未成熟卵体外培养成熟技术治疗后妊娠情况及结局分析

目的通过比较接受人类未成熟卵体外培养成熟(IVM)技术、常规体外受精技术(IVF)及单精子卵胞浆内注射技术(ICSI)治疗后妊娠的病例,分析妊娠和产科结局,从而评估IVM技术的安全性。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心2004年1月～2007年12月接受IVM35例、IVF369例和ICSI298例治疗后妊娠的702例患者的临床资料。结果3组的多胎妊娠发生率、流产率、异位妊娠率比较,差异无显著性(P>0.05)。除外流产和继续妊娠外,IVM、IVF和ICSI治疗后出生婴儿数分别为34、321和243例,比较3组单胎妊娠和双胎妊娠的妊娠结局,差异无显著性(P>0.05)。结论与常规IVF、ICSI比较,IVM并不增加妊娠风险、产科并发症和新生儿异常的比例。

人类未成熟卵母细胞的体外成熟培养研究进展

随着人类生育年龄的推迟及二胎政策的全面放开,不孕症、卵巢早衰、卵巢储备功能不足等女性生殖疾病罹患率也呈逐年上升趋势。人类未成熟卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养一直是国内外生殖医学领域研究者关注的热点。体外培养卵泡生长状态受获取卵泡途径、培养环境、培养方案等多种因素影响。文章就人类未成熟卵母细胞IVM培养的临床适应证、培养方案及影响因素作一综述,为相关研究人员和临床工作者提供参考。

小鼠未成熟卵母细胞体外培养

目的 :探讨小鼠未成熟裸卵体外培养 ,获得较高的成熟率和受精率的适宜培养时间和培养条件 .方法 :在培养液中添加不同剂量的人绝经期促性腺激素 (hMG)和卵泡刺激素 (FSH) ,分别培养从未行激素刺激排卵处理的昆明系小白鼠卵巢中获得的未成熟裸卵 ,培养 2 4h和 4 8h后 ,进行体外受精和胚胎培养 .结果 :添加不同激素和培养不同时间对未成熟裸卵的体外成熟无显著性影响 (P >0 0 5) ,但黄体生成素 (LH)的存在对培养 4 8h后成熟卵子的体外受精率有显著性影响 (P <0 0 5) ,并随LH含量的增多 ,影响也越大 .结论 :未成熟裸卵能在体外培养成熟并受精 。

超排卵周期未成熟卵体外培养的研究

目的:研究来源于超排卵周期中的未成熟卵在拆除卵丘细胞后进行体外成熟培养(IVM)的成熟、受精及胚胎发育能力,探讨IVM技术的临床应用。方法:选取46名体外受精/卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者为研究对象,比较MI和GV期不成熟卵的体外成熟情况,并比较体内成熟卵和体外成熟卵进行ICSI后的正常受精、异常受精、卵裂和优质胚胎形成情况。结果:体外培养中69.8%的MI期卵和77.2%的GV期卵均在24小时内达到成熟,其24小时和48小时的成熟率、总成熟率均无明显差异(P>0.05)。体外成熟卵与体内成熟卵相比较,正常受精率、异常受精率和卵裂率均无明显差异(P>0.05),优质胚胎形成率较低,差异有显著性(P<0.05)。结论:常规超排卵周期中的未成熟卵在拆除卵丘细胞后能够继续体外发育成熟,具有与体内成熟卵相似的ICSI受精、卵裂能力。虽然优质胚胎的形成率低于体内成熟卵,但增加了可移植胚胎和冷冻胚胎数量,提高了助孕成功率。

体外受精周期中卵泡发育阻滞患者应用未成熟卵体外成熟培养的临床观察

目的观察常规体外受精(IVF)中卵泡发育阻滞患者采用未成熟卵体外成熟(IVM)培养治疗结果。方法常规IVF治疗患者11例,在促排卵过程发生卵泡发育阻滞时,取卵行IVM培养成熟后,卵母细胞行卵胞浆内单精子注射(ICSI)以获得受精卵并最终实现胚胎移植。统计分析未成熟卵的成熟率、卵母细胞的受精率、胚胎的发育情况及临床结果。结果共获取卵母细胞128枚,其中成熟卵21枚,行ICSI后15枚正常受精,获10枚正常卵裂胚胎,全部移植3例,均未妊娠;107枚未成熟卵,经IVM、ICSI和体外培养后,成熟率、受精率、正常卵裂率及优质胚胎率分别为72.9%、75.6%、78%及39.1%,胚胎移植后3例临床妊娠(新鲜周期2例,冻融周期1例)。结论常规IVF控制性超促排卵(COH)过程中,发育阻滞的卵泡在体外适宜的培养条件下仍有成熟、受精、继续发育的能力,并最终实现临床妊娠。IVM技术是改善IVF中发生卵泡发育阻滞患者结局的措施之一。

体外受精周期中不同改行时机对未成熟卵体外培养结局的影响

目的:探讨常规体外受精周期中,不同改行时机对未成熟卵体外培养结局的影响。方法:回顾性分析2008年1月至2009年12月,在温州医学院附属第一医院生殖医学中心行常规体外受精(in vitrofertilization,IVF)过程中为预防出现卵巢过度刺激综合征或因卵泡发育迟缓,改行未成熟卵体外培养(in vitro maturation,IVM)的91例患者,按促性腺激素(gonadotropin,Gn)使用天数不同分为两组,A组使用Gn 5～7 d,共51例,B组使用Gn 8～13 d,共40例。比较两组的一般指标、Gn用量、体外成熟与胚胎发育及妊娠结局。结果:两组年龄、不孕年限、基础激素水平均差异无统计学意义(P>0.05)。Gn使用量A组明显低于B组,但获卵数A组明显高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。取卵日的雌激素以及黄体生成素水平A组明显高于B组,而孕激素水平则B组高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组的卵子成熟率、受精率、卵裂率、优胚率、种植率差异均无统计学意义(P>0.05)。两组的移植周期率、hCG阳性率、周期取消率、临床妊娠率、多胎妊娠率、自然流产率、异位妊娠率等临床结局差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:体外受精咛ヒ浦仓芷谥校煌被男蠭VM均能获得较好的临床结局,但Gn使用后5～7 d比8～13 d可以显著减少促排卵药物的用量,增加获卵数,降低治疗费用。

未成熟卵母细胞体外培养治疗不孕症的临床研究

目的:评价未成熟卵母细胞体外培养成熟(IVM)治疗不孕症的临床价值。方法:40例不孕患者接受54个IVM周期治疗,包括26例难治性多囊卵巢综合征(PCOS)和14例月经周期正常但经其他辅助生育技术失败的患者。测定卵泡早期的性激素、抑制素-A(INH-A)、抑制素-B(INH-B)。未经任何药物刺激,于月经周期的9～12d在超声引导下经阴道对两侧卵巢内的小卵泡进行穿刺获卵。体外培养24～48h,进行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),18h后观察受精情况,继续培养24～48h,直至胚胎移植,移植前行激光辅助孵化。结果:7个周期取消,取消率为13%(7/54)。1例生化妊娠,19例临床妊娠,每取卵周期的临床妊娠率为35.2%(19/54),每移植周期的临床妊娠率为40.4%(19/47)。47个移植周期共获得未成熟卵母细胞857个,平均每周期18.2个,体外培养48h后总成熟率为73.7%(632/857),正常受精率为75.3%(476/632),卵裂率为91.2%。妊娠组的获卵数显著多于非妊娠组[(22.4±16.2)个vs(15.2±7.1)个,P<0.05],取卵日和胚胎移植日的子宫内膜厚度显著大于非妊娠组([8.0±1.5)cmvs(6.8±0.9)cm;(9.5±1.6)cmvs(8.3±1.3)cm,P<0.05],但两组患者的年龄、不孕年限、体重指数、基础性激素、INH-A、INH-B各参数相比均无显著性差异。结论:未经药物刺激的IVM技术是治疗不孕症的一种有效方法,获卵数和子宫内膜厚度与成功率有关。

未成熟卵母细胞体外成熟培养技术研究进展

1935年,Pincus和Enzmanz[1]观察到兔的未成熟卵母细胞在体外培养条件下可以自发完成卵母细胞的成熟过程,自此在生殖领域引入了一个新的概念即卵母细胞体外成熟（in vitro maturation,IVM）。自1991年Cha[2]等报道IVM技术取得第1例妊娠以来,IVM技术已应用于治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的不孕,

自然周期未成熟卵体外培养卵母细胞成熟率与临床结局的关系

目的探讨在自然周期未成熟卵体外培养后行体外受精与胚胎移植（IVF—ET），所获卵母细胞的成熟比例与胚胎发育及妊娠结局的关系。方法2008年1月至2011年4月接受自然周期未成熟卵体外培养治疗的PCOS患者183个周期，按卵母细胞成熟比例分为70％～100％（Ⅰ组）、55％～69％（Ⅲ组）、40％～54％（Ⅲ组）、〈40％（Ⅳ组），分析4组的胚胎发育情况及妊娠结局。结果4组的平均获卵数、受精率、卵裂率、平均胚胎移植数差异均无统计学意义（均P〉0．05）。Ⅳ组的胚胎种植率（7．14％）和妊娠率（13.51％）明显低于前3组（24．53％、22．93％、16.77％）和（48．65％、44．64％、33．96％），均P〈0．05，而其流产率（60％）则明显高于前3组（27．78％、20％、33．33％），均P〈0．05。结论卵母细胞成熟比例低组，胚胎的发育潜能及最终的妊娠结局也偏弱，流产率增加。

人未成熟卵母细胞体外成熟培养在多囊卵巢综合征不孕妇女中的应用

目的:探讨未成熟卵母细胞体外成熟培养-胚胎移植技术(IVM-ET)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者不孕症治疗中的临床应用前景。方法:将39例PCOS不孕妇女分未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)组和常规体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)组。IVM组:11例PCOS患者,用小剂量促性腺激素(Gn)刺激后取未成熟卵母细胞体外培养28h,行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),继续培养3d后行胚胎移植。IVF/ICSI组:28例PCOS患者,用常规IVF/ICSI技术助孕。结果:IVM组获卵数123枚,体外培养成熟率为82.93%(102/123),受精率为98.04%(100/102),卵裂率为92.00%(92/100),优胚率为39.13%(36/92),移植10个新鲜胚胎周期,临床妊娠2例,临床妊娠率为2/10,累计妊娠率4/11。与同期28例施行IVF/ICSI的PCOS患者进行比较,其Gn天数、用量、HCG日E2水平、获卵数、优胚率显著低于IVF/ICSI组,差异有统计学意义(P<0.05);卵裂率无明显差异(P>0.05);种植率、临床妊娠率均低于IVF/ICSI组,但差异无统计学意义(P>0.05);IVM组无中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)和自然流产的发生,而IVF/ICSI组中重度OHSS发生率为10.71%(3/28)、自然流产率为3/10,但差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:IVM技术为PCOS患者的治疗开辟了一条新的途径,同时在减少外源性Gn用量,有效控制卵泡数量和E2水平方面具有明显优势。但对其能否降低OHSS风险以及成功率较低等问题,有待进一步研究。

超排卵周期未成熟卵体外培养的研究

目的研究来源于超排卵周期中的未成熟卵母细胞,观察其体外培养成熟、受精及胚胎发育能力,探讨IVM技术在超排卵周期中的未成熟卵母细胞体外成熟的临床应用。方法比较同源体内成熟卵和体外成熟卵进行IVF/ICSI后的正常受精、卵裂、优质胚胎和囊胚形成情况。结果体外培养中72·41%的GV期卵和76·08%的MI期卵在36h内达到成熟,两组成熟率无明显差异(P>0·05)。体内成熟与体外成熟卵相比较,受精率无明显差异(P>0·05),但卵裂、优质胚胎形成率低,差异有显著性(P<0·05)。未成熟卵母细胞组共有13个囊胚培养形成。结论超排卵周期中的未成熟卵,能够继续在体外发育成熟。虽然优质胚胎的形成率低于体内成熟卵,但在同一促排周期增加了可移植胚胎数。同一促排周期所获的未成熟卵行体外成熟培养是可行的。

颗粒细胞在未成熟卵体外培养时对未成熟卵母细胞发育的影响

目的研究颗粒细胞在未成熟卵母细胞体外培养时对卵母细胞的成熟有何影响。方法实验分实验组和对照组。将拆除颗粒细胞的未成熟卵母细胞作为对照组,不拆除颗粒细胞的未成熟卵母细胞为实验组,观察它们在卵母细胞成熟时间、核成熟率、卵细胞受精率和优质胚胎的生成率等方面是否存在差异。结果实验组在卵母细胞成熟时间和卵细胞受精率上和对照组无明显差别,但是在卵母细胞核成熟率、优质胚胎的生成率等方面与对照组相比有显著性差异。结论颗粒细胞对卵母细胞的核成熟、胞浆成熟和保护其发育潜能有重要的作用。

人未成熟卵母细胞的体外培养和体外受精

收集人次级卵泡中的卵母细胞(n=69)进行体外培养和体外受精。23个卵母细胞经体外培养后用组织学方法观察,19个(成熟率83％)排出第一极体。46个经体外培养后再进行体外受精的卵母细胞中有24个(受精率53％)成为受精卵。其中有13个(卵裂率54％)在体外发育到2-细胞胚或4-细胞胚。本实验结果提示人次级卵泡中的初级卵母细胞经体外培养可达成熟并具有受精能力。

未成熟卵体外成熟培养成功妊娠1例

1病例资料患者,女,29岁,结婚3年,婚后3年不孕就诊。14岁初潮,月经稀发3～6个月,BMI 27.63 kg/m2。生殖激素测定：LH 18.54 mIU/ml,FSH 5.80 mIU/ml,E254.2 pg/ml。B超见子宫内膜5 mm/线性,双侧卵巢均有12个以上直径〈5 mm的小卵泡。OGTT（-）,IRT（＋）,我院行HSG提示双侧输卵管通畅,左侧输卵管上举。男方精液检查活率99.07%,密度28.47×106/ml。诊断：①原发不孕症;②多囊卵巢综合征;③胰岛素抵抗综合征;④肥胖症。

卵母细胞体外培养成熟技术在人类生殖中的应用

辅助生殖技术中未成熟卵母细胞体外成熟培养 ( IVM)研究已有二十余年 ,从 GV期卵母细胞到窦前卵泡的体外培养已获得一定成功 ,目前 IVM应用范围已从纯粹的基础研究扩展到治疗PCOS、供卵、生殖保险等领域。IVM仍处于实验阶段 。

注射人绒毛膜促性腺激素与否对体外受精周期中改行未成熟卵体外培养结局的影响

目的探讨不育患者在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中改行未成熟卵体外培养(IVM),取卵前注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)与否对其实验室及临床结局的影响。方法回顾分析2008年1月至2010年11月在温州医学院附属第一医院生殖医学中心行常规IVF治疗的138个周期,在促排卵5～7d后,双侧卵泡数目≥20个,或用药8～13 d后,卵泡发育缓慢且两侧卵泡数目≥15个,最大卵泡直径平均≤12 mm,根据患者意愿,停药改行IVM治疗,其中63个周期在取卵前12 h注射hCG(A组),75个周期未注射hCG(B组)。比较两组的实验室及临床结局。结果 A组的卵成熟率(64.56%)显著高于B组(56.3%),但是平均获卵数(8.42±0.52)个低于B组(11.32±0.82)个,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组的受精率、卵裂率、移植率、临床妊娠率、流产率,多胎妊娠率比较均无统计学差异(P>0.05)。结论常规IVF周期改行IVM后可以获得良好的妊娠结局,取卵前注射hCG虽然可以提高卵子的成熟率,但并不能提高妊娠结局。

人类卵母细胞体外成熟培养的研究进展

在进行体外受精胚胎移植(IVF-ET)时,超促排卵可使妇女在同一周期产生多个成熟和不成熟的卵子.卵母细胞体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)为因遗传、免疫及分泌等因素而不孕的患者提供大量成熟卵母细胞,为治疗不孕提供了一条新途径.1935年,Pincus观察到兔卵母细胞可在体外成熟-排出第一极体,首次提出IVM观点.此后,许多学者对人卵母细胞体外成熟的调控及培养条件进行深入研究.1983年,IVM技术首次成功应用于临床,1991年,报道了第一例采用IVM技术分娩的"试管婴儿".本文主要对卵母细胞的体外成熟机制、体外培养条件及影响因素等问题进行综述.