人类白细胞Ⅱ类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性研究

目的探讨人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性。方法对26例GDM孕妇及同期入院的42例正常健康孕妇,采用序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)检测HLA-II类抗原DR和DQ的等位基因。结果研究中发现,DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因频率在GDM中显著高于正常对照组,两组比较,统计学有差异(Ρ<0.05)。DQB1*0301基因频率在GDM中显著低于正常对照组,两组比较,有统计学差异(Ρ<0.05)。结论人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与GDM的易感性和保护性存在关联。DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因是GDM的易感基因。DQB1*0301基因是GDM的保护基因。

脾胃湿热证与人类白细胞抗原Ⅱ类基因多态性的相关性研究

【目的】探讨广东地区汉族人群慢性胃炎、消化性溃疡患者中脾胃湿热证与人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ类等位基因的相关关系。【方法】选择以籍贯为广东地区的汉族健康人(正常对照组16例)和慢性浅表性胃炎或消化性溃疡患者(观察组46例,根据辨证分为脾胃湿热证组26例、脾气虚证组20例)的全血为研究标本,采用聚合酶链反应—序列特异性引物(PCR-SSP)基因分型方法检测HLA-Ⅱ类基因中的HLA-DQB1、HLA-DRB1、HLA-DQA1及HLA-DPB1的等位基因类型。【结果】DQA1*0103基因型在脾胃湿热组显著高于正常对照组(P<0.05),但与脾气虚组比较无显著性差异;DQA1*0505基因型在脾胃湿热组显著低于正常对照组及脾气虚组(P<0.05)。【结论】脾胃湿热证存在着一定的免疫遗传基础,DQA1*0103基因型可能是脾胃湿热证的易感基因,DQA1*0505可能是脾胃湿热证的保护性基因。

尸肾移植中人类白细胞抗原-Ⅱ类配型

目的：探讨同种异体尸肾移植中ＨＬＡ－Ⅱ类抗原配型的可行性。方法：应用基因分型技术，对２７例尸肾移植供体和４９例受体进行ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ回顾性分型。结果：在这些未做配型而进行移植的供－受者中，ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ完全配合率分别仅为２．０％和１０．２％，完全不配合率分别为３０．６％和８．２％；将这些供体与受体作ＨＬＡ－Ⅱ类配型后再作选择性移植，则同为这些供、受者，其ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ的完全配合率分别可达８．２％和４０．８％，而完全不配合率仅为１０．２％和０。完全不配合的受者移植效果要比其他受者差。结论：在尸肾移植中进行ＨＬＡ－Ⅱ类配型，不但可行。

人类白细胞抗原Ⅱ类基因与溃疡性结肠炎的关系研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是一种与遗传、免疫、环境等多种因素相关的慢性肠道非特异性炎症性疾病。其具体病因、发病机制还不完全清楚,但近来一系列研究表明其发生与基因多态性所致的遗传易感性相关。人类白细胞抗原Ⅱ类基因是一个引人注意的UC易感基因,具有高度多态性,与UC发病及临床表型有关,现就人类白细胞抗原Ⅱ基因与UC的相关性研究进展予以综述。

人类白细胞抗原Ⅱ类基因多态性与胃肠道疾病相关性的研究进展

人类白细胞抗原(HLA)是目前发现的与疾病关联最为密切的基因复合体,决定疾病易感性和个体差异。胃肠道疾病(如消化性溃疡)是人类最为常见的疾病。HLA-Ⅱ类基因多态性可以改变HLA分子、抗原和T细胞之间相互作用的特性,并因此控制对外来抗原(或自身抗原)的免疫应答,致人类疾病的易感性和临床表现不同。现就HLA-Ⅱ类基因多态性与胃肠道疾病的相关性研究予以综述。

以HLAⅡ类转基因鼠研究类风湿关节炎的发病机制

类风湿关节炎(RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,至今发病原因不明。许多研究表明遗传因素是导致RA发病的最主要原因,而在遗传因素中约35%来自于人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类复合体。因此,对于HLA Ⅱ类复合体参与RA发病的分子机制研究一直是人们关注的热点,而表达HLA Ⅱ类分子的转基因鼠是研究HLA Ⅱ类复合体与RA发病关系最佳的平台。目前,国外已建立了几个HLA Ⅱ类转基因鼠品系,为RA发病机制的研究奠定了很好的基础。本文对HLA Ⅱ类转基因鼠及以此为基础的RA相关研究进行综述。

人类白细胞抗原Ⅱ类基因与天津汉族2型糖尿病肾病的相关性研究

人类自细胞抗原（HLA）基因型是迄今为止所知最复杂的遗传多态系统，目前1型糖尿病与HIA-DQA1的关系已比较明确。近年研究显示，2型糖尿病（T2DM）与HLA也存在着一定的关联。本研究应用基因芯片技术检测HIA-Ⅱ类基因，探讨其与T2DM及糖尿病肾病（DN）的相关性。

HLA-Ⅱ类基因多态性与霍奇金淋巴瘤相关性的Meta分析

目的探索人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅱ类基因多态性与霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)的相关性。方法在OVID、Cochrane图书馆、Pub Med、中国生物医学文献数据库、万方数据库、维普数据库、中国知网中检索关于HLA-Ⅱ类基因与HL相关的病例对照研究文献,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入7篇相关文献,经综合分析:HL患者与健康对照者比较,两者在DRB1*07、DPB1*0201、DPB1*0301、DRB1*15基因型分布上差异均有统计学意义(OR=0.53,95%CI:0.45-0.63,P<0.01;OR=0.61,95%CI:0.50-0.73,P<0.01;OR=1.71,95%CI:1.25-2.33,P<0.01;OR=1.34,95%CI:1.16-1.55,P<0.01),具有DRB1*07、DPB1*0201基因型的人群发病风险降低,而具有DPB1*0301、DRB1*15基因型的人群发病风险增加。结论现有的证据表明DRB1*07、DPB1*0201等位基因的表达降低人群HL的易感性,DPB1*0301、DRB1*15增加人群HL的易感性。

RNA干扰沉默食管癌细胞株ECA109中人乳头瘤病毒18型E6、E7基因对人类白细胞抗原Ⅱ类分子表达的影响

目的应用RNA干扰（RNAi）技术，使人乳头瘤病毒18型（HPVl8）E6、E7基因表达下调或缺失，观察下调或缺失后的HPVl8阳性食管癌细胞株ECAl09细胞内的人类白细胞抗原（HLA）-Ⅱ类分子表达。方法．将合成并包装好的含有E6、E7基因片段的短发卡RNA（shRNA）腺病毒载体（shpAd—E6-eGFP、shpAd—E7-eGFP）感染食管癌细胞株，并用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）[E6siRNA组HLA—IImRNA表达量是空白组的1．27倍，E7siRNA组HLA—IImRNA表达量是空白组的1．66倍（P〉0．05]和Westernblot技术[各组ACTIN蛋白条带灰度基本-致，shRNA—E6、shRNA—E7、无关序列和阴性对照组蛋白表达分别为0．5543、0．7246、0．4452、0．4365，siRNAE6、E7实验组灰度稍高于空白组（P〉0．05）及无关序列组]以β—actin为内参照，在基因和蛋白水平上检测E6、E7和胞内HLA-Ⅱ类分子的表达。结果2条含有E6、E7基因片段的shRNA腺病毒载体（shpAd—E6-eGFP、shpAd—E7-eGFP）能有效的抑制ECAl09细胞中HPVl8E6、E7的转录及表达，抑制率分别为92％和89％，细胞内HLA-11类分子的表达上调，分别是空转染组及无关序列组的1．27和1．66倍，无关序列组和空白对照组HPVl8E6、E7及HLA—II的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HLA-Ⅱ类抗原表达的缺失可能与食管癌中的HPV感染及作用明显相关。

人类白细胞抗原-Ⅱ类等位基因多态性与HBV慢性感染相关性研究进展

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染仍是我国一个重大的疾病负担.HBV感染后可表现为隐性感染、急性感染或慢性持续感染,后者可进展为肝硬化（liver cirrhosis,LC）、肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）;这些不同的疾病转归和患者对治疗应答的个体差异,不仅与HBV本身有关,也与宿主的遗传背景密切相关.人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）复合物是首个被发现的与疾病有明确关系的遗传系统,其通过参与免疫应答与抗原提呈过程影响机体免疫功能,其中HLA-Ⅱ类分子可决定抗原结合槽的构象、结合及提呈抗原肽给T细胞的效率,其基因多态性影响不同个体对HBV的易感性和感染结局以及治疗应答[1,2].现将相关进展综述如下.

人类白细胞抗原II类基因与妊娠期糖尿病的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原II(HLA-II)类基因与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应技术,对48例GDM孕妇(GDM组)及同期入院的48例正常健康孕妇(对照组)的HLA-II类基因进行检测。结果GDM组DRB1*0301、DRB1*1302、DQA1*0301等位基因频率分别为18·8%、45·8%、64·6%,均明显高于对照组的4·2%、18·8%、41·7%,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论HLA-II类等位基因与GDM发病存在相关性;DRB1*0301、DRB1*1302、DQA1*0301是GDM患者的易感基因。

IL-10对培养的树突状细胞影响的研究

目的 探讨 IL- 1 0对培养的树突状细胞的影响。方法 采用 Ficoll- Hypaque淋巴细胞分离液从正常人外周血分离 PBMC,以细胞贴壁法分离得单核细胞。在 RPMI1 640培养液中加入 rh GM- CSF和rh IL- 4诱生树突状细胞 ( DC) ,分别在培养第 8,第 1 3d时加入 0 ,1 2 .5 ,2 5 ,5 0 ,1 0 0 ng/ml浓度梯度的 IL-1 0。作用 2 d后 ,用倒置相差显微镜或荧光显微镜观察细胞形态 ,流式细胞术分析 DC表型。结果 IL- 1 0对成熟 DC的表型表达无影响 ;IL - 1 0抑制未成熟 DC的共刺激分子 CD 86和 DC成熟特异标志 CDla,CD83的表达 ,对 CD80的表达没有影响 ;对未成熟 DC的 类抗原 HLA- DR的表达率无影响 ,但使其表达的平均荧光强度降低 ;IL- 1 0能使未成熟的 DC向耐受原性抗原提呈细胞 ( APC)转化。结论 为过敏性疾病和自身免疫性疾病的预防和治疗提供了实验依据。

急性排斥反应时移植肾组织HLA-Ⅱ的表达

【目的】检测肾功能异常尤其是急性排斥反应时移植肾组织内HLA-Ⅱ的表达情况。【方法】对同种异体移植肾患者在出现肾功能异常时,随时行经皮肾穿刺活检获取植肾组织,用免疫组化方法检测活检组织中HLA-Ⅱ的表达情况。【结果】53例肾移植受体因肾功能异常共行肾活检64次,其中急性排斥反应28例次,非急性排斥反应27例次,抗排斥后7 d 9例次。急性排斥反应时(AR)HLA-Ⅱ抗原在系膜细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞和炎性细胞上的表达均较非急性排斥反应(N-AR)组增加,抗排斥治疗7 d后明显下降。【结论】移植肾组织内HLA-Ⅱ类分子表达与急性排斥反应密切相关。

HLA-Ⅱ血清学分型与微量SSP法基因分型的比较分析

目的验证微量序列特异性引物(SSP)技术进行HLA-Ⅱ类移植配型的准确性并探讨血清学分型错误发生的原因。方法采用聚合酶链反应结合微量SSP技术(简称微量PCR-SSP法)以及单克隆抗体血清学分型技术对血清样品进行HLA分型并比较其结果。结果(1)微量PCR-SSP法检测的110例样本中,99例检出HLA-DR的396个等位基因、11例检出HLA-DQ的22个等位基因,检出10%的单倍型个体;(2)两种方法对比研究发现单克隆抗体血清学分型检出错误或漏检率较高,其误差在DR和DQ分别为38.81%和50.75%;(3)错误发生和易混淆的抗原为:DR15/16、11/12、13/14、8、12和DQ5/6、8/9。结论微量SSP法可以准确检定血清学易漏检和发生错误的抗原等位基因。

人类免疫缺陷病毒感染者及艾滋病患者CD8^+CD38^+ CD8^+HLA-DR+比例与HIV载量的相关性研究

目的研究人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者和获得性免疫缺陷综合征(AIDS,艾滋病)患者CD8+T细胞激活分子CD38、人类白细胞Ⅱ类抗原(HLA-DR)与血浆HIV载量的相关性,分析用CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+的比例替代HIV载量的可行性。方法采集1998—2006年期间在北京协和医院初诊的HIV感染者或AIDS患者236例和56名同期健康献血员的抗凝静脉血,用流式细胞术分析CD8+T细胞分别表达CD38和HLA-DR的比例,用分支DNA技术(bDNA)检测血浆病毒载量(VL)。用受试者工作特征曲线(ROC)分别预测VL>1×103拷贝/mL、>1×104拷贝/mL和>1×105拷贝/mL时CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+比例的临界值范围。结果236例患者的CD4+T细胞计数138(16,262)×106/L,显著低于对照组(P<0.01);CD8+T细胞计数618(353,879),显著高于对照组(P<0.05);CD8+CD38+、CD8+HLA-DR+的比例分别为85.4%(72.5%,92.2%)和40.3%(17.5%,59.7%),显著高于对照组(P<0.01),与HIV载量的相关性分别为0.429(P<0.01)和0.282(P<0.01)。用CD8+CD38+>80.4%预测VL>1×103拷贝/mL的敏感度和特异度为80.6%和75.0%;用CD8+HLA-DR+预测VL>1×105拷贝/mL的敏感度和特异度为78.7%和81.4%。结论对HIV感染或AIDS初诊的患者可以尝试用CD38和HLA-DR激活亚群来预测血浆HIV载量,这种替代检测方法具有一定的可行性。

年轻1型糖尿病患者残余β细胞功能的预测

目的 探讨影响新诊断年轻1型糖尿病患者病程进展后残余β细胞功能（RBF）的预测因素。 方法 入选110例12～35岁起病的新诊断1型糖尿病患者进行（35.1±13.8）个月的临床随访研究。记录一般资料，进行口服葡萄糖耐量试验和C肽释放试验，检测血清学指标、HbA1C和抗谷氨酸脱羧酶抗体（GAD）水平，并进行人类白细胞抗原（HLA）-Ⅱ类基因分型。根据随访终点的C肽峰值（Cmax）是否≥0.6 ng/ml将患者分成高RBF组和低RBF组。建立logistics回归模型分析预测RBF的相关因素。 结果 在随访终点，高RBF组的Cmax水平显著高于低RBF组[（1.87±1.35对0.23±0.19）ng/ml, P〈0.01]，HbA1C更低[（7.00±1.69对8.39±1.77）%, P〈0.01]，胰岛素剂量显著减低[（0.62±0.17对0.79±0.17）IU·kg-1·d-1,P〈0.01]。Logistics回归提示影响低RBF的相关因素有：起病年龄（OR＝0.82，95%CI 0.73～0.92, P＝0.001）、HLA-Ⅱ高危表型（OR＝4.73，95%CI 1.28～17.52, P＝0.020）、女性（OR＝3.39，95%CI 1.03～11.22, P＝0.045）、糖尿病酮症酸中毒起病史（OR＝8.71，95%CI 2.31～32.83, P＝0.001）以及病程进展中的HbA1C水平（OR＝2.46，95%CI 1.47～4.11, P＝0.001）。与血糖控制水平相比，起病状态的相关危险因素（起病年龄〈18岁、女性、携带高危的HLA表型、糖尿病酮症酸中毒起病）的综合预测概率值更大[（OR＝145.75，95%CI 17.30～1 228.31, P〈0.01）对（OR＝1.82，95%CI 1.24～2.69, P＝0.003）]。 结论 起病年龄小、女性、HLA-Ⅱ的高危表型、糖尿病酮症酸中毒起病史和病程中血糖控制不佳是较长病程后低RBF的影响因素；且相比于病程中HbA1C水平，起病状态对残余β细胞功能的影响作用更大。

HLA-DQ等位基因与哮喘相关性研究

目的 探讨在中国汉族哮喘家系中 ,HLA DQ基因与哮喘的相关性。方法 对 98例哮喘家系成员 ,用PCR 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对HLA DQA1和B1进行基因分型 ,并与正常对照进行比较。结果 发现DQA1 0 10 1和DQA1 0 6 0 1等位基因频率在哮喘患者组 (4 0 0 % ,45 0 % )较正常对照组 (16 4% ,13 4% )显著升高 (χ2 =6 186 0 ,P <0 0 5 ,RR =3 39;χ2 =11 6 0 90 ,P <0 0 1,RR =5 2 7) ;DQB1 0 30 3和DQB1 0 6 0 1等位基因频率在哮喘患者组 (5 5 0 % ,47 5 % )较正常对照组 (13 7% ,13 7% )显著升高 (χ2 =15 740 0 ,P <0 0 1,RR =7 6 8;χ2 =10 930 0 ,P <0 0 1,RR =5 6 9)。同时发现HLA DQB1 0 2 0 1等位基因频率在对屋尘螨抗原特异性IgE反应哮喘家系成员 (39 4% )较家系中非特应症者 (12 0 % )显著高频表达 (t =2 382 5 ,P <0 0 5 )。结论 HLA DQA1 0 10 1, 0 6 0 1和DQB1 0 30 3, 0 6 0 1是哮喘遗传易感等位基因 ;HLA DQB1 0 2 0