人类白细胞抗原-G在妇科相关疾病诊治中的研究进展

人类白细胞抗原-G(HLA-G)是一种非经典的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(MHCⅠ),与特异性免疫细胞相互作用,诱导母胎免疫耐受,以保护妊娠。HLA-G也是肿瘤细胞逃避免疫监测产生免疫耐受的重要标志物,其在包括子宫内膜异位症、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌等在内的各种妇科疾病中都有表达并且与疾病预后存在相关性。因此,回顾既往HLA-G在妇科疾病中的研究,为阐明某些妇科疾病发生发展的具体分子机制奠定理论基础,也为今后妇科疾病的诊断及治疗提供参考。

人类白细胞抗原HLA-A基因多态性与HBV携带的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因多态性与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。方法收集云南省昆明市延安医院健康体检者静脉血样本501例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV二对半,根据HBV二对半检测结果分为HBV携带组和既往感染组以及健康对照组3组,用序列特异性引物聚合酶链反应(polymerase chain reaction with sequence specific primers,PCR-SSP)基因分型技术检测HLA-A抗原的基因型,将HBV携带组和健康对照组以及HBV既往感染组和健康对照组的HLA-A基因多态性的分布频率进行比较。采用SPSS17.0软件进行数据统计分析。结果健康对照组HLA-A2阳性数占比47.49%,等位基因频率数占比31.29%;健康对照组基因分布频率总体与中华骨髓库发布的中国常见及确认的HLA-A等位基因表一致。HBV携带组HLA-A2阳性数占比63.04%,等位基因频率数占比42.23%,携带者的HLA-A2阳性率和等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05);HBV既往感染组HLA-A2阳性数占比56.14%,等位基因频率数占比35.97%,既往感染组的HLA-A2阳性率和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论HLA-A2基因可能是慢性乙型肝炎HBV携带者的易感基因。

人类白细胞抗原-G和干扰素γ与复发性流产相关性的初步探讨

目的分析人类白细胞抗原-G(HLA-G)和干扰素γ(IFN-γ)与复发性流产(RPL)的相关性。方法选取2016年4月至2019年7月在本院生殖医学中心和妇产科诊治的70例流产患者为研究对象,根据流产发生的起因分组,分为RPL不孕症患者的RPL组(n=29)和正常终止妊娠的早孕女性的对照组(n=41)。采用酶联免疫反应测定两组患者血清HLA-G和IFN-γ水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定两组患者外周血和流产绒毛组织中HLA-G和IFN-γ的mRNA相对表达量。结果两组患者的年龄、体质量指数(BMI)、基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平等一般资料比较均无显著性差异(P>0.05),而RPL组患者在胎停7~8周的血清HCG和孕酮水平均显著低于对照组(P<0.05);酶联免疫反应结果显示,RPL组血清HLA-G水平显著低于对照组,而IFN-γ水平显著高于对照组(P<0.05);qRT-PCR结果显示,两组患者外周血和流产绒毛中均有HLA-G mRNA和IFN-γmRNA表达,RPL组患者外周血和流产绒毛中的HLA-G mRNA表达水平均显著低于对照组,而IFN-γmRNA表达均水平显著高于对照组(P<0.01)。结论妊娠初期HLA-G和IFN-γ的表达失衡与RPL的发生存在一定相关性。

可溶性人类白细胞抗原-G在恶性肿瘤中诊断价值的研究进展

可溶性人类白细胞抗原(s HLA)-G在恶性肿瘤患者血浆中的表达水平明显升高〔1〕,s HLA-G可能成为一种潜在的肿瘤标记物,在鉴别良恶性肿瘤中发挥重要作用。肿瘤细胞表达HLA-G被认为是其逃避宿主免疫监视策略的主要途径〔2〕。目前,已经在多种肿瘤中发现异常的HLA表型,如:HLA多倍体、单倍体、等位基因丢失、HLA特定部位的低表达及上述异常可能同时存在〔3〕。

人类白细胞抗原-G和人类白细胞抗原-E在妊娠免疫耐受中的作用

人类白细胞抗原(HLA)-G、-E同属非经典主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类分子,于母胎界面滋养层细胞高表达,在妊娠免疫耐受中发挥重要作用。HLA-G和HLA-E主要通过和自然杀伤(NK)细胞、T淋巴细胞表面抑制性CD94/NKG2C受体或激活性CD94/NKG2A受体结合,抑制或激活免疫细胞效应,维持正常妊娠免疫耐受。HLA-G和HLA-E基因结构及表达异常可能与妊娠并发症相关,可作为判定正常妊娠和妊娠相关疾病指标。本文综述HLA-G和HLA-E结构和分布、与免疫细胞可能的作用机制以及相关临床应用,讨论其在维持母胎免疫耐受中的作用。

人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达

目的 克隆人类白细胞抗原 G(Humanleukocyteantligen G ,HLA G)突变体cDNA ,并使其在HLA Ⅰ类阴性的K5 6 2细胞上获得稳定表达 ,为研究配 受体之间的识别机制奠定基础。方法 用RT PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA GcDNA ,得到全长HLA GPCR产物后 ,用桥式PCR方法进行定点点突变 ,将突变的目的基因亚克隆于逆转录 ,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG pLNCX表达载体 ,采用感染的方法将重组质粒转入K5 6 2细胞 ,最后经G4 18筛选及有限稀释 ,利用单克隆抗体W6 32进行FACS及mRNA检测 ,观察HLA G突变体在靶细胞表面的表达。结果 HLA G突变体分子在经mG pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论 成功构建了mG pLNCX表达载体 ,并使HLA G突变体分子在HLA Ⅰ类阴性的靶细胞K5 6 2细胞上获得稳定表达。

人类白细胞抗原HLA氨基酸残基配型在角膜移植供受体选择中的应用

目的:探讨人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)氨基酸残基配型在角膜移植排斥反应中的作用程度,以及术前进行HLA配型的临床意义。方法:角膜移植患者91例92眼,其中高危角膜50例50眼,非高危角膜41例42眼。HLA-Ⅰ,Ⅱ类抗原分别由一步单抗法和DNA法检测。根据HLA氨基酸残基的相配数分为HLA的低错配组(2错配、3错配)和高错配组(4错配、5错配)。结果:高危组的排斥反应率74.0%明显高于非高危组31.0%(P=0.001)。在高危组中,HLA高错配的排斥反应率高达84.8%,明显高于低错配的52.9%(P=0.021),而且高错配组发生排斥反应的危险性是低错配组的1.6倍(RR=1.6)。在非高危组中:HLA高错配的排斥反应率30.4%与低错配的31.6%比较无统计学意义(P=0.936)。结论:高危角膜患者HLA高错配组的排斥反应率高于低错配组,术前进行HLA配型有临床指导意义,而对非高危角膜配型无意义。

人类白细胞抗原-G与早期胚胎生长发育和着床

人类白细胞抗原-G(HLA-G)是人类组织相容性抗原复合物,在母胎免疫耐受中起作用。近年的研究发现,HLA-G在着床前胚胎表达。我们和国际上其他的临床研究显示,分泌可溶性HLA-G的胚胎在体外受精和胚胎移植中的临床妊娠率和种植率较高。进一步的研究发现,HLA-G与胚胎的免疫耐受、生长、着床相关的粘附和浸润相关,并通过MEK1/2信号传导通路促进人绒毛膜促性腺激素的分泌。我们还发现,子宫内膜细胞与可溶性HLA-G结合,并表达其受体;可溶性HLA-G还促进子宫内膜细胞与滋养细胞的粘附;白血病抑制因子和miR-152参与HLA-G在滋养细胞表达的调控。HLA-G表达和功能相关的分子机制研究显示,HLA-G在胚胎生长和着床上起重要作用,可能是胚胎发育潜能的标志分子。

人类白细胞抗原-G与移植免疫

人类白细胞抗原-G（human leucocyte antigen G,HLA-G）属于非经典的主要组织相容性复合物Ⅰ类分子（major histocompatibility complex,MHC-Ⅰ）,在妊娠期作为免疫耐受分子表达于胎盘滋养层细胞,促进母胎免疫耐受。近年来研究表明HLA-G在移植免疫中发挥重要作用,HLA-G通过多种途径参与免疫调控,诱导移植免疫耐受。笔者就HLA-G抑制移植免疫排斥的机制、功能及临床意义做一综述。HLA-G位于人体第6号染色体MHC I类基因6p21.3,由8个外显子、7个内含子组成。

人类白细胞抗原-G与肝炎病毒感染的相关性研究进展

人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen G,HLA-G)属于非经典主要组织相容性复合体Ⅰ类分子,选择性表达在母胎交界面的细胞滋养层细胞使得妊娠期间形成母体对胎儿的免疫耐受。但是,HLA-G的有限多态性和异常表达与多种病理改变有关,例如肿瘤、自身免疫病和感染性疾病等。近来有研究表明,乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染过程中HLA-G的表达均会发生改变,而且HLA-G的表型与病毒的易感性相关。但是,至于HLA-G分子在乙型肝炎和丙型肝炎疾病发展中的作用目前仍不完全清楚。HLA-G与病毒性肝炎的相关性仍需深入研究。

人类白细胞抗原HLA在角膜移植中的作用

目前肾脏移植术前已进行人类白细胞抗原 (HLA)检测 ,根据其配型结果筛选理想的供体 ,大大减少了移植术后的免疫排斥反应 ,而在角膜移植术前尤其新生血管化的高危角膜移植术前是否同样需要进行HLA配型 ?本文就该方面的研究作一综述。

人类白细胞抗原-G cDNA的克隆及序列分析

目的:构建表达人类白细胞抗原-G(HLA-G)蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-G。方法:从孕妇绒毛组织中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增HLA-G的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果:经酶切鉴定及测序分析,证实已构建表达HLA-G蛋白的真核表达载体pcDNA3-HLA-G。结论:应用RT-PCR扩增及DNA连接技术成功构建HLA-G的真核表达载体。

人类白细胞抗原-G5对移植肾功能延迟恢复的影响

目的观察和比较人类白细胞抗原-G5(human leukocyte antigen G5,HLA-G5)不同表达水平对肾移植术后移植肾功能延迟恢复(delayed graft function,DGF)的影响。方法应用酶联免疫方法 (ELISA)检测HLA-G5在肾移植受者体内表达情况,分析对比HLA-G5不同表达组移植肾功能延迟恢复的发生率。结果肾移植术后HLA-G5高表达组无1例发生DGF,而低表达组发生率为57%(P<0.05)。结论 DGF的发生与HLA-G5表达水平密切相关,HLA-G5可能通过减少排斥反应减少DGF的发生。

人类白细胞抗原-DR及-G基因多态性与广西儿童哮喘发病的研究

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DR及-G基因多态性与儿童哮喘的关系。方法以无血缘关系的84例哮喘儿童为哮喘组,168名无哮喘和特应性疾病的健康个体为对照组。采用Pharmacia UniCAP系统检测哮喘儿童的血清总IgE水平。应用基因芯片法检测HLA-DR的21个基因位点和基于基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱技术(MALDI-TOF)检测HLA-G的9个单核苷酸位点。结果 (1)儿童哮喘组HLA-DRB1*070X基因和HLA-DRB1*11XX基因频率分别为2.98%和13.69%,对照组分别为0.3%和5.95%(χ2=6.915,P<0.05;χ2=9.478,P<0.01)。优势比(OR?)分别为10.57(95%CI:1.215～91.986)和2.79(95%CI:1.429～5.449)。HLA-DRB3(52)*010X基因频率在哮喘组为7.14%,低于对照组的13.99%(χ2=5.854,P<0.05),OR?为0.429(95%CI:0.214～0.862)。(2)HLA-DRB1*15XX-HLA-G的rs1704和rs1063320位点的14bp缺失-G单体型(HLA-DRB1*15XX-14bp缺失-G)携带者哮喘风险比未携带者降低(Wald值为13.419,P<0.001),OR?值为0.198,95%CI为0.084～0.471;哮喘组中携带该单体型者血清IgE水平(365.0±943.1)KU/L,也较未携带者(977.8±14334.9)KU/L为低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HLA-DRB1*070X基因和HLA-DRB1*11XX基因与儿童哮喘易感性相关,HLA-DRB3(52)*010X基因可能为保护性基因,HLA-DRB1*15XX和HLA-G的rs1704和rs1063320位点的14bp缺失-G单体型是哮喘的保护性单体型。

人类白细胞抗原-G在皮肤恶性黑素瘤中表达的研究

目的:检测人类白细胞抗原-G(HLA-G)在原发性皮肤恶性黑素瘤(CMM)中的表达情况。方法:以免疫组化法检测35例原发性CMM、22例痣细胞痣HLA-G及Bcl-2的表达,并结合临床及组织病理学进行分析。结果:在CMM中HLA-G蛋白的阳性表达率显著高于痣细胞痣(P=0.029)。HLA-G蛋白表达与CMM炎细胞浸润、Bcl-2蛋白表达显著相关(P值分别为0.032,0.008)。CMM中HLA-G表达与临床分期、肿瘤厚度、溃疡及生长模式等预后变量无显著相关性。结论:CMM中HLA-G表达上调,可能参与肿瘤的发生及发展。

重组腺病毒介导人类白细胞抗原-G基因转染恒河猴树突状细胞对T细胞的增殖作用

目的人类白细胞抗原-G(HLA-G)通过与树突状细胞(DC)表面的免疫球蛋白样转录体(ILT2)和ILT4(CD85d)结合,广泛参与机体的免疫耐受的过程。探讨经HLA-G重组腺病毒载体感染后的恒河猴未成熟树突状细胞刺激T细胞的增殖作用。方法麻醉恒河猴获取新鲜骨髓血,采用密度梯度离心法,分离获得的单个核细胞行免疫磁珠法获得CD34+细胞。添加小剂量细胞因子联合诱导分化CD34+细胞,从而获得树突状细胞。介导HLA-G的重组腺病毒经过转染未成熟树突状细胞后,检测病毒感染效率,Western blot检测HLA-G在未成熟树突状细胞中的表达。以恒河猴T细胞作为反应细胞,将介导HLA-G的重组腺病毒转染的不同状态下的DC为刺激细胞,进行混合淋巴细胞实验。设置5组:即成熟树突状细胞组(mDC组);未成熟树突状细胞组(imDC组);imDC(L)组:在第7天成功获得imDC后加入脂多糖100 ng/m L;imDC(V)组:重组腺病毒介导HLA-G感染的imDC,方法同前;imDC(L+V)组:重组腺病毒同样转染imDC,同时在培养过程中添加100ng/m L的脂多糖。根据DC与T细胞不同比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)计算各组刺激指数(SI)。结果成功培养获得恒河猴未成熟树突状细胞,HLA-G在该细胞中表达。流式细胞术检测结果发现DC的纯度高达92.3%,imDC组则高达72.39%,CD4+T细胞阳性率纯度>80%。混合淋巴细胞实验分析DC刺激T细胞增殖结果表明,不同DC与T细胞比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)下,imDC组SI为1.63±0.03、1.52±0.04、1.39±0.03和1.21±0.01;mDC组SI为2.23±0.05、2.01±0.03、1.65±0.02和1.54±0.05;imDC(L)组SI为2.25±0.04、1.96±0.02、1.62±0.03和1.48±0.01;imDC(V)组SI为1.46±0.04、1.33±0.02、1.20±0.04和1.04±0.02;imDC(L+V)组SI为1.67±0.03、1.59±0.04、1.38±0.03和1.24±0.03。与imDC组比较,mDC组、imDC(L)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(V)组比较,imDC组、mDC组、imDC(L)组、imDC(L+V)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(L+V)组比较,mDC组、imDC(L)组SI明显增高(P<0.01)。结论重组腺病毒介导HLA-G转染的恒河猴未成熟树突状细胞能够有效抑制恒河猴T细胞的增殖。

可溶性人类白细胞抗原-G在重度子痫前期患者胎盘组织培养液中的表达

为了检测妊娠晚期重度子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘组织培养液中可溶性人类白细胞抗-G(soluble human leu-kocyte antigen-G,sHLA-G)的表达水平,探讨sHLA-G在子痫前期发病中的作用,选择了2008年10月至2009年4月第四军医大学唐都医院重度子痫前期患者20例(重度子痫前期组),正常足月妊娠者20例(正常足月妊娠组),用酶联免疫吸附法(ELISA)检测胎盘组织培养液中sHLA-G的表达水平。经检测重度子痫前期组胎盘组织培养液中sHLA-G的表达水平(26.78±5.17U/ml)明显低于正常妊娠组(53.64±28.85U/ml)(P<0.05)。实验表明,sHLA-G在重度子痫前期患者胎盘组织培养液中表达水平均明显降低,可能与子痫前期发病有关。

血清可溶性人类白细胞抗原-G、白介素-17对先兆流产保胎治疗孕妇妊娠结局的预测价值

目的分析血清可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)、白介素-17(IL-17)预测先兆流产(TA)保胎治疗孕妇妊娠结局不良的临床价值。方法选取2019年4月至2020年7月海南医学院第二附属医院收治的94例采用保胎治疗的TA孕妇作为研究对象。治疗前检测血清sHLA-G、IL-17水平,根据是否流产分为妊娠结局良好组(n=75)与妊娠结局不良组(n=19),分析并比较两组基线资料,分析治疗前血清sHLA-G、IL-17预测TA保胎治疗孕妇妊娠结局不良的临床价值。结果94例TA孕妇经保胎治疗后有19例妊娠结局不良,妊娠结局不良率为20.21%;经双变量Spearman直线相关检验发现,TA孕妇血清sHLA-G水平与孕酮、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平均呈正相关(r>0,P<0.05),血清IL-17水平与孕酮、β-HCG水平呈负相关(r<0,P<0.05);Logistic回归分析结果显示,血清孕酮、β-HCG、sHLA-G水平升高可能是TA保胎治疗孕妇妊娠结局不良的保护因素(OR<1,P<0.05);IL-17水平升高可能是TA保胎治疗孕妇妊娠结局不良的的风险因素(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作特征曲线发现,血清sHLA-G、IL-17单一及联合预测TA保胎治疗孕妇妊娠结局不良的曲线下面积均>0.80,均具有一定预测价值。结论血清sHLA-G、IL-17预测TA保胎治疗孕妇妊娠结局不良具有一定的临床价值。

人类白细胞抗原-G与母胎免疫耐受的关系

人类的主要组织相容性抗原复合体分子称为人类白细胞抗原(HLA)。人类白细胞抗原-G(HLA-G)是目前发现与妊娠关系最密切的非经典HLA-Ib类分子。HLA-G低多态性及限制性分布于母胎界面的绒毛外滋养细胞等少数免疫豁免组织。HLA-G免疫耐受中作用可能主要与子宫内膜自然杀伤细胞(NK)活性变化相关。HLA-G表达水平变化与胚胎的着床、生长发育、体外授精妊娠结局、正常妊娠维持,及病理妊娠(如不明原因复发性流产、子痫前期、胎儿生长受限、胎膜早破、羊水过少)的发生发展密切相关。研究HLA-G在母胎免疫中的作用对于病理妊娠的预测、预防和治疗可能具有极高的临床价值。

人类白细胞抗原-G阳性的脐带间充质干细胞体外诱导调节性T细胞的实验研究

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-G阳性的脐带间充质干细胞在体外诱导调节性T细胞(Treg)产生的效果。方法从新生儿脐带中分离脐带间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到脐带间充质干细胞中,设为PEGFP-N1-HLA-G组;转染空载体PEGFP-N1质粒的脐带间充质干细胞设为PEGFP-N1组;相同条件下,未加入空载体的脐带间充质干细胞设为空白对照组。采用流式细胞仪检测脐带间充质干细胞标志物;采用蛋白质免疫印迹法鉴定各组细胞HLA-G蛋白的表达;各组细胞与健康人外周血中CD4+T细胞混合培养24 h和48 h后,采用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的比例。结果脐带间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;PEGFP-N1-HLA-G组可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。PEGFP-N1-HLA-G组细胞在与CD4+T细胞混合培养24 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(15.3±1.9)%,在培养48 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(14.3±2.1)%,与空白对照组和PEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 HLA-G基因修饰后脐带间充质干细胞能够有效地在体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg的产生。