RNA干扰沉默食管癌细胞株ECA109中人乳头瘤病毒18型E6、E7基因对人类白细胞抗原Ⅱ类分子表达的影响

目的应用RNA干扰（RNAi）技术，使人乳头瘤病毒18型（HPVl8）E6、E7基因表达下调或缺失，观察下调或缺失后的HPVl8阳性食管癌细胞株ECAl09细胞内的人类白细胞抗原（HLA）-Ⅱ类分子表达。方法．将合成并包装好的含有E6、E7基因片段的短发卡RNA（shRNA）腺病毒载体（shpAd—E6-eGFP、shpAd—E7-eGFP）感染食管癌细胞株，并用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）[E6siRNA组HLA—IImRNA表达量是空白组的1．27倍，E7siRNA组HLA—IImRNA表达量是空白组的1．66倍（P〉0．05]和Westernblot技术[各组ACTIN蛋白条带灰度基本-致，shRNA—E6、shRNA—E7、无关序列和阴性对照组蛋白表达分别为0．5543、0．7246、0．4452、0．4365，siRNAE6、E7实验组灰度稍高于空白组（P〉0．05）及无关序列组]以β—actin为内参照，在基因和蛋白水平上检测E6、E7和胞内HLA-Ⅱ类分子的表达。结果2条含有E6、E7基因片段的shRNA腺病毒载体（shpAd—E6-eGFP、shpAd—E7-eGFP）能有效的抑制ECAl09细胞中HPVl8E6、E7的转录及表达，抑制率分别为92％和89％，细胞内HLA-11类分子的表达上调，分别是空转染组及无关序列组的1．27和1．66倍，无关序列组和空白对照组HPVl8E6、E7及HLA—II的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HLA-Ⅱ类抗原表达的缺失可能与食管癌中的HPV感染及作用明显相关。

脾胃湿热证与人类白细胞抗原Ⅱ类基因多态性的相关性研究

【目的】探讨广东地区汉族人群慢性胃炎、消化性溃疡患者中脾胃湿热证与人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ类等位基因的相关关系。【方法】选择以籍贯为广东地区的汉族健康人(正常对照组16例)和慢性浅表性胃炎或消化性溃疡患者(观察组46例,根据辨证分为脾胃湿热证组26例、脾气虚证组20例)的全血为研究标本,采用聚合酶链反应—序列特异性引物(PCR-SSP)基因分型方法检测HLA-Ⅱ类基因中的HLA-DQB1、HLA-DRB1、HLA-DQA1及HLA-DPB1的等位基因类型。【结果】DQA1*0103基因型在脾胃湿热组显著高于正常对照组(P<0.05),但与脾气虚组比较无显著性差异;DQA1*0505基因型在脾胃湿热组显著低于正常对照组及脾气虚组(P<0.05)。【结论】脾胃湿热证存在着一定的免疫遗传基础,DQA1*0103基因型可能是脾胃湿热证的易感基因,DQA1*0505可能是脾胃湿热证的保护性基因。

人类白细胞抗原-Ⅰ类基因表达与高危型HPV感染及宫颈发病的关系

目的了解宫颈癌不同病变程度患者人类白细胞抗原-Ⅰ类基因表达和高危型人乳头瘤病毒感染情况,分析人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达与高危型人乳头瘤病毒感染、宫颈癌发病的关系。方法将92例宫颈病变患者按病变严重程度分为宫颈炎37例、CINⅠ级组9例、CINⅡ级组12例、CINⅢ级组10例、宫颈癌组24例,将58名健康者设为健康组,比较各组人类白细胞抗原-I基因及蛋白表达情况。采用聚合酶链式反应检测各组人乳头瘤病毒感染情况,分析宫颈病变不同程度患者人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达及人乳头瘤病毒分型,对人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达与高危型人乳头瘤病毒感染及宫颈癌发病的关系采用Spearman相关性分析。结果两组首次性生活年龄、流产次数比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01),年龄、受教育程度、体质量指数、吸烟史、饮酒史比较差异无统计学意义(P>0.05)。健康组、宫颈炎组、CINⅠ级组、CINⅡ级~Ⅲ级组及宫颈癌组宫颈上皮细胞人类白细胞抗原-Ⅰ基因、蛋白表达水平依次递减,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈炎、CINⅠ级组、CINⅡ级~CINⅢ级组、宫颈癌组人乳头瘤病毒感染率分别为18.92%、55.56%、81.82%和87.5%,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05),各组感染分型中HPV16、HPV18感染率较高。高危型人乳头瘤病毒感染的宫颈病变患者人类白细胞抗原-Ⅰ基因整体表达显著低于低危型患者(P<0.05),但两者人类白细胞抗原-Ⅰ蛋白表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);高危型人乳头瘤病毒感染患者中,宫颈癌组人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达显著低于其他组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达与高危型人乳头瘤病毒感染、宫颈癌发病均呈显著负相关(P<0.05)。结论人类白细胞抗原-Ⅰ基因表达减弱或缺失与宫颈癌发生关系密切,可能增加高危型人乳头瘤病毒感染风险,导致宫颈病变恶化。

人类白细胞抗原Ⅱ基因对乙型肝炎病毒易感性和干扰素抗病毒治疗的影响

目的 探讨人类白细胞抗原 (HLA) DRB1和 DQB1等位基因多态性是对乙型肝炎病毒 (HBV)易感性及干扰素 (IFN)抗HBV治疗的影响。方法 应用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术检测上海地区 6 9例慢性乙型肝炎 (CHB)患者的HLA DRB1和 DQB1等位基因以及 2 0 0名健康准骨髓捐献者的HLA DRB1等位基因。其中 32例接受α 1b干扰素治疗 2 4周。结果 CHB患者HLA DRB1 0 6和 DRB1 0 8等位基因的频度高于健康人 (2 .17%对 0 % ,RR =3.96 3,95 %CI :3.4 2 5～ 4 .5 85 ,P =0 .0 17;11.5 9%对 5 .5 0 % ,RR=2 .2 5 3,95 %CI:1.14 7～ 4 .4 2 8,P =0 .0 2 1) ;而DRB1 0 7等位基因的频度则低于健康人 (2 .90 %对 7.75 % ,RR=0 .35 5 ,95 %CI:0 .12 3～ 1.0 2 5 ,P =0 .0 4 7)。IFN治疗的患者中 ,10例应答者DRB1 14等位基因频度高于 2 2例非应答者 (2 0 .0 %对 2 .3% ,RR =10 .75 0 ,95 %CI :1.116～ 10 3.5 5 8,P =0 .0 30 ) ;而DQB1 0 7分布则相反(10 .0 %对 38.6 % ,RR =0 .176 ,95 %CI :0 .0 36～ 0 .85 6 ,P =0 .0 2 2 )。结论 HLA等位基因多态性可能与上海地区人群HBV的易感性和IFN抗HBV治疗有关。与其他HLA DRB1等位基因比较 ,HLA DRB1 0 6和 DRB1 0 8可能与HBV易感性有关 ,而HLA DRB1 0 7则相反 ,?

尸肾移植中人类白细胞抗原-Ⅱ类配型

目的：探讨同种异体尸肾移植中ＨＬＡ－Ⅱ类抗原配型的可行性。方法：应用基因分型技术，对２７例尸肾移植供体和４９例受体进行ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ回顾性分型。结果：在这些未做配型而进行移植的供－受者中，ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ完全配合率分别仅为２．０％和１０．２％，完全不配合率分别为３０．６％和８．２％；将这些供体与受体作ＨＬＡ－Ⅱ类配型后再作选择性移植，则同为这些供、受者，其ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＢ的完全配合率分别可达８．２％和４０．８％，而完全不配合率仅为１０．２％和０。完全不配合的受者移植效果要比其他受者差。结论：在尸肾移植中进行ＨＬＡ－Ⅱ类配型，不但可行。

人类白细胞抗原-I类在错配修复缺陷型子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的分析人类白细胞抗原(HLA)-I类在错配修复缺陷/高度微卫星不稳定(MMRd/MSI-H)型子宫内膜癌中的表达情况,及其与细胞毒性T淋巴细胞在肿瘤中的浸润情况以及其它临床病理特征的关系。方法从我院病理科筛选出90例MMRd型子宫内膜癌。根据HLA-I类的表达状态将MMRd肿瘤分为HLA-I类正常48例和HLA-I类缺失的肿瘤42例。比较两组CD8^(+)肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)密度及其它临床病理特征,并用TCGA数据验证子宫内膜癌中HLA-I类和CD8^(+)TILs浸润情况的关联。随后分析用HLA-I类的表达状态来预测CD8^(+)TILs浸润情况的价值。结果46.7%的MMRd肿瘤存在不同程度的HLA-I类缺失。HLA-I类正常肿瘤比HLA-I类缺失肿瘤具有更多的CD8^(+)TILs(P<0.05)。HLA-I类的表达状态和肿瘤的组织学类型、肿瘤级别、肿瘤分期以及缺失的错配修复蛋白肿瘤无相关性。TCGA数据显示在mRNA水平,构成HLA-I类的分子HLA-A、HLA-B以及HLA-C均和CD8A成正相关。HLA-I类预测CD8^(+)TILs浸润情况的AUC为0.7613。结论HLA-I类缺失在MMRd子宫内膜癌中普遍存在。HLA-I类可能作为一种结合MMRd/MSI-H的补充性生物标志物,用于筛选接受免疫治疗的患者。

人类白细胞抗原Ⅱ类基因与溃疡性结肠炎的关系研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是一种与遗传、免疫、环境等多种因素相关的慢性肠道非特异性炎症性疾病。其具体病因、发病机制还不完全清楚,但近来一系列研究表明其发生与基因多态性所致的遗传易感性相关。人类白细胞抗原Ⅱ类基因是一个引人注意的UC易感基因,具有高度多态性,与UC发病及临床表型有关,现就人类白细胞抗原Ⅱ基因与UC的相关性研究进展予以综述。

人类免疫缺陷病毒-1 nef诱导凋亡及下调人类白细胞抗原-I类分子

【目的】研究人类免疫缺陷病毒(HIV)-1 nef调节细胞表面的人类白细胞抗原(HLA)-I类分子及诱导细胞凋亡情况。【方法】将293T细胞分为两组,用脂质体法将含HIV-1 nef基因的质粒及空载体分别转染细胞,Western blot检测HIV-1 nef在转染细胞中的表达,荧光抗体染色结合流式细胞术检测细胞表面的HLA-I类分子表达及细胞凋亡情况。【结果】HIV-1 nef在转染细胞中有表达。转染HIV-1 nef的细胞与转染空载体的细胞经抗HLA-A,B,C-FITC染色后,平均荧光强度分别为205±22及269±15,两者相比有显著性差异(P<0.01);经Annexin V-APC/PI染色后,阳性细胞百分率分别为(60.82±8.32)%及(8.12±5.43)%,两者相比亦有显著性差异(P<0.01)。【结论】HIV-1 nef下调细胞表面的HLA-I类分子及诱导细胞凋亡。

人类白细胞抗原Ⅱ类基因多态性与胃肠道疾病相关性的研究进展

人类白细胞抗原(HLA)是目前发现的与疾病关联最为密切的基因复合体,决定疾病易感性和个体差异。胃肠道疾病(如消化性溃疡)是人类最为常见的疾病。HLA-Ⅱ类基因多态性可以改变HLA分子、抗原和T细胞之间相互作用的特性,并因此控制对外来抗原(或自身抗原)的免疫应答,致人类疾病的易感性和临床表现不同。现就HLA-Ⅱ类基因多态性与胃肠道疾病的相关性研究予以综述。

人类白细胞Ⅱ类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性研究

目的探讨人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与妊娠期糖尿病的相关性。方法对26例GDM孕妇及同期入院的42例正常健康孕妇,采用序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)检测HLA-II类抗原DR和DQ的等位基因。结果研究中发现,DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因频率在GDM中显著高于正常对照组,两组比较,统计学有差异(Ρ<0.05)。DQB1*0301基因频率在GDM中显著低于正常对照组,两组比较,有统计学差异(Ρ<0.05)。结论人类白细胞II类抗原DR、DQ基因型与GDM的易感性和保护性存在关联。DQA1*0101、DQA1*0201、DQB1*0609、DRB l*07-DQA1*0201-DQB1*0201基因是GDM的易感基因。DQB1*0301基因是GDM的保护基因。

人类白细胞抗原G分子、凋亡相关因子及FAS配体分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中表达的研究

目的检测人类白细胞抗原-G分子(HLA-G)、FAS/FASL分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况。方法应用免疫组织化学方法检测18例宫颈鳞癌,40例宫颈上皮内瘤变(包括CINⅢ16例,CINⅡ12例,CINⅠ12例),18例正常宫颈组织中HLA-G分子、FAS分子、FASL分子的表达,并分别比较各分子之间的相关性。结果宫颈鳞癌中HLA-G分子的表达水平显著高于正常宫颈组织,其FAS分子的表达水平显著低于正常宫颈组织。HLA-G与FAS分子在宫颈鳞癌与CINs中的表达水平无统计学差异性,在CINs组间以及CINs与正常组织中的表达无显著差异性。FASL分子在宫颈鳞癌和CINs及正常组织中的表达水平无明显差异性。HLA-C与FASL分子在各宫颈病变中表达均具有正相关性,其两者与FAS分子之间表达无相关性。结论宫颈鳞癌组织中HLA-G和FASL分子呈高表达,FAS分子呈低表达。HLA-G与FASL分子呈正相关。但HLA-G分子是否介导宫颈鳞癌的免疫耐受,以及FAS/FASL分子介导的细胞凋亡途径是否为其发生的途径之一尚需进一步研究。

猪白细胞Ⅱ类抗原基因多态性研究进展

本文对SLAⅡ类基因的染色体图谱定位、分子结构、基因分型及其多态性的研究进展作了介绍。重点介绍了SLAⅡ类基因的RFLP基因分型及其多态性研究。猪的主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原基因座位存在不同程度的等位基因多态性。RFLP技术是一种简便而快捷的SLAⅡ类等位基因分型方法。SLAⅡ类基因的多态性和抗原肽结合位点密切相关,这些位点能结合处理过的抗原,然后递呈给T细胞。另外,在编码β1链的SLA DRB1基因和SLA DQB基因中有4个富含GC序列区。

医院获得性肺炎患者单核细胞人类白细胞抗原DR表达与预后

目的探讨单核细胞人类白细胞抗原DR(HLA-DR)在转入重症监护病房(ICU)的医院获得性肺炎(HAP)患者中预测预后的价值。方法对ICU内68例HAP患者根据预后分为死亡组和存活组,比较两组单核细胞HLA-DR、APACHEⅡ评分、皮质醇、T细胞亚群和NK细胞;采用Logistic回归模型对单核细胞HLA-DR、APACHEⅡ评分与28 d住院病死率相关性进行分析。结果死亡组单核细胞HLA-DR低于存活组(P<0.05),而APACHEⅡ评分和皮质醇水平高于存活组(P<0.01);入ICU时单核细胞HLA-DR和APACHEⅡ评分与预后相关,单核细胞HLA-DR与28 d住院病死率均和皮质醇水平呈负相关。结论HAP患者的单核细胞HLA-DR表达水平与预后相关,将APACHEⅡ评分与单核细胞HLA-DR结合分析能提高预后预测的准确性。

可溶性人类白细胞抗原G联合癌胚抗原检测在恶性胸腔积液中诊断价值

胸水细胞学检查是诊断胸腔积液最常见的方法,但其诊断敏感度最高也仅有60%左右〔1〕。胸腔镜获取病理组织虽是诊断胸膜疾病的金标准,但部分患者不愿接受胸腔镜有创检查,且部分基层医院不具备开展胸腔镜的条件。因此,分子方法检测胸水性质用于鉴别良恶性胸腔积液具有重要意义。人类白细胞抗原(HLA)-G作为肿瘤相关分子有助于鉴别组织的良恶性〔2〕。可溶性HLA(s HLA)-G作为一个潜在的肿瘤标志物,

散发性阿尔茨海默病易患性与人类白细胞抗原基因频率的相关性(英文)

目的探讨人类白细胞抗原HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率与散发性阿尔茨海默病(SAD)的关系,试图从分子免疫遗传学角度揭示SAD的发病机制。方法SAD组44例(广州市精神病院中筛选),男11例,女33例,年龄59～91岁。正常对照组45例(中山大学附属第二医院保健科体检的自愿健康老年人),男14例,女31例,年龄61～88岁。采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术分别测定44例SAD患者(SAD组)和45例正常老年人(对照组)的HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率。结果SAD患者中3种基因频数分别为25,5,16;频率分别为28.41%,5.68%,18.18%。而正常老年人中的相应基因频数分别为16,13,19;频率分别为17.78%,14.44%,21.11%。其中HLA-DR2,DRB1*04较对照组差异有显著性意义(χ2=4.002,4.187,P<0.05),DRB1*09差异无显著性意义(χ2=0.050,P>0.05)。结论HLA-DR2可能是SAD的易感基因,而HLA-DRB1*04可能对SAD的发病起到保护作用。HLA-DRB1*09与SAD发病无关联。

肝移植术后血清可溶性人类白细胞Ⅰ类抗原的动态观察

目的 :探讨动态检测血清可溶性人类白细胞Ⅰ类抗原 (serumsolublehumanleukocyteclassⅠanti gen ,sHLA Ⅰ )在监测肝移植术后急性排斥反应方面的诊断价值。方法 :采用ELISA法检测 10例肝移植患者术前及术后一个月血清sHLA Ⅰ的动态变化。结果 :急性排斥反应前 4～ 6d(肝酶ALT尚未明显升高 )sHLA Ⅰ即明显升高 ,排斥逆转后逐渐下降 ;当出现肝动脉并发症时 ,sHLA Ⅰ伴随肝酶ALT同步升高 ;感染时sHLA Ⅰ无明显升降。结论 :sHLA Ⅰ能预测肝移植急性排斥反应 ,结合肝功能酶学指标有助于克服其特异性差的缺点。