人类白细胞抗原配型不合造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征15例

背景:骨髓增生异常综合征是一组异质性的髓系肿瘤,易向白血病转化。异基因造血干细胞移植为治愈该病提供了可能性。目的:通过观察人类白细胞抗原配型不合造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征患者的反应,评价该方法的疗效和安全性。方法:15例骨髓增生异常综合征患者均接受人类白细胞抗原配型不合造血干细胞移植,预处理方案包括阿糖胞苷、白消安、氟达拉滨及甲基环己亚硝脲。移植后给予抗胸腺细胞球蛋白、环孢素A、吗替麦考酚酯、甲氨蝶呤等预防移植物抗宿主病。结果与结论:15例患者中有14例移植后造血完全重建,中性粒细胞≥0.5×109L-1的中位时间为移植后16d,血小板≥20×109L-1的中位时间为移植后20d;1例患者植入失败,后接受二次移植,于移植后+14d获造血重建。随访14(1～36)个月,1例死于肺部感染;1例于移植后12个月复发,经供者淋巴细胞输注及化疗获完全缓解;累积存活率为93.3%。8例患者在移植后出现急性移植物抗宿主病,发生率为57.1%;2例经免疫抑制剂治疗后病情得以控制,6例发生慢性移植物抗宿主病。结果表明,造血干细胞移植是治疗骨髓增生异常综合征的有效方法,可使多数患者得以长期生存。

人类白细胞抗原配型在高致敏受者肾移植中应用

目的 探讨人类白细胞抗原 (HLA)交叉反应组 (CREGs)配型原则在肾移植高致敏受者中的应用及意义。方法 应用莱姆德细胞板通过补体依赖微量淋巴毒性试验检测受者的群体反应性抗体 (PRA) ;应用单抗干板进行供受者HLA -Ⅰ类抗原分型 ;应用微量序列特异性引物 (Micro -SSP)进行HLA -Ⅱ类基因分型 ;对 14例高致敏肾移植受者采用交叉反应组配型原则选择供者 ,观察其供受者相配情况及移植效果。结果 按交叉反应组配型原则 ,供受者HLACREGs +DR 0 ,1和 2错配 (MM)分别为 4例( 2 8% )、6例 ( 4 4% )、4例 ( 2 8% ) ,无 3～ 6错配 ;而按传统的HLA -A ,B ,DR抗原配型原则 ,其 0 ,1,2 ,3和 4MM ,分别为 1例 ( 7% )、3例 ( 2 1% )、5例 ( 3 6% )和 5例 ( 3 6% ) ,无 4～ 6MM者 ,其中 0～ 1错配仅有 4例。肾移植术后仅有 4例发生急性排斥反应 ,经OKT3治疗逆转 ,所有受者术后肾功能均恢复正常。结论 良好的HLACREGs配型 ,可以显著提高供受者相配率 ,对减少致敏受者的排斥反应 ,提高移植肾存活率具有重要的意义。

胚胎植入前单基因遗传学检测结合HLA配型诊疗X连锁高IgM综合征1例

目的 探讨胚胎植入前单基因遗传学检测(PGT-M)基因突变结合人类白细胞抗原(HLA)配型在X连锁高IgM综合征(X-HIGM)患者临床诊疗中的应用效率及可行性。方法 应用多重PCR结合二代测序技术针对X-HIGM的致病基因CD40LG及临近区域特异性单核苷酸多态性(SNP)位点进行鉴别构建单体型,另外针对HLA-A、HLA-B、HLA-DRA、HLA-DQB1及临近区域特异性SNP位点进行鉴别构建单体型。经本中心常规促排卵、体外受精及胚胎培养,随后进行胚胎活检;对于目标基因CD40LG进行PGT-M,包括直接突变检测和间接单体型连锁分析;对于HLA采用HLA复合体中多个位点的连锁分析来选择相合的胚胎。结果 先证者男孩,临床诊断为X-HIGM,基因检测分析显示其X染色体上的CD40LG基因有1个半合子突变,c.49_59del(p.L17Hfs*28)。该基因突变会导致X-HIGM。经家系验证发现,先证者母亲在该位点存在和先证者相同的杂合变异。对该家系通过单体型连锁分析之后进行CD40LG基因检测+HLA配型双重PGT。由于先证者母亲卵巢储备不足,只获得3枚卵子,受精后养成的囊胚也只有1枚,这枚囊胚的PGT结果为整倍体+未携带CD40LG基因突变+HLA配型半相合。此枚胚胎发育出生的婴儿没有患上X-HIGM,而且他的半相合的造血干细胞成功移植给了先证者。结论 PGT-M技术在该类血液遗传病家系中不仅可以阻断基因突变垂直传递,同时HLA相合胚胎的选择也为先证者儿童的造血干细胞移植治疗提供了新的曙光。

短串联重复序列监测异基因造血干细胞移植后的植入状态及其演变过程

目的:监测和观察异基因造血干细胞移植后的植入状态及其演变过程。方法:于2003-01/2004-12在中国造血干细胞库深圳分库采集完成人类白细胞抗原配型的6对供受者标本。采用荧光标记复合扩增短串联重复序列检测技术,对6对供受者标本移植前后的系列血样进行D8S1179,D21S11,D18S51,D5S818,D13S317,D7S820,D3S1358,vWA,FGA共9个短串联重复序列位点和Amelogenin性别位点的检测,找出供受者间的差异基因,通过移植后不同时间段患者基因型的转变情况,判断供者细胞是否植入以及嵌合体类型。结果:供受者6对样本均获得满意的9个短串联重复序列位点和1个性别位点的分型结果。6对移植标本短串联重复序列差异基因由受者型向供者型转化的时间为14～23d。6对样本间存在明显差异。第3对、第5对在第14天已为供者完全嵌合状态,而第1对在第16天、第4对在第18天尚为供受者混合嵌合体。但6对样本都是一个从混合嵌合向完全嵌合发展的良好趋势。结论:①6对移植标本短串联重复序列差异基因由受者型向供者型转化的时间为14～23d,6对样本都有从混合嵌合向完全嵌合发展的良好趋势。②采用荧光标记复合扩增短串联重复序列方法可精确地测量聚合酶链反应产物的数量,描述造血干细胞的植入程度及植入的整个演变过程。

微量淋巴细胞毒试剂盒中阳性血清的研制与鉴定

目的研制微量淋巴细胞毒(CDC)试剂盒中阳性血清,为临床检测节约成本。方法收集近年来临床检测人类白细胞抗原(HLA)配型的供者和受者外周血,用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,通过多次免疫新西兰大白兔得到抗人淋巴细胞的抗体,即为试剂盒中的阳性血清,提取兔血清进行效价测定和微量淋巴细胞毒实验,与试剂盒中自带的阳性血清作对比分析;并对兔血清进行加速稳定性实验,采用过度升高和降低温度的条件来增加抗体降解的速度,来验证血清的稳定性。结果免疫的两只兔子中,在做微量淋巴细胞毒实验中,1号兔子在免疫第十一次后实验组中死亡细胞比例已接近阳性对照组,在免疫第十二次后实验组中死亡细胞比例高于阳性对照组,2号兔子的实验组中死亡细胞比例最高只达50%,经验证对比1号兔子的血清比试剂盒中的阳性血清效果更佳,且效价达10^(7),获取总量达60mL,并对其做加速稳定性实验,具有很好的稳定性。结论此研究方法适宜于研发部门参考文中成熟的研究方法,开发微量淋巴细胞毒试剂盒为其提供优质的实验材料,并可大批量制备后投放于市场,由于其制备成本低,也较易得到,其大大降低了试剂盒的制作成本,具有很好的实际应用价值。

提高致敏受者肾移植成功率的临床研究——附82例报告

目的 :观察致敏受者经严格的人类白细胞抗原 (humanleukocyteantigen ,HLA)配型和交叉反应组 (crossreactivegroups,CREG)配型后行肾移植的效果 ,寻找提高致敏受者肾移植成功率的措施。方法 :对 82例致敏受者按照美国联合器官调配网络 (unitednetworkfororgansharing ,UNOS)制定的CREG配型原则进行供、受者配型筛选 ,按常规方法进行肾移植及预防排斥反应 ,酌情使用血浆置换和静脉滴注免疫球蛋白。结果 :移植成功率为 90 % (74 / 82 ) ,病死率为 1% (1/ 82 ) ,超急性排斥、加速排斥和急性排斥反应及移植肾功能延迟恢复分别为 3例、 5例和 2 3例 (2 8% )及 17例 (2 1% )。成功病例术后随访 12个月～ 5 8个月 ,未再发生急性排斥反应。按HLA配型原则 ,供、受者 0～ 1、 2位点错配分别为 8例 (10 % )、2 0例 (2 4 % ) ,少于CREG配型的相应位点错配 38例 (4 6 % )、 2 6例 (32 % ) ,均为P <0 0 5 ;而 3～ 4位点错配则HLA配型高于CREG配型 ,分别为 5 4例 (6 9% )、 2 6例 (32 % ) ,P <0 0 5。中、重度致敏受者术后超急性排斥和加速排斥发生率明显高于轻度致敏受者组及HLAⅠ类抗体阳性受者 ,术后急性排斥发生率亦明显高于HLAⅡ类抗体阳性受者组 (P <0 0 5 )。结论 :严格按照HLA配型及CREG配型进行供、受者筛?

脐带血库信息联网查询系统设计与应用

目的:利用现代信息技术建立我国脐带血公共库信息联网查询系统,为有效利用我国脐带血公共资源、统筹规划脐带血行业发展提供支撑工具。方法:本信息系统采用迭代和循序渐进的方式来进行系统的构建。从平台技术框架、业务流程与数据库、信息交换共享、数据安全防护、子系统功能、数据管理与分析等方面进行研究设计,实现脐血库、医疗机构脐血资源数据共享和利用。结果:系统主要功能包括数据采集服务、配型查询服务、医疗机构管理、医疗机构用血管理和脐带血库发血管理等。到2018年底,系统整合了全国6家脐带血公共库的全部有效数据,联网脐带血数据85464例,并在多家医疗机构进行了试用,共查询检索匹配数据230例。结论:脐带血库信息联网查询系统是临床开展脐带血移植配型查询有效工具,具有高效、快捷、准确等特点。

胰肾联合移植的HLA配型

胰肾联合移植术后排斥反应,尤其是抗体介导的排斥反应,是导致移植物丢失的主要原因之一。HLA配型是减少器官移植术后受者免疫系统对移植物损伤的重要保障。通过HLA配型,尤其是HLA分子配型,可帮助临床选择适合的供器官,以预防和避免受者在移植后发生排斥反应;同时,可预估移植后发生排斥反应的风险,从而及时调整免疫抑制方案,使移植器官功能恢复正常。本文就近年来HLA配型在胰肾联合移植中的作用,以及临床上如何根据HLA配型选用胰肾联合移植供器官作一综述。

肾移植后新生DSA针对性位点初步观察和新生DQ DSA产生的相关因素分析

目的观察中国肾移植受者的新生供者特异性抗体(dn DSA)产生规律及分析产生针对特定位点的新生供者特异性抗体(DQ DSA)的相关因素。方法回顾性分析2016年1月至2020年1月在海军军医大学附属长海医院接受肾移植的470例受者的临床资料,其中dn DSA阳性受者36例,通过横断面研究观察受者产生的dn DSA的针对性位点数量及其MFI值,对比分析各位点dn DSA的受者数量及强阳性受者比例之间的差异,初步观察dn DSA的产生规律,并将dn DQ DSA阳性受者与dn DQ DSA阴性受者的临床资料进行对照,应用卡方检验、秩和检验等方法进行统计学分析,找寻导致dn DQ DSA产生的相关因素。结果本研究排除术前PRA阳性、移植失败、失访受者后共纳入肾移植受者470例,产生dn DSA者36例,发生率36/470(7.36%),各dn DSA位点差异具有统计学意义(P<0.001),其中DQ位点最多为19例(52.8%),且强阳性比例最高(P<0.001)。将全部dn DQ DSA阳性受者作为观察组(19例),随机选取dn DQ DSA阴性受者作为对照组(38例),对两组进行单因素分析,发现两组在性别、诱导方案、输血史、移植病史等方面差异无统计学意义,DQ位点错配数是产生dn DQ DSA的相关因素(P=0.003)。结论dn DQ DSA是中国肾移植受者群dn DSA主要组成部分,DQ位点应作为影响参数纳入中国人体器官分配与共享系统肾脏匹配算法,以降低dn DQ DSA发生率,改善预后。