人类白细胞抗原-I类在错配修复缺陷型子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的分析人类白细胞抗原(HLA)-I类在错配修复缺陷/高度微卫星不稳定(MMRd/MSI-H)型子宫内膜癌中的表达情况,及其与细胞毒性T淋巴细胞在肿瘤中的浸润情况以及其它临床病理特征的关系。方法从我院病理科筛选出90例MMRd型子宫内膜癌。根据HLA-I类的表达状态将MMRd肿瘤分为HLA-I类正常48例和HLA-I类缺失的肿瘤42例。比较两组CD8^(+)肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)密度及其它临床病理特征,并用TCGA数据验证子宫内膜癌中HLA-I类和CD8^(+)TILs浸润情况的关联。随后分析用HLA-I类的表达状态来预测CD8^(+)TILs浸润情况的价值。结果46.7%的MMRd肿瘤存在不同程度的HLA-I类缺失。HLA-I类正常肿瘤比HLA-I类缺失肿瘤具有更多的CD8^(+)TILs(P<0.05)。HLA-I类的表达状态和肿瘤的组织学类型、肿瘤级别、肿瘤分期以及缺失的错配修复蛋白肿瘤无相关性。TCGA数据显示在mRNA水平,构成HLA-I类的分子HLA-A、HLA-B以及HLA-C均和CD8A成正相关。HLA-I类预测CD8^(+)TILs浸润情况的AUC为0.7613。结论HLA-I类缺失在MMRd子宫内膜癌中普遍存在。HLA-I类可能作为一种结合MMRd/MSI-H的补充性生物标志物,用于筛选接受免疫治疗的患者。

vIL-10对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈“操纵子”表达的影响

目的研究病毒白介素-10(vIL-10)对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"表达的影响。方法收集不同时间段vIL-10处理的鼻咽癌细胞(CNE-1和CNE-2),采用RT-PCR、Western blot方法检测vIL-10处理的鼻咽癌细胞中MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"(TAP-1、2,LMP-2、7及HLA-I)表达的变化。结果1mRNA水平:CNE-1和CNE-2的TAP-1水平在不同时间点均未表现出显著差异;vIL-10作用1、4、6、12h时,CNE-1和CNE-2的TAP-2、LMP-2均未出现变化,24h时,两者均出现显著下降甚至消失;CNE-1在vIL-10作用后4h即出现LMP-7下降,而CNE-2在vIL-10作用后6h出现下降;在vIL-10作用24h时CNE-1和CNE-2的HLA-I出现显著下降。2蛋白水平:vIL-10作用后24h时,两种细胞的TAP-1均出现显著下降,TAP-2则在vIL-10作用后1、6、12、24h出现逐渐下降;CNE-2的LMP-2、LMP-7在vIL-10作用后随时间逐渐下降,而CNE-1的两种蛋白仅在作用后12h出现显著下降;HLA-I在vIL-10作用后出现下降趋势,但在CNE-1中各时间段变化无统计学差异,CNE-2在24h显著下降。结论 vIL-10可明显抑制鼻咽癌MHC-I类分子抗原加工和提呈的"操纵子"的表达,并且呈一定的时间依赖性。

可溶性HLA-I检测技术和贮存血中可溶性HLA-I的浓度变化观察

本研究建立可溶性人类白细胞抗原 I类 (sHLA I)检测方法 ,并探讨贮存血中sHLA I浓度变化的意义。采用ELISA双抗夹心法定量检测 6 0例正常广东人血清中sHLA I水平和 2 0例献血员成分血中sHLA I含量。结果表明 :采用本技术时 ,可溶性HLA I最低检测限为 2 .84ng ml,批内变异系数为 5 .80 % ,批间变异系数为 9.0 0 % ,回收率≥ 98 5 7% ,广东人sHLA I平均值为 (6 99.5 4± 36 0 .10 )ng ml。贮存 2 8天的RBC和随机供者血小板的sHLA I的浓度明显高于其它成分血 ,并且与成分血中残存的白细胞数和贮存时间有关。结论 :用ELISA法检测可溶性HLA I灵敏、特异、稳定 ,在临床输血过程中可考虑选择性输注含有不同浓度可溶性HLA I的成分血。

TAP-1、TAP-2及HLA-I在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌组织中MHC-I类分子抗原加工提呈"操纵子"(即TAP-1、TAP-2及HLA-I)表达的变化及其与临床因素的关系。方法免疫组织化学法(IHC)检测鼻咽癌石蜡切片中TAP-1、TAP-2及HLA-I的表达,采用流式细胞仪(FCM)检测鼻咽癌患者及对照组外周血中CD4+T、CD8+T细胞比例,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测空腹外周静脉血IL-10含量,并对以上结果进行统计分析。结果 TAP-1、TAP-2及HLA-I在鼻咽癌组织中表达分别为43.1%、46.55%、50%,均低于鼻咽正常组织中的表达90%、95%、95%(P<0.05);鼻咽癌组CD4+T细胞比例明显低于对照组[(33.41±10.04)%vs.(40.15±3.56)%](P<0.05),CD8+T细胞比例与对照组比较差异无统计学意义[(25.32±8.29)%vs.(22.89±2.24)%,P>0.05],鼻咽癌IL-10表达明显高于对照组[(13.12±1.23)ng/mL vs.(3.69±1.03)ng/mL,P<0.05];TAP-1、TAP-2及HLA-I表达与年龄、性别无相关性(P>0.05),与TNM分期、有无淋巴结转移及有无远处转移密切相关(P<0.05);CD8+T细胞比例与TAP-1、TAP-2及HLA-I表达成正比,IL-10表达与TAP-1、TAP-2及HLA-I表达成反比,而CD4+T细胞比例与TAP-1、TAP-2及HLA-I表达无明显相关性;Kaplan-Meier分析提示,临床分期、有无淋巴结转移、有无远处器官转移、病理分型、TAP-1表达、TAP-2表达、HLA-I表达与鼻咽癌患者预后相关,差异具有统计学意义(P<0.05);Logistic回归模型分析显示,有无远处器官转移及HLA-I表达为鼻咽癌患者独立预后因素(P=0.043,P=0.045)。结论鼻咽癌中TAP-1、TAP-2及HLA-I低表达,且与患者免疫功能低下相关;远处器官转移及HLA-I低表达预示鼻咽癌患者预后不良。

中国北方汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体HLA-I基因的多态性研究

目的分析中国北方汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killercellimmunoglobulin-likereceptors，KIR）及其配体人类白细胞抗原（humanleucocyteantigen，HLA）-I类分子的基因多态性特征。方法研究对象为184名北方汉族儿童（男91名，女93名）。采用聚合酶链反应一序列特异性引物方法分别检测KIR及HLA—ABC的基因多态性。结果16个KIR基因在本研究中均能检测到；4个框架基因的基因频率均为100％；其他K豫的基因频率在16．3％～99．5％之间。共检测出24种基因型（包括1种新的基因型，其基因组成包括框架基因及KIR2DL3、3DL1、2DPI）。在HLA—A、B、C基因座位上，分别检测出低分辨水平等位基因12种、27种、11种。结论获得了中国北方汉族人群的K豫及其配体HLA—ABC基因多态性特征；报告了9对KIR／HLA配对组合在汉族人群中的频率。