长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

人类免疫缺陷病毒-1 nef诱导凋亡及下调人类白细胞抗原-I类分子

【目的】研究人类免疫缺陷病毒(HIV)-1 nef调节细胞表面的人类白细胞抗原(HLA)-I类分子及诱导细胞凋亡情况。【方法】将293T细胞分为两组,用脂质体法将含HIV-1 nef基因的质粒及空载体分别转染细胞,Western blot检测HIV-1 nef在转染细胞中的表达,荧光抗体染色结合流式细胞术检测细胞表面的HLA-I类分子表达及细胞凋亡情况。【结果】HIV-1 nef在转染细胞中有表达。转染HIV-1 nef的细胞与转染空载体的细胞经抗HLA-A,B,C-FITC染色后,平均荧光强度分别为205±22及269±15,两者相比有显著性差异(P<0.01);经Annexin V-APC/PI染色后,阳性细胞百分率分别为(60.82±8.32)%及(8.12±5.43)%,两者相比亦有显著性差异(P<0.01)。【结论】HIV-1 nef下调细胞表面的HLA-I类分子及诱导细胞凋亡。

人类白细胞抗原E基因全长序列测定及两个新等位基因的鉴定

背景:人类白细胞抗原E是非经典的人类白细胞抗原I类分子,目前的多态性分析研究主要针对其第3外显子人类白细胞抗原E~*01:01及人类白细胞抗原E*01:03进行区分,然而其全基因序列测定方法及新等位基因报道尚不多见。目的:利用中国深圳地区无偿献血正常个体建立人类白细胞抗原E基因全长序列测序分型方法,鉴定人类白细胞抗原E基因全长序列新的等位基因。方法:提取研究对象外周血DNA,根据IMGT/HLA数据库中公布的人类白细胞抗原E基因序列,在保守区设计全基因扩增及测序引物,利用高保真反应体系对人类白细胞抗原E全长序列进行扩增,随后测序、拼接、序列确认及基因定型。结果与结论:(1)成功建立了人类白细胞抗原E的全基因扩增及测序分型方法,发现了两个人类白细胞抗原E新等位基因——人类白细胞抗原E~*01:01:01:06与人类白细胞抗原E~*01:01:01:07,获得了WHO人类白细胞抗原命名因子委员会的命名;(2)人类白细胞抗原E~*01:01:01:06与其最接近的等位基因人类白细胞抗原E~*01:01:01:01相比,突变位点在5’-启动子区的NT-26(G->T),人类白细胞抗原E~*01:01:01:07与其最接近的等位基因人类白细胞抗原E~*01:01:01:01相比,突变位点在3’-非翻译区的NT3345位(T->C);(3)结果提示,中国人群中人类白细胞抗原E全基因序列多态性数据有待填补,试验建立的方法为该项研究提供了关键的技术。

人类白细胞抗原G分子、凋亡相关因子及FAS配体分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中表达的研究

目的检测人类白细胞抗原-G分子(HLA-G)、FAS/FASL分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况。方法应用免疫组织化学方法检测18例宫颈鳞癌,40例宫颈上皮内瘤变(包括CINⅢ16例,CINⅡ12例,CINⅠ12例),18例正常宫颈组织中HLA-G分子、FAS分子、FASL分子的表达,并分别比较各分子之间的相关性。结果宫颈鳞癌中HLA-G分子的表达水平显著高于正常宫颈组织,其FAS分子的表达水平显著低于正常宫颈组织。HLA-G与FAS分子在宫颈鳞癌与CINs中的表达水平无统计学差异性,在CINs组间以及CINs与正常组织中的表达无显著差异性。FASL分子在宫颈鳞癌和CINs及正常组织中的表达水平无明显差异性。HLA-C与FASL分子在各宫颈病变中表达均具有正相关性,其两者与FAS分子之间表达无相关性。结论宫颈鳞癌组织中HLA-G和FASL分子呈高表达,FAS分子呈低表达。HLA-G与FASL分子呈正相关。但HLA-G分子是否介导宫颈鳞癌的免疫耐受,以及FAS/FASL分子介导的细胞凋亡途径是否为其发生的途径之一尚需进一步研究。

可溶性人类白细胞抗原G联合癌胚抗原检测在恶性胸腔积液中诊断价值

胸水细胞学检查是诊断胸腔积液最常见的方法,但其诊断敏感度最高也仅有60%左右〔1〕。胸腔镜获取病理组织虽是诊断胸膜疾病的金标准,但部分患者不愿接受胸腔镜有创检查,且部分基层医院不具备开展胸腔镜的条件。因此,分子方法检测胸水性质用于鉴别良恶性胸腔积液具有重要意义。人类白细胞抗原(HLA)-G作为肿瘤相关分子有助于鉴别组织的良恶性〔2〕。可溶性HLA(s HLA)-G作为一个潜在的肿瘤标志物,

散发性阿尔茨海默病易患性与人类白细胞抗原基因频率的相关性(英文)

目的探讨人类白细胞抗原HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率与散发性阿尔茨海默病(SAD)的关系,试图从分子免疫遗传学角度揭示SAD的发病机制。方法SAD组44例(广州市精神病院中筛选),男11例,女33例,年龄59～91岁。正常对照组45例(中山大学附属第二医院保健科体检的自愿健康老年人),男14例,女31例,年龄61～88岁。采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术分别测定44例SAD患者(SAD组)和45例正常老年人(对照组)的HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率。结果SAD患者中3种基因频数分别为25,5,16;频率分别为28.41%,5.68%,18.18%。而正常老年人中的相应基因频数分别为16,13,19;频率分别为17.78%,14.44%,21.11%。其中HLA-DR2,DRB1*04较对照组差异有显著性意义(χ2=4.002,4.187,P<0.05),DRB1*09差异无显著性意义(χ2=0.050,P>0.05)。结论HLA-DR2可能是SAD的易感基因,而HLA-DRB1*04可能对SAD的发病起到保护作用。HLA-DRB1*09与SAD发病无关联。

汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA1~＊01：11的鉴定

背景:在群体遗传学研究中,发现一个样本人类白细胞抗原-DPA1位点结果异常,而国际上与人类白细胞抗原-DPA1等位基因相关的报道较少。目的:鉴定一个人类白细胞抗原-DPA1*01相关的新变异等位基因。方法:在群体遗传学研究中,采用PCR产物直接测序分型方法,对人类白细胞抗原-DPA1基因第2外显子进行双向测序。对出现异常分型结果的样本,进行分子克隆和单倍体测序。结果与结论:发现一个样本的人类白细胞抗原-DPA1位点结果异常,经分子克隆和单倍体测序,检出了一个正常的人类白细胞抗原-DPA1*01:03和一个DPA1*01相关的新变异等位基因,该新等位基因的序列与DPA1*01:03的序列最接近,其差异是在第二外显子区域的242位碱基发生A>G的替换,并导致了相应的第50位密码子由CAA>CGA,编码的氨基酸残基由谷氨酰胺变成精氨酸。该等位基因为人类白细胞抗原新的等位基因,已被世界卫生组织人类白细胞抗原因子命名委员会正式命名为人类白细胞抗原-DPA1*01:11(提交序列号HWS10015443)。

人类白细胞抗原-DRB基因多态性与儿童哮喘易感性的相关性研究

目的通过对人类白细胞抗原(HLA)-DR基因的检测,探讨哮喘儿童HLA-DRB基因型基因多态性与儿童哮喘易感性的关系。方法将无血缘关系的84名哮喘儿童(哮喘组)和168名无哮喘和特应性疾病的健康个体(对照组)纳入研究。采用PharmaciaUniCAP系统检测哮喘儿童的血清总IgE水平,同时完成10种吸入性过敏原皮肤实验。应用基因芯片法检测HLA-DR的21个基因位点。结果支气管哮喘组HLA-DRB1*070X基因和HLA-DRB1*11XX基因频率(分别为2.98%和13.69%)高于对照组(分别为0.3%和5.95%,x^2=6.915,P<0.05和x^2=9.478,P<0.01),优势比(OR)分别为10.57(95%CI 1.215～91.986)和2.79(95%CI 1.429～5.449);HLA-DRB3(52)*010X基因频率在哮喘组为7.14%,低于对照组的13.99%(x^2=5.854,P<0.05),OR为0.429(95%CI 0.214～0.862)。结论 HLA-DRB1*070X基因和HLA-DRB1*11XX基因与哮喘儿童易感性相关;HLA-DRB3(52)*010X基因则为抗性基因。

可溶性人类白细胞抗原G在肾移植术后肺部感染患者中的表达及临床意义

人类白细胞抗原G（HLA—G）属于非经典HLA-I类分子．与经典HLA—I类抗原不同，它组织分布局限，正常生理条件下HLA—G的表达与HLA其他抗原的普遍表达存在不同，仅限制性地表达在一些免疫赦免区．如母胎交界面、胸腺髓质间上皮细胞和眼球部分，病理状态下表达于感染、肿瘤细胞、自身免疫性疾病以及移植功能良好的情况下。HLA—G已经在无排斥的心脏移植、肾移植、肝移植和肝肾联合移植受者中检测到。

人类白细胞分化抗原CD44与骨关节病

人类白细胞分化抗原作为一种粘附分子,主要与细胞外透明质酸结合,参与关节软骨基质中透明质酸的代谢,因而它与各种骨关节疾病包括大骨节病关系密切。本文从人类白细胞分化抗原的基因结构、蛋白结构、生物学功能等多方面阐述了近年来国内外在骨关节疾病领域的研究成果,并对开展有关人类白细胞分化抗原和大骨节病的研究提出了建议。

人类白细胞E抗原和G抗原在HIV感染中的作用（一）

HIV研究工作的重要领域是免疫应答以及HIV是如何破坏免疫应答而引起慢性感染的。各种研究不仅提供了“HIV如何侵入”的基本知识，而且为研制抵抗AIDS的疫苗提供了线索。虽然HIV最初引起免疫应答，但随后它逃逸并躲避免疫系统而最终发生感染。逃逸免疫应答的方法包括快速产生改变细胞表面受体结构的突变、改变人白细胞抗原（HLA）表达谱以及破坏免疫效应细胞。

雷公藤甲素对γ-干扰素刺激后人眼球后成纤维细胞粘附分子-1和白细胞抗原-DR表达的影响

目的 观察雷公藤甲素对γ -干扰素 (IFN -γ)刺激后人眼球后成纤维细胞 (RFs)增殖和对细胞粘附分子 - 1(ICAM - 1)、白细胞抗原 (HLA) -DR表达的影响。方法 体外培养的RFs分别与IFN -γ、雷公藤甲素孵育后 ,MTT比色法检测雷公藤甲素对RFs增殖的影响 ;流式细胞仪检测ICAM - 1、HLA -DR的表达状况。结果 雷公藤甲素能以剂量依赖方式抑制RFs的增殖 ,当剂量达 10 0 μg/L时 ,RFs的增殖完全被抑制。正常人自发表达少量的ICAM - 1,不表达HLA -DR ;IFN -γ (10 0U/L)能强烈刺激ICAM - 1、HLA -DR的表达 (P <0 0 1) ;雷公藤甲素能明显抑制IFN -γ对ICAM - 1、HLA -DR的刺激作用。结论 雷公藤甲素能够抑制细胞因子介导的RFs的生物活性 。

人类白细胞E抗原和G抗原在HIV感染中的作用（三）

HIV和切去顶端胞浆区的HLA—G Geraghty等人在1987年克隆了HLA G。它是较少多态的，已知它是迄今为止仅为15个等位基因。与经典的1类抗原比较，它受到组织分布的限制。虽然在妊娠期间维持耐受中提出了最初的HLA—G，但是它在不同的癌症和器官移植中的肿瘤逃逸机制的作用已得到研究。

人类白细胞E抗原和G抗原在HIV感染中的作用（二）

HLA基因型和细胞毒性T细胞 HLA抗原通过在与CTL相互作用的细胞表面上形成抗原一呈递结合物来刺激细胞应答，介导它们抑制受感染细胞并通过表面分子的杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）家族相互作用来激活先天免疫应答的自然杀伤（NK）细胞。重要证据表明，免疫应答可有效地削减HIV疾病的感染和传播。

NKG2A-HLA-E轴介导NK细胞应答在病毒感染性疾病中的作用及机制研究进展

自然杀伤(NK)细胞主要通过迅速释放细胞毒性介质以及细胞因子直接杀伤病毒感染的靶细胞。NK细胞表面抑制性和活化性受体的平衡以及靶细胞上相应配体的表达均参与调控NK细胞的杀伤功能。其中NK细胞2组成员A(NKG2A)是NK细胞上备受关注的抑制性受体之一,通过与其配体人类白细胞抗原E(HLA-E)的相互作用,可抑制NK细胞对自身正常组织细胞的杀伤活性。研究发现病毒感染细胞表面HLA-E表达上调,并且可与病毒蛋白来源的多肽结合形成复合物,通过与NKG2A的相互作用调控NK细胞功能,从而参与病毒感染性疾病发病过程。本文总结了NKG2A与HLA-E分子互作特点,以及NKG2A-HLA-E轴参与调控NK细胞的功能机制,有助于了解NK细胞在病毒感染性疾病中的重要作用。

抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞HLA-E的表达调控及对NK细胞抗肿瘤活性的影响

目的研究HLA-I类基因抗原肽(B7)、巨细胞病毒(CMV)抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞系U266表面HLA-E分子表达水平的调控及其表达水平的改变对NK细胞抗肿瘤活性的影响。方法将体外合成的B7及CMV抗原肽与U266共同孵育,流式细胞术检测这些抗原肽孵育前后U266细胞表面的HLA-E分子表达水平。分离健康人NK细胞,利用CD107a表达检测法研究U266细胞表面HLA-E表达水平改变后,NK细胞对其杀伤活性的变化。结果 HLA-B7抗原肽,CMV抗原肽,均可显著上调人多发性骨髓瘤细胞U266表面的HLA-E分子表达水平,且HLA-E表达上调后,可明显特异性抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞活性。结论在肿瘤微环境中,细胞表面HLA-E表达上调可能是肿瘤细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的一个重要手段之一。