人类白细胞抗原F在妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘中的表达及意义

目的:研究人类白细胞抗原F(HLA-F)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织中的表达,并从免疫学角度探讨其与ICP发病的关系。方法:采用免疫组织化学技术对妊娠晚期(ICP组40例和正常对照组40例)胎盘组织中表达的HLA-F蛋白进行定位;再通过PCR及蛋白质免疫印迹技术,研究ICP患者(轻度20例,重度20例)胎盘组织中HLA-F在核酸分子(mRNA)及蛋白中的表达情况。结果:1妊娠晚期胎盘组织中仅蜕膜板绒毛外滋养细胞(EVCT)膜上有HLA-F蛋白表达。2正常对照组和ICP组间胎盘组织中HLA-F mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);正常对照组和轻度ICP、重度ICP3组间胎盘组织中HLA-F mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05);ICP组胎盘组织中HLA-F蛋白的表达水平低于正常对照组(0.6092±0.3370vs1.3451±0.5540),差异有统计学意义(P<0.05);重度ICP胎盘组织中HLA-F蛋白的表达水平显著低于正常对照组(0.5328±0.2762vs 1.3451±0.5540)差异有统计学意义(P<0.05);而轻度ICP和正常对照组间胎盘组织中HAL-F蛋白的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。3ICP非地塞米松组和ICP地塞米松组间胎盘组织中HLA-F mRNA及蛋白的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HLA-F蛋白表达于妊娠晚期胎盘组织蜕膜板EVCT细胞膜上;ICP患者胎盘组织中HLA-F蛋白表达水平降低可能是导致ICP患者妊娠免疫耐受平衡紊乱的重要机制之一。

宫颈癌组织人类白细胞抗原F表达变化及其与患者临床病理参数的关系

目的观察宫颈癌组织人类白细胞抗原F(HLA-F)表达变化,并分析其表达与患者临床病理参数的关系。方法选择宫颈癌组织115例份及其配对的癌旁正常组织20例份,采用免疫组化法检测各组织HLA-F表达,并分析其表达与宫颈癌患者临床病理参数的关系。结果宫颈癌组织HLA-F表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01)。宫颈癌组织HLA-F表达与患者组织学类型、肿瘤直径以及浸润深度有关(P均<0.05),与患者年龄、组织分化程度、临床分期及淋巴结转移情况无关(P均>0.05)。结论宫颈癌组织HLA-F表达升高,其表达变化可能参与了宫颈癌的发生、发展。

人类白细胞抗原F介导转录因子10在甲状腺癌细胞TPC-1增殖和凋亡中的作用及其机制

目的 观察人类白细胞抗原F介导转录因子10（FAT10）的碳末端双甘酸缺失突变体对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 收集甲状腺原位癌组织标本和正常宫颈组织标本各10例,Western blot法检测组织中FAT10蛋白的表达.采用定点突变技术构建pcDNA3.0-flag-FAT10△GG质粒,分别将野生型FAT10、FAT10△GG及空载体（阴性对照）瞬时转染至TPC-1细胞中,以野生型TPC-1细胞作为空白对照组,采用Western blot法检测转染效率,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖.转染24 h后,各组细胞经顺铂诱导凋亡,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 FAT10蛋白在甲状腺癌组织中的表达明显高于正常组织.过表达野生型FAT10对甲状腺癌细胞的增殖有明显促进作用,但FAT10发生双甘酸突变之后,该作用受到明显抑制.流式细胞仪检测结果显示：与空白对照组[（22.7±4.2）％]和阴性对照组[（24.1±3.8）％]比较,过表达野生型FAT10组的细胞凋亡率[（10.9±2.0）％]明显降低（P＜0.05）,而与FAT10△GG组的细胞凋亡率[（25.7±5.1）％]比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 FAT10可通过其碳末端双甘酸结构促进肿瘤细胞增殖,减少凋亡,从而促进肿瘤的发生发展.

类泛素蛋白FAT10通过Nrf2/HO-1通路对心肌细胞缺血缺氧修复损伤的保护作用

目的探讨类泛素蛋白人类白细胞抗原F介导转录因子10(FAT10)在心肌细胞缺氧修复损伤中的作用及机制。方法采用H9C2大鼠心肌细胞构建缺氧复氧模型,将心肌细胞分为对照组、缺氧4 h组、复氧2 h组及复氧4 h组。采用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,采用Annexin V-FITC/PI法检测心肌细胞凋亡,采用微量酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)。将阴性对照RNA序列(si-CON)和FAT10沉默序列转入心肌细胞,将细胞分为对照组、缺氧4 h+si-CON组、缺氧4 h+siRNA组、复氧4 h+si-CON组、复氧4 h+siRNA组。Western-blot检测细胞FAT10、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果随复氧时间延长,心肌细胞存活率下降,心肌细胞损伤加重,细胞凋亡率升高,在复氧4 h后最低。复氧4 h组细胞存活率低于对照组,而LDH水平及细胞凋亡率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。FAT10蛋白表达水平:复氧4 h+siRNA组<缺氧4 h+siRNA组<缺氧4 h+si-CON组,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染siRNA后,心肌细胞FAT10蛋白表达水平下降,凋亡率增高,Nrf2和HO-1蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论FAT10可能通过Nrf2/HO-1通路抗心肌细胞凋亡,进而对缺氧修复损伤起到保护作用。

HLA-F在ICP患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织中人类白细胞抗原F(HLA-F)的表达变化及意义。方法选取2013年1月至2015年7月产科确诊的ICP患者65例(ICP组)、40例健康妊娠女性(健康组),采用Western blot检验技术检测2组胎盘组织中HLA-F蛋白的表达水平,并将ICP组根据病情进行亚组分析。结果 ICP组患者的胎盘组织中HLA-F蛋白表达灰度值(0.729±0.164)显著的低于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);ICP组患者的血清TBA、ALT、AST水平均高于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05);ICP重度组患者的胎盘组织中HLA-F蛋白表达灰度值显著的低于ICP轻度组,差异有统计学意义(P<0.05);ICP重度组患者的血清TBA、ALT、AST水平均高于ICP轻度组,差异均具有统计学意义(P<0.05);ICP组患者的胎盘组织中HLA-F蛋白表达灰度值与血清TBA、ALT、AST水平均呈现出显著的负相关关系(P<0.05)。结论 ICP患者胎盘组织的HLA-F蛋白表达水平明显降低,并且与患者的病情、血清TBA、ALT、AST水平密切相关性。

鼻咽癌EGFR、HLA-F表达水平及调强放疗预后的影响因素分析

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、人类白细胞抗原F(HLA-F)表达水平预测鼻咽癌调强放疗预后的价值。方法采用免疫组织化学法,检测120例鼻咽癌组织中EGFR和HLA-F的表达水平。将患者根据预后分为生存组和死亡组,应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Cox比例风险模型分析EGFR和HLA-F表达水平与预后的关系。结果 EGFR和HLA-F在鼻咽癌组织中的阳性表达水平正相关。EGFR≥(++)表达率为70.8%(85/120)。HLA-F≥(++)表达率为66.7%(80/120)。EGFR和HLA-F表达水平与患者的性别、年龄、组织病理学分型间均无相关性(均P>0.05)。但与患者T、N分期有相关性(均P<0.05)。Cox多因素回归分析表明T分期是PFS的独立影响因素,EGFR+HLA-F高低表达是OS的独立影响因素。高EGFR+高HLA-F表达的患者预后最差。结论相对于EGFR、HLA-F低表达,高EGFR+高HLA-F表达患者预后更差,联合检测EGFR、HLA-F表达水平可作为预测鼻咽癌调强放疗预后的重要分子生物学指标。

类泛素蛋白FAT10对AngⅡ诱导的内皮细胞炎症的影响及其作用机制

目的探究类泛素蛋白FAT10对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管内皮炎症因子释放的作用机制。方法选取雄性16周龄WKY大鼠3只和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、人血管平滑肌细胞(VSMC)。使用Western blot检测大鼠胸主动脉、颈动脉、肾动脉以及上述细胞中FAT10的表达。使用HUVEC细胞筛选FAT10表达量最高时AngⅡ的浓度及作用时间。构建空白对照质粒、过表达FAT10质粒、无效干扰质粒及干扰FAT10质粒,使用上述质粒转染HUVEC细胞。在加入100 nmol/L AngⅡ培养36 h后,采用Western blot检测炎症因子单核细胞趋向性蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达水平;采用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧生成水平;对转染空白对照质粒和过表达FAT10质粒的细胞应用活性氧清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC),采用Western blot检测应用或不应用NAC时MCP-1、TNF-α蛋白的表达水平。结果FAT10在正常血压大鼠的颈动脉、胸主动脉、肾动脉以及HUVEC、VSMC、MDA-MB-231细胞系中均有表达。在HUVEC中,随着AngⅡ作用时间及浓度增加,FAT10的表达量逐渐增高,且在100 nmol/L AngⅡ作用36 h时达最高(P<0.01)。在AngⅡ诱导下,过表达FAT10的HUVEC中炎症因子MCP-1(P<0.001)与TNF-α的蛋白表达显著增加(P<0.01),干扰FAT10的HUVEC中MCP-1与TNF-α的蛋白表达降低(P均<0.001)。过表达FAT10的HUVEC中活性氧生成水平增加(P<0.001),干扰FAT10的HUVEC中活性氧生成水平降低(P<0.05)。应用NAC后,过表达FAT10的HUVEC中炎症因子MCP-1与TNF-α的蛋白表达升高趋势被逆转(P均<0.05)。结论FAT10通过增加细胞内活性氧生成水平而促进AngⅡ诱导的内皮细胞炎症因子释放。

胎盘HLA-F蛋白表达水平与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘人类白细胞抗原F(HLA-F)蛋白表达水平及与其发病的相关性。方法选取2014年1月-2015年12月在该院住院分娩的单胎妊娠孕妇90例,其中轻度ICP 24例、重度ICP 20例、正常孕妇46例。采用免疫组化技术检测ICP患者和正常孕妇胎盘中HLA-F蛋白的表达;采用RT-PCR技术检测患者胎盘中HLA-F基因mRNA的表达,采用Western Blot技术检测蛋白的表达。结果 HLA-F仅在胎盘蜕膜板绒毛外滋养层细胞上有表达,轻、重ICP患者和正常孕妇的HLA-F mRNA的相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);轻度ICP患者与正常孕妇的HLA-F蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);重度ICP患者的HLA-F蛋白相对表达量显著低于正常孕妇的表达量,差异有统计学意义(P<0.05);ICP患者总体的HLA-F蛋白相对表达量低于正常孕妇的HLA-F蛋白表达量,差异有统计学意义(P<0.05);应用地塞米松组ICP患者和未应用地塞米松组ICP患者的HLA-F蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论表达于绒毛外滋养层细胞上的HLA-F蛋白关系着母体对胎盘组织的免疫耐受情况,HLA-F的异常低表达可能是ICP的发病原因之一。

AnnexinA7、ERCC1、HLA-F在鼻咽癌演进过程中的表达水平研究

目的探讨膜联蛋白A7(AnnexinA7)、核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、人类白细胞抗原F(HLA-F)在鼻咽癌演进过程中的表达水平。方法选取2020年4月至2021年3月在该院进行手术治疗的78例鼻咽癌患者癌组织、癌旁组织标本进行免疫组织化学染色,检测各组标本组织中AnnexinA7、ERCC1、HLA-F表达情况,分析AnnexinA7、ERCC1、HLA-F在鼻咽癌演进过程中的表达水平。结果癌组织中AnnexinA7、ERCC1、HLA-F表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。AnnexinA7、ERCC1、HLA-F在不同性别、年龄的鼻咽癌中表达水平无统计学差异(P>0.05);在不同组织学类型、T分期、N分期差异具有统计学意义(P<0.05)。与Ⅱ期鼻咽癌患者比较,Ⅲ、Ⅳ期管鼻咽癌患者AnnexinA7、ERCC1、HLA-F表达水平明显升高(P<0.05);与Ⅲ期鼻咽癌患者比较,Ⅳ期管鼻咽癌患者AnnexinA7、ERCC1、HLA-F表达水平明显升高(P<0.05)。与AnnexinA7、ERCC1、HLA-F单一指标检测比较,AnnexinA7、ERCC1、HLA-F联合检测对鼻咽癌的预测价值明显增高(P<0.001)。对鼻咽癌组织中AnnexinA7、ERCC1、HLA-F表达相关性进行分析,鼻咽癌组织中AnnexinA7与ERCC1、HLA-F表达水平呈正相关(r=0.537、0.652,P=0.001);ERCC1与HLA-F表达水平呈正相关(r=0.479,P=0.001)。结论AnnexinA7、ERCC1、HLA-F在鼻咽癌患者中表达水平明显升高,且与肿瘤的分期、淋巴结转移有关,三者可能共同参与了鼻咽癌的发生、发展过程。