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对头颈鳞状细胞癌中高表达基质金属蛋白酶基因具有激活作用的人类膜蛋白基因筛选
被引量:
2
1
作者
许洪波
米光熙
+3 位作者
黄俊伟
刘泽阳
尹高菲
黄志刚
《山东医药》
CAS
北大核心
2017年第23期1-3,共3页
目的对头颈部鳞状细胞癌中高表达的基质金属蛋白酶(MMP)基因(包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12和MMP13)具有激活作用的人类膜蛋白基因进行筛选。方法构建上述7个备选MMP启动子报告基因质粒。用豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA,一种蛋白激...
目的对头颈部鳞状细胞癌中高表达的基质金属蛋白酶(MMP)基因(包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12和MMP13)具有激活作用的人类膜蛋白基因进行筛选。方法构建上述7个备选MMP启动子报告基因质粒。用豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA,一种蛋白激酶C激活剂)刺激7个备选MMP启动子报告基因质粒。用双荧光素酶检测系统检测各备选MMP启动子报告基因质粒PMA刺激前的活性及PMA刺激后的活性,以后者除以前者得出各备选MMP启动子报告基因质粒的相对荧光素酶活性值(RLA),RLA最大者选定为MMP启动子报告基因质粒。用人类膜蛋白基因质粒库中的722种质粒依次刺激MMP启动子报告基因质粒,刺激前后MMP启动子报告基因质粒RLA均数超过10确定为对MMP启动子报告基因质粒活性有明显激活作用的人类膜蛋白基因质粒。将筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第二轮筛选,第二轮筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第三轮筛选,最终确定对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP有激活作用的人类膜蛋白基因。结果PMA刺激后MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12、MMP13启动子报告基因质粒的RLA分别为4.53±0.72、1.47±0.28、23.28±1.96、2.37±0.46、8.81±1.35、2.15±0.51、3.47±0.99。MMP3启动子报告基因质粒的RLA明显高于其他MMP启动子报告基因质粒(P均<0.05),被选为MMP启动子报告基因质粒。全部722个质粒经3轮筛选,确定AXL受体酪氨酸激酶(AXL)、肿瘤坏死因子受体超家族成员10b(TNFRSF10B)和G蛋白耦联受体65(GPR65)质粒对MMP启动子报告基因质粒均有明显的激活作用。结论 GPR65、AXL、TNFRSF10B基因对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP基因有激活作用。
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关键词
头颈部鳞状细胞癌
基质金属
蛋白
酶
人类膜蛋白
G
蛋白
耦联受体65
AXL受体酪氨酸激酶
肿瘤坏死因子受体超家族成员10b
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职称材料
HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选
2
作者
王美霞
金铭
+2 位作者
段瑾
傅晓晴
徐斌
《医学研究杂志》
2012年第5期45-49,共5页
目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根...
目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs;分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算ΔΔCT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA。结果荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在;每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过ΔΔCT值的计算找出其中效率最高的一条。结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达。
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关键词
RNA
La自身抗原33kDa
人类
囊相关
膜蛋白
真核细胞翻译起始因子第三亚单位
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职称材料
题名
对头颈鳞状细胞癌中高表达基质金属蛋白酶基因具有激活作用的人类膜蛋白基因筛选
被引量:
2
1
作者
许洪波
米光熙
黄俊伟
刘泽阳
尹高菲
黄志刚
机构
首都医科大学附属北京同仁医院
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2017年第23期1-3,共3页
基金
国家自然科学基金项目(81670946)
北京市医管局临床医学发展专项扬帆计划项目(XMLX201507)
首都医科大学附属北京同仁医院科研骨干基金项目(2015-YJJ-GGL-002)
文摘
目的对头颈部鳞状细胞癌中高表达的基质金属蛋白酶(MMP)基因(包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12和MMP13)具有激活作用的人类膜蛋白基因进行筛选。方法构建上述7个备选MMP启动子报告基因质粒。用豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA,一种蛋白激酶C激活剂)刺激7个备选MMP启动子报告基因质粒。用双荧光素酶检测系统检测各备选MMP启动子报告基因质粒PMA刺激前的活性及PMA刺激后的活性,以后者除以前者得出各备选MMP启动子报告基因质粒的相对荧光素酶活性值(RLA),RLA最大者选定为MMP启动子报告基因质粒。用人类膜蛋白基因质粒库中的722种质粒依次刺激MMP启动子报告基因质粒,刺激前后MMP启动子报告基因质粒RLA均数超过10确定为对MMP启动子报告基因质粒活性有明显激活作用的人类膜蛋白基因质粒。将筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第二轮筛选,第二轮筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第三轮筛选,最终确定对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP有激活作用的人类膜蛋白基因。结果PMA刺激后MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12、MMP13启动子报告基因质粒的RLA分别为4.53±0.72、1.47±0.28、23.28±1.96、2.37±0.46、8.81±1.35、2.15±0.51、3.47±0.99。MMP3启动子报告基因质粒的RLA明显高于其他MMP启动子报告基因质粒(P均<0.05),被选为MMP启动子报告基因质粒。全部722个质粒经3轮筛选,确定AXL受体酪氨酸激酶(AXL)、肿瘤坏死因子受体超家族成员10b(TNFRSF10B)和G蛋白耦联受体65(GPR65)质粒对MMP启动子报告基因质粒均有明显的激活作用。结论 GPR65、AXL、TNFRSF10B基因对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP基因有激活作用。
关键词
头颈部鳞状细胞癌
基质金属
蛋白
酶
人类膜蛋白
G
蛋白
耦联受体65
AXL受体酪氨酸激酶
肿瘤坏死因子受体超家族成员10b
Keywords
head and neck squamous-cell carcinoma
matrix metalloproteinases
human membrane protein
AXL receptor tyrosine kinase
tumor necrosis factor receptor superfamily 10b
分类号
R739.91 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选
2
作者
王美霞
金铭
段瑾
傅晓晴
徐斌
机构
首都医科大学附属北京佑安医院
浙江中医药大学附属杭州市第六人民医院
出处
《医学研究杂志》
2012年第5期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(30500426)
文摘
目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs;分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算ΔΔCT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA。结果荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在;每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过ΔΔCT值的计算找出其中效率最高的一条。结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达。
关键词
RNA
La自身抗原33kDa
人类
囊相关
膜蛋白
真核细胞翻译起始因子第三亚单位
Keywords
RNAi
La autoantigen
hVAP - 33
eIF2Bgamma
分类号
R [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
对头颈鳞状细胞癌中高表达基质金属蛋白酶基因具有激活作用的人类膜蛋白基因筛选
许洪波
米光熙
黄俊伟
刘泽阳
尹高菲
黄志刚
《山东医药》
CAS
北大核心
2017
2
下载PDF
职称材料
2
HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选
王美霞
金铭
段瑾
傅晓晴
徐斌
《医学研究杂志》
2012
0
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职称材料
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