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当归补血汤含药血清抑制JAK2/STAT1/3信号通路诱导人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 赵莹 王爽 +2 位作者 潘志 汪少琼 王颖航 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期870-877,共8页
目的基于JAK2/STAT1/3信号通路探讨当归补血汤含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖、凋亡的影响及机制。方法将Wistar大鼠随机分为空白组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及当归... 目的基于JAK2/STAT1/3信号通路探讨当归补血汤含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖、凋亡的影响及机制。方法将Wistar大鼠随机分为空白组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及当归补血汤高、中、低剂量组(15、7.5、3.75 g·kg^(-1)),连续灌胃给药7 d,制备大鼠空白血清及含药血清。将HFLS-RA细胞随机分为6组,即空白组(10%空白组大鼠血清培养基)、模型组(20 ng·mL^(-1)TNF-α+10%空白组大鼠血清培养基)、雷公藤多苷组(20 ng·mL^(-1)TNF-α+10%雷公藤多苷组大鼠血清培养基),以及当归补血汤含药血清低、中、高剂量组(20 ng·mL^(-1)TNF-α+10%当归补血汤低、中、高剂量组大鼠血清培养基);按照分组设置加入终质量浓度为20 ng·mL^(-1)的TNF-α,1 h后加入相应含药(或空白)血清处理24 h。采用CCK-8法检测HFLS-RA细胞增殖活性;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法)检测HFLS-RA细胞凋亡情况;RT-PCR法检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA表达;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素15(IL-15)水平;Western Blot法检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、p-JAK2、p-STAT3、p-STAT1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组HFLS-RA细胞的增殖活性显著升高(P<0.01),细胞凋亡率明显下降(P<0.05),IL-6、IL-15水平显著升高(P<0.01);Bax、caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),而Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bax/Bcl-2比值显著降低(P<0.01);细胞p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,雷公藤多苷组及当归补血汤含药血清各剂量组HFLS-RA细胞的增殖活性均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-15水平均显著降低(P<0.01);Bax、caspase-3mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),Bax/Bcl-2比值显著升高(P<0.01);当归补血汤含药血清中、高剂量组HFLS-RA细胞的p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论当归补血汤含药血清对TNF-α诱导HFLS-RA细胞增殖有显著的抑制作用,并可促使其凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT1/3信号通路转导有关。 展开更多
关键词 当归补血汤含药血清 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 增殖 凋亡 JAK2/STAT1/3信号通路 大鼠
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红景天含药血清对肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响 被引量:6
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作者 田乐 朴松兰 +1 位作者 何艳新 潘志 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期287-292,共6页
目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg^(-1))... 目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg^(-1))大鼠含药血清;体外培养HFLS-RA,以20 ng·mL^(-1)TNF-α及10%不同组含药血清对HFLS-RA进行干预。采用MTT法检测各组含药血清对HFLS-RA细胞的增殖作用;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的含量;PCR法检测细胞中维甲酸受体相关孤儿受体γt(ROR-γt)、信号转导及转录激活因子3(Stat3)、叉头样转录因子3(Foxp3)mRNA表达;Western Blot法检测细胞中ROR-γt、Stat3、Foxp3蛋白表达。结果与空白组比较,模型组培养HFLS-RA 24、48 h后细胞增殖水平明显升高(P<0.01),ROR-γt、Stat3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),IL-6、IL-17水平升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平降低(P<0.01)。与模型组比较,红景天各剂量组HFLS-RA细胞增殖水平降低(P<0.01),ROR-γt、Stat3mRNA及蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平升高(P<0.01)。结论红景天含药血清可抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞的异常增殖,其机制可能与下调ROR-γt、Stat3表达及上调Foxp3表达有关。 展开更多
关键词 红景天含药血清 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 维甲酸受体相关孤儿受体γt 信号转导及转录激活因子3 叉头样转录因子3 细胞增殖 肿瘤坏死因子Α
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基于PI3K/AKT信号通路探究红景天-鬼箭羽药对对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用机制及配伍规律 被引量:1
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作者 郑秋含 杜连云 +3 位作者 张众 朴松兰 王颖航 潘志 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期875-881,共7页
目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称“天羽”药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制。方法:通过高效液相色谱法测定“天羽”药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1... 目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称“天羽”药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制。方法:通过高效液相色谱法测定“天羽”药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1∶2)中红景天苷的含量。通过体外实验CCK-8、PCR和Western Blot法检测肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocyte rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖、mRNA及蛋白表达。结果:“天羽”药对不同配伍比例(2∶1,1∶1,1∶2)的合煎液中红景天苷的含量均高于红景天单煎液,且配伍比例为1∶1时红景天苷的含量最高。CCK-8实验结果表明,“天羽”药对可对HFLS-RA细胞的增殖起到抑制作用。PCR和Western blot实验结果表明,“天羽”药对可显著降低HFLS-RA细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP1、MMP3和MMP9 mRNA和蛋白的表达,增加TIMP1 mRNA和蛋白表达。结论:“天羽”药对可有效抑制HFLS-RA细胞增殖,其最佳的配伍比例为1∶1,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,进而调节MMPs/TIMPs平衡有关。 展开更多
关键词 “天羽”药对 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 高效液相色谱法 配伍规律 作用机制
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DNA甲基化对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞表观遗传调控的研究进展 被引量:2
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作者 苗茁 曹梅琳 周海舟 《国际免疫学杂志》 CAS 2022年第5期498-502,共5页
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种由免疫介导的慢性炎症性疾病,以滑膜增生和关节破坏为特征,并受遗传和环境因素影响。然而,现有证据表明,遗传多样性和环境暴露并不能解释RA的所有临床特征和异质性,而且越来越多的研究显示... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种由免疫介导的慢性炎症性疾病,以滑膜增生和关节破坏为特征,并受遗传和环境因素影响。然而,现有证据表明,遗传多样性和环境暴露并不能解释RA的所有临床特征和异质性,而且越来越多的研究显示表观遗传调控,尤其是DNA甲基化,可在人RA成纤维样滑膜细胞(RA fibroblast-like synoviocytes,RAFLS)中促进疾病的发展,并可能参与RA的发病。文章对RA的发病机制以及RAFLS中DNA甲基化调控进行介绍,并且简要介绍了有关疾病进展及治疗的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 自身免疫病 DNA甲基化 表观遗传调控
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血清14-3-3η蛋白在类风湿关节炎及骨关节炎患者血清的表达及临床意义 被引量:5
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作者 何睿妍 张宁 《解剖科学进展》 2018年第1期84-87,共4页
目的检测类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者血清14-3-3η蛋白水平,探讨其临床意义。方法选取56例RA患者、31例OA患者及31例健康体检者,应用ELISA法测定血清14-3-3η蛋白水平。结果RA组血清14-3-3η蛋白水平高于OA组,OA组高于健康对照... 目的检测类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者血清14-3-3η蛋白水平,探讨其临床意义。方法选取56例RA患者、31例OA患者及31例健康体检者,应用ELISA法测定血清14-3-3η蛋白水平。结果RA组血清14-3-3η蛋白水平高于OA组,OA组高于健康对照组(P<0.05)。RA组血清14-3-3η蛋白水平与抗CCP抗体、DAS28评分、CRP呈正相关(P<0.05),对RA诊断敏感性为100%,特异性为71%。结论14-3-3η蛋白参与RA的致病过程,反映RA疾病活动度和疾病严重程度,可作为RA的诊断指标之一。 展开更多
关键词 人类风湿关节炎 人骨关节炎 血清 14-3-3η蛋白 酶联免疫吸附试验
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False Human Immunodeficiency Virus Test Results Associated with Rheumatoid Factors in Rheumatoid Arthritis 被引量:7
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作者 Yun-chun Li Fan Yang +3 位作者 Xiao-yun Ji Zhong-jun Fang Jun Liu Yue Wang 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2014年第2期103-106,共4页
Objective To investigate if immunological factors associated with rheumatoid arthritis(RA) affect the result of human immunodeficiency virus(HIV) screening by electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA) and enzyme-lin... Objective To investigate if immunological factors associated with rheumatoid arthritis(RA) affect the result of human immunodeficiency virus(HIV) screening by electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA) and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Methods 100 RA cases were enrolled from January 2012 to February 2013 into this study. HIV screening was conducted with ECLIA detecting both HIV-1 p24 antigen, HIV-1 and HIV-2 antibodies, with ELISA and colloidal gold method detecting HIV-1 and HIV-2 antibodies. The samples producing positive results were submitted to the Center for Disease Control for confirmation using Western blotting method. The antibody titers of rheumatoid factors(RF) including RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG were analyzed by ELISA. Results The HIV positive-rate determined by ECLIA was significantly higher than that by ELISA and colloidal gold method(P<0.01). The false-positive rate of HIV screening was associated with antibody titers of RF-IgG, RF-IgM, RF-IgA, and CCP-IgG in RA(P<0.01). Conclusion Immunological factors, including RF and anti-CCP antibody, may influence the screening of HIV by ECLIA, producing false-positive result. 展开更多
关键词 human immunodeficiency virus false positive rheumatoid arthritis ANTIBODY
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The Effect of Biological and Cytotoxic Therapy for Rheumatoid Arthritis on Human Chromosomes
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作者 Sekib Sokolovic Sida Kasumagic +1 位作者 Mirela Mackic-Curovic Izeta Aganovic-Musinovic 《Journal of Life Sciences》 2010年第7期30-32,共3页
Objectives: An open-label prospective, combined basic and clinical controlled study was done to investigate the effects of biological therapy using rituximab, and cytotoxic drug treatment with methotrexate on morphol... Objectives: An open-label prospective, combined basic and clinical controlled study was done to investigate the effects of biological therapy using rituximab, and cytotoxic drug treatment with methotrexate on morphology and quantifitiation of chromosomes in rheumatoid arthritis patients. Methods: This study is follow-up of a prior publication, with new observations in comparison with control subjects. A total of 16 subjects were divided into two groups. Group I comprised 8 seropositive rheumatoid arthritis patients who were analysed for the primary end point of possible cytotoxic effects of rituximab and methotrexate. Group II included 8 healthy individuals who served as controls. Assessment was done before treatment with rituximab, and 4 weeks after initiation of therapy. Patients were randomly assigned to receive infusion of rituximab in a full dose of 2.0 g divided into two doses of 1.0 g on days I and 15. The lymphocytes from periphereal blood was cultured by the Moorhead method. Results: Normal male and female Karyograms were observed after full courses of therapy with rituximab. In one female patient who had been receiving longstanding cytotoxic therapy with methotrexate, 2% of chromosomal mitosis showed structural abnormalities. Following the discontinuation of methotrexate and the administration of rituximab, her karyogram became normal. Conclusion: The results from this study indicated that rituximab therapy was safe for the number and structure of human chromosomes, while methotrexate showed chromosomal aberration in one female RA patient. After discontinuation of this longstanding treatment, the karyogram of the same patient returned to normal. 展开更多
关键词 RITUXIMAB CHROMOSOME rheumatoid arthritis structure and number.
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