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增殖细胞核抗原、人类N-myc下游调节基因1在肝细胞性肝癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 李永明 范文艳 +3 位作者 高建芝 许娜 崔鑫华 徐振平 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期35-37,共3页
目的:研究增殖细胞核抗原(PCNA)及人类N-myc下游调节基因1(NDRG1)在人肝细胞性肝癌中的表达情况,探讨其与肝癌生物学行为的关系及临床意义。方法:选择有存档的原发性肝癌标本58例,肝硬化34例,正常肝组织标本15例,用H-E染色观察组... 目的:研究增殖细胞核抗原(PCNA)及人类N-myc下游调节基因1(NDRG1)在人肝细胞性肝癌中的表达情况,探讨其与肝癌生物学行为的关系及临床意义。方法:选择有存档的原发性肝癌标本58例,肝硬化34例,正常肝组织标本15例,用H-E染色观察组织形态,用免疫组织化学SABC检测PCNA和NDRG1的表达。结果:肝癌组织中PCNA表达明显高于肝硬化组织和正常组织;在肝硬化组织和正常肝组织中,PCNA的表达没有差异;肝癌中PCNA的表达与患者的性别、年龄、HbsAg阳性、AFP水平、部位和肿瘤的直径无关。NDRG1在正常肝组织、肝硬化组织、肝癌组织中表达逐渐减弱;肝硬化组与正常肝组织组相比,差异无统计学意义,在肝癌组织中NDRG1与患者的性别、年龄、HbsAg阳性、AFP水平、部位和肿瘤的直径无关。PCNA及NDRG1在肝癌组织中的表达呈负相关。结论:PCNA、 NDRG1在肝癌发生、发展过程中起着重要的作用,联合检测可以为肿瘤的早发现、早诊断、早治疗提供判断依据。 展开更多
关键词 肝癌 增殖细胞核抗原 人类n—myc下游调节基因1 免疫组织化学
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前列腺癌中N—myc下游调节基因-1启动子区甲基化状态的初步研究 被引量:2
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作者 乔鹏飞 刘冉录 +2 位作者 徐勇 张志宏 陈晓博 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期705-709,共5页
目的检测前列腺癌中N-myc下游调节基因-1(N—mycdownstreamregu1atedgene-1,NDRG1)启动子区的甲基化状态,探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷对NDRG1基因在前列腺癌细胞mRNA的表达及对细胞增殖的影响。方法2013年1月至2014年4月采用... 目的检测前列腺癌中N-myc下游调节基因-1(N—mycdownstreamregu1atedgene-1,NDRG1)启动子区的甲基化状态,探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷对NDRG1基因在前列腺癌细胞mRNA的表达及对细胞增殖的影响。方法2013年1月至2014年4月采用亚硫酸盐测序PCR法分别检测前列腺癌组织、良性前列腺增生(BPH)组织、前列腺癌细胞系(PC3、22RV1、LNCaP、DU145)和人正常前列腺细胞系RWPE-1中的NDRG1基因启动子区甲基化状态。用10~mo1/L5-氮杂胞苷分别作用于LNCaP和DU145细胞72h后,噻唑盐法分析5-氮杂胞苷对LNCaP和DU145细胞增殖的影响;RT.PCR法检测两种细胞系中NDRG1mRNA的表达。结果NDRG1基因在前列腺癌细胞系PC.3、22RV1、LNCaP和DU145中甲基化率分别为(24.8±3.3)%、(36.2±2.5)%、(48.6±2.8)%、(69.5±1.7)%,人正常前列腺细胞系RWPE-1甲基化率为(4.8±4.5)%;前列腺癌组织中为(48.6±5.3)%,BPH组织中为(4.3±2.1)%,组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。10μmo1/L5-氮杂胞苷处理LNCaP和DU145细胞72h后,两种细胞中NDRG1基因发生了去甲基化,mRNA表达水平较处理前增强8~9倍,细胞生长受到抑制(P〈0.05)。结论NDRG1基因启动子区的高甲基化是其在前列腺癌中异常表达的原因之-,5-氮杂胞苷能逆转NDRG1基因的甲基化状态,调控该基因mRNA表达,并能抑制前列腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌 启动子 甲基化 n—myc下游调节基因-1 5-氮杂胞苷
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转化生长因子-β1抑制人肾小管上皮细胞株HK-2中N-Myc下游调节基因2表达及意义 被引量:2
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作者 金志波 顾朝辉 +3 位作者 贾占奎 黄珍林 丁映辉 杨锦建 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期2068-2070,共3页
目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对人肾小管上皮细胞株HK-2中N-myc下游调节基因2(NDRG2)表达的影响。方法按照是否孵育TGF-β1分别设置对照组和实验组,取两组细胞分别提取蛋白及RNA行Western blot及实时定量反转录聚合酶链反应... 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对人肾小管上皮细胞株HK-2中N-myc下游调节基因2(NDRG2)表达的影响。方法按照是否孵育TGF-β1分别设置对照组和实验组,取两组细胞分别提取蛋白及RNA行Western blot及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR),检验两组上皮细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和Snail蛋白的表达差异。然后根据孵育TGF-β1的不同浓度梯度设置不同组别,分别取各组细胞提取蛋白及RNA行Western blot及RT-qPCR以检验NDRG2在TGF-β1作用后的人肾小管上皮细胞(HK-2)中的表达。结果结果表明对照组和实验组在蛋白水平相关表达量分别为E-cadherin(1.0±0.2比0.3±0.2)(t=4.850, P=0.008),α-SMA(1.0±0.1比2.6±0.4)(t=6.721, P=0.003),Vimentin(1.0±0.1比2.6±0.4)(t=6.721, P=0.003),Snail(1.0±0.1比2.5±0.2)(t=11.620, P=0.000),以上标志物两组之间差异均有统计学意义。对照组和实验组在mRNA水平相关表达量分别为E-cadherin(1.0±0.2比0.2±0.1)(t=7.686, P=0.002),α-SMA(1.0±0.3比2.4±0.3)(t=5.715, P=0.005),Vimentin(1.1±0.2比2.6±0.5)(t=4.977, P=0.008),Snail(0.9±0.2比1.9±0.2)(t=6.124, P=0.004),以上标志物两组之间差异均有统计学意义。同时在TGF-β1孵育后,HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平都明显下调,各组在蛋白水平相关表达量分别为1.00±0.04比0.80±0.03比0.50±0.05比0.30±0.03比0.20±0.02(P=0.019),在mRNA水平相关表达量分别为1.00±0.05比0.70±0.03比0.50±0.04比0.30±0.02比0.20±0.05(P=0.021)。尤其当孵育TGF-β1浓度大于10 ng/ml时这种作用最为显著,各组表达水平之间差异有统计学意义。结论TGF-β1可以促进HK-2细胞中上皮-间充质转化(EMT)过程,同时TGF-β1可以下调HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平的表达量。 展开更多
关键词 n—myc下游调节基因2 转化生长因子-Β1 肾小管上皮细胞 上皮-间充质转化
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慢病毒介导的N-myc下游调节基因-2对肾癌细胞株786-0增殖及细胞周期素D1、p21表达的影响
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作者 高磊 张景 +3 位作者 张瑞 袁建林 武国军 王禾 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1113-1115,共3页
目的观察N—myc下游调节基因-2(NDRG2)对肾癌细胞株786—0增殖及细胞周期素(Cyclin)D1、p21表达的影响。方法以携带人NDRG2基因的慢病毒载体感染体外培养的肾癌细胞株786-O。采用间接免疫荧光实验检测慢病毒感染后细胞中NDRG2的过... 目的观察N—myc下游调节基因-2(NDRG2)对肾癌细胞株786—0增殖及细胞周期素(Cyclin)D1、p21表达的影响。方法以携带人NDRG2基因的慢病毒载体感染体外培养的肾癌细胞株786-O。采用间接免疫荧光实验检测慢病毒感染后细胞中NDRG2的过表达。Westernblot检测CyclinD1、p21的表达变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对786一O细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测感染前后细胞的凋亡。结果786一O细胞经慢病毒感染后NDRG2蛋白表达水平明显增加。Westernblot实验显示慢病毒感染后细胞中CyclinD1表达明显降低;而p21表达明显增加。噻唑蓝(MTT)比色(抑制率12h为3.96%,24h为4.78%,36h为9.32%,48h为20.27%,60h为22.85%,72h为30.86%)显示NDRG2对786—0细胞的生长有明显抑制作用。平板克隆实验(3组分别为67.1%、65.5%和41.7%)显示lenti—NDRG2组786—0细胞的克隆形成能力明显降低。流式细胞术显示lenti-NDRG2组细胞凋亡率为(17.20±1.44)%,明显高于对照组[(6.30±0.46)%,t=12.49,P〈0.01]和lenti—mCherry组[(6.00±0.31)%,t=13.17,P〈0.01]。结论通过慢病毒载体使786-O细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低CyelinD1表达,同时增加p2l的表达。 展开更多
关键词 肾癌 n—myc下游调节基因-2 细胞增殖 细胞周期
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N—Myc下游调节基因3在胃癌组织的表达及临床意义 被引量:5
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作者 刘翔 凌志强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期303-306,共4页
目的观察N—Mye下游调节基因3(NDRG3)在胃癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测120例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁组织中NDRG3的表达,分析其与患者临床病理特征和预后的关系。结果癌组织中NDRG3的高表达率... 目的观察N—Mye下游调节基因3(NDRG3)在胃癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测120例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁组织中NDRG3的表达,分析其与患者临床病理特征和预后的关系。结果癌组织中NDRG3的高表达率为43.3%(52/120),显著高于正常胃组织。癌组织中NDRG3高表达与患者幽门螺杆菌(Hp)感染状态(x^2=21.08,P〈0.01)、肿瘤分化程度(x^2=6.96,P〈0.05)、浸润深度(x^2=4.81,P〈0.05)、淋巴结转移状态(x^2=13.64,P〈0.01)、TNM分期(x^2=22.51,P〈0.01)具有显著相关性,而与患者性别、年龄、肿瘤部位和大小无明显相关(P〉0.05)。此外,Kaplan—Meier生存分析显示,NDRG3高表达的胃癌患者与正常/低表达患者中位生存时间分别为28个月和68个月,两者差异有统计学意义(P〈0.05)。Cox多因素回归分析表明NDRG3高表达是胃癌患者独立预后因素[风险比(HR)=2.49,P〈0.05]。结论NDRG3在胃癌组织中表达上调,与胃癌发生进展及预后明显相关。 展开更多
关键词 胃癌 n—myc下游调节基因3 预后
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肿瘤抑制基因N-myc下游调节基因2调节结肠癌细胞糖代谢 被引量:1
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作者 来伟 施景龙 +4 位作者 林显敢 曾育杰 许鹤洋 蓝球生 褚忠华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2533-2534,共2页
目的 观察肿瘤抑制因子N-myc下游调节基因2(NDRG2)于结肠癌细胞葡萄糖代谢调节作用.方法 稳定转染NDRG2于结肠癌细胞HCT116,乳酸检测试剂盒检测细胞(1×10^6个)乳酸代谢的水平;葡萄糖试剂盒检测通过细胞(1 ×10^6个)消耗... 目的 观察肿瘤抑制因子N-myc下游调节基因2(NDRG2)于结肠癌细胞葡萄糖代谢调节作用.方法 稳定转染NDRG2于结肠癌细胞HCT116,乳酸检测试剂盒检测细胞(1×10^6个)乳酸代谢的水平;葡萄糖试剂盒检测通过细胞(1 ×10^6个)消耗培养基葡萄糖的水平;Western blot检测HCT116细胞(1×10^6个)糖酵解中丙酮酸激(PKM)、乳酸脱氢酶(LDHA)、己糖激酶(HK)表达水平.结果 转染NDRG2后,NDRG2可有效抑制HCT116细胞乳酸[(38.2 ±3.4) mol/L比(62.1±4.8)mol/L,P<0.05]的生成,培养基剩余葡萄糖量则明显增多[(137.0±3.6) mol/L比(88.2±2.2)mol/L,P<0.05].Western blot检测NDRG2转染的HCT116细胞显示PKM、LDHA、HK表达显著低于对照组HCT116细胞.结论 NDRG2作为肿瘤抑制基因,能够 调控结肠癌细胞糖代谢,抑制糖酵解关键酶生成,从而抑制肿瘤细胞糖酵解. 展开更多
关键词 n—myc下游调节基因2 糖酵解 结肠癌
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胰腺疾病组织N—myc下游调节基因2的表达与分布
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作者 贺菲菲 焦凯 +1 位作者 刘新平 沈岚 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期162-164,共3页
分离胰岛细胞增生症患者、胰岛素瘤患者、胰尾高中分化腺癌患者和正常人胰腺组织,制成石蜡切片,用抗N-myc下游调节基因2(Ndrg2)单克隆抗体进行免疫组织化学染色(ABC法),用Western印迹法检测Ndrg2的表达与分布情况。结果显示,Nd... 分离胰岛细胞增生症患者、胰岛素瘤患者、胰尾高中分化腺癌患者和正常人胰腺组织,制成石蜡切片,用抗N-myc下游调节基因2(Ndrg2)单克隆抗体进行免疫组织化学染色(ABC法),用Western印迹法检测Ndrg2的表达与分布情况。结果显示,Ndrg2阳性反应物主要分布在胰岛细胞的胞浆,与胰岛素的阳性反应物分布与定位相似;胰岛细胞增生症患者胰岛数量增加,体积增大,且该疾病患者胰腺中Ndrg2表达增加;Western印迹实验结果显示胰岛细胞增生症患者胰腺组织中Ndrg2蛋白的表达量较正常组增高。提示Ndrg2基因可能在胰岛细胞中发挥重要的生理功能。 展开更多
关键词 n—myc下游调节基因2 胰岛细胞 胰岛素 免疫组织化学
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结直肠癌中缺氧诱导因子-1α与NDRG1表达的关系 被引量:4
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作者 江从庆 刘志苏 +3 位作者 赵端仪 钱群 邬开朗 吴建国 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期915-917,共3页
目的探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与NDRG1的相关性。方法构建靶向HIF-1α的质粒pSilence-2.1-U6-siRNA并鉴定,采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞,低氧培养24h,运用逆转录-聚合酶... 目的探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与NDRG1的相关性。方法构建靶向HIF-1α的质粒pSilence-2.1-U6-siRNA并鉴定,采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞,低氧培养24h,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α、NDRG1 mRNA表达。Western blots检测NDRG1蛋白表达。采用原位杂交技术检测人结直肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1αmRNA,应用免疫组织化学方法检测NDRG1蛋白的表达。结果siRNA从转录水平抑制了HIF-1α基因表达。同时,NDRG1 mRNA、蛋白表达也显著受抑制。结直肠腺癌组织中HIF-1αmRNA阳性表达率为67.7%(42/62),腺瘤为44.4%(8/18)。从Dukes A期到Dukes C+D期演变过程中HIF-1αmRNA表达阳性率不断增加(P<0.05)。腺癌组NDRG1阳性表达率显著高于腺瘤组。结直肠腺癌中NDRG1阳性表达与Dukes分期显著相关。HIF-1α与NDRG1均呈正相关(P<0.05)。结论HIF-1α可能通过上调NDRG1表达参与了结直肠腺的进展。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α n—myc下游调节基因1 小干扰RnA 结直肠癌
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