降钙素基因相关肽对大鼠成骨细胞表达转录因子RUNX2的影响

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠颅盖骨来源成骨细胞RUNX2因子表达水平的影响,进一步了解CGRP促进成骨的作用机制。方法:用酶消化法培养原代大鼠成骨细胞并鉴定;MTT法筛选促进成骨细胞增殖的有效浓度,将含有不同浓度CGRP的条件培养基加入大鼠成骨细胞培养体系中,药物作用48 h后,用半定量RT-PCR和Western blotting方法检测大鼠成骨细胞转录因子RUNX2在mRNA和蛋白水平的表达。结果:当CGRP浓度在10-8～10-6mol/L范围时,对成骨细胞增殖有明显促进作用,增殖率分别为71.9%,142.1%,321.0%,P<0.05;浓度为10-7和10-6mol/L的CGRP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2在mRNA水平的表达量明显上调,分别增强(46.2±11.2)%和(58.6±14.0)%,P<0.05;转录因子RUNX2的蛋白表达变化趋势与其mRNA的表达变化趋势基本一致。结论:一定浓度的CGRP对大鼠成骨细胞转录因子RUNX2的表达有直接促进作用,RUNX2可能参与了CGRP刺激成骨细胞增殖反应的机制。

人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达及意义

目的检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2(Nrf2)、人类线粒体转录因子A(TFAM)的表达,并分析其表达与Gleason评分的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman相关分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达与Gleason评分正相关(P值为0.0052,0.0003);Nrf2与TFAM的表达也有相关性(P=0.006)。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。

人源性RUNX相关转录因子1在肾癌中的表达及生物学功能

目的人源性RUNX相关转录因子1(RUNX 1)在肾癌中的作用报道较少。文中旨在研究RUNX1基因在肾癌中的表达及生物学功能。方法从GEO数据库下载GSE66272肾癌芯片原始CEL文件,包括肾癌及癌旁组织样本,利用R软件对组织样本基因进行差异表达分析。选取2015年1月至2019年6月南通大学附属医院泌尿外科20份肾癌组织标本,另取对应癌旁组织标本。基因芯片分析RUNX 1在肾癌组织中的表达。小干扰RNA转染786-O细胞株,敲低RUNX1基因,将细胞分为:siRNA1组(转染si-RUNX1的siRNA1序列)、siRNA2组(转染si-RUNX1的siRNA2序列)、siRNA3组(转染si-RUNX1的siRNA3序列)、对照组(对照序列空载体siRNA转染)。实时定量PCR测定RUNX 1含量;细胞克隆形成实验统计细胞克隆形成数量;MTT法检测786-O细胞增殖活性;Transwell肿瘤细胞侵袭实验分析细胞迁移数量;Western blot检测蛋白水平变化。结果RUNX 1在肾癌组织中的表达水平(1.95±0.09)显著高于癌旁组织(0.62±0.05),差异有统计学意义(P<0.01)。siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组的siRNA敲减效率显著低于对照组(P<0.01)。MTT检测结果显示,siRNA1组较对照组显著抑制786-O肾癌细胞的增殖(P<0.01)。克隆形成结果显示,siRNA1组786-O肾癌细胞的集落形成效率较对照组显着降低(P<0.003)。siRNA1组的细胞过膜数量[(98.67±3.53)个/视野]明显低于对照组[(143.3±8.74)个/视野],差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示,siRNA1组RUNX1、N-cadherin、MMP9、p-AKT及p-GSK3β较对照组明显下降,E-cadherin明显增加。结论RUNX1在肾癌组织的高表达可促进肾癌细胞的增殖和迁移,故RUNX 1可作为肾癌的潜在临床诊治靶点及预后标志物。

子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3与果蝇zeste基因增强子同源物2的表达

目的:检测子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)和果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达。方法:采用免疫组化SP法检测60例子宫内膜腺癌、40例子宫内膜增殖症和20例正常增生期子宫内膜组织中RUNX3与EZH2蛋白的表达。结果:子宫内膜腺癌、子宫内膜增殖症与正常增生期子宫内膜组织RUNX3蛋白的阳性表达率分别为43.3%(26/60)、67.5%(27/40)与95.0%(19/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=18.090,P<0.001);上述3种组织中EZH2蛋白的阳性表达率分别为75.0%(45/60)、42.5%(17/40)与15.0%(3/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=25.041,P<0.001)。RUNX3蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度、TNM分期及浸润深度有关(χ2=-3.561,-2.367,5.370,P均<0.05),EZH2蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度及浸润深度有关(χ2=-3.084,5.568,P均<0.05)。子宫内膜腺癌组织中RUNX3和EZH2蛋白的表达相关(rP=0.330,P=0.007)。结论:RUNX3蛋白表达缺失和EZH2蛋白过度表达在子宫内膜腺癌的发生与发展中起重要作用,高表达的EZH2可能在一定程度上参与调控RUNX3基因的表达下调。

敲低Runt相关转录因子3(RUNX3)抑制低氧诱导的内皮细胞间质转分化

目的探讨敲减Runt相关转录因子3(RUNX3)对低氧诱导人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)向间质转分化的影响及具体机制。方法低氧条件下培养HCMEC,使用RUNX3干扰慢病毒敲减HCMEC中的RUNX3基因,应用反转录PCR检测内皮细胞间质转分化(EndoMT)相关基因CD31、血管内皮钙黏素(VE-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP-1)以及RUNX3的mRNA表达,应用Western blot法检测CD31、α-SMA、RUNX3、转化生长因子β2(TGF-β2)、Smad2/3、p-Smad2/3以及Notch-1、Hes1、Hey1蛋白表达,免疫荧光细胞化学染色检测CD31、α-SMA的表达和定位。结果低氧能够诱导HCMEC发生EndoMT;低氧时TGF-β2、Smad2/3、p-Smad2/3以及Notch-1、Hes1、Hey1蛋白均上调;而RUNX3敲减后TGF-β2以及Notch-1蛋白水平增高,然而Smad2/3、p-Smad2/3以及Hes1、Hey1蛋白水平均不同程度下调。结论 RUNX3敲减可减轻低氧诱导的EndoMT,可能是通过部分抑制TGF-β及Notch信号通路。

敲低Runt相关转录因子2(Runx2)表达抑制结肠癌细胞生长和迁移

目的构建稳定低表达Runt相关转录因子2(Runx2)的HCT-8结肠癌细胞,检测对结肠癌细胞生长和迁移等生物学行为的影响。方法首先采用Western blot法检测Runx2在不同结肠癌细胞系中表达,确定HCT-8结肠癌细胞高表达Runx2;将含有Runx2的慢病毒短发卡RNA(shRNA)的干扰载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚肾HEK293FT细胞后,收集病毒上清,感染HCT-8结肠癌细胞。经嘌呤霉素筛选后,获得慢病毒介导的Runx2 shRNA的稳定表达细胞,利用实时定量PCR和Western blot法检测Runx2的shRNA的干涉效果;用CCK-8法检测细胞增殖活性、平板克隆形成实验检测癌细胞生长、Transwell^(TM)侵袭实验和划痕愈合实验检测Runx2 shRNA转染对癌细胞侵袭和迁移的影响。结果建立了稳定敲低Runx2水平的HCT-8结肠癌细胞;敲低HCT-8细胞Runx2表达水平后,癌细胞的生长、侵袭和迁移受到明显抑制。结论敲低Runx2抑制结肠癌细胞的生长、侵袭和迁移。

微RNA-130a靶向人类RUNT相关转录因子3对肺癌A549细胞增殖和转移的影响

目的探讨微RNA(miR)-130a与人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)的靶向关系及其对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响。方法将体外培养的A549细胞分为对照组(未处理)、anti-miR-NC组(转染miR-130a inhibitor阴性对照)、anti-miR-130a组(转染miR-130a inhibitor)、anti-miR-130a+siNC组(转染miR-130a inhibitor和NC-siRNA)和antimiR-130a+siRUNX3组(转染miR-130a inhibitor和RUNX3-siRNA),采用实时定量PCR检测各组细胞中miR-130a和RUNX3mRNA的表达水平,蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞中RUNX3蛋白和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测各组细胞增殖能力,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭与迁移能力,荧光素酶实验检测miR-130a和RUNX3的靶向关系。结果荧光素酶实验证实,RUNX3是miR-130a的潜在靶基因。与anti-miR-NC组相比,下调miR-130a可抑制A549细胞增殖[(94.72±6.05)%比(51.28±3.24)%]、克隆[(36.15±2.06)%比(15.46±1.25)%]、侵袭[(90.25±5.48)个比(42.18±3.26)个]、迁移[(118.55±9.86)个比(73.48±6.75)个](P<0.05),促进E-cadherin蛋白表达[(0.26±0.03)比(0.48±0.04)](P<0.05),而抑制N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.52±0.03)比(0.25±0.02);(0.68±0.05)比(0.35±0.03)](P<0.05);与anti-miR-130a+siNC组相比,共转染anti-miR-130a与siRUNX3可成功增强A549细胞增殖[(52.16±3.12)%比(72.23±6.13)%]、克隆[(16.08±1.05)%比(22.12±1.34)%]、侵袭[(41.59±3.02)个比(68.32±4.26)个]、迁移能力[(72.26±5.18)个比(98.25±6.02)个](P<0.05),抑制E-cadherin蛋白表达[(0.52±0.04)比(0.33±0.03)](P<0.05),而促进N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.27±0.03)比(0.46±0.03);(0.33±0.02)比(0.53±0.04)](P<0.05)。结论miR-130a可通过靶向RUNX3抑制A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转移。

转录因子EZH2和RUNX3在骨巨细胞瘤中的表达及与复发的关系研究

目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)和人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)在骨巨细胞瘤中的表达,及与骨巨细胞瘤复发的关系。方法:选取2013年10月至2018年1月在本院经病理组织检查确诊为骨巨细胞瘤并接受手术治疗者53例为研究对象,术中收集骨巨细胞瘤患者瘤组织以及瘤旁组织(距瘤组织>3cm),采用免疫组织化学法检测EZH2和RUNX3的表达,分析其与患者临床病理特征的关系;采用Spearman进行相关性分析;术后随访36个月,比较复发组与未复发组EZH2和RUNX3的表达情况。结果:骨巨细胞瘤瘤组织EZH2阳性表达率(69.81%)高于瘤旁组织(15.09%)(P<0.05),RUNX3阳性表达率(32.08%)低于瘤旁组织(86.79%)(P<0.05);瘤组织EZH2、RUNX3表达与肿瘤直径、影像学分级、病理学分级、组织浸润程度均有关(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,骨巨细胞瘤瘤组织中EZH2、RUNX3表达呈负相关(r=-0.544,P<0.05);复发组EZH2阳性表达率(93.33%)高于未复发组(60.53%)(P<0.05),RUNX3阳性表达率(0.00%)低于未复发组(44.74%)(P<0.05)。结论:骨巨细胞瘤瘤组织中EZH2为高表达,RUNX3为低表达,且与患者临床病理特征密切相关,EZH2、RUNX3表达呈负相关,EZH2可能抑制RUNX3表达,EZH2、RUNX3可能用于骨巨细胞瘤的病情及预后评估。

核转录因子-κB和三叶因子3在不同胃黏膜组织中的表达及其相关性

在恶性肿瘤中胃癌的发生率居高不下，是威胁人类健康最常见的恶性肿瘤之一。目前胃癌的早期诊断率仍然不高，治疗效果也不理想。如何对胃癌进行“早期诊断、早期发现、早期治疗”是提高胃癌患者生存期的关键。

成骨细胞分化相关转录因子及其调控机制

成骨细胞的分化成熟是骨形成的前提,在该过程中需要多种因素的参与和调控。骨形成相关转录因子是其他因素如生长因子、细胞因子和动力传导的中枢和靶向,在促使间充质祖细胞向功能性成骨细胞的转化过程中起着关键作用。本文将介绍几个常见的成骨相关转录因子:R unx2、O sterix、M sx1/2和D lx5/6。

RUNX1对奶牛乳腺上皮细胞间质转化的调节作用

[目的]探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。[方法]通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-T细胞活力的影响;通过倒置显微镜观察经金黄色葡萄球菌处理后MAC-T细胞的形态变化。通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞后,细胞中EMT标志分子(E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin))、TGF/Smad通路信号分子(TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4)和RUNX1的表达量变化情况;并比较了分别使用RUNX1和TGF-β特异性抑制剂前后细胞EMT标志分子、TGF/Smad通路信号分子和RUNX1的表达水平变化。[结果]不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理72 h后,MAC-T细胞活力较24和48 h组均极显著下降(P<0.01),通过显微镜观察发现此时细胞出现漂浮死亡现象。因此后续观察细胞形态变化时设置时间为12、24、36和48 h。当用感染复数(MOI)为100热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h后,细胞形态由上皮细胞典型的“鹅卵石”样转变为间质细胞的“长梭状”;实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果发现,与正常细胞相比,EMT标志分子E-cadherin mRNA表达量极显著下调(P<0.01),Vimentin、α-SMA、N-cadherin、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和RUNX1 mRNA表达量显著或极显著上调(P<0.01);且Vimentin、α-SMA、P-Smad2和RUNX1蛋白表达量明显上调。经LY2109761抑制剂处理后,与感染组相比,2个抑制剂组MAC-T细胞中Smad2、Smad3、Smad4、N-cadherin、Vimentin、α-SMA和RUNX1的mRNA表达量均极显著下调(P<0.01),E-cadherin mRNA表达量极显著上调(P<0.01);经抑制剂Ro5-3335处理后,MAC-T细胞形态未出现显著的间质细胞样变化;与感染组相比,2个抑制剂Ro5-3335组细胞中E-cadherin的mRNA表达量极显著上调(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、α-SMA(除10μmol/L Ro5-3335抑制剂组α-SMA外)、TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad4的mRNA表达水平均极显著降低(P<0.01)。[结论]热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h可激活TGF/Smad通路诱导MAC-T细胞发生EMT变化;RUNX1可通过介导TGF/Smad通路调节金黄色葡萄球菌诱导的MAC-T细胞EMT过程。

应用胃癌组织芯片研究RUNX3、VEGF与MVD的相关性及其意义

目的:探讨胃癌组织芯片中RUNX3、VEGF表达与MVD的相关性及其意义.方法:采用组织芯片技术建立经确证80例胃癌的组织芯片,免疫组化检测芯片中RUNX3、VEGF的表达及微血管密度计数.结果:RUNX3在胃癌芯片中表达阳性率分别为阴性46.3%(37/80)、弱阳性35.0%(28/80)和强阳性18.7%(15/80);VEGF的表达阳性率分别为阴性22.5%(18/80)、弱阳性30.0%(24/80)和强阳性47.5%(38/80),其阳性表达部位为细胞质.MVD值RUNX3表达阳性者显著低于表达阴性者;VEGF表达阳性者显著高于表达阴性者,RUNX3的表达和MVD之间存在显著负相关(rs=-0.742,P<0.01),VEGF的表达和MVD之间存在显著正相关(rs=0.683,P<0.01).VEGF表达阳性率在RUNX3阴性组逐渐增高;在RUNX3弱阳性组逐渐增高,在RUNX3强阳性组逐渐降低,RUNX3的表达和VEGF之间存在显著的负相关(rs=-0.333,P<0.01).结论:RUNX3作为一种抑癌基因可能通过某种机制抑制VEGF的表达减少胃癌的血管新生、生长和转移;联合检测RUNX3、VEGF和MVD的表达,对把握胃癌生物学行为和预后有一定的价值。

强直性脊柱炎患者骨代谢生化指标与BMP-2、RUNX-2基因表达的相关性研究

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者中骨代谢指标和骨形态发生蛋白2(BMP-2)、人类相关转录因子2(RUNX-2)对骨量减少或骨质疏松的内在机制。方法通过检测AS患者与健康对照组的骨密度(BMD),骨代谢指标[骨吸收指标骨钙素(BGP)I型强胶原羧基肽(PICP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)],BMP-2及RUNX-2的水平,采用直线相关性分析骨代谢指标与BMP-2、RUNX-2表达的相关性。结果不同部位的骨密度发生不同程度的骨量减少和骨质疏松,除BGP外的AS患者血清中骨代谢指标及BMP-2、RUNX-2的表达较正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。患病组转子间的BMD与BGP、BMP-2负相关(r=-0.369,P=0.017;r=-0.103,P=0.016),BMP-2、RUNX-2与腰椎BMD均呈现负相关(r=-0.143,P=0.011;r=-0.132,P=0.011),PICP与腰椎密度呈现正相关(r=0.365,P=0.024)。BMP-2与RUNX-2存在正相关(r=0.354,P=0.023),与TRAP存在负相关(r=-0.248,P=0.036),RUNX-2与BGP、BALP存在正相关(r=0.417,P=0.046;r=0.205,P=0.027),与TRAP存在负相关(r=-0.264,P=0.038)。结论 BMP-2、RUNX-2或许通过影响骨代谢过程,改变骨密度,导致AS的发生,为AS的治疗和预防提供深层的理论依据和临床基础。

含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)及其相关因子在T细胞分化及功能中的作用

含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)是CD4谱系分化中的关键转录因子,并抑制CD8谱系生成。ThPOK蛋白表达促进CD4谱系分化,维持CD4谱系稳定性,并抑制CD8谱系分化。首先在胸腺内,ThPOK基因表达受T细胞受体(TCR)信号、基因增强子、基因沉默子等调节,且ThPOK表达受GATA结合蛋白3(GATA3)、Runt相关转录因子3(Runx3)、白血病/淋巴瘤相关因子(LRF)、胸腺细胞选择相关性高迁移率族盒基因(TOX)、Myc关联的锌指蛋白相关因子(MAZR)、E1A结合蛋白p300(P300)等转录因子影响,进而影响CD4、CD8谱系分化。而在外周T细胞中,ThPOK影响CD_4^+T细胞亚群、CD_8^+T细胞分化及功能。在此基础上,正逐步展开针对外周疾病中ThPOK作用的研究。

FASN、Runx2在老年脑胶质瘤患者中表达及与临床病理特征、预后生存的相关性

目的分析脂肪酸合成酶(FASN)、人类runt相关转录因子(Runx)2在老年脑胶质瘤患者中的表达及与临床病理特征、预后生存的相关性。方法选取67例老年脑胶质瘤组织及相关临床资料,最终65例满足纳入标准作为研究组。选取同期收治的50例脑胶质瘤癌旁相对正常标本及相关临床资料作为对照组。比较两组FASN、Runx2表达水平,分析FASN、Runx2与老年脑胶质瘤患者各病理参数的相关性,采用多元Logistic回归分析影响老年脑胶质瘤患者预后生存的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析影响老年脑胶质瘤患者预后生存的预测价值。结果研究组FASN、Runx2高表达率显著高于对照组(P<0.001);老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2水平与组织分化类型、组织学分级、远处转移有关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、病理类型、肿瘤部位等无关(P>0.05);对65例患者进行2年随访发现,生存46例,死亡19例,预后不良率为29.23%。死亡组FASN、Runx2高表达率显著高于生存组(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示,组织中低分化、组织学分级:Ⅲ+Ⅳ、FASN、Runx2高表达是影响老年脑胶质瘤患者预后生存的独立危险因素(P<0.05),FASN、Runx2蛋白及两者联合曲线下面积分别为0.666、0.781、0.798,各指标曲线下面积以联合检测最大。结论老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2呈高表达状态;FASN、Runx2与患者预后生存关系密切,可作为预测老年脑胶质瘤患者预后的分子标志物和肿瘤治疗的潜在靶点。

淫羊藿苷通过上调Runx2促进踝关节骨折大鼠骨重建及抑制破骨细胞形成

【目的】观察淫羊藿苷对踝关节骨折大鼠的治疗作用及机制。【方法】取55只SD大鼠,建立踝关节骨折模型。将成功造模的全部50只大鼠随机分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组及阳性药组,每组10只。淫羊藿苷低、中、高剂量组分别给予腹腔注射淫羊藿苷30、60、120 mg/kg,阳性药组给予腹腔注射复方骨肽注射液0.4 mL/kg,模型组给予腹腔注射等体积生理盐水,每日1次,连续给药4周。给药结束后,进行Micro-CT活体扫描及生物力学测试,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测骨痂组织破骨细胞数量,苏木素-伊红(HE)染色法观察骨痂组织病理学变化,采用Western Blot法检测骨痂组织Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达量。【结果】与模型组比较,淫羊藿苷低、中、高剂量组和阳性药组干预2、4周后骨小梁数量(Tb.N)、最大载荷、刚度、骨体积分数(BV/TV)值及骨痂组织Runx2蛋白表达量升高,骨痂组织破骨细胞数量减少(P<0.05),淫羊藿苷各剂量组作用效果呈剂量依赖性;但淫羊藿苷各剂量组干预2、4周后Tb.N、最大载荷、刚度、BV/TV值及骨痂组织Runx2蛋白表达量均低于同期阳性药组,骨痂组织破骨细胞数高于阳性药组(均P<0.05)。【结论】淫羊藿苷可促进踝关节骨折创伤大鼠骨重建,抑制破骨细胞形成,提高生物力学性能,其作用机制可能与上调Runx2蛋白表达有关;但其作用效果不及复方骨肽注射液。

免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达及其与预后的关系

目的探讨免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达水平及其与预后的关系。方法选取延安大学附属医院2017年1月至2019年1月宫颈癌患者74例作为宫颈癌变组,宫颈癌前病变患者74例作为宫颈癌前病变组,另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者74例作为宫颈正常组,比较3组免疫浸润相关基因[人类白细胞抗原G(HLA-G)、叉状头螺旋转录因子3(FOXP3)、T细胞免疫球蛋白粘连蛋白-3(TIM-3)]、恶性生物学行为相关基因[侵袭基因p21-活化的激酶6(PAK-6)、zeste 2多梳抑制复合物2亚基增强子(EZH2)、增殖基因血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、同源盒基因B7(HOXB7)]的mRNA相对表达量,分析免疫浸润相关基因与宫颈癌发生及宫颈癌恶性生物学行为的关系,并统计对比不同免疫浸润相关基因表达水平患者3年生存率。结果HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA相对表达量为宫颈癌变组>宫颈癌前病变组>宫颈正常组(P<0.05);不同临床分期、分化程度,以及有无淋巴结转移、有无脉管浸润患者的HLA-G、FOXP3、TIM-3、PAK-6、EZH2、ANGPTL4、HOXB7 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者宫颈癌前病变进展至宫颈癌的风险分别是低表达患者的3.005倍、4.654倍、3.343倍;宫颈癌患者HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA与侵袭相关基因PAK-6、EZH2 mRNA、增殖相关基因ANGPTL4、HOXB7的mRNA表达呈正相关(P<0.05);随访3年,失访2例,72例宫颈癌患者3年生存率为68.06%(49/72),HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者3年生存率均低于低表达患者(P<0.05)。结论免疫浸润相关基因HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中呈上调表达,会显著增加宫颈癌发病风险,且与宫颈癌恶性生物学行为密切相关,还可能对生存预后产生重要影响。

外周血RUNX3基因甲基化在胃癌中的临床价值

目的研究外周血人类RUNX相关转录因子(RUNX3)基因甲基化在胃癌中的临床价值。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌患者(GAC组)及健康者(CON组)外周血RUNX3基因启动子甲基化状态,比较两者间的差异并分析RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素的关系。结果 GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率为56.0%,对照组甲基化率为4.0%,胃癌组患者甲基化率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率在性别、年龄、酗酒史、家族史、幽门螺杆菌(HP)感染和肿瘤部位中的差异无统计学意义(P>0.05),在Lauren′s分型、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者外周血RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素密切相关,可作为胃癌诊断、病情及预后评估的标志物。

抑癌基因脾酪氨酸激酶和人类Runt相关转录因子3基因启动子甲基化与胃癌术后复发转移的关系

目的探讨抑癌基因脾酪氨酸激酶（Syk）和人类Runt相关转录因子3（Runx3）启动子甲基化与胃癌术后复发转移的关系。方法采用甲基化特异性PCR检测70例胃癌组织和癌旁胃正常组织中Syk和Runx3基因启动子甲基化状态。结果在70例胃癌组织中，Syk和Runx3基因启动子甲基化发生率分别为45．7％（32／70）和55．7％（39／70）；在癌旁胃正常组织中，Syk和Runx3基因启动子甲基化发生率分别为0（0／70）和7．1％（5／70）。胃癌组织中Syk和Runx3基因启动子甲基化发生率明显高于癌旁胃正常组织（均P〈0．001）。Syk、Runx3基因启动子甲基化与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和病理分期有关（均P〈0．05）。32例Syk基因启动子甲基化患者中，有21例患者术后发生复发转移，复发转移发生率为65．6％（21／32）；38例Syk基因启动子非甲基化患者中，仅有7例患者术后发生复发转移，复发转移发生率为18．4％（7／38），差异有统计学意义（P〈0．001）。39例Runx3基因启动子甲基化患者中，有24例患者术后发生复发转移，复发转移发生率为61．5％（24／39）；31例Runx3基因启动子非甲基化患者中，仅有4例患者术后发生复发转移，复发转移发生率为12．9％（4／31），差异有统计学意义（P〈0．001）。结论Syk和Runx3基因启动子甲基化与胃癌术后复发转移密切相关。Syk和Runx3基因启动子甲基化的联合检测有助于胃癌术后复发转移的早期诊断和预后评估。