人精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子1在膀胱尿路上皮癌中表达及临床意义

目的探讨人精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子1(SRSF1)在膀胱尿路上皮细胞癌的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测41例膀胱尿路上皮癌及10例正常膀胱尿路上皮中SRSF1的表达情况。结合临床资料以及分析SRSF1与病理分期,组织学分级和复发转移情况的关系。结果 SRSF1在膀胱尿路上皮细胞癌的阳性表达率为83(34/41),而对照组的阳性率为10.0%(1/10),两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。SRSF1的阳性表达与膀胱尿路上皮癌的初发和复发、是否转移显著相关(P<0.05);但在病理分期,组织学分级和肿瘤数量无显著差异。结论 SRSF1在膀胱尿路上皮细胞癌的表达明显上调,并且与膀胱尿路上皮癌的复发及转移密切相关,SRSF1可能通过与肿瘤基因相互作用,调控细胞周期及凋亡等多途径,参与肿瘤的发生及发展。SRSF1可用于膀胱上皮细胞癌早期诊断和复发、转移的一项重要指标。

丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1在肿瘤发生发展过程中的作用

选择性剪接(alternative splicing)是产生蛋白质组多样性的重要机制,并与肿瘤的发生、发展密切相关。丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)是选择性剪接因子家族的代表性成员,参与前体mRNA的选择性剪接与加工、胞内定位与运输等生理过程。研究已证实,SRSF1为原癌蛋白,并在肺癌、乳腺癌和白血病等人类肿瘤细胞中存在过表达现象。SRSF1蛋白通过与肿瘤相关基因的相互作用、调控细胞周期及凋亡等多种途径参与肿瘤的发生、发展过程。此外,SRSF1蛋白通过影响PI3K-Akt-mTOR、Ras-MNK-MAPK及Wnt-β-catenin信号转导通路中相关基因的剪接方式发挥致癌作用。针对剪接异常事件,目前主要采用反义寡核苷酸方法特异性纠正基因的错误性剪接,该方法已在肺癌及乳腺癌等实体肿瘤治疗中开展研究。深入研究选择性剪接的位点选择机制和作用机制必将对探讨肿瘤发病机制、诊断和治疗方法产生深远影响。

丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤U87细胞的增殖

目的:探讨丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1(SRSF1)基因对神经胶质瘤U87细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:采用基因沉默技术抑制SRSF1基因表达,获得2种不同靶点的SRSF1稳定沉默细胞系(shSRSF1-1组和shSRSF1-2组)。用CCK-8法检测SRSF1沉默对神经胶质瘤U87细胞的增殖活性,流式细胞技术检测SRSF1沉默对U87细胞周期的影响,qPCR和WB实验检测SRSF1沉默对细胞分裂相关基因(CEP70和SMC4)m RNA和蛋白表达水平的影响,用WB实验检测SRSF1沉默对翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化的影响。结果:shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中SRSF1蛋白表达均明显低于对照组(P<0.01),shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞增殖能力被显著抑制(P<0.01),并且处在G2期的细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,shSRSF1-1组和shSRSF1-2组细胞中细胞分裂相关基因CEP70和SMC4 mRNA水平无明显差异(P>0.05),但是蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化程度要明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默SRSF1基因通过降低翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化水平抑制细胞分裂相关基因CEP70和SMC4的翻译过程,最终使细胞阻滞在G2期,进而减弱神经胶质瘤U87细胞的增殖能力。

富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子1、转录因子7类似物2在胃癌组织中的表达及与化疗药物耐药性的关系

目的 探讨富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子1(SRSF1)、转录因子7类似物2(TCF7L2)在胃癌组织中的表达及与化疗药物耐药性的关系。方法 收集120例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测胃癌患者胃癌组织和癌旁组织中SRSF1、TCF7L2的表达量,分析这两种蛋白的表达情况与患者临床特征的关系,并检测胃癌患者对不同化疗药物的敏感性与SRSF1、TCF7L2的关系。结果 胃癌组织中SRSF1、TCF7L2相对表达量均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况胃癌患者的胃癌组织中SRSF1、TCF7L2表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同顺铂、紫杉醇、多西他赛和环磷酰胺耐药情况的胃癌患者胃癌组织中SRSF1、TCF7L2表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 胃癌患者胃癌组织中SRSF1和TCF7L2呈异常高表达,SRSF1和TCF7L2高表达可能是胃癌患者对化疗药物产生耐药性的重要原因。

丝氨酸/精氨酸富有剪接因子1、核因子κB在前列腺癌中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨前列腺癌组织中丝氨酸/精氨酸富有剪接因子1(SRSF1)、核因子κB(NF-κB)的表达情况及与患者临床特征的关系。方法选取前列腺癌患者和前列腺良性增生患者,各70例,取前列腺癌组织和前列腺良性增生组织。免疫组化法检测前列腺癌组织和前列腺良性增生组织SRSF1、NF-κB蛋白的阳性表达率,并分析不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中SRSF1、NF-κB蛋白的表达情况。结果前列腺癌组织中SRSF1、NF-κB蛋白的阳性表达率均高于前列腺良性增生组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同前列腺特异性抗原(PSA)水平前列腺癌患者前列腺癌组织中SRSF1蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);不同TNM分期、淋巴结转移情况、Gleason评分前列腺癌患者前列腺癌组织中SRSF1蛋白的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同PSA水平、Gleason评分前列腺癌患者前列腺癌组织中NF-κB蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);不同TNM分期、淋巴结转移情况前列腺癌患者前列腺癌组织中NF-κB蛋白的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论前列腺癌组织中的SRSF1、NF-κB蛋白表达水平和阳性表达率均较高,SRSF1蛋白的表达可能与TNM分期、淋巴结转移情况和Gleason评分,NF-κB蛋白的表达可能与TNM分期和淋巴结转移情况有关。

丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1上调表达对前列腺癌发病进程及临床预后的指导作用

目的 探讨丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1（ASF/SF2）在前列腺癌的作用及其可能参与的致癌分子机制.方法 免疫组织化学法检测102例前列腺癌患者及20例前列腺良性组织ASF/SF2的表达水平.x^2检验分析ASF/SF2表达同前列腺癌患者临床病理特征的相关性.Kaplan-Meier及Cox多因素模型检测ASF/SF2表达同前列腺癌生化复发的关系.结果 ASF/SF2在前列腺癌组中阳性率为51.0％ （52/102）,在前列腺良性组织的阳性率为20.0％（4/20）,两者差异有统计学意义（P＜0.05）.ASF/SF2表达同临床病理分期显著相关（P＜0.05）,其高表达与无生化复发生存率呈显著负相关（P＜0.05）,Cox多因素分析表明ASF/SF2可独立预测前列腺癌生化复发的危险度（风险比=2.943,P＜0.05）.结论 ASF/SF2高表达同前列腺癌的发病进程密切相关,ASF/SF2的致癌作用也许同哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路有关.

丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1和Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)和凋亡蛋白抑制因子Livin表达及临床意义。方法膀胱移行细胞癌患者46例,取手术切除癌组织46份为膀胱移行细胞癌组,癌旁正常组织10份为对照组,采用免疫组织化学法检测2组SRSF1和Livin阳性表达情况,分析SRSF1和Livin阳性表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系,Spearman秩相关分析膀胱移行细胞癌患者SRSF1和Livin阳性表达的相关性。结果膀胱移行细胞癌组SRSF1、Livin阳性表达率(80.4%、82.6%)均高于对照组(10.0%、30.0%)(P<0.05);膀胱移行细胞癌组肿瘤复发者SRSF1、Livin阳性表达率(92.6%、96.3%)高于未复发者(63.2%、63.2%)(P<0.05),SRSF1、Livin阳性表达率在肿瘤是否单发、分化程度、TNM分期上比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关分析结果显示,膀胱移行细胞癌组SRSF1和Livin阳性表达呈正相关(r=0.662,P<0.001)。结论膀胱移行细胞癌组织中Livin、SRSF1呈高表达,且与患者复发有关。

丝氨酸/精氨酸剪接因子1调节T细胞活化在系统性红斑狼疮发病机制中的作用

T细胞活化是SLE发生发展的关键环节,异常活化的T细胞不仅促进大量炎性细胞因子分泌,引起组织炎性浸润,还能促进生发中心B细胞产生大量的自身抗体,导致靶器官损伤。丝氨酸/精氨酸剪接因子1(SRSF1)是机体内重要的剪接因子,通过多种机制调控基因表达。研究发现,SLE患者T细胞中SRSF1减少,并与T细胞活化有关。因此,明确SRSF1调节T细胞活化在SLE发病机制中的作用具有重要意义。

SRSF1通过调控VEGFA mRNA可变剪接促进食管鳞状细胞癌Eca9706细胞增殖、侵袭和迁移

背景与目的:丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)与肿瘤的发生、发展密切相关。食管癌是常见的消化系统恶性肿瘤,但SRSF1在食管癌中的作用罕有报道。检测SRSF1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:收集2020年1月—2021年12月于河北医科大学第四医院行手术切除的40例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色法检测ESCC组织中SRSF1的水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测ESCC细胞系中SRSF1 mRNA表达和蛋白水平。筛选SRSF1高表达的Eca9706细胞进行研究。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术降低SRSF1 mRNA表达。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、transwell和Matrigel基质胶实验分别检测Eca9706细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用数据库分析ESCC组织中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达,并分析SRSF1与VEGFA表达的相关性。采用RTFQ-PCR检测Eca9706细胞VEGFA Iso8a和Iso8b亚型的表达水平,以及敲低SRSF1后VEGFA Iso8a和Iso8b亚型的表达变化。结果:SRSF1在ESCC组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。SRSF1 mRNA表达和蛋白水平在ESCC Eca9706细胞系中最高(P<0.01)。转染siRNA-SRSF1组中SRSF1 mRNA表达和蛋白水平显著低于siRNA-NC组(P<0.01)。与siRNA-NC组相比,siRNA-SRSF1组Eca9706细增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。ESCC组织中VEGFA表达明显高于食管正常组织(P<0.05),且与SRSF1表达呈正相关(P<0.01)。Eca9706细胞VEGFA Iso8a亚型表达明显高于VEGFA Iso8b亚型(P<0.01),且敲低SRSF1后VEGFA Iso8a亚型表达降低,VEGFA Iso8b亚型表达升高(P<0.01)。结论:SRSF1可通过作用于VEGFA可变剪接促进ESCC Eca9706细胞增殖、侵袭和迁移。

SRSF1剪接失调在非小细胞肺癌致病机制中的研究进展

选择性剪接是蛋白质多样性产生的一个关键步骤,异常的选择性剪接功能失调与癌症有关。不同组织出现疾病时显示特定模式剪接变异体,SRSF1通过调节靶基因的选择性剪接发挥作用。剪接因子的表达改变与肿瘤发生、发展及预后有关。SRSF1可能通过不同的信号传导通路及在肿瘤发病过程中的多个环节发挥其致瘤活性。目前已证实SRSF1在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达上调,可作为其诊断标志以及治疗的重要靶点。尽管如此,我们对SRSF1在NSCLC中准确致病机制的认识仍是了了。因此,明确SRSF1选择性剪接功能失调的致病机制对NSCLC的诊治具有重要意义。

SRSF1和Survivin在前列腺癌组织中的表达及其与病理分级的相关性

目的检测人丝氨酸/精氨酸富有剪接因子1(SRSF1)和凋亡抑制因子(Survivin)在前列腺癌组织中的表达,并探讨两者的相关性及其与前列腺癌病理分级的关系,从而初步提出前列腺癌治疗中的新靶点。方法采用免疫组织化学SP法检测SRSF1、Survivin蛋白在12例前列腺癌组织和8例良性前列腺增生组织中的表达,分析其与病理分级的关系,并探讨两者的相关性。结果 SRSF1蛋白在前列腺癌组织中的细胞阳性表达率为(76.37±5.06)%,显著高于良性前列腺增生[(11.30±1.09)%,P<0.05],Survivin蛋白在前列腺癌组织中的细胞阳性表达率为(86.93±3.21)%,显著高于良性前列腺增生[(17.67±1.99)%,P<0.05]。SRSF1和Survivin蛋白在前列腺癌组织中的表达与病理Gleason分级呈正相关,并且二者有明显的相关性(P<0.05)。结论SRSF1和Survivin蛋白在前列腺癌组织中均有高表达,比在良性前列腺增生组织中明显增加;并且SRSF1和Survivin蛋白的阳性表达与前列腺癌Gleason评分呈正相关,同时前列腺癌组织中Survivin蛋白表达量的升高与SRSF1蛋白表达量的升高呈正相关,初步证明了SRSF1的作用可能是通过上调Survivin的表达,从而促进了前列腺癌的发生、发展。

SRSF1在肿瘤中的研究进展

人类基因中约有94％发生选择性剪接，使同一前体 m R‐NA分子产生不同基因型，编码不同蛋白质，极大增加了基因表达复杂程度和蛋白质多样性［1］。不同组织出现疾病时显示特定模式剪接变异体，这些剪接模式依赖于剪接因子在细胞核中的相对表达，包括表达量或翻译后修饰［2］。富含丝氨酸／精氨酸剪接因子1（SRSF1），是1个典型富含丝氨酸／精氨酸SR蛋白家族成员，参与基因组成性剪接和选择性剪接［3］。SRSF1通过调节基因选择性剪接参与肿瘤形成发展。

膀胱尿路上皮癌组织中SRSF1及Caspase-3的表达水平及临床意义

目的探讨膀胱浸润性尿路上皮癌组织中丝氨酸/精氨酸富有剪接因子1(SRSF1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平及临床意义。方法选取2017年3月至2019年6月郑州大学第五附属医院收集的92例膀胱浸润性尿路上皮癌手术或活检标本为观察组,选取同期20例病理检查结果为正常膀胱尿路上皮组织的活检标本为对照组。采用免疫组化法检测对照组、观察组中SRSF1及Caspase-3的表达情况,分析观察组Caspase-3与SRSF1的相关性。结果观察组SRSF1阳性表达率高于对照组(P<0.05)。复发性浸润性尿路上皮癌组织SRSF1阳性表达率高于原发性癌(P<0.001)。观察组Caspase-3阳性表达率低于对照组(P<0.05)。观察组Caspase-3与SRSF1的表达呈负相关(P<0.05)。结论SRSF1与膀胱浸润性尿路上皮癌的发生、复发关系密切,膀胱浸润性尿路上皮癌组织中Caspase-3与SRSF1表达呈负相关,SRSF1高表达与Caspase-3低表达对膀胱浸润性尿路上皮癌患者病情进展起促进作用。

PSRC1与ANXA2相互作用减缓动脉粥样硬化进展的作用机制

目的探讨脯氨酸/丝氨酸丰富的卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)与膜联蛋白A2(ANXA2)相互作用减缓动脉粥样硬化进展的可能机制。方法为检测与PSRC1结合的蛋白,将RAW264.7巨噬细胞分为Ad-GFP+ox-LDL组与Ad-PSRC1+ox-LDL组,采用非标记定量蛋白质组学方法检测与PSRC1结合的蛋白表达水平;采用免疫共沉淀(Co-IP)实验及免疫荧光实验对上述蛋白质谱结果进行验证。为检测ox-LDL刺激下过表达PSRC1对ANXA2分泌的影响,将RAW264.7巨噬细胞分为四组(对照组、ox-LDL组、Ad-GFP+ox-LDL组、Ad-PSRC1+ox-LDL组),采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组培养上清中ANXA2的水平。为检测Ad-shANXA2对AXNA2的敲低效果,将RAW264.7巨噬细胞分为Ad-GFP组与Ad-shANXA2组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞内ANXA2 mRNA的表达情况。为检测敲低ANXA2对主动脉斑块进展及炎性因子分泌的影响,将24只ApoE-/-小鼠随机分为四组(n=6):普通饮食+Ad-GFP组、普通饮食+AdshANXA2组、高脂饮食+Ad-GFP组、高脂饮食+Ad-shANXA2组,采用油红O染色观察主动脉大体及主动脉根部动脉粥样硬化(AS)面积,并采用ELISA检测高脂饮食+Ad-GFP组与高脂饮食+Ad-shANXA2组小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6的水平。结果蛋白质组学检测结果显示,用ox-LDL刺激后PSRC1与ANXA2的结合明显增加,且二者的结合具有特异性,免疫荧光实验也显示PSRC1与ANXA2在细胞内存在共定位现象。RT-PCR检测发现,与Ad-GFP组比较,Ad-shANXA2组的ANXA2水平明显下降(0.198±0.065 vs.1.002±0.069,P<0.05);ELISA检测发现,与对照组比较,ox-LDL组的ANXA2水平明显升高[(2027.23±93.55)pg/ml vs.(697.01±30.08)pg/ml,P<0.01],与Ad-GFP+ox-LDL组比较,Ad-PSRC1+ox-LDL组的ANXA2水平明显降低[(1061.65±68.52)pg/ml vs.(2098.67±318.41)pg/ml,P<0.01]。在动物实验中,油红O染色发现普通饮食两组间主动脉大体及主动脉根部斑块面积差异无统计学意义;而与高脂饮食+Ad-GFP组比较,高脂饮食+Ad-shANXA2组小鼠的主动脉大体斑块面积百分比明显减少(5.29%±1.14%vs.12.28%±2.48%,P<0.05),主动脉根部切片斑块面积百分比也明显减少(1.31%±0.04%vs.2.83%±0.22%,P<0.05),且血清中IL-1β水平明显降低[(122.90±9.80)pg/ml vs.(172.90±21.83)pg/ml,P<0.05],IL-6水平也明显降低[(3.65±0.12)pg/ml vs.(5.97±0.42)pg/ml,P<0.05]。结论巨噬细胞过表达PSRC1可减缓动脉粥样硬化的进展,其机制可能与PSRC1与ANXA2的结合增加,抑制ANXA2释放至胞外,从而抑制炎性因子的释放有关。

SRSF7对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制

目的:探讨富含丝氨酸/精氨酸剪接因子7(SRSF7)对肝细胞癌(HCC)细胞HepG2增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter在线分析SRSF7在HCC和癌旁组织中的差异表达及其与患者预后的关系。常规培养HepG2细胞,用转染试剂将SRSF7 RNA敲减序列(siSRSF7#1和siSRSF7#2)、对照序列(NC)、SRSF7过表达载体(hSRSF7-oe)和对照载体(hSRSF7-nc)转染至HepG2细胞中,实验分为NC组、siSRSF7#1组、siSRSF7#2组、NC+hSRSF7-nc组、siSRSF7+hSRSF7-nc组和siSRSF7+hSRSF7-oe组。通过qPCR和WB法检测各组HepG2细胞中SRSF7 mRNA和蛋白的表达,MTS实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭的能力。WB法检测各组HepG2细胞中JAK1/STAT3信号通路的相关蛋白的表达。结果:数据库数据分析显示SRSF7 mRNA在HCC组织中呈高表达(P<0.001),SRSF7 mRNA高表达与HCC患者不良预后有关联(P<0.05)。敲减SRSF7后,HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著下降(均P<0.01)。敲减SRSF7组细胞中JAK1和STAT3磷酸化水平显著降低(均P<0.05),同时过表达SRSF7后,JAK1和STAT3磷酸化水平又明显升高(均P<0.05)。结论:SRSF7在HCC组织中呈高表达,其可能通过调控JAK1/STAT3信号通路促进HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭。

急性髓系白血病SRSF2基因突变患者临床病理特征及预后生存分析

目的探讨急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子2(serine/arginine-rich splicing factor 2,SRSF2)基因突变患者的临床病理特征及预后生存情况。方法选取2006年12月至2013年4月内蒙古医科大学附属医院收治的286例AML患者作为研究对象,回顾性分析所有患者的临床及随访资料,统计患者的临床资料、SRSF2基因突变情况、临床病理特征及预后生存时间,并比较SRSF2基因不同表达患者间上述资料的差异性,分析影响AML患者预后的相关因素。结果本研究286例AML患者中有12例发生杂合子SRSF2基因突变,突变率为4.20%,其余为野生型SRSF2基因。发生SRSF2基因突变和未发生SRSF2基因突变的AML患者在性别、病程、FAB分型、核型、白细胞(white blood cell,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、血小板(platelet,PLT)水平以及骨髓原始细胞比例比较均无显著差异(P_均> 0.05),但发生SRSF2基因突变的AML患者年龄较未发生SRSF2基因突变的AML患者大(P <0.05)。发生SRSF2基因突变和未发生SRSF2基因突变的AML患者5年总生存率比较差异具有显著性(χ~2=14.148,P <0.001)。经Log-Rank检验单因素分析,年龄≥60岁、出现异常核型、Hb <90.00 g/L、骨髓原始细胞比例≥50.00%以及SRSF2基因突变的AML患者生存时间均明显缩短(P_均<0.05)。经多因素Cox回归模型分析,年龄≥60岁、出现异常核型、Hb <90.00 g/L、骨髓原始细胞比例≥50.00%均为导致AML患者预后较差的独立危险因素(P_均<0.05)。结论 SRSF2基因突变的AML患者年龄显著较大,且年龄较大、出现异常核型、Hb水平过低、骨髓原始细胞比例较高均可导致AML患者预后不良,但SRSF2基因突变并非影响AML患者预后的独立危险因素。

SRSF1和BIRC5在胃癌组织中的表达及临床意义

目的通过对丝氨酸/精氨酸富有剪接因子1(SRSF1)和凋亡抑制因子(BIRC5)在胃癌组织中表达的检测及两者之间相关性的研究,来探讨两者与胃癌的发生、发展之间的关系;为胃癌的转移及复发预警,以及预后评估提供新靶点。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)检测60例术中切除的胃癌肿组织以及对应的癌旁组织中SRSF1与BIRC5的表达水平,分析这两种蛋白的表达水平与临床病理学特征的关系。结果 (1)胃癌肿组织中SRSF1 mRNA和BIRC5mRNA表达情况:SRSF1阳性表达率(75.0%,45/60)高于癌旁组织中(8.3%,5/60);BIRC5阳性表达率(81.7%,49/60)高于癌旁组织中(11.7%,7/60)。胃癌肿组织中SRSF1mRNA与BIRC5mRNA的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小等因素无关,与胃癌肿组织的分化程度、淋巴结转移以及TNM分期有关;SRSF1和BIRC5 mRNA在胃癌肿组织中的阳性表达呈正相关(r=0.3496,P=0.0062)。(2)胃癌肿组织中SRSF1蛋白与BIRC5蛋白表达情况:胃癌肿组织中SRSF1蛋白表达量相较于其在癌旁组织中的表达量明显增多(t=44.87,P<0.01),BIRC5蛋白表达量较癌旁组织同样异常增高(t=69.84,P<0.01)。结论在胃癌肿组织中SRSF1和BIRC5表达均存在异常增高,与胃癌的发生发展存在正相关,这可能与SRSF1选择性剪接BIRC5片段,促进凋亡抑制基因BIRC5的高表达有关,具体机制还需进一步探讨。

宫颈癌组织YAP1和SRSF3蛋白表达与临床病理参数及预后的关系

目的检测宫颈癌组织Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1, YAP1)、丝氨酸/精氨酸富集剪接因子3(serine and arginine rich splicing factor 3, SRSF3)蛋白表达情况,探讨YAP1、SRSF3蛋白表达与临床病理参数及预后的关系。方法 81例宫颈癌患者,取其宫颈癌组织和癌旁正常组织,采用免疫组织化学法检测宫颈癌组织和癌旁正常组织YAP1和SRSF3蛋白表达情况。记录患者临床资料,分析YAP1、SRSF3蛋白表达与临床病理参数的关系;采用Pearson相关性分析宫颈癌组织YAP1与SRSF3表达的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析YAP1、SRSF3蛋白阳性表达者与阴性表达者3年生存率的差异;采用多因素COX比例风险回归模型分析宫颈癌患者预后不良的影响因素。结果宫颈癌组织YAP1、SRSF3蛋白阳性表达率(74.07%、65.43%)高于癌旁正常组织(28.40%、30.86%)(P<0.05)。TNM分期Ⅰa/Ⅰb、无淋巴结转移的宫颈癌患者YAP1(65.31%、64.58%)和SRSF3(51.02%、52.08%)阳性表达率均低于TNM分期Ⅱa、有淋巴结转移患者(87.50%、87.88%,87.50%、84.85%)(P<0.05)。宫颈癌组织YAP1与SRSF3表达呈正相关(r=0.708,P=0.001)。YAP1阴性表达者3年生存率(90.5%)高于YAP1阳性表达者(70.0%)(P<0.05),SRSF3阴性表达者3年生存率(92.9%)高于SRSF3阳性表达者(66.0%)(P<0.05)。TNM分期Ⅱa期(OR=2.036,95%CI:1.024~3.049,P<0.001)、淋巴结转移(OR=1.842,95%CI:1.569~2.216,P=0.006)、YAP1表达阳性(OR=1.480,95%CI:1.203~2.429,P<0.001)和SRSF3表达阳性(OR=1.525,95%CI:1.106~1.814,P=0.011)是宫颈癌患者预后不良的危险因素。结论宫颈癌组织YAP1和SRSF3阳性表达率明显提高,YAP1和SRSF3表达与TNM分期、淋巴结转移、预后和生存相关,在宫颈癌的预后和诊断中有一定临床价值。

Srsf1敲低对GT1-7细胞基因表达谱的影响

目的:本研究通过RNA-seq技术分析Srsf1基因表达敲低的GT1-7细胞(knock down, KD)和野生型GT1-7细胞(wide type,WT)的表达谱和可变剪接事件,研究Srsf1敲低对GT1-7细胞基因表达谱的影响。方法:利用实验室现有的Srsf1基因表达敲低的GT1-7细胞(SRSF1-KD)和野生型GT1-7细胞分别抽提RNA,做RNA-seq数据分析,利用r MATS软件分析两株细胞内可变剪接事件的变化,确定Srsf1调控的下游关键基因。结果:结果显示共有875个基因表达存在显著性差异,对这些基因进行KEGG通路分析,发现γ-氨基丁酸能突触、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等与性发育相关的通路均受到影响。此外,P53通路也受到Srsf1敲低的影响。利用r MATS软件进行可变剪接事件分析,显示共发生839个可变剪接事件,涉及719个基因,进行KEGG通路分析发现与性发育相关的MAPK信号通路受到影响。结论:成功检测了GT1-7细胞和Srsf1基因敲低的GT1-7细胞表达谱,通过分析基因表达差异以及可变剪接事件,证明了Srsf1对于PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、γ-氨基丁酸能突触信号通路、p53通路的调控作用,并且这些信号通路提示我们Srsf1可能更多的通过非可变剪接方式影响性发育相关基因的表达,而非可变剪接方式,从而为更深入的性发育研究提供了理论基础。

丹参通络解毒汤通过调控Beclin-1对缺氧/复氧CMECs的保护作用及机制

目的:探讨丹参通络解毒汤(DSTLJD)通过调控Beclin-1对缺氧/复氧(H/R)大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)的保护作用及机制。方法:体外培养CMECs,构建H/R细胞模型,通过慢病毒转染过表达和沉默Beclin-1。将细胞随机分为pcDNA-Beclin-1组(过表达Beclin-1载体组)、control-pcDNA+DSTLJD组(过表达空载体+丹参通络解毒汤组)、pcDNA-Beclin-1+DSTLJD组(过表达Beclin-1载体+丹参通络解毒汤组)、Beclin-1-siRNA组(沉默Beclin-1载体组)、control-siRNA+DSTLJD组(沉默空载体+丹参通络解毒汤组)、Beclin-1-siRNA+DSTLJD组(沉默Beclin-1载体+丹参通络解毒汤组)。Western Blot法检测丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)、丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(SRSF1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及自噬相关蛋白(Atg5)蛋白表达,ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达,RT-PCR法检测肺癌转移相关转录本1(MALAT1)、SRPK1、SRSF1 mRNA表达。结果:与control-pcDNA+DSTLJD组比较,pcDNA-Beclin-1+DSTLJD组ATG5蛋白表达显著升高(P<0.01),eNOS蛋白表达显著下降(P<0.01),SOD水平下降(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05);与pcDNA-Beclin-1组比较,pcDNA-Beclin-1+DSTLJD组ATG5蛋白表达下降(P<0.05),eNOS蛋白表达显著升高(P<0.01),SRPK1、SRSF1蛋白及mRNA表达均显著下降(P<0.01),MALAT1 mRNA表达显著下降(P<0.01),SOD水平升高(P<0.05),MDA水平下降(P<0.05);与control-siRNA+DSTLJD组比较,Beclin-1-siRNA+DSTLJD组ATG5蛋白表达显著下降(P<0.01),eNOS蛋白表达升高(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05),MDA水平下降(P<0.05);与Beclin-1-siRNA组比较,Beclin-1-siRNA+DSTLJD组ATG5蛋白表达下降(P<0.05),eNOS蛋白表达升高(P<0.05),SRPK1、SRSF1蛋白及mRNA表达均下降(P<0.01,P<0.05),MALAT1 mRNA表达显著下降(P<0.01),SOD水平升高(P<0.05),MDA水平下降(P<0.05)。结论:丹参通络解毒汤可能通过抑制MALAT1-Beclin-1轴,降低ATG5蛋白,增强eNOS蛋白,上调SOD,下调MDA保护心肌微血管内皮细胞。