大剂量重组人红细胞生成素治疗尿毒症贫血的疗效观察

目的:观察每周1次大剂量皮下注射国产重组人红细胞生成素(rhEPO)治疗尿毒症贫血的临床疗效。方法:20例尿毒症合并肾性贫血的血透患者,随机分为2组,试验组10例,采用国产rhEPO(益比奥,沈阳三生制药公司)10 000 U皮下注射1次/周治疗;对照组1O例,采用进口rhEPO(利血宝,日本麒麟公司)3 000 U皮下注射2～3次/周治疗。治疗期间,监测血常规、血脂、肝肾功能、电解质、血压等指标及患者出现的各种不良反应。结果:试验组显效5例、有效4例、无效1例;对照组显效6例、有效3例、无效1例,治疗前后白细胞、血小板、血脂、肝肾功能、电解质无明显变化。结论:大剂量益比奥每周1次治疗肾性贫血安全可靠、疗效确切,不良反应发生率与利血宝相似,且价格/药效明显低于利血宝。

重组人红细胞生成素对缺氧缺血新生大鼠脑细胞的影响

目的 探讨重组人红细胞生成素 (rhEPO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)脑细胞凋亡的影响及rhEPO能否通过血脑脊液屏障。方法 选用Wistar大鼠 80只随机分为 4组 ,即正常对照组、HIBD组、川芎嗪 (TMP)治疗组、rhEPO治疗组 ,每组各 2 0只。制备HIBD模型后腹腔内注射rhEPO及TMP。在缺氧缺血后48h处死 ,取脑组织常规固定 ,切片行HE及原位末端标记法染色 ,测定脑细胞凋亡百分率及凋亡面密度。结果 HIBD组凋亡百分率、凋亡面密度均明显高于正常对照组 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 1) ;rhEPO组测定值明显低于HIBD组 (P均 <0 .0 1) ,而与TMP组相比无差异 (P均 >0 .0 5)。结论 rhEPO能抑制脑细胞凋亡 ,具有与TMP类似作用 。

基因重组人红细胞生成素注射液治疗肾性贫血的多中心临床研究

目的 观察基因重组人红细胞生成素治疗肾性贫血的疗效及安全性。方法 采用非盲非对照方法进行多中心临床研究。初始给药剂量：血透和腹透患者每周 150 U/kg,非透析者每周 100 U/kg，每周分 2～ 3次皮下或静脉注射。根据血红蛋白和红细胞压积升高的情况调整剂量，疗程为 12周。 结果 共 358例患者进入试验，中途退出 8例， 350例计入统计。完成 12周治疗者 182例，显效 57.1％（ 104/182），有效 30.2％（ 55/182），总有效率 87.3％，无效 12.7％（ 23/182）。不良反应主要是高血压（ 14.6％），偶有头痛、注射部位疼痛等。结论 基因重组人红细胞生成素治疗肾性贫血安全有效。

重组人红细胞生成素大剂量冲击维持疗法治疗30例肿瘤相关贫血的临床报告

背景与目的:贫血是癌症患者常见的并发症,重组人红细胞生成素(recombinanthumanerythropoietin,rhEPO)的应用能改善癌症贫血患者的症状,但其最佳使用方法仍在探讨之中。为探索rhEPO在肿瘤相关贫血患者中的最佳用药方案,本研究在同期接受化疗的癌症贫血患者中进行了rhEPO冲击维持疗法的临床应用研究。方法:采用开放性非随机的临床研究方法,选取2004年5月至2005年2月30例同期接受化疗且伴随贫血的恶性肿瘤患者,第1周采用rhEPO120000U冲击用药(40000U皮下d1,3,5),然后rhEPO每周40000U皮下维持用药,共3周(d8,15,22);比较治疗前及治疗开始后每2周的血红蛋白(Hb)水平和红细胞压积(Hct)值。结果:入组患者给予rhEPO后Hb水平呈持续上升趋势,在治疗后第2周及第4周Hb比基础值(79.56g/L)上升≥20g/L的患者分别占27.59%和61.90%;第2周(n=29)及第4周(n=21)Hb的平均值分别为90.26g/L和96.81g/L,与治疗前相比差异均具有显著性(P<0.05);第2周及第4周Hct的平均值分别为27.01%和30.17%,与治疗前(24.29%)相比也有所提高(P=0.062,P=0.001)。所有患者均耐受良好。结论:在恶性肿瘤贫血患者中使用rhEPO大剂量冲击维持疗法,可有效快速提高患者的血红蛋白水平,改善患者的贫血状况,该疗法耐受性较好,值得进一步扩大临床研究。

重组人红细胞生成素治疗晚期非小细胞肺癌化疗相关贫血疗效的观察

目的 观察重组人红细胞生成素 (rhEPO)对晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)化疗所致贫血的疗效。方法 选择 5 8例晚期NSCLC采用以铂剂为主联合化疗方案所致贫血患者 ,分为两组 ,EPO治疗组 2 8例给予皮下注射rhE PO ,剂量为 15 0 μg/kg ,3次 /周。对照组 30例不给予EPO治疗 ,仅给予五参芪口服液 ,10ml,3次 /日。 结果 治疗后 4周起EPO治疗组患者血红蛋白 (Hb)、红细胞压积 (HCT)、红细胞总数 (RBC)均明显上升 ,与治疗前相比差异有显著性 (P值 <0 0 1) ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 5 )。EPO治疗组总有效率为 89 3% ,对照组为37 1% ,差异有显著性 (P值 <0 0 1)。结论 EPO对晚期NSCLC采用以铂剂为主联合化疗方案所致贫血有肯定的疗效。

重组人红细胞生成素每周1次给药法治疗肾性贫血

目的对比观察重组人红细胞生成素(益比奥)1万IU每周1次及3000IU每周3次皮下注射的疗效。方法将尿毒症合并肾性贫血26例患者(包括腹透、血透、保守治疗)分两组,益比奥1万IU试验组10例,3000IU对照组16例,观察治疗前、后贫血症状、血常规及其他生化指标变化。结果两组治疗有效率分别为90%,94%,无明显差异,均未发现明显副作用,血小板、白细胞、血脂及肝、肾功能治疗前后无明显变化。结论大剂量益比奥每周1次治疗肾性贫血安全有效。

围手术期应用重组人红细胞生成素的多中心随机对照研究

目的观察围手术期贫血患者使用重组人红细胞生成素(rhEPO)对纠正贫血和减少异体输血的临床效果。方法74例胃肠道肿瘤伴贫血患者,随机分成治疗组A、治疗组B和对照组C,A组患者术前每天皮下注射rhEPO1万IU,连续4d,术后第1、3d分别皮下注射rhEPO1万IU;B组患者术前7d始隔天皮下注射rhE-PO1万IU,连续6次;C组患者不给予rhEPO。观察所有患者贫血纠正及异体输血情况。结果治疗组患者用药后血红蛋白(Hb)、网织红细胞(Ret)及血细胞比容(Hct)水平高于对照组、用药前,术中及术后异体输血少于对照组。B组疗效优于A组。结论围手术期使用rhEPO对于纠正贫血和减少异体输血是有效的。

人红细胞生成素乳腺特异性表达载体构建及其可行性检验方法的建立

将大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列与人红细胞生成素基因组ＤＮＡ融合，构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３乳腺特异性表达载体，该载体经脂质体包裹后，通过显微外科技术，经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。经ＥＬＩＳＡ检测，大鼠乳汁中有ＥＰＯ表达，外周血网织红细胞计数法测定表达的ＥＰＯ具有体内生物活性。

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和caspase-9的影响及作用机制

目的观察重组人红细胞生成素(rHuEPO)对戊四氮(PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制。方法采用PTZ点燃大鼠SE模型,将175只大鼠随机分为正常对照组(给予生理盐水腹腔注射)、PTZ组(腹腔注射PTZ点燃SE发作后30min腹腔注射生理盐水)、rHuEPO组(SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg)、LY294002组(SE发作后10min脑室注射5μlLY294002,SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg)、二甲基亚砜(DMSO)组(SE发作后10min脑室注射5μlDMSO,SE发作后30min腹腔注射rHuEPO5000U/kg),并给予相应处理。检测大鼠行为学和脑电图的改变,免疫组织化学法观察p-Akt、caspase-9的表达,RT-PCR方法检测各组大鼠海马caspase-9mRNA的表达;Westernblotting方法检测各组大鼠海马Akt、p-Akt蛋白的表达。结果与PTZ组比较,rHuEPO组p-Akt免疫反应阳性细胞和p-Akt蛋白表达水平均增高,caspase-9免疫反应阳性细胞及caspase-9mRNA表达水平均降低(P<0.05);与rHuEPO组比较,LY294002组p-Akt免疫反应阳性细胞和p-Akt蛋白表达水平均降低,caspase-9免疫反应阳性细胞及caspase-9mRNA表达水平均增高(P<0.05)。结论在SE大鼠模型中rHuEPO激活PI3K/Akt信号转导途径调整线粒体凋亡途径相关调控因子caspase-9,借以发挥抗凋亡的神经保护作用。

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马线粒体凋亡途径相关调控因子的影响及作用机制

目的观察重组人红细胞生成素(r Hu EPO)对戊四氮(PTZ)点燃的癫痫持续状态(SE)的成年雄性(SD)大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响,并进一步探讨r Hu EPO作用的可能机制。方法于2010年3月,由河北省实验动物中心提供的健康清洁级成年SD大鼠。采用PTZ点燃大鼠SE模型,将大鼠随机分为B组(PTZ+0.9%氯化钠溶液)、C组(PTZ+r Hu EPO)、D组(PTZ+LY294002+r Hu EPO)、E组(PTZ+二甲基亚砜+r Hu EPO),同时另选取不进行SE制模的SD大鼠作为A组(0.9%氯化钠溶液),检测大鼠行为学和脑电图的改变;用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测海马神经元的凋亡情况;免疫组织化学法观察p-Akt、Bax、XIAP的阳性细胞数;反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠海马Bax信使RNA(BaxmRNA)的表达;Western blot方法检测各组大鼠海马蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、XIAP蛋白的表达。结果与B组比较,C组p-Akt、XIAP阳性细胞数和p-Akt、XIAP蛋白表达水平均增多,Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达水平均减少,差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较,D组p-Akt、XIAP阳性细胞数和p-Akt、XIAP蛋白表达水平均减少,Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达水平均增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 r Hu EPO可以提高p-Akt、XIAP阳性细胞数及蛋白表达水平,降低Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达水平,减少海马神经元的凋亡,发挥神经保护作用;加入磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002后,海马p-Akt、XIAP阳性细胞数及蛋白表达减少、Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达增加,海马神经元的凋亡增加,减弱了r Hu EPO的保护作用。因此,PI3K/Akt信号通路是r Hu EPO发挥神经保护作用的通路之一,其作用机制可能是r Hu EPO活化PI3K/Akt后,提高p-Akt蛋白及线粒体凋亡途径相关调控因子XIAP的表达,下调了Bax的表达,从而介导线粒体凋亡途经,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用。

人红细胞生成素基因在小鼠体内的转移与表达

将人的红细胞生成素（ＥＰＯ）基因克隆在ＣＭＶ启动子的下游，构建ＥＰＯ表达质粒，在ＢＨＫ２１细胞中表达成功后，将该质粒经脂质体包埋，再导入到小鼠的骨骼肌内，在体内亦获得了表达，一个月时小鼠血浆中人红细胞生成素的表达量高达１３４０ｎｇ／Ｌ。

重组人红细胞生成素治疗肿瘤化疗相关性贫血388例

目的评价重组人促红细胞生成素(rhEPO)治疗肿瘤化疗相关性贫血的疗效和不良反应。方法 388例肿瘤化疗相关性贫血患者分为观察组192例和对照组196例,对照组给予一般性纠正贫血药物,观察组给予rhEPO肌肉注射。评价2组疗效和副作用。结果对照组治疗后血红蛋白(Hb)和血细胞比容(Hct)呈下降趋势,观察组治疗后Hb和Hct呈上升趋势。治疗4、6和8周后,观察组Hb和Hct均高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。治疗6周后,观察组生活质量改善率(100.0%)明显高于对照组(21.4%),差别有统计学意义(P<0.01)。治疗后观察组的输血需求率(8.9%)明显低于对照组(25.0%),差别有统计学意义(P<0.01)。2组患者均未出现明显不良反应。结论 rhEPO治疗恶性肿瘤贫血具有一定的疗效,能提高患者的Hb和Hct,有效降低输血需求及风险,且安全性好。

优化等电聚焦电泳方法评价重组人红细胞生成素质量

目的对等电聚焦电泳(IEF)分析方法进行优化,以更好地评价重组人红细胞生成素(rHuEPO)产品的质量。方法用优化的IEF方法分析rHuEPO异构体分布,同时参照rHuEPO的体内外生物学活性和唾液酸含量结果,综合评判rHuEPO的质量。结果建立的优化等电聚焦电泳方法分析rHuEPO,图谱清晰,检测结果可靠。结论IEF方法的优化为rHuEPO的质量控制提供了快捷,准确的手段。

应用重组人红细胞生成素改善肿瘤相关性贫血患者生活质量的作用

目的回顾性分析重组人红细胞生成素(recombinanthu-manerythropoietin,rHuEPO)改善肿瘤相关性贫血患者生活质量的疗效。方法肿瘤相关性贫血患者30例,以rHuEPO150U/kg,皮下注射,3次/周,连用8周,同时服铁剂,总结和评估疗效。结果30例中,1例未完成8周的治疗,29例患者在治疗的4,8周时,血红蛋白、红细胞、血细胞比容均较治疗前有显著改善,显效16例,有效10例,无效3例,总有效率89.6%。生活质量评分提高26例,无效3例。结论rHuEPO用于治疗肿瘤相关性贫血的疗效可靠、安全。

重组人红细胞生成素与β-七叶皂甙钠治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:观察重组人红细胞生成素(rHu-EPO)和β-七叶皂甙钠治疗大鼠脊髓损伤后功能恢复、损伤段神经细胞凋亡情况。方法:30只SD大鼠根据损伤及治疗情况分为4组:空白组、损伤组、治疗A组和治疗B组,观察药物治疗前后大鼠的神经功能行为、红细胞、血红蛋白的变化。损伤后12d处死动物,损伤段脊髓标本做组织学切片,HE染色;做免疫组化检测凋亡因子(包括bcl-2,bax,fas);TUNEL标记凋亡细胞;比较各组间差别。结果:治疗A、B组在用药后,红细胞、血红蛋白数值明显高于治疗前,且与损伤组比较,神经功能有显著提高(P<0.05)。凋亡指标检测:fas、bax、TUNEL显示,损伤组的凋亡阳性细胞明显多于治疗组;bcl-2显示,治疗组的阳性表达明显多于损伤组(P<0.05)。结论:rHu-EPO能抑制脊髓神经细胞凋亡,对损伤脊髓的神经功能具有保护作用,联合应用rHu-EPO和β-七叶皂甙钠效果更明显。

重组人红细胞生成素治疗肿瘤相关贫血

贫血在晚期肿瘤患者中很常见。输血在很长一段时间内是纠正贫血的唯一方法,但这种方法费用高、效果差、危险性大。伴随分子生物学技术的进展,重组人红细胞生成素(益比奥,rHuEPO)问世,并应用于临床。自2001-10/2002-05应用沈阳三生制药股份有限公司生产的益比奥治疗肿瘤相关贫血患者15例,现总结如下。

重组人红细胞生成素胶原蛋白双层微条的制备及含量测定

目的:制备重组人红细胞生成素(rhEPO)胶原蛋白双层微条并建立其含量测定方法。方法:以胶原蛋白为包裹材料,以硫酸软骨素钠为释放调节剂,采用凝胶加压成型的方法制备双层微条;采用反相高效液相色谱法测定双层微条中rhEPO的含量。结果:rhEPO检测浓度线性范围为0 .25～20μg/ml(r=0 9998) ,平均回收率为96 .2% ,日内、日间精密度分别为0. 9%、2 .6%(n=3)。结论:rhEPO胶原蛋白双层微条制备方法简单可行,含量测定方法准确、可靠。

重组人红细胞生成素在全髋关节置换中的应用

目的 :研究重组人红细胞生成素 (rhEPO)对全髋关节置换术后失血性贫血的作用及作用机制。方法 :2 0 0 1年 6～ 1 2月期间 ,选择 36例单侧全髋关节置换病人纳入本实验。其中男 2 0例 ,女 1 6例 ,年龄 6 0～ 75岁 ,平均 6 4.6岁。将病人随机分为 2组 ,实验组于手术前 4d开始皮下注射rhEPO ,每次 1 0 0 0 0IU ,隔日 1次 ,共 2周 ;用药期间同时补充铁剂 ;对照组不使用rhEPO ,仅补充铁剂。用药前后及手术前后 ,监测两组病人的网织红细胞、血红蛋白、红细胞比积。实验组同时监测血压、血小板、血钾及肝肾功能。结果 :实验组的网织红细胞、血红蛋白和红细胞比积测定值在用药后不同时点上均高于对照组 ,差异具有统计学意义 (P <0 .0 5)。实验组病人的血压、血小板、血钾、谷丙转氨酶、尿素氮测定值在治疗前后无统计学差异 (P >0 .0 5)。用药后 ,实验组有 1例皮疹 ,2例注射部位疼痛 ,均自行缓解。结论 :全髋关节置换病人在围手术期使用rhEPO ,能有效预防和治疗病人的贫血状态 ,药物的耐受性良好。rhEPO的作用机制在于促进原红细胞分裂增殖并维持其活力 ,治疗期间需同时补充铁剂。

S100β蛋白在脑损伤中的作用及重组人红细胞生成素的干预机制研究

目的考察S100β蛋白在新生大鼠脑损伤中的作用及重组人红细胞生成素(rhEPO)干预机制的研究。方法将2日龄SD大鼠分成3组:假手术组、缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型组(HIBD组)和rhEPO治疗组(rhEPO组),每组40只。HIBD组和rhEPO组大鼠组均存在HIBD,rhEPO组腹腔注射rhEPO 5 000 u/(kg·次)。采用ELISA法检测大鼠出生后第3、5和7天及治疗后6和24 h,第3和7天外周血的S100β蛋白表达水平;选取2015年2月—2017年10月在大连医科大学附属二院妇产科或新生儿科确诊为脑损伤的新生儿25例,选择同期出生的健康新生儿29例为对照。脑损伤的新生儿均给予皮下注射rhEPO。采用ELISA法检测rhEPO治疗前和治疗后第3、7和14天外周血的S100β蛋白表达水平。结果 3组大鼠出生后第3、5和7天外周血S100β蛋白表达水平比较:①不同时间点的S100β蛋白表达无差异(P>0.05);②3组S100β蛋白表达无差异(P>0.05);③3组的S100β蛋白表达变化趋势无差异(P>0.05)。3组大鼠治疗后6、24 h,第3和7天外周血S100β蛋白表达比较:①不同时间点的S100β蛋白表达有差异(P <0.05);②3组的S100β蛋白表达有差异(P <0.05),rhEPO组和HIBD组较假手术组高;③3组的S100β蛋白表达变化趋势有差异(P <0.05)。两组新生儿治疗前、治疗后第3、7和14天外周血S100β蛋白表达比较:①不同时间点的S100β蛋白表达有差异(P <0.05);②两组S100β蛋白表达有差异(P <0.05),脑损伤组较对照组高;③两组的S100β蛋白表达变化趋势有差异(P <0.05)。脑损伤组外周血的S100β蛋白表达呈双峰变化。对照组,轻度和重度脑损伤新生儿组治疗前、治疗后第3、7和14天外周血S100β蛋白表达比较:①不同时间点的S100β蛋白表达有差异(P <0.05);②3组的S100β蛋白表达有差异(P <0.05),重度脑损伤组较其他两组高;③3组的S100β蛋白表达变化趋势有差异(P <0.05)。轻度和重度脑损伤新生儿组外周血的S100β蛋白表达呈双峰变化。结论 S100β蛋白在新生大鼠及新生儿脑损伤可呈双峰变化,其中轻度新生儿脑损伤的S100β蛋白无双峰变化,rhEPO可用于治疗新生大鼠及新生儿脑损伤。