PCOS患者血清中人组织激肽释放酶结合蛋白水平及其与肥胖的相关性分析

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中人组织激肽释放酶结合蛋白(KS)水平及其与肥胖的相关性。方法选择42例PCOS患者作为PCOS组、46例月经正常的育龄期妇女作为对照组,比较2组的血清KS水平及其与胆固醇等脂代谢指标的相关性。结果PCOS组BMI、总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、血清KS水平均高于对照组(P<0.05)。PCOS组中血清KS水平与肥胖代谢相关生化指标均呈正相关(P均<0.05)。结论血清KS水平与脂代谢相关指标密切相关,提示代谢紊乱与KS共同促进PCOS的发生。

人组织激肽释放酶结合蛋白在脓毒性休克患者预后评估中的价值

目的研究人组织激肽释放酶结合蛋白(Kallistatin,Ks)在脓毒性休克患者预后评估中的价值,为脓毒性休克患者的病情评估及预后判断提供新的思路及临床依据。方法本研究是基于前瞻性数据收集的回顾性分析研究,选择2017年10月-2020年01月就诊于新疆医科大学第一附属医院急救创伤中心抢救室及急救中心重症监护室明确诊断脓毒性休克的患者79例,收集并比较存活组与死亡组患者的医疗资料,建立COX回归模型分析影响脓毒性休克患者28d全因死亡率的独立危险因素。绘制Kallistatin的受试者工作特征曲线,根据kallistatin的Cut-off值将患者分为两组,绘制Kaplan-meier曲线比较脓毒性休克患者的累计生存率,Log-Rank检验比较两组间是否存在差异。结果根据入院28天内患者的预后情况分为存活组53例,死亡组26例,病死率32.9%。入院时患者的血浆kallistatin水平与健康受试者存在显著差异3.9(2.8,4.7)vs 14.4(13.6,15.4),P<0.001;存活组患者血浆kallistatin水平与死亡组患者存在显著差异4.21±1.22 vs 3.16±1.26,P<0.001。COX回归分析均显示:kallistatin为影响脓毒性休克患者预后状况的保护性因素(β<0,P<0.05)。绘制kallistatin的受试者工作特征曲线,经计算截断值为3.99ug/ml,曲线下面积为0.727,灵敏度为62.3%,特异度为80.8%,95%置信区间为0.607-0.847,P=0.001。根据kallistatin的Cut-off值为3.99 ug/ml,将所有脓毒性休克患者分为两组:KS≥3.99 ug/ml组和KS<3.99 ug/ml组,运用Kaplan-Meier曲线比较两组脓毒性休克患者28天累积生存率,差异具有统计学意义(Log-Rank=15.309,P<0.001)。结论血浆kallistatin水平是脓毒性休克患者预后评估中的保护性因素,入院时血浆kallistatin<3.99ug/ml提示预后不良,其对脓毒性休克患者的预后评估有一定的预测价值。

难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶、组织蛋白酶B的表达及其临床意义

目的:探讨难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶(KLK)、组织蛋白酶B(catB)表达及其临床意义.方法:选取2017年3月至2019年3月河南中医药大学第五临床医学院收治的难治性癫痫患儿43例为研究对象,纳入研究组.选择同期在本院治疗的治疗有效癫痫患儿,同期在本院体检的健康儿童作为对照,分别纳入治疗有效组(n=35)及对照组(n=50).①对3组受试儿血浆KLK、catB,白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平分别进行统计学分析.②分析研究组患儿血浆KLK、catB水平,分别与其血浆IL-8、IL-6、TNF-α水平的相关关系.③受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC),对难治性癫痫的诊断截断值、诊断灵敏度及特异度.④采取多因素非条件Logistic回归分析难治性癫痫临床诊断的独立影响因素.结果:①研究组患儿血浆KLK、catB、IL-6、IL-8、TNF-α水平,均显著高于对照组、治疗有效组,并且差异均有统计学意义(P<0.05).②研究组患儿血浆KLK、catB水平与其IL-6、IL-8、TNF-α水平,均呈正相关关系(r=0.625、0.628、0.657,0.634、0.619、0.664,P<0.05).③血浆KLK、catB水平ROC曲线的AUC分别为0.889、0.856,对难治性癫痫的诊断截断值分别为3.99 U/mL、3.66 U/mL,二者单独诊断难治性癫痫的灵敏度分别为72.10%、72.10%,特异度分别为92.00%、94.00%;二者联合诊断的AUC为0.950,灵敏度为86.00%,特异度为90.70%.④血浆KLK高表达(OR=2.652,95%CI:1.668~4.218,P<0.05),以及catB高表达(OR=2.635,95%CI:1.704~4.075,P<0.05),均是导致患儿发生难治性癫痫的独立危险因素.结论:难治性癫痫儿童血浆KLK、catB水平高表达,对难治性癫痫患儿的临床诊断具有重要参考价值.

组织激肽释放酶家族在病原微生物感染中的作用

组织激肽释放酶(tissue kallikrein-related peptidase, KLK)家族是丝氨酸蛋白酶家族中一种具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶性质的蛋白水解酶亚群,有15个家族蛋白,分别为KLK1~KLK15。近年来,越来越多的研究表明,KLK家族可通过切割病毒和细菌关键蛋白、激活多种宿主受体、调控激肽系统等方式参与机体的多种生理活动,影响着病毒、细菌和真菌中多种病原微生物感染的进程,作用机制复杂且广泛。本文通过对近年来KLK家族蛋白在微生物感染中的作用和机制进行综述,以更好地探究KLK在微生物感染中的重要作用,特别是为其在结核分枝杆菌感染中的研究提供思路,也为KLK家族蛋白作为抗结核治疗靶点提供理论基础。

老年急性脑梗死患者血清磷酸化tau蛋白181与激肽释放酶6的表达及对发病后睡眠障碍的预测价值

目的观察老年急性脑梗死(ACI)患者血清磷酸化tau蛋白181(P-tau-181)和激肽释放酶6(KLK6)水平变化,并探讨其与患者发病后睡眠障碍的关系。方法选择2020年5月至2022年5月海安市人民医院收治的158例老年ACI患者作为观察对象,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,将其分为轻度组(40例)、中度组(81例)和重度组(37例);患者发病后根据匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分,将其分为睡眠障碍组(56例)和睡眠良好组(102例);患者血清P-tau-181和KLK6水平选择酶联免疫吸附法检测;采用logistic回归分析法对老年ACI患者发病后睡眠障碍的影响因素进行分析;采用受试者工作特征曲线分析血清P-tau-181和KLK6水平对老年ACI患者发病后睡眠障碍的诊断价值。结果重度组ACI患者血清P-tau-181、KLK6水平显著高于轻度组和中度组(P<0.05),中度组血清P-tau-181、KLK6水平显著高于轻度组(P<0.05)。与睡眠良好组患者相比较,睡眠障碍组有卒中家族史、有吸烟史以及有饮酒史患者比例及血清P-tau-181、KLK6水平较高(P<0.05)。血清P-tau-181及KLK6水平是影响老年ACI患者发病后睡眠障碍的独立危险因素(P<0.05)。血清P-tau-181、KLK6以及两者联合诊断老年ACI患者发病后发生睡眠障碍的ROC曲线下面积分别为0.844、0.826和0.924,联合诊断效能高于单独检测(Z=2.030,P=0.042;Z=2.340,P=0.019)。结论老年ACI患者血清中P-tau-181及KLK6高表达可能与其发病后睡眠障碍有重要联系,且两者联合预测老年ACI患者发病后睡眠障碍效能高于单独检测。

重组人组织激肽释放酶结合蛋白对小鼠溃疡性结肠炎的抗炎作用

本文考察了重组人组织激肽释放酶结合蛋白(kallistatin,Kal)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型的体内抗炎效果。采用4%葡聚糖酸钠(DSS)建立小鼠UC模型,随机分为模型组与Kal高、中、低剂量治疗组及柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗组,并与正常对照组比较。测定6组间小鼠体重、结肠长度及病变组织炎症因子及IL-10和TNF-α水平变化,并进行组织损伤评分。结果显示,与模型组相比,Kal高剂量治疗组和SASP治疗组的组织损伤评分、MPO/MDA/TNF-α水平均显著降低,而小鼠体重、IL-10水平和SOD活性则显著提高,趋近于正常对照组,经过Kal治疗后小鼠溃疡性结肠炎得到了明显的改善,且呈剂量依赖性。因此,本研究揭示了Kal可以改善小鼠溃疡性结肠炎,可能与其参与调控炎性细胞因子IL-10、TNF-α水平及具有一定抗氧化能力有关。

外周血脑型脂肪酸结合蛋白和激肽释放酶6对高龄髋关节置换患者术后认知功能障碍的预测价值

目的 探讨外周血脑型脂肪酸结合蛋白(B-FABP)和激肽释放酶6(KLK6)对高龄髋关节置换患者术后认知功能障碍(POCD)的预测价值。方法 选取145例高龄髋关节置换患者,根据术后7 d的蒙特利尔认知功能量表(MoCA)评估结果分为POCD组(n=39)和非POCD组(n=106)。比较2组患者术前及术后3、7 d血清B-FABP和KLK6水平;采用Pearson法分析不同时点血清指标与MoCA评分的相关性;采用单因素和多因素Logistic回归分析确定POCD发生的影响因素;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清指标对POCD的诊断效能。结果 POCD组术后3、7 d的B-FABP高于非POCD组,KLK6低于非POCD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,认知功能障碍评分与术后3、7 d的B-FABP呈负相关(r=-0.469、-0.341,P<0.05),认知功能障碍评分与术后3、7 d的KLK6呈正相关(r=0.891、0.473,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,术后3 d的B-FABP(OR=1.898, 95%CI:1.202~2.997)、术后7 d的B-FABP(OR=1.669, 95%CI:1.125~2.474)、术后3 d的KLK6(OR=0.676, 95%CI:0.553~0.828)和术后7 d的KLK6(OR=0.604, 95%CI:0.400~0.912)是POCD发生的影响因素。ROC曲线显示,当术后3 d的B-FABP临界值为156.34 ng/L时,其对应的敏感度为69.23%,特异度为70.75%,曲线下面积(AUC)为0.801(95%CI:0.750~0.852);当术后7 d的B-FABP临界值为133.02 ng/L时,其对应的敏感度为71.79%,特异度为71.70%,AUC为0.760(95%CI:0.707~0.812);当术后3 d的KLK6临界值为5.52μg/L时,其对应的敏感度为58.97%,特异度为60.38%,AUC为0.631(95%CI:0.564~0.698);当术后7 d的KLK6临界值为6.01μg/L时,其对应的敏感度为61.54%,特异度为63.21%,AUC为0.708(95%CI:0.645~0.772);根据Logistic回归结果建立上述4个指标联合应用的风险预测模型,当模型临界值为1.29(去常数项)时,对应的敏感度为82.05%,特异度为80.19%,AUC为0.869(95%CI:0.831~0.907)。结论 血清B-FABP和KLK6与髋关节置换患者POCD发生密切相关,单独和联合检测时可有效预测POCD的发生,临床应根据指标进行干预。

腺相关病毒载体介导人组织激肽释放酶结合蛋白的胞内生物活性研究

人组织激肽释放酶结合蛋白(Kallistatin,KAL)是一种分泌型蛋白,其通过与胞外受体结合来调控多条下游信号通路,但尚未有KAL的胞内活性研究以及胞内KAL是否具有与胞外相似生物学活性的报道。通过构建无信号肽的KAL腺相关病毒表达载体(rAAV-NSK)来探索KAL蛋白的胞内活性。转染rAAV-NSK后,所有受试细胞均有KAL胞内表达但不分泌,其中HUVEC的增殖、迁移和小管形成均受到抑制;NCI-H460、NCI-H446和A549受到不同程度抑制。这一细胞水平研究,不仅证实了KAL的胞内活性,也暗示着KAL将可能作为一种"平衡因子"参与多靶点调控,也为解释目前有关KAL在PI3K-Akt信号通路的调控矛盾提供了新的思路。

血清发育内皮细胞基因-1、组织激肽释放酶结合蛋白对脓毒症患者病情严重程度及预后评估研究

目的探讨血清发育内皮细胞基因-1(Del-1)、组织激肽释放酶结合蛋白(KS)对脓毒症患者病情严重程度及预后的评估价值。方法选取2017年5月至2019年5月东台市人民医院重症医学科收治的120例脓毒症患者为研究对象,根据病情严重程度分为脓毒症组(n=77)和脓毒症休克组(n=43)。另选健康体检者60例为健康组。比较各组血清Del-1、KS差异。采用Pearson相关法分析血清Del-1、KS与序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)的相关性;应用logistic回归分析脓毒症患者28 d死亡的危险因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析Del-1、KS对脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果脓毒症休克组及脓毒症组患者的血清Del-1水平均高于健康组,且脓毒症休克组高于脓毒症组患者;脓毒症休克组及脓毒症组患者血清KS水平均低于健康组,且脓毒症休克组低于脓毒症组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组患者的血清Del-1水平高于存活组,KS水平低于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患者血清Del-1与SOFA评分、APACHEⅡ评分呈正相关,血清KS与SOFA评分、APACHEⅡ评分呈负相关。ROC曲线显示,血清Del-1及KS联合检测预测脓毒症患者死亡的曲线下面积、敏感度和特异度分别为0.912、0.909和0.771。结论脓毒症患者的血清Del-1、KS是评估脓毒症病情严重程度及不良预后的重要指标,两项联合检测有助于监测、评估脓毒症患者的病情变化及预后,对及时治疗脓毒症患者有指导意义。

孕早期血清人组织激肽释放酶结合蛋白对早发型子痫前期的预测价值

目的评估孕早期血清人组织激肽释放酶结合蛋白(kallistatin,KS)水平对早发型子痫前期(early onset preeclampsia,EOPE)的预测价值。方法回顾性分析2020年3~11月海口市妇幼保健院产科110例PE孕妇的临床和实验室参数,根据PE类型分为55例EOPE(EOPE组)和55例晚发型PE(LOPE组),并选择55例胎龄匹配(±1周)、无妊娠并发症且胎龄适宜的孕妇作为对照组。采集5~13孕周的外周血,检测血清KS水平。用Logistic回归模型估计血清KS水平预测EOPE的优势比。受试者特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线评估各指标预测EOPE的曲线下面积。结果EOPE组孕妇血清KS水平低于对照组,子宫动脉搏动指数(pulsatile index,PI)和收缩压高于对照组,且分娩孕周相对更早,差异均有统计学意义(P<0.05)。EOPE组孕妇血清KS水平低于LOPE组(P<0.05),LOPE组孕妇血清KS水平和子宫动脉PI值与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。经ROC曲线分析,血清KS预测EOPE的最佳截断值为28.60 ng/mL(AUC=0.725,95%CI:0.603-0.848,P<0.001)。经多因素Logistic回归分析,舒张早期切迹(单侧和双侧)、血清KS≤28.60 ng/mL是预测EOPE风险的独立危险因素(P<0.05)。血清KS≤28.60 ng/mL联合子宫动脉平均PI>相应孕周PI值的95个百分位用于预测EOPE的敏感度、特异度分别为59.1%、95.0%。结论孕早期血清KS水平降低与EOPE密切相关,检测孕早期血清KS水平可提高子宫动脉PI值和舒张早期切迹预测EOPE的灵敏度。

组织型激肽释放酶通过诱导自噬对缺血性脑卒中发挥保护作用

目的:通过在体实验研究组织型激肽释放酶(TK)对缺血性卒中的神经保护作用是否与诱导保护性自噬有关。方法:成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水(NS)组、TK组、3-MA组和3-MA+TK组,每组11只。假手术组和NS组分别于侧脑室注射NS,TK组和3-MA组分别于侧脑室注射TK和自噬抑制剂3-MA,3-MA+TK组先注射3-MA,30 min后再注射TK。各组完成侧脑室给药后,采用线栓法建立永久性大脑中动脉缺血模型(pMCAO)。在缺血后12 h,采用Longa评分法评估各组大鼠的神经功能。完成神经损伤评分后,TTC染色检测各组大鼠脑梗死体积,免疫印迹实验检测各组自噬相关蛋白LC3和p62的表达水平。结果:NS组大鼠缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ较假手术组表达升高,p62水平降低(均P<0.01)。与NS组相比,TK组缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ表达增高,p62水平降低(均P<0.01),大鼠神经功能损伤较轻、脑梗死体积明显缩小(均P<0.01);与TK组比较,3-MA组缺血脑皮质LC3-Ⅱ的表达降低和p62的水平水平较高,大鼠神经功能损伤较重、脑梗死体积较大(均P<0.01);与TK组相比,3-MA+TK组大鼠神经损伤评分增加、脑梗死体积明显增加(均P<0.01)。结论:TK对缺血性卒中大鼠具有神经保护作用,其机制与诱导自噬发生有关。

重组人组织激肽释放酶结合蛋白的高密度毕赤酵母表达、纯化和生物学活性

研究重组人组织激肽释放酶结合蛋白(rHKal)的高密度毕赤酵母表达、纯化以及生物学活性。以质粒pPIC9-Kal/GS115(His4)转化毕赤酵母细胞,在7.5 L培养罐内高密度细胞发酵,以1%～2%的甲醇诱导表达rHKal。发酵上清液经疏水层析、亲和层析和凝胶层析分离rHKal。通过MTT及小管形成实验评价rHKal对HUVEC的生物学活性。收获发酵上清液内rHKal的表达水平为50 mg.L 1,纯化后rHKal原液的纯度达98%以上。rHKal对HUVEC的增殖抑制活性呈剂量依赖性,但对其小管形成抑制作用的量效关系呈U型曲线。rHKal具有新生血管形成抑制活性,本研究为rHKal的生产提供了有效方法。

人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达

将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 。

激肽释放酶结合蛋白对大鼠视神经不完全损伤后视网膜神经细胞的保护作用及轴突再生的研究

目的探讨激肽释放酶结合蛋白(KBP)是否对体内视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存在保护和促进其轴突再生的作用。方法在距SD大鼠视神经球侧端0.5～1.0mm的地方夹持视神经,造成大鼠视神经不完全性损伤;在大鼠视神经损伤的模型中,行玻璃体腔分别注入KBP作为实验组和PBS为对照组;分别于损伤后7d,14d和21d取材,HE染色观察视网膜结构、测量视网膜厚度及RGCs的存活数量;提取术眼视神经行蛋白免疫印迹。根据统计学分析结果,明确KBP是否有视网膜神经节细胞保护和促进其轴突再生作用。结果①大鼠不完全视神经损伤模型建立成功。②通过HE染色,我们观察了视网膜各层结构变化,通过双盲法计数RGCs,和视网膜厚度测量,经统计学分析,组间差异具有统计学意义。③对神经再生的标记蛋白GAP-43进行Western-blot,统计学分析,组间GAP-43表达差异具有统计学意义。结论①KBP对视神经损伤后的RGCs具有保护作用。②KBP在视神经损伤后可能促进了视神经的轴突再生。

人组织激肽释放酶在肝癌中的研究进展

肝癌是一种高度恶性的消化系统肿瘤,因其早期无典型症状,不易引起人们重视,一旦确诊已是进展期或晚期。人组织激肽释放酶(KLKs)是丝氨酸蛋白酶家族中一种具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶性质的蛋白水解酶亚群,与恶性肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关,可以作为一些恶性肿瘤的生物学标志物应用于疾病的早期筛查、明确诊断、个性化治疗以及预后评估等临床实践中。本文综述了KLKs基因及其在肝癌中的表达调控、作用机制、化疗敏感性及预后价值。

人组织型激肽释放酶基因对2型糖尿病大鼠AMP激活的蛋白激酶活性的影响

目的研究人组织型激肽释放酶(humantissue kallikrein,HK)基因对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病(diabete mellitus,DM)大鼠AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活性的影响。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为普通饲料组,即正常对照组(n=16),和高脂高糖饲料组(n=32),高脂高糖饲料组大鼠以小剂量STZ加高脂高糖饮食诱导2型DM,再将其随机分为两组,分别经尾静脉导入重组腺相关病毒(recom-binant adeno-associated viruses,rAAV)介导的HK基因(HK组)以及报告基因beta-半乳糖苷酶(beta-galactosidase,Lacz)(Lacz组),观察12周后处死实验动物,留取心脏、肝脏、肾脏等组织。Western blot法检测HK在各脏器的表达以及AMPK的表达及其磷酸化水平(phospho-AMPK)。结果rAAV介导的HK可在2型DM大鼠的肝脏、肾脏、心脏组织表达,且HK组各脏器中HK蛋白表达显著高于Lacz组(均P<0.05)。Western blot检测发现,在肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌、脂肪等脏器中,HK组和Lacz组AMPK的表达与正常对照组比较,差异无显著性意义(均P>0.05),而HK组phospho-AMPK较正常对照组显著上调(P<0.05),Lacz组phospho-AMPK与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论rAAV载体介导的HK基因能够激活2型DM大鼠主要器官AMPK的表达。

组织激肽释放酶与基质金属蛋白酶抑制剂在血管重构中的研究进展

血管重构是动脉粥样硬化、高血压、血管再狭窄等血管重塑性疾病的病理生理过程。近年来研究表明,细胞因子和生长因子诱导的血管平滑肌细胞发生表型转化,丧失收缩功能并获得增殖、迁移和分泌细胞外基质的能力是该类疾病形成与发展的根本原因。现就组织激肽释放酶或基质金属蛋白酶抑制物,对血管重构的影响及其基因治疗在血管重构中的研究进展进行综述,为抗血管重塑性疾病提供新的治疗思路。

卵巢上皮性肿瘤组织中人组织激肽释放酶15和CA125蛋白的表达

目的:检测卵巢上皮性肿瘤组织中人组织激肽释放酶15(KLK15)和CA125蛋白的表达。方法:采用免疫组化SP法检测10例正常卵巢组织、18例卵巢良性肿瘤组织、16例卵巢交界性肿瘤组织和64例卵巢恶性肿瘤组织中KLK15与CA125蛋白的表达。结果:上述4种组织中KLK15蛋白的阳性表达率分别为10.0%、16.7%、62.5%和64.1%,4种组织相比,差异有统计学意义(χ2=20.432,P<0.001);4种组织中CA125蛋白的阳性表达率分别为0.0%、5.6%、37.5%和71.9%,4种组织相比,差异有统计学意义(χ2=37.448,P<0.001)。KLK15蛋白的表达与卵巢癌患者的临床分期、病理分级及淋巴结转移有关(χ2=3.90,P=0.048;χ2=4.84,P=0.028;χ2=5.49,P=0.019)。CA125蛋白的表达与卵巢癌患者的病理类型有关(χ2=37.49,P<0.001)。卵巢浆液性癌组织中KLK15与CA125蛋白的表达有关联(rP=0.334,P=0.033)。结论:KLK15蛋白对卵巢上皮性癌的诊断具有一定的价值,可能作为其预后判断的指标。KLK15与CA125蛋白联合检测可能有助于提高卵巢上皮性癌诊断的准确性。

血浆人源性激肽释放酶结合蛋白水平对严重脓毒症患者预后评估的意义

目的:探讨血浆人源性激肽释放酶结合蛋白(Kal)水平对严重脓毒症患者预后评估的意义。方法:选择严重脓毒症和脓毒性休克患者88例。根据60 d后患者临床结局分为存活组(58例)和死亡组(30例)。比较2组患者在临床特征方面的差异,探讨Kal水平与各临床参数之间相关性及影响严重脓毒症和脓毒性休克患者预后的因素。结果:2组患者在年龄、急性呼吸窘迫综合征例数、脓毒性休克例数、APACHEⅡ评分、SOFA评分、ICU时间、机械通气时间、Kal水平、CRP水平方面差异显著(均P <0. 05)。Kal水平与年龄、急性呼吸窘迫综合征、有创机械通气、脓毒性休克、APACHEⅡ评分、SOFA评分、ICU时间、机械通气时间、CRP水平呈负相关(均P <0. 05)。APACHEⅡ评分高、SOFA评分高、Kal水平偏低、CRP水平偏高是影响严重脓毒症和脓毒性休克患者预后的危险性因素(均P <0. 05)。其中,入住ICU时血浆Kal水平<4μg/mL提示患者预后差。结论:入住ICU时血浆Kal水平<4μg/m L提示严重脓毒症和脓毒性休克患者预后不良,血浆Kal水平可作为严重脓毒症和脓毒性休克患者预后评估的重要指标。

酸敏感离子通道蛋白与组织型激肽释放酶相互作用的研究

目的:观察酸敏感离子通道蛋白(ASIC1a、ASIC2a)与组织型激肽释放酶(TK)之间是否存在相互作用。方法:RT-PCR分别获得小鼠TK、ASIC1a、ASIC2a全长cDNA,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/Myc-his中,脂质体法分别将pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-ASIC1a、pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-ASIC2a共转染至人胚胎肾细胞(HEK293T),免疫共沉淀分别用抗Myc及抗TK抗体观察两者间有无相互作用。将ASICs融合蛋白与TK(100μg/mL)共孵育,SDS-PAGE分别用抗Myc及抗TK抗体检测蛋白表达。结果:pcDNA3.1-TK和pcD-NA3.1-ASIC1a、pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-ASIC2a共转染后,SDS-PAGE显示抗TK抗体检测后在转染细胞内见有56 kDa的TK条带出现,但抗Myc抗体作用未见ASICs目的条带出现。纯化的ASIC1a、ASIC2a融合蛋白与TK共孵育后,SDS-PAGE显示抗Myc抗体检测后在约66 kDa处有融合蛋白表达条带,但抗TK抗体检测后在56 kDa处无条带出现。结论:TK与ASIC1a、TK与ASIC2a之间无相互作用。