组织激肽释放酶家族在病原微生物感染中的作用

组织激肽释放酶(tissue kallikrein-related peptidase, KLK)家族是丝氨酸蛋白酶家族中一种具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶性质的蛋白水解酶亚群,有15个家族蛋白,分别为KLK1~KLK15。近年来,越来越多的研究表明,KLK家族可通过切割病毒和细菌关键蛋白、激活多种宿主受体、调控激肽系统等方式参与机体的多种生理活动,影响着病毒、细菌和真菌中多种病原微生物感染的进程,作用机制复杂且广泛。本文通过对近年来KLK家族蛋白在微生物感染中的作用和机制进行综述,以更好地探究KLK在微生物感染中的重要作用,特别是为其在结核分枝杆菌感染中的研究提供思路,也为KLK家族蛋白作为抗结核治疗靶点提供理论基础。

难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶、组织蛋白酶B的表达及其临床意义

目的:探讨难治性癫痫儿童血浆激肽释放酶(KLK)、组织蛋白酶B(catB)表达及其临床意义.方法:选取2017年3月至2019年3月河南中医药大学第五临床医学院收治的难治性癫痫患儿43例为研究对象,纳入研究组.选择同期在本院治疗的治疗有效癫痫患儿,同期在本院体检的健康儿童作为对照,分别纳入治疗有效组(n=35)及对照组(n=50).①对3组受试儿血浆KLK、catB,白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平分别进行统计学分析.②分析研究组患儿血浆KLK、catB水平,分别与其血浆IL-8、IL-6、TNF-α水平的相关关系.③受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC),对难治性癫痫的诊断截断值、诊断灵敏度及特异度.④采取多因素非条件Logistic回归分析难治性癫痫临床诊断的独立影响因素.结果:①研究组患儿血浆KLK、catB、IL-6、IL-8、TNF-α水平,均显著高于对照组、治疗有效组,并且差异均有统计学意义(P<0.05).②研究组患儿血浆KLK、catB水平与其IL-6、IL-8、TNF-α水平,均呈正相关关系(r=0.625、0.628、0.657,0.634、0.619、0.664,P<0.05).③血浆KLK、catB水平ROC曲线的AUC分别为0.889、0.856,对难治性癫痫的诊断截断值分别为3.99 U/mL、3.66 U/mL,二者单独诊断难治性癫痫的灵敏度分别为72.10%、72.10%,特异度分别为92.00%、94.00%;二者联合诊断的AUC为0.950,灵敏度为86.00%,特异度为90.70%.④血浆KLK高表达(OR=2.652,95%CI:1.668~4.218,P<0.05),以及catB高表达(OR=2.635,95%CI:1.704~4.075,P<0.05),均是导致患儿发生难治性癫痫的独立危险因素.结论:难治性癫痫儿童血浆KLK、catB水平高表达,对难治性癫痫患儿的临床诊断具有重要参考价值.

前列腺癌激肽释放酶3 mRNA表达与前列腺癌病理特征的相关性

目的:探究前列腺癌激肽释放酶3(klk3)mRNA表达与前列腺癌病理特征的相关性。方法:选取39例前列腺增生患者(良性组)、57例无家族遗传史的前列腺癌患者(非家族遗传组)、29例家族遗传性前列腺癌患者(家族遗传组)为研究对象。分析klk3 mRNA表达与前列腺癌临床病理特征的关系。结果:家族遗传组外周血klk3 mRNA水平高于非家族遗传组、良性组(P<0.05)。外周血klk3 mRNA水平诊断家族性前列腺癌的曲线下面积(AUC)为0.843,灵敏度为62.07%,特异度为96.49%。Logistic回归显示,外周血klk3 mRNA水平为家族性前列腺癌发生的危险因素(P<0.05)。Gleason评分8~10分患者的外周血klk3 mRNA水平高于Gleason评分7分、6分患者,肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期患者的外周血klk3 mRNA水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者,Psa水平>20 ng/mL患者的外周血klk3 mRNA水平高于Psa水平10~20 ng/mL及<10 ng/mL患者(P<0.05)。结论:klk3基因mRNA表达对家族遗传性前列腺癌具有诊断价值,且与Gleason评分、肿瘤分期等病理特征有关。

血清沉默信息调节因子6、人激肽释放酶抑制剂对急性心肌梗死伴心力衰竭预后的预测价值

目的探讨急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清沉默信息调节因子6(SIRT6)、人激肽释放酶抑制剂(Kallistatin)的表达水平对预后的预测价值。方法选择2021年1月至2023年1月安阳市人民医院收治的急性心肌梗死伴心力衰竭病人123例作为疾病组,治疗90 d后将其分为预后不佳组(n=77)和预后良好组(n=46),选取同一时期进行健康体检的123例志愿者作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISE)检测血清SIRT6、Kallistatin表达水平,收集入选者心功能指标[左室收缩末期容积指数(LVESVI)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期容积指数(LVEDVI)];采用Pearson法分析急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清SIRT6、Kallistatin与LVESVI、LVEF、LVEDVI的相关性;运用ROC曲线评估血清SIRT6、Kallistatin水平对急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后不佳的预测价值。结果与对照组相比,急性心肌梗死伴心力衰竭病人LVEF[(56.98±8.29)%比(68.21±10.12)%]、血清SIRT6[(5.08±0.87)μg/L比(7.12±1.26)μg/L]、Kallistatin[(6.51±1.01)mg/L比(8.24±1.38)mg/L]水平较低(P<0.05),LVEDVI、LVESVI较高(均P<0.05),且病人血清SIRT6、Kallistatin与LVEF呈正相关,与LVEDVI、LVESVI呈负相关性(均P<0.01)。与预后良好组相比,预后不佳组血清SIRT6、Kallistatin水平均明显较低(P<0.05);血清SIRT6、Kallistatin预测急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后不佳的AUC分别为0.860、0.884,血清SIRT6、Kallistatin联合检测预测预后不佳的AUC(0.945)高于单独检测(Z_(二者联合-SIRT6)=2.72、Z_(二者联合-Kallistatin)=2.18,P=0.007、0.029)。结论急性心肌梗死伴心力衰竭病人血清SIRT6、Kallistatin水平明显降低,二者联合对急性心肌梗死伴心力衰竭病人预后具有较好的预测价值。

老年急性脑梗死患者血清磷酸化tau蛋白181与激肽释放酶6的表达及对发病后睡眠障碍的预测价值

目的观察老年急性脑梗死(ACI)患者血清磷酸化tau蛋白181(P-tau-181)和激肽释放酶6(KLK6)水平变化,并探讨其与患者发病后睡眠障碍的关系。方法选择2020年5月至2022年5月海安市人民医院收治的158例老年ACI患者作为观察对象,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,将其分为轻度组(40例)、中度组(81例)和重度组(37例);患者发病后根据匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分,将其分为睡眠障碍组(56例)和睡眠良好组(102例);患者血清P-tau-181和KLK6水平选择酶联免疫吸附法检测;采用logistic回归分析法对老年ACI患者发病后睡眠障碍的影响因素进行分析;采用受试者工作特征曲线分析血清P-tau-181和KLK6水平对老年ACI患者发病后睡眠障碍的诊断价值。结果重度组ACI患者血清P-tau-181、KLK6水平显著高于轻度组和中度组(P<0.05),中度组血清P-tau-181、KLK6水平显著高于轻度组(P<0.05)。与睡眠良好组患者相比较,睡眠障碍组有卒中家族史、有吸烟史以及有饮酒史患者比例及血清P-tau-181、KLK6水平较高(P<0.05)。血清P-tau-181及KLK6水平是影响老年ACI患者发病后睡眠障碍的独立危险因素(P<0.05)。血清P-tau-181、KLK6以及两者联合诊断老年ACI患者发病后发生睡眠障碍的ROC曲线下面积分别为0.844、0.826和0.924,联合诊断效能高于单独检测(Z=2.030,P=0.042;Z=2.340,P=0.019)。结论老年ACI患者血清中P-tau-181及KLK6高表达可能与其发病后睡眠障碍有重要联系,且两者联合预测老年ACI患者发病后睡眠障碍效能高于单独检测。

游离前列腺特异性抗原与总前列腺特异性抗原的比值、腺激肽释放酶2在前列腺癌诊断中的价值

目的:探究游离前列腺特异性抗原(fPSA)与总前列腺特异性抗原(tPSA)的比值、腺激肽释放酶2(hK2)在前列腺癌诊断中的价值。方法:回顾性选择2019年1月~2023年12月厦门大学附属翔安医院思明院区进行前列腺系统性穿刺活检患者120例,依据病理结果分为前列腺组48例,良性前列腺增生组72例。比较两组患者hK2和前列腺特异性抗原(PSA)水平、不同tPSA分区情况、不同分区fPSA/tPSA水平、分析前列腺癌的危险因素、评估fPSA/tPSA联合hK2在前列腺癌诊断中的价值。结果:前列腺癌组患者hK2和PSA水平均高于良性前列腺增生组,差异有统计学意义(P<0.05);前列腺癌组tPSA≤4 ng/ml患者比例(43.75%)与tPSA>10 ng/ml患者比例(45.83%)均高于良性前列腺增生组,差异有统计学意义(43.06%,29.17%,P<0.05);两组患者在tPSA≤4 ng/ml区tPSA和fPSA/tPSA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);在4 ng/ml<tPSA≤10 ng/ml区,两组患者tPSA水平差异无统计学意义(P>0.05),前列腺癌组患者fPSA/tPSA水平低于良性前列腺增生组,差异有统计学意义(P<0.05);在tPSA>10 ng/ml区,前列腺癌组患者tPSA水平高于良性前列腺增生组,差异有统计学意义(P<0.05),fPSA/tPSA水平低于良性前列腺增生组,差异有统计学意义(P<0.05);前列腺癌患病风险随着fPSA/tPSA与hK2水平升高而增加;fPSA/tPSA联合hK2与患有前列腺癌风险曲线下面积(AUC)为0.904(95%CI:0.833~0.980),灵敏度90.15%,特异度84.38%。结论:fPSA/tPSA、hK2对患有前列腺癌的评估有较高的准确度和灵敏度,有助于前列腺癌的早期诊断治疗。

激肽释放酶-10在甲状腺乳头状癌进展中的作用和调节机制

目的探究激肽释放酶-10(KLK10)在甲状腺乳头状癌(PTC)进展中的作用和调节机制。方法实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测PTC患者组织和细胞系中KLK10表达水平。通过CCK-8和Annexin-V/PI凋亡检测试剂盒分别检测细胞活力和凋亡率。此外,测定各组细胞葡萄糖消耗、乳酸产生和ATP浓度。蛋白免疫印迹检测FAK/SRC/PI3K/AKT轴相关蛋白表达。结果与正常组相比,PTC组织和细胞中KLK10 mRNA和蛋白水平增加,具有显著性差异(P<0.01)。沉默KLK10细胞活力较对照组减弱,而细胞凋亡较对照组增强。同时,与si-NC组相比,si-KLK10组葡萄糖消耗、乳酸产生和ATP浓度均减少,具有显著性差异(P<0.01)。而KLK10过表达组的结果与沉默KLK10组相反。此外,与对照组相比,KLK10过表达组FAK、SRC、PI3K和AKT的磷酸化水平增加。结论KLK10通过FAK/SRC/PI3K/AKT轴调节甲状腺乳头状癌患者葡萄糖代谢和恶性进展。

组织型激肽释放酶通过诱导自噬对缺血性脑卒中发挥保护作用

目的:通过在体实验研究组织型激肽释放酶(TK)对缺血性卒中的神经保护作用是否与诱导保护性自噬有关。方法:成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水(NS)组、TK组、3-MA组和3-MA+TK组,每组11只。假手术组和NS组分别于侧脑室注射NS,TK组和3-MA组分别于侧脑室注射TK和自噬抑制剂3-MA,3-MA+TK组先注射3-MA,30 min后再注射TK。各组完成侧脑室给药后,采用线栓法建立永久性大脑中动脉缺血模型(pMCAO)。在缺血后12 h,采用Longa评分法评估各组大鼠的神经功能。完成神经损伤评分后,TTC染色检测各组大鼠脑梗死体积,免疫印迹实验检测各组自噬相关蛋白LC3和p62的表达水平。结果:NS组大鼠缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ较假手术组表达升高,p62水平降低(均P<0.01)。与NS组相比,TK组缺血侧脑皮质LC3-Ⅱ表达增高,p62水平降低(均P<0.01),大鼠神经功能损伤较轻、脑梗死体积明显缩小(均P<0.01);与TK组比较,3-MA组缺血脑皮质LC3-Ⅱ的表达降低和p62的水平水平较高,大鼠神经功能损伤较重、脑梗死体积较大(均P<0.01);与TK组相比,3-MA+TK组大鼠神经损伤评分增加、脑梗死体积明显增加(均P<0.01)。结论:TK对缺血性卒中大鼠具有神经保护作用,其机制与诱导自噬发生有关。

血清组织激肽释放酶6和簇集素在血管性痴呆患者中的表达及临床意义

目的探究血清组织激肽释放酶6(KLK6)和簇集素(CLU)在血管性痴呆(VD)患者中的表达及临床意义。方法选取2020年7月至2021年8月空军军医大学第二附属医院收治的95例VD患者作为VD组,另选取同期来该院体检的健康者90例作为对照组。比较不同组别中血清KLK6、CLU水平差异。通过Pearson相关分析KLK6、CLU与简易精神状态量表(MMSE)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估KLK6、CLU对VD患者预后发生重度功能障碍的诊断价值。结果VD组患者血清KLK6、CLU水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着VD患者病情严重程度的增加,血清KLK6和CLU水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着VD患者神经功能缺损程度的增加,血清KLK6和CLU水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清KLK6、CLU水平与MMSE评分呈负相关,而与NIHSS评分呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,KLK6和CLU检测的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.761(Z=7.221,P<0.05;Z=3.392,P<0.05)。KLK6、CLU两项指标联合检测的AUC为0.873(95%CI:0.838~0.945),其灵敏度和特异度分别为90.48%和79.73%(Z=7.219,P<0.05)。结论VD患者血清KLK6和CLU水平与病情程度及神经功能缺损程度关系密切,二者联合检测对VD患者预后发生重度功能障碍具有良好的诊断效能,可为临床实施早期干预治疗提供科学依据。

组织激肽释放酶在皮肤病发病机制中的作用研究进展

组织激肽释放酶(KLKs)家族由15种丝氨酸蛋白酶组成,广泛表达于各种组织,参与机体多种生理与病理进程。其中KLKs家族因KLK1在激肽释放酶-激肽系统中的作用,以及KLK3作为前列腺癌筛查生物标记物的临床应用而闻名。在皮肤组织中,KLKs调控角质形成细胞脱落和增殖,是内瑟顿综合征(NS)和特应性皮炎(AD)的重要致病基因。此外,越来越多的证据表明KLKs还参与炎性反应信号激活、瘙痒信号传递、抗菌肽活性裂解等多种皮肤病理过程,与银屑病、玫瑰痤疮、黑色素瘤等皮肤疾病的发生发展有关。本文主要介绍KLKs在皮肤中的生理功能及病理意义,以及KLKs在皮肤病中的研究进展。

卵巢上皮性癌组织中激肽释放酶7及14的表达及临床意义

目的研究激肽释放酶(kallikrein,KLK)7及KLK14在卵巢上皮性癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR及Western-blot技术测定KLK7及KLK14在50例不同临床分期、不同组织分级的卵巢上皮性癌中mRNA及蛋白表达。结果KLK7在卵巢癌中表达明显增高,且低分化组织较高分化组织表达高(P<0.01);KLK14在卵巢癌中表达亦增高(P<0.05),且晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)明显高于早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期,P<0.01);G3级卵巢癌高于G1、G2级卵巢癌(P<0.05)。结论KLK7、KLK14在卵巢癌的发生及转移中有潜在促进作用。

卵巢上皮性癌组织中人组织激肽释放酶基因14的表达

目的:检测卵巢上皮性癌组织中人组织激肽释放酶基因14(KLK14)mRNA和蛋白的表达。方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测正常卵巢、良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤和卵巢上皮性癌组织中KLK14mRNA和蛋白的表达,分析其表达与卵巢上皮性癌患者临床病理特征的关系。结果:卵巢上皮性癌组织中KLK14mRNA的相对表达量(1.36±0.24)高于正常卵巢组织(0.63±0.19)(t=8.432,P<0.001);卵巢上皮性癌组织中KLK14蛋白的阳性表达率为61.4%,与正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤和交界性卵巢肿瘤相比,差异有统计学意义(χ2=21.648,P<0.001)。KLK14蛋白的表达与卵巢上皮性癌的FIGO分期(χ2=5.759,P=0.016)、组织学分级(χ2=4.671,P=0.031)和淋巴结转移(χ2=8.254,P=0.004)相关。结论:KLK14可能参与了卵巢上皮性癌的侵袭和转移。

人组织激肽释放酶在肝癌中的研究进展

肝癌是一种高度恶性的消化系统肿瘤,因其早期无典型症状,不易引起人们重视,一旦确诊已是进展期或晚期。人组织激肽释放酶(KLKs)是丝氨酸蛋白酶家族中一种具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶性质的蛋白水解酶亚群,与恶性肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关,可以作为一些恶性肿瘤的生物学标志物应用于疾病的早期筛查、明确诊断、个性化治疗以及预后评估等临床实践中。本文综述了KLKs基因及其在肝癌中的表达调控、作用机制、化疗敏感性及预后价值。

组织激肽释放酶8在神经系统疾病中作用的研究进展

组织激肽释放酶8(KLK8)与中枢神经系统的联系极为紧密,通过改变突触间的黏附关系和细胞外基质分子从而改变突触形态,调节突触可塑性,最终参与多种神经系统疾病的病理过程。本文针对KLK8的生理特性,对其在神经系统疾病如情绪障碍、阿尔茨海默病、癫痫、多发性硬化中的作用与发病机制进行综述。期待能够为神经系统疾病诊断和预后提供理论依据,为此类疾病的研究提供方向。

人类组织激肽释放酶基因14与卵巢癌研究进展

人类组织激肽释放酶14属于人类组织激肽释放酶家族中的一员,由人类组织激肽释放酶基因14编码,定位于人类染色体19q13.3-13.4上,受甾体类激素调节,其功能可能有降解胶原IV等细胞外基质作用,但具体尚不十分清楚。部分研究表明人类组织激肽释放酶基因14与卵巢癌的生长、转移和浸润有关,对卵巢癌的早期诊断、临床监测和判断预后具有一定价值。

降压宝蓝片对SHR肾损害及激肽释放酶-激肽系统的影响

目的探讨降压宝蓝片对自发性高血压大鼠(SHR)肾损害及激肽释放酶-激肽系统(KKS)的影响。方法30只12周龄雄性SHR随机分为模型(SHR)组(0.5%羧甲基纤维素钠)、依那普利组(0.02 g/kg依那普利)、降压宝蓝片组(0.6 g/kg降压宝蓝片),另设同龄正常血压的雄性WKY大鼠为对照(WKY)组(0.5%羧甲基纤维素钠),灌胃给药,连续12 w。取肾组织,苏木素-伊红(HE)及马松三色(Masson)染色观察肾小球硬化指数(GSI)及肾组织间质胶原蛋白容积分数(CVF)变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肾组织匀浆液低分子量激肽原(LK)、组织激肽释放酶(TK)、缓激肽(BK)、前列环素(PG)I2;Western印迹测定肾组织缓激肽2型受体(B2R)蛋白表达。结果与WKY组比较,SHR组GSI和CVF显著增加(P<0.01),肾组织BK、PGI2含量及B2R蛋白表达显著降低(P<0.05)。降压宝蓝片能显著降低SHR大鼠GSI、CVF(P<0.01),明显升高肾组织PGI2含量及B2R蛋白表达(P<0.05),对BK、TK、LK含量有升高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论降压宝蓝片对SHR有肾保护作用,部分作用机制与激活KKS活性有关。

外周血脑型脂肪酸结合蛋白和激肽释放酶6对高龄髋关节置换患者术后认知功能障碍的预测价值

目的 探讨外周血脑型脂肪酸结合蛋白(B-FABP)和激肽释放酶6(KLK6)对高龄髋关节置换患者术后认知功能障碍(POCD)的预测价值。方法 选取145例高龄髋关节置换患者,根据术后7 d的蒙特利尔认知功能量表(MoCA)评估结果分为POCD组(n=39)和非POCD组(n=106)。比较2组患者术前及术后3、7 d血清B-FABP和KLK6水平;采用Pearson法分析不同时点血清指标与MoCA评分的相关性;采用单因素和多因素Logistic回归分析确定POCD发生的影响因素;应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清指标对POCD的诊断效能。结果 POCD组术后3、7 d的B-FABP高于非POCD组,KLK6低于非POCD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,认知功能障碍评分与术后3、7 d的B-FABP呈负相关(r=-0.469、-0.341,P<0.05),认知功能障碍评分与术后3、7 d的KLK6呈正相关(r=0.891、0.473,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,术后3 d的B-FABP(OR=1.898, 95%CI:1.202~2.997)、术后7 d的B-FABP(OR=1.669, 95%CI:1.125~2.474)、术后3 d的KLK6(OR=0.676, 95%CI:0.553~0.828)和术后7 d的KLK6(OR=0.604, 95%CI:0.400~0.912)是POCD发生的影响因素。ROC曲线显示,当术后3 d的B-FABP临界值为156.34 ng/L时,其对应的敏感度为69.23%,特异度为70.75%,曲线下面积(AUC)为0.801(95%CI:0.750~0.852);当术后7 d的B-FABP临界值为133.02 ng/L时,其对应的敏感度为71.79%,特异度为71.70%,AUC为0.760(95%CI:0.707~0.812);当术后3 d的KLK6临界值为5.52μg/L时,其对应的敏感度为58.97%,特异度为60.38%,AUC为0.631(95%CI:0.564~0.698);当术后7 d的KLK6临界值为6.01μg/L时,其对应的敏感度为61.54%,特异度为63.21%,AUC为0.708(95%CI:0.645~0.772);根据Logistic回归结果建立上述4个指标联合应用的风险预测模型,当模型临界值为1.29(去常数项)时,对应的敏感度为82.05%,特异度为80.19%,AUC为0.869(95%CI:0.831~0.907)。结论 血清B-FABP和KLK6与髋关节置换患者POCD发生密切相关,单独和联合检测时可有效预测POCD的发生,临床应根据指标进行干预。

激肽释放酶——激肽系统与缺血性脑卒中

脑卒中是全球第二大死亡原因,其高致死率和高致残率严重危害人类健康。卒中通常分为缺血性和出血性卒中两种,其中87%的病例属于缺血性卒中[1]。目前,组织型纤溶酶原激活剂是FDA唯一批准的用于缺血性脑卒中患者的治疗方式,但由于治疗时间窗狭窄以及会使得患者脑出血并发症风险增加,很少有患者能从这种治疗中获益[2]。越来越多的证据表明,激肽释放酶———激肽系统(Kallikrein-kinin system,KKS)与缺血性脑卒中密切相关,但其保护作用备受研究人员的争议[3~7]。这可能与KKS对脑内不同细胞发挥不同作用有关,本文将针对KKS对缺血性脑卒中后不同类型脑细胞的影响进行综述。

人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达

将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 。

人激肽释放酶10在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的:研究人激肽释放酶10(hK10)在卵巢癌组织中的表达,探讨hK10基因在卵巢癌早期诊断研究中的意义。方法:①应用4097靶基因点基因芯片对5例卵巢浆液性囊腺癌及5例正常卵巢组织进行基因表达谱分析,筛查差异表达基因。②应用RT-PCR检测32例卵巢浆液性囊腺癌组织、20例卵巢浆液性囊腺瘤组织及16例正常卵巢组织中hK10表达并对比分析。结果:①基因芯片筛查出差异表达基因58个,其中表达增高(上调趋势)基因30个,表达降低(下调趋势)基因28个,hK10基因为表达上调基因(Cy5/Cy3=3.031)。②hK10基因在正常卵巢及卵巢瘤组织中有弱表达(0.023±0015和0.023±0.045),在卵巢癌组织中表达明显增强(0.106±0.045),hK10基因在卵巢癌组的表达明显高于正常卵巢组及卵巢瘤组(P<0.01)。结论:基因芯片能够用于筛查卵巢癌差异表达基因;hK10基因在卵巢癌组织表达明显增强,有望成为卵巢癌的肿瘤标志物。