直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨

目的建立直接多肽结合试验(DPRA)和人细胞系活化试验(h-CLAT)的皮肤致敏组合检测方法,对化学品及植物提取物的致敏性进行初筛。方法选择12种化学品和7种植物提取物为受试物,把不同受试物分别与两种肽(半胱氨酸肽和赖氨酸肽)共孵育24 h,采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。同时将不同浓度的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)共孵育24 h,通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标志物CD86和CD54的变化。再进一步比较DPRA和h-CLAT预测结果的一致性。结果 DPRA方法和h-CLAT方法准确区分了12种化学品的皮肤致敏性,其中2种判定为阴性,10种判定为阳性,两种方法检测结果一致。DPRA对植物提取物致敏性的预测中,除绿茶提取物无法判定外,其余6种均为皮肤致敏疑似物质。h-CLAT预测中,除绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物,其余4种植物提取物为致敏物。DPRA与h-CLAT预测的一致性为0.57。结论 DPRA与h-CLAT的简单组合可以实现对单一化合物的准确预测,对于复杂混合物可实现初步预测,确认需要进一步组合其他方法。

应用in silico模型优化形成皮肤致敏性体外替代方法整合测试策略的研究

皮肤致敏又称过敏性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD),是皮肤反复接触致敏物质后引发的迟发型超敏反应。皮肤致敏性筛查是外用制剂和化妆品等皮肤接触类产品安全性评价的重要内容。目前我国皮肤致敏性检测中最普遍采用的仍是动物试验,如豚鼠局部封闭涂皮试验(Buehler test)、豚鼠最大值试验(GPMT test)和小鼠局部淋巴结试验(LLNA),需使用相当数量的动物。2013年,欧盟颁布了关于化妆品检测时使用实验动物的禁令。