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壳寡糖对人结肠癌LoVo细胞株生长的影响 被引量:20
1
作者 刘莹 柳红 《徐州医学院学报》 CAS 2002年第2期148-151,共4页
目的 探讨壳寡糖对人结肠癌LoVo细胞株生长的影响。方法 用细胞计数法比较不同浓度壳寡糖作用下细胞生长情况 ,苏木精 -伊红染色后 ,光镜下观察细胞生长情况及病理变化。结果 高浓度壳寡糖 (10 0、2 0 0、40 0mg/L)对LoVo细胞的生长... 目的 探讨壳寡糖对人结肠癌LoVo细胞株生长的影响。方法 用细胞计数法比较不同浓度壳寡糖作用下细胞生长情况 ,苏木精 -伊红染色后 ,光镜下观察细胞生长情况及病理变化。结果 高浓度壳寡糖 (10 0、2 0 0、40 0mg/L)对LoVo细胞的生长有抑制作用 ,而低浓度 (10、5 0mg/L )未显示抑制作用。结论 壳寡糖对人结肠癌LoVo细胞株的生长有一定的抑制作用 ,对其深入研究可为壳寡糖成为肿瘤治疗的辅助用药提供理论依据。 展开更多
关键词 壳寡糖 肿瘤细胞 细胞培养 肠癌 lovo细胞
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壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞株bcl-2、bax表达改变 被引量:6
2
作者 柳红 崔涛 刘莹 《徐州医学院学报》 CAS 2005年第1期1-3,共3页
目的通过研究壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞株bcl-2、bax表达改变,初步探讨壳寡糖抑肿瘤机制。方法整个实验分5组,壳寡糖终浓度分别为0mg/L(对照组)、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L,光镜观察不同浓度壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞... 目的通过研究壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞株bcl-2、bax表达改变,初步探讨壳寡糖抑肿瘤机制。方法整个实验分5组,壳寡糖终浓度分别为0mg/L(对照组)、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L,光镜观察不同浓度壳寡糖作用后人结肠癌LoVo细胞形态学改变,并用免疫组织化学PowerVision两步法检测bcl-2、bax的表达。结果光镜下见高浓度组细胞生长较对照组稀疏,并可见较多的核碎裂、固缩、染色质边集等凋亡和坏死的形态学改变;同时随着壳寡糖浓度的升高,bcl-2表达逐渐下降,100、200、400mg/L组与0mg/L组比较有统计学差异(P<0.05);bax的表达逐渐升高,200、400mg/L组与0mg/L组比较有统计学差异(P<0.05)。结论通过调节bcl-2、bax的表达而诱使肿瘤细胞凋亡是壳寡糖抗肿瘤作用机制之一。 展开更多
关键词 lovo细胞 人结肠癌 bcl-2 BAX表达 形态学改变 壳寡糖 对照组 糖浓度 染色质 光镜观察
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究 被引量:4
3
作者 何冬雷 谢小明 +2 位作者 刘玉 夏立平 许荣华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期31-35,共5页
目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA... 目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证。结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08。microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7f、mir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异。结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 肠癌 耐药相关microRNA 5-氟尿嘧啶 lovo 5-FU细胞株 microRNA芯片
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU的建立及其差异表达基因的筛选 被引量:3
4
作者 盛雅萍 李建芳 +4 位作者 刘炳亚 罗建明 郑磊贞 陈强 郭伟剑 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第17期1899-1904,共6页
目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术... 目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中的差异表达基因,从中筛选出可能的耐药相关基因;用半定量RT-PCR方法对筛选出的部分耐药相关基因在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果:LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大.LoVo/5-FU对5-FU、ADM、MMC耐药,而对CDDP无耐药性(RI:7.69,2.78,1.43和0.96).通过基因芯片筛选出差异表达基因425个,可能的耐药相关基因包括CYP1B1,NAT2,RNF20,SNAI2,MAP3K2,其中CYP1B1在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异(Cy5/Cv3=5.877).结论:LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,耐药机制可能与CYP1B1,NAT2等耐药相关基因有关. 展开更多
关键词 肠癌 耐药相关基因 5-氟尿嘧啶 lovo/5-FU细胞株 MTT法 基因芯片 逆转录-聚合酶链反应
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CXCR3B在结肠癌组织中的表达及对结肠癌LOVO细胞株迁移能力的影响 被引量:2
5
作者 李海 荣诗阔 +3 位作者 许佳义 陈冬梅 刘晓明 杨银学 《宁夏医科大学学报》 2017年第6期651-654,I0002,共5页
目的探讨趋化因子受体CXCR3B(CXC型趋化因子受体3变体B)在结肠癌组织中的表达及对结肠癌LOVO细胞株迁移能力的影响。方法常规收取结直肠癌及癌旁组织标本,用免疫组织化学(IHC)染色方法检测CXCR3B的表达;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测... 目的探讨趋化因子受体CXCR3B(CXC型趋化因子受体3变体B)在结肠癌组织中的表达及对结肠癌LOVO细胞株迁移能力的影响。方法常规收取结直肠癌及癌旁组织标本,用免疫组织化学(IHC)染色方法检测CXCR3B的表达;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测正常肠上皮细胞株NCM460及结肠癌细胞株LOVO中的CXCR3B m RNA表达,过表达CXCR3B-RFP慢病毒感染LOVO细胞株,划痕实验及transwell实验检测LOVO细胞株的迁移变化。结果免疫组织化学结果显示在结直肠癌旁组织中CXCR3B的表达显著高于癌组织(P<0.001);NCM460细胞中CXCR3B m RNA表达高于LOVO细胞表达(P<0.01)。划痕实验及transwell迁移实验显示过表达CXCR3B组(LOVO-CXCR3B)细胞迁移较阴性对照组(LOVO-NC)低(P<0.01)。结论人结直肠癌组织中CXCR3B低表达,过表达CXCR3B可抑制结肠癌细胞株LOVO的迁移。 展开更多
关键词 CXC型趋化因子受体3变体B 肠癌 迁移 lovo细胞株
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苹果酸舒尼替尼对人结肠癌细胞株LoVo的增殖抑制作用
6
作者 卢康荣 周娅 +1 位作者 杜玮 王万山 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2583-2585,共3页
目的探讨苹果酸舒尼替尼体外对结肠癌LoVo细胞的生长抑制及诱导凋亡的作用。方法利用四亚基噻唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法观察苹果酸舒尼替尼对结肠癌LoVo细胞生长抑制作用。应用流式细胞仪、电子显微镜检测苹果酸舒尼替尼诱导LoVo细胞... 目的探讨苹果酸舒尼替尼体外对结肠癌LoVo细胞的生长抑制及诱导凋亡的作用。方法利用四亚基噻唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法观察苹果酸舒尼替尼对结肠癌LoVo细胞生长抑制作用。应用流式细胞仪、电子显微镜检测苹果酸舒尼替尼诱导LoVo细胞的凋亡作用。结果 MTT结果显示苹果酸舒尼替尼在(2.5~20μM)的浓度范围内对结肠癌LoVo细胞的生长具有显著的抑制作用。生长曲线结果显示各个浓度的药物对LoVo细胞的抑制作用呈时间依赖性。流式细胞仪可以观察到细胞周期阻滞在G0/G1期。透射电子显微镜下见到典型的早期凋亡形态学表现。结论在一定的浓度范围内,苹果酸舒尼替尼可以抑制LoVo细胞的生长,并呈剂量和时间依赖效应。其抗肿瘤的特性与引起肿瘤细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 苹果酸舒尼替尼 凋亡 肠癌lovo细胞
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miR-214负向调控结肠癌细胞株LoVo中Sema4D的表达
7
作者 刘洋 周红林 +1 位作者 侯友芳 张捷 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第7期1115-1120,共6页
目的:观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D,Sema4D)表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用.方法:设计并合成miR-214模拟物(miR-214mimics),miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor),二者对照序列(mi-contr... 目的:观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D,Sema4D)表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用.方法:设计并合成miR-214模拟物(miR-214mimics),miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor),二者对照序列(mi-control,in-control),分别与以脂质体lipofectamine 2000包裹后转染人结肠癌细胞株LoVo.RT-PCR检测转染24 h后各细胞株内miR-214的表达及Sema4D mRNA的表达变化,并用Western blot检测Sema4D蛋白的表达变化.结果:LoVo细胞株转染miR-214 mimics、mi-control,inhibitor、in-control 24 h后miR-214的相对表达量为8.003±0.651,3.464±0.332,0.740±0.088,2.620±0.166,mimics组miR-214表达较其对照组升高,inhibitor组表达较其对照组降低(P<0.05).Sema4D mRNA的相对表达量为:0.420±0.027,0.851±0.062,1.243±0.087,0.660±0.042;Sema4D蛋白/β-actin分别为:0.163±0.037,0.550±0.038,1.137±0.112,0.457±0.046.Sema4D mRNA及蛋白mimics组表达较其对照组降低,inhibitor组较其对照组升高(P<0.05).结论:人结肠癌细胞株LoVo中,Sema4D受miR-214的调控,miR-214可负向调控Sema4D mRNA的表达水平进而影响其蛋白的表达,miR-214可能作为结肠癌治疗的新靶点. 展开更多
关键词 MI R-214 轴突导向因子4D 肠癌 lovo
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中成药逆转人结肠癌细胞株对化疗药物耐药的研究 被引量:4
8
作者 张念华 陈高峰 +2 位作者 李寿杰 武如通 高海利 《新中医》 CAS 2017年第2期11-14,共4页
目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lov... 目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lovo/5-Fu。MTT法检测lovo/5-Fu的耐药能力及不同浓度中成药对lovo/5-Fu细胞株的耐药逆转作用,并根据相应结果计算耐药逆转倍数(RF)。细胞迁移实验分为4组:空白对照组、黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组,检测不同中成药对lovo/5-Fu细胞株迁移能力的影响。结果:5-Fu对lovo细胞株的IC_(50)为14.5 mg/L,对lovo/5-Fu细胞株的IC_(50)为115.1 mg/L,根据上述两株细胞的IC_(50)可算出lovo/5-Fu细胞株对5-Fu的耐药指数为:7.94。浓度为17.3、45.3、83.8、112.5 mg/L鸦胆子油乳注射液的耐药逆转倍数分别为9.5、23.5、54.4、86.5倍;浓度为8.2、21.2、38.6、50.1 mg/L华蟾素注射液的耐药逆转倍数分别为11.2、25.2、56.6、90.5倍;浓度为26.3、70.9、115.2、163.4 mg/L注射用黄芪多糖的耐药逆转倍数分别为1.5、8.2、26.5、74.2倍。与空白对照组比较,黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组侵出小室的细胞数目明显减少,迁移能力明显减弱,其中以鸦胆子组和华蟾素组更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖这三种中成药均能不同程度的逆转lovo/5-Fu对5-Fu的耐药性,其中以鸦胆子油乳注射液和华蟾素注射液最为明显。 展开更多
关键词 人结肠癌lovo细胞株 多药耐药性 5-氟尿嘧啶(5-Fu):lovo/5-Fu细胞株 鸦胆子油乳注射液 华蟾素注射液 注射用黄芪多糖
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血桐叶水提物对人结肠癌LoVo细胞的增殖抑制作用 被引量:1
9
作者 何带桂 温俊林 +2 位作者 王华倩 张磊 赵肃清 《广东工业大学学报》 CAS 2013年第1期120-124,共5页
水煮浸提血桐叶,减压浓缩后冻干制成粗体样品;以MTT、生长曲线法、集落形成实验考察血桐叶提取物对人结肠癌LoVo细胞的增殖抑制作用,并且以倒置显微镜观察其对细胞形态影响.实验结果表明,血桐叶水提物对LoVo细胞的增殖有显著抑制作用,... 水煮浸提血桐叶,减压浓缩后冻干制成粗体样品;以MTT、生长曲线法、集落形成实验考察血桐叶提取物对人结肠癌LoVo细胞的增殖抑制作用,并且以倒置显微镜观察其对细胞形态影响.实验结果表明,血桐叶水提物对LoVo细胞的增殖有显著抑制作用,呈明显剂量依赖关系,并且对细胞的形态有改变作用. 展开更多
关键词 血桐 提取物 人结肠癌lovo细胞株 抗肿瘤
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ppGalNac-T10对人结直肠癌细胞株LoVo的生物学特性的影响
10
作者 冯菁华 高媛 +3 位作者 陈玕 彭翼飞 郑文岭 马文丽 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期428-432,共5页
探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)对人结直肠癌细胞株LoVo细胞特性的影响.ppGalNAc-T10正义真核表达载体pcDNA3.1-T10(+)、反义真核表达载体pcDNA3.1-T10(-)与空载体pcDNA3.1分别转染LoVo细胞,Western blot检测ppGalNAc-... 探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10)对人结直肠癌细胞株LoVo细胞特性的影响.ppGalNAc-T10正义真核表达载体pcDNA3.1-T10(+)、反义真核表达载体pcDNA3.1-T10(-)与空载体pcDNA3.1分别转染LoVo细胞,Western blot检测ppGalNAc-T10蛋白水平表达的变化,确定转染效果.CCK8法检测转染后各实验组细胞增殖的变化,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,穿膜实验检测细胞侵袭能力的变化.Western blot证明各实验组经转染不同ppGalNAc-T10载体后,ppGalNAc-T10蛋白表达量发生变化,转染pp-GalNAc-T10正义真核表达载体的LoVo细胞,ppGalNAc-T10的蛋白表达量增加,同时细胞的增殖受到抑制,迁移能力和侵袭能力降低;而转染ppGalNAc-T10反义真核表达载体的LoVo细胞,ppGalNAc-T10的蛋白表达量降低,细胞生长加快,迁移能力和侵袭能力增强.ppGalNAc-T10可能影响人结直肠癌细胞株LoVo细胞的增殖、迁移能力和侵袭能力. 展开更多
关键词 多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(ppGalNAc-T10) 肠癌细胞株 生物学性能
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薏苡仁油联合奥沙利铂对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响
11
作者 王韬 费建东 +1 位作者 聂双发 李磊 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第3期650-652,共3页
目的 分析薏苡仁油联合奥沙利铂对结肠癌HT-29细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 将人结肠癌HT-29细胞株作为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度注射用薏苡仁油和奥沙利铂联合作用对人结肠癌HT-29细胞株增殖的影响... 目的 分析薏苡仁油联合奥沙利铂对结肠癌HT-29细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 将人结肠癌HT-29细胞株作为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度注射用薏苡仁油和奥沙利铂联合作用对人结肠癌HT-29细胞株增殖的影响,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Suvivin表达水平。结果 薏苡仁油组、奥沙利铂组、奥沙利铂+薏苡仁油组均会对人结肠癌HT-29细胞增殖产生一定抑制作用,且薏苡仁油浓度越高,作用时间越长,细胞增殖抑制率越高,差异有统计学意义(P<0.05);与薏苡仁油组、奥沙利铂组相比,奥沙利铂+薏苡仁油组细胞增殖抑制率更高,差异有统计学意义(P<0.05);薏苡仁油组、奥沙利铂组、奥沙利铂+薏苡仁油组细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P<0.05);薏苡仁油浓度越高,细胞凋亡率也越高,差异有统计学意义(P<0.05);奥沙利铂+薏苡仁油组细胞凋亡率明显高于单独奥沙利铂组、薏苡仁油组,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组中Survivin mRNA为阴性表达,将不同浓度薏苡仁油加入行48 h干扰之后,Survivin mRNA表达明显降低(P<0.05);与空白对照组对比,奥沙利铂组Survivin mRNA表达强度明显提高(P<0.05);奥沙利铂+薏苡仁油组Survivin mRNA表达强度较单独奥沙利铂组明显降低(P<0.05)。结论 薏苡仁油能对结肠癌HT-29细胞增殖进行抑制,并对细胞凋亡进行诱导,与奥沙利铂联合用药能发挥药物协同作用,其作用机制可能和Suvivin表达下调具有密切相关性。 展开更多
关键词 薏苡仁油 奥沙利铂 肠癌 HT-29细胞株 增殖 凋亡
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大蒜素对结肠癌LoVo细胞增殖的影响 被引量:17
12
作者 刘扬清 高勇 +4 位作者 万一元 易竹筠 惠红霞 徐丽娟 刘华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2009年第2期139-143,共5页
目的:观察大蒜素对结肠癌细胞LoVo生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,倒置显微镜下观察LoVo细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力,An-nexinV-FITC标记流式细胞术... 目的:观察大蒜素对结肠癌细胞LoVo生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,倒置显微镜下观察LoVo细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力,An-nexinV-FITC标记流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞周期影响。结果:大蒜素可抑制人结肠癌LoVo细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,24、48和72h大蒜素抑制LoVo细胞的IC50分别为32.23、10.74和6.58μg/ml;大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,作用24h其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用48h其诱导凋亡作用峰值浓度为8μg/ml,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用LoVo细胞24h后,大蒜素浓度低于4μg/ml时,LoVo细胞周期被阻滞于G2/M;而高于4μg/ml时,细胞周期被阻滞于G2/M和G1期。结论:大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 大蒜素 肠癌 lovo细胞株 细胞增殖 凋亡
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反义DLC-1基因对结直肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响 被引量:8
13
作者 金月玲 商延芳 +2 位作者 田小强 方媛 黄培林 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期493-496,共4页
目的应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响。方法构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株。采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC... 目的应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响。方法构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株。采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC-1 mRNA以及Bax、Bcl-2基因表达的改变,MTT比色法检测转染前后细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建发卡siRNA真核表达载体pGCsiDLC;pGCsiDLC转染LoVo细胞后,电泳显示DLC-1 mRNA表达水平明显下降;LoVo细胞生长曲线增长幅度亦随时间的增加而逐渐增高,在48h最为明显,RNAi组细胞比脂质体组及空白对照组细胞增殖明显增高(P<0.05);干扰后的LoVo细胞株G0/G1期发生阻滞,而G2/M期细胞数量分布减少。而Bax和bcl-2基因表达在干扰前后未见明显改变。结论成功构建载体介导的DLC-1靶向RNAi重组体可有效抑制LoVo细胞DLC-1 mRNA表达;DLC-1基因可抑制结直肠癌细胞增殖并且对细胞周期重新分布,其可能与结直肠癌的发生发展有一定关系,可能是一个新的抑癌基因。 展开更多
关键词 核糖核酸干扰 DLC-1基因 lovo细胞株 肠癌
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羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞凋亡及bcl-2、p53基因表达的影响 被引量:8
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作者 徐康 范钰 +2 位作者 林庚金 钱立平 黄富春 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期642-644,共3页
目的 探讨羟基喜树碱治疗结肠癌LoVo细胞的作用机制。方法 应用四唑盐比色试验、琼脂糖凝胶电泳、DNA末端原位标记染色法研究羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞生长及诱导凋亡的作用 ,采用WesternBlot法分析羟基喜树碱处理结肠癌细胞前后bc... 目的 探讨羟基喜树碱治疗结肠癌LoVo细胞的作用机制。方法 应用四唑盐比色试验、琼脂糖凝胶电泳、DNA末端原位标记染色法研究羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞生长及诱导凋亡的作用 ,采用WesternBlot法分析羟基喜树碱处理结肠癌细胞前后bcl 2、p5 3基因的表达情况。 结果 羟基喜树碱对结肠癌LoVo细胞生长具有较强的抑制作用 ,可诱导结肠癌细胞凋亡 ,且其凋亡作用呈浓度及时间依赖性。羟基喜树碱处理结肠癌LoVo细胞后 ,bcl 2基因表达下降 ,p5 3基因表达上升。结论 羟基喜树碱可诱导结肠癌细胞凋亡 ,可能与下调bcl 2基因及升高 p5 展开更多
关键词 羟基喜树碱 肠癌 lovo细胞 BCL-2 p53 基因表达 细胞凋亡 作用机制
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结直肠癌组织和细胞株中TSPAN1蛋白、mRNA的表达变化 被引量:4
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作者 石刚 张睿 +6 位作者 任宇鹏 陈悦 廉波 马思平 孟庆凯 陈玉泽 刘放 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第31期41-43,共3页
目的观察结直肠癌组织和细胞株中TSPAN1蛋白、mRNA的表达变化,并探讨其意义。方法结直肠癌患者31例,手术治疗中留结直肠癌组织、癌旁组织及距离肿瘤5 cm以上的正常结直肠组织各31例份,分别采用Western blotting法及qRT-PCR法检测TSPAN1... 目的观察结直肠癌组织和细胞株中TSPAN1蛋白、mRNA的表达变化,并探讨其意义。方法结直肠癌患者31例,手术治疗中留结直肠癌组织、癌旁组织及距离肿瘤5 cm以上的正常结直肠组织各31例份,分别采用Western blotting法及qRT-PCR法检测TSPAN1蛋白、mRNA,并分析TSPAN1蛋白表达与结直肠癌临床病理参数的关系;另选结直肠癌细胞株Colo-205、HCT-116、HT-29、SW620,分别采用Western blotting法及qRT-PCR法检测各组TSPAN1蛋白、mRNA。结果结直肠癌、癌旁、正常组织中TSPAN1蛋白相对表达量分别为29.3±4.1、12.8±4.6、10.1±3.7,TSPAN1 mRNA相对表达量分别为1.6±0.4、0.6±0.5、0.5±0.3,结直肠癌组织与癌旁、正常组织比较,P均<0.05。组织中TSPAN1蛋白表达与结直肠癌肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、神经浸润及血管浸润有关(P均<0.05)。Colo-205、HCT-116、HT-29、SW620细胞中TSPAN1蛋白相对表达量分别为12.7±2.1、13.6±2.9、11.8±2.4、23.6±3.5,TSPAN1 mRNA相对表达量分别为1.1±0.3、1.2±0.3、0.9±0.2、1.8±0.1,Colo-205、HCT-116、HT-29细胞与SW620细胞比较,P均<0.05。结论 TSPAN1蛋白、mRNA在结直肠癌组织和细胞株中均呈高表达,可能与结直肠癌的转移及浸润恶性行为有关。 展开更多
关键词 肠癌 直肠肿瘤 肠癌细胞株 TSPAN1蛋白
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LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离、培养及鉴定 被引量:2
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作者 张洪也 程勇 +2 位作者 胡祥 吕原 武乃金 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期149-154,共6页
目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细... 目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细胞,接种于添加生长因子的无血清培养基中,观察其增殖过程,继而诱导分化。MTT法、流式细胞术检测CD44+/EPCAMhigh、EPCAMlow和未分选LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布。3种细胞接种裸鼠,比较不同细胞的成瘤率;免疫荧光技术检测小鼠次代CD44+/EPCAMhigh细胞中CD44/EPCAM的表达。结果:LoVo细胞中有17.4%的CD44+/EPCAMhigh细胞,并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长,且可连续传代;在血清的诱导下,呈贴壁分化生长,其形态与未分选LoVo细胞无差别。CD44+/EPCAMhigh细胞增殖能力高于EPCAMlow细胞及未分选LoVo细胞,且细胞周期多集中在G0/G1期。以500个CD44+/EPCAMhigh细胞接种裸鼠成瘤率为90%(9/10),而1×104个EPCAMlow细胞成瘤率为0(0/10)。小鼠移植瘤中次代CD44+/EPCAMhigh细胞仍能少量表达CD44和EPCAM。结论:LoVo细胞中存在CD44+/EPCAMhigh结肠癌干细胞样细胞,CD44+/EPCAMhigh可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究。 展开更多
关键词 肠癌 lovo细胞株 肿瘤干细胞 细胞细胞 CD44/EPCAM
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人结直肠癌耐药细胞株HT-29/CPT-11的构建及其生物学特性探讨 被引量:5
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作者 冯婉婷 车晓玲 +4 位作者 李进 宗明珠 史玉叶 曹维克 何敬东 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2012年第1期31-35,共5页
目的:建立耐伊立替康(CPT-11)的人结直肠癌细胞株(HT-29/CPT-11),并研究其生物学特性。方法:采用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结直肠癌耐药株HT-29/CPT-11;CCK-8法检测CPT-11对亲本细胞HT-29和耐药细胞株HT-29/CPT-11细胞的半数抑... 目的:建立耐伊立替康(CPT-11)的人结直肠癌细胞株(HT-29/CPT-11),并研究其生物学特性。方法:采用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结直肠癌耐药株HT-29/CPT-11;CCK-8法检测CPT-11对亲本细胞HT-29和耐药细胞株HT-29/CPT-11细胞的半数抑制率(IC50);绘制细胞生长曲线,并计算细胞倍增时间;流式细胞术分析细胞周期分布;RT-PCR检测HT-29/CPT-11和HT-29细胞MDR-1 mRNA的表达。结果:(1)成功建立人结直肠癌耐药细胞株HT-29/CPT-11,耐药指数为6.51。(2)HT-29/CPT-11耐药细胞株倍增时间较原代细胞HT-29延长[分别为(41.29±1.69)h和(27.12±2.73)h,P<0.05]。(3)流式细胞术检测细胞周期结果显示,耐药细胞株HT-29/CPT-11 G1期细胞数目增加,S期细胞数目减少(P<0.05)。(4)耐药细胞HT-29/CPT-11的MDR-1 mRNA表达水平明显高于亲本细胞株HT-29,分别为1.086±0.054和0.416±0.02(P<0.05)。结论:成功构建了人结直肠癌耐药细胞株HT-29/CPT-11,为下一步研究耐药机制奠定实验基础。 展开更多
关键词 伊立替康 人结肠癌 耐药 HT-29细胞株
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TRAIL对结肠癌细胞株SW480的细胞毒作用 被引量:3
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作者 李小安 房殿春 +2 位作者 杨柳芹 张汝刚 司佩任 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第3期298-301,共4页
目的:观察TRAIL对结肠癌细胞株SW480的细胞毒作用.方法:采用MTT法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞存活分数的影响;TUNEL法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞凋亡率的影响.结果:TRAIL能有效地杀伤结肠癌SW480细胞,MTT法显示1000μg/L的TRAIL作用24h... 目的:观察TRAIL对结肠癌细胞株SW480的细胞毒作用.方法:采用MTT法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞存活分数的影响;TUNEL法检测TRAIL对结肠癌SW480细胞凋亡率的影响.结果:TRAIL能有效地杀伤结肠癌SW480细胞,MTT法显示1000μg/L的TRAIL作用24hSW480细胞存活分数仅为18.7%.TUNEL法均显示0,50,150,500,1500,5000μg/LTRAIL蛋白诱导结肠癌SW480细胞的凋亡率分别为6.7%,29.4%,42.8%,50.8%,84.6%和87.4%;500μg/LTRAIL蛋白于0,6,12,18,24和30h诱导结肠癌SW480细胞的凋亡率分别为7.8%,21.4%,41.8%,60.6%,73.8%和77.3%.TRAIL对结肠癌SW480细胞的作用存在较好的量效关系和时效关系.结论:TRAIL能通过诱导细胞凋亡的方式杀伤SW480细胞,有可能成为有效的抗结肠癌新药. 展开更多
关键词 TRAIL 肠癌 细胞株 SW480 细胞毒作用
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猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞凋亡和线粒体电位的影响 被引量:10
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作者 周清安 余海滨 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第5期1079-1081,共3页
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞的增殖和凋亡作用及作用机制。方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg.mL-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显... 目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞的增殖和凋亡作用及作用机制。方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg.mL-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率。结果:与对照组比较,猫爪草皂苷处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对LoVo细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);随着浓度的增加凋亡率增加,药物组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);流式细胞仪细胞周期分析图可看出细胞阻滞在G1期,随着给药浓度的增加,细胞凋亡峰(AP峰)越来越明显(图1);激光共聚焦扫描技术观察显示,细胞经皂苷作用4h、8h、12h后,线粒体膜电位下降(P<0.05)。结论:猫爪草皂苷可导致人结肠癌LoVo细胞线粒体膜电位下降,具有明显抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 猫爪草皂苷 肠癌lovo细胞 细胞增殖 细胞凋亡 线粒体膜电位
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猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡影响的研究 被引量:12
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作者 周清安 余海滨 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2009年第4期190-192,共3页
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg/mL4个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜... 目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus ternate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg/mL4个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;荧光染色观察细胞凋亡;流式细胞仪(FCM)进行细胞周期分析;采用细胞免疫化学检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的变化。结果:与对照组比较,猫爪草皂苷可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,LoVo细胞增殖的抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个猫爪草皂苷不同浓度处理组凋亡率分别为(3.57±1.56)%、(8.14±1.02)%、(11.11±2.30)%、(17.59±0.95)%和(25.10±1.23)%;流式细胞术显示,G1期细胞增加,而停滞在S、G2期细胞减少;细胞免疫化学检测发现,经猫爪草皂苷作用24h后,LoVo细胞Bax蛋白水平明显增高,而Bcl-2出现抑制,Bcl-2/Bax比例下降,Caspase-3蛋白水平明显升高,且呈明显的浓度依赖性。结论:猫爪草皂苷具有明显抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡作用,下调Bcl-2、Bcl-2/Bax,增加Bax、Caspase-3蛋白的表达可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 猫爪草皂苷 肠癌lovo细胞 细胞增殖 细胞凋亡 BAX BCL-2 CASPASE-3
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