人结节型皮肤基底细胞癌病变组织和细胞株中视蛋白3的表达及功能

目的探讨人结节型皮肤基底细胞癌(BCC)病变组织及细胞株中视蛋白3(OPN3)的表达及功能。方法选取31例结节型BCC患者病灶组织及相邻癌旁正常组织(PANST)分别作为病灶组及PANST组,采用免疫荧光染色法检测OPN3的表达,Western blot及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测2组标本组织中OPN3蛋白及mRNA的表达;取对数生长期的人BCC细胞株TE354T,分为对照(Control)组、空白(RNAi-NC)组及实验(RNAi-OPN3)组,并设计针对人OPN3的小干扰RNA转染TE354T细胞,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测OPN3下调后0、24、48及72 h RNAi-NC组及RNAi-OPN3组的细胞增殖活性,采用Transwell迁移和细胞划痕实验检测OPN3下调48 h后2组细胞的迁移能力,采用流式细胞术和Western blot分别检测OPN3下调48 h后2组细胞凋亡数量及钙通道相关蛋白环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)、钙调蛋白依赖激酶Ⅱ(CAMKⅡ)、磷酸化CAMKⅡ(p-CAMKⅡ)的表达。结果与PANST组比较,病灶组BCC组织中OPN3表达增高(P<0.05);下调OPN3后72 h,RNAi-OPN3组TE354T细胞增殖活性较RNAi-NC组下降(P<0.05);下调OPN3后48 h,与RNAi-NC组相比,RNAi-OPN3组TE354T细胞迁移能力降低(P<0.05),TE354T细胞凋亡细胞数量增加(P<0.05),TE354T细胞钙通道相关蛋白p-CREB和p-CAMKⅡ表达下降(P<0.05)。结论OPN3在人结节型BCC组织中高表达,可调控人BCC系TE354T细胞的增殖、迁移及凋亡,其机制可能与钙依赖G蛋白偶联受体(GPCR)信号通路有关。