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Transwell 3-D联合共培养促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化的研究 被引量:6
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作者 张胜利 范应中 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1323-1328,共6页
目的 探讨Transwell 3-D联合共培养促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化的可能性.方法 利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原进行鉴定.利用Transwell... 目的 探讨Transwell 3-D联合共培养促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化的可能性.方法 利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原进行鉴定.利用Transwell小室联合共培养肝细胞诱导其向肝样细胞分化,观察诱导后细胞形态的变化,利用细胞免疫荧光检测甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)和细胞角蛋白-18(CK-18)在诱导后细胞中的表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝细胞相关基因的表达.结果 利用克隆杯分离出的人羊水克隆样细胞来源干细胞CD44和CD90表达阳性,CD10、CD14、CD34、CD45和人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)表达阴性.诱导2~4周后,肝样细胞出现,检测证实这些细胞表达AFP、ALB、CK-18、GATA结合蛋白-4(GATA4)、肝细胞核因子(HNF)-1α和细胞色素20A(CYP20A)等肝细胞相关标志和基因.结论 Transwell 3-D联合共培养可以促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化. 展开更多
关键词 人羊水克隆样细胞来源干细胞 TRANSWELL 3-D联合共培养 细胞
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人羊水克隆样细胞来源干细胞用于侧脑室损伤动物模型细胞治疗的研究 被引量:1
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作者 张胜利 范应中 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期1336-1338,共3页
目的 探讨人羊水克隆样细胞来源干细胞用于侧脑室损伤大鼠模型细胞治疗的可能性.方法 羊水标本来自怀孕16~22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得.利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培... 目的 探讨人羊水克隆样细胞来源干细胞用于侧脑室损伤大鼠模型细胞治疗的可能性.方法 羊水标本来自怀孕16~22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得.利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培养扩增.制作脑室损伤大鼠模型,设立正常对照组、实验对照组、实验组、空白对照组.第3代人羊水克隆样细胞来源干细胞注入脑室损伤模型大鼠脑室内,选取合适的时间点对模型鼠的生长发育指标(体重、脑重、张耳时间、长毛时间)、感觉运动功能(足测试、姿势反射、肢体位置)进行观察测试.并运用SNK法对各组结果均数进行两两比较,判断有无差异.利用Western blot技术检测模型鼠脑组织内人相关Nestin 的表达.结果 各组模型鼠体重、脑重无明显差异,实验组、实验对照组和空白对照组鼠崽之间长毛时间无明显差异,但此3组跟正常对照组差异有统计学意义.实验对照组和空白对照组运动功能测试各项指标与正常对照组和实验组差异均有统计学意义,实验组各项指标与正常对照组接近.Western blot检测表明,hAFCSCs移植5d后,就可以检测出人相关蛋白的表达.结论 人羊水克隆样细胞来源干细胞移植入侧脑室损伤模型鼠体内可以改善模型鼠的生长发育和感觉运动功能. 展开更多
关键词 人羊水克隆样细胞来源干细胞 侧脑室损伤 动物模型 细胞治疗
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脂肪来源干细胞诱导分化为成牙本质样细胞的体外培养研究 被引量:5
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作者 陈小红 刘鲁川 +4 位作者 金岩 邓蔓菁 安建平 方军 孙雅娟 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期9-12,共4页
目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs)向成牙本质样细胞分化的可能性。方法:SD仔4只,处死后取腹股沟处脂肪组织。采用细胞体外共培养的方法,在牙胚细胞条件培养液(TGC-CM)的诱导下,通过形态学观察、免疫组化、RT-PCR等方法,观察脂肪来源... 目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs)向成牙本质样细胞分化的可能性。方法:SD仔4只,处死后取腹股沟处脂肪组织。采用细胞体外共培养的方法,在牙胚细胞条件培养液(TGC-CM)的诱导下,通过形态学观察、免疫组化、RT-PCR等方法,观察脂肪来源干细胞向成牙本质样细胞分化的过程。结果:大鼠脂肪来源干细胞在诱导培养基中生长良好。培养7d,在诱导组中细胞出现核极化,有很长的突起,细胞平行排列。抗牙本质涎蛋白(DSP)呈阳性反应。RT-PCR显示mRNA水平表达成牙本质细胞特异的牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白(DMP-1)。结论:含有多种细胞因子的TGC-CM能提供较好的微环境,诱导大鼠脂肪来源干细胞向成牙本质样细胞分化,能为组织工程牙体再生提供种子细胞来源和微环境选择。 展开更多
关键词 牙胚细胞条件培养液 脂肪来源干细胞 成牙本质细胞 分化
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兔脂肪来源干细胞表面标记分析及向心肌样细胞分化 被引量:4
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作者 裴艳 徐亚伟 +1 位作者 侯磊 于学靖 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2006年第6期34-37,共4页
目的分析兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCS)表面标记并且对其进行体外诱导,观察其向心肌细胞分化的潜能,探讨脂肪来源细胞治疗缺血性心脏病的可能性。方法应用酶消化法获得兔ADSCs,并在DMEM培养基中进行体外培养。取... 目的分析兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCS)表面标记并且对其进行体外诱导,观察其向心肌细胞分化的潜能,探讨脂肪来源细胞治疗缺血性心脏病的可能性。方法应用酶消化法获得兔ADSCs,并在DMEM培养基中进行体外培养。取第二代细胞以流式细胞术鉴定其表面标记。第二代细胞经5-AZA(浓渡为10μmol/L)处理24 h,第2天更换新鲜培养液,以后每3 d换液1次,诱导3周后,应用RT-PCR检测心肌细胞特异性α肌球蛋白重链(α-MHC)基因及免疫荧光检测心肌肌钙蛋白(cTNT)。结果流式细胞术检测显示Sca1、CD44、CD117高表达,CD34和CD45低表达。诱导后细胞表达cTNT。RT-PCR显示与正常心肌组织α-MHC阳性条带对照,诱导后ADSC也在相同位置出现α-MHC的阳性条带,而未诱导ADSC没有阳性条带出现。结论ADSC具有间质干细胞的特征,ADSC在一定诱导条件下向心肌样细胞分化,是一种有潜力的治疗缺血性心脏病的移植细胞。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 心肌细胞 分化
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hHCN2基因转染的脂肪组织来源的成体干细胞可分化为起搏样细胞 被引量:2
5
作者 李勇 李宾公 +2 位作者 李哲 张健 曾明辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期901-904,909,共5页
目的大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因,观察其作为起搏细胞的可行性。方法取生长良好的ADSC转染hHCN2基因,通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达,用... 目的大鼠脂肪来源的成体干细胞(ADSC)转染人超极化激活环核苷酸门控离子通道-2(hHCN2)基因,观察其作为起搏细胞的可行性。方法取生长良好的ADSC转染hHCN2基因,通过RT-PCR、Western blot分析、免疫荧光技术检测hHCN2基因及蛋白的表达,用膜片钳技术检测细胞的电生理特征并记录其内向电流。将转染hHCN2基因的ADSC与心室肌细胞共培养,观察其对心室肌细胞自发性搏动的影响。结果 hHCN2基因修饰的大鼠ADSC能表达较强的hHCN2基因及蛋白,还能够产生超级化激活内向离子流。将其与心室肌细胞共培养,能使心室肌细胞的自发性搏动明显增快增强。结论将hHCN2基因转染ADSC能够使其分化为具有起搏功能的起搏样细胞,为进一步优化生物起搏器的研究提供了材料。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 起搏细胞 生物起搏 超极化激活环核苷酸门控离子通道-2
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单细胞克隆肝癌干细胞向间充质样细胞的分化潜能 被引量:1
6
作者 刘虹麟 彭亮 +6 位作者 王在 许世清 娄晋宁 冉宇靓 杨治华 王培刚 张文健 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期245-250,共6页
目的:探讨单细胞克隆肝癌干细胞(liver cancer stem cell,LCSCs)向间充质样细胞分化的潜能。方法:通过有限稀释法获得单个细胞来源的LCSC克隆,采用RT-PCR法鉴定干细胞标志物;将该单细胞克隆分别用成骨、软骨和脂肪诱导分化培养基培养3周... 目的:探讨单细胞克隆肝癌干细胞(liver cancer stem cell,LCSCs)向间充质样细胞分化的潜能。方法:通过有限稀释法获得单个细胞来源的LCSC克隆,采用RT-PCR法鉴定干细胞标志物;将该单细胞克隆分别用成骨、软骨和脂肪诱导分化培养基培养3周后,采用Real-time PCR及特殊染色技术比较诱导前后LCSC表达成骨、软骨及脂肪细胞特异标志物的差异。结果:单细胞克隆的LCSC表达多种干细胞标志物、干细胞因子(stem cell factor,SCF)、干细胞因子受体、C-kit、巢蛋白(nestin)、CD34、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)、CD133。分化诱导培养3周后,成骨方向诱导的细胞茜素红染色呈现橘红色钙结节形成,软骨方向诱导的细胞阿尔新蓝染色显示蓝色蛋白多糖沉积,脂肪方向诱导的细胞油红O染色显示大量脂滴形成。Real-time PCR结果显示,诱导后成骨细胞特异标志物骨钙素和Ⅰ型胶原、软骨细胞特异标志物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原、脂肪细胞特异标志物脂联素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的mRNA表达均较对照组显著上调(Ⅰ型及Ⅱ型胶原间为P<0.05,其他指标间均为P<0.01)。结论:LCSC具有可塑性,在特定的微环境下具有向间充质样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 肝癌干细胞 细胞克隆 间充质细胞 多向分化潜能 可塑性
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SD大鼠羊水间充质干细胞向神经样细胞体外诱导分化 被引量:1
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作者 冯建勋 腊晓林 +2 位作者 马艳 毕晓娟 温浩 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期250-255,共6页
目的:探讨体外诱导羊水间充质干细胞(AF-MSCs)分化成神经干细胞.方法:10只SD怀孕大鼠,180-240g,胎龄16d,过量腹腔麻醉致死,开腹全部切除子宫,在无菌的条件下抽取全羊水,采用贴壁法分离AF-MSCs,体外培养扩增,观察细胞生长特性,流式细胞... 目的:探讨体外诱导羊水间充质干细胞(AF-MSCs)分化成神经干细胞.方法:10只SD怀孕大鼠,180-240g,胎龄16d,过量腹腔麻醉致死,开腹全部切除子宫,在无菌的条件下抽取全羊水,采用贴壁法分离AF-MSCs,体外培养扩增,观察细胞生长特性,流式细胞仪检测AF-MSCs表面抗原表达及细胞周期.取第3代AF-MSCs,加入预诱导液(DMEM/F12、100mL/LFBS、1mmol/Lβ-MEM)诱导24h,然后加入诱导液(DMEM/F12、100mL/LFBS、5mmol/Lβ-MEM)诱导24h,最后在分化维持培养液(DMEM/F12、20μg/LEGF、20μg/L bFGF)中培养,行免疫荧光染色,检测NSE和GFAP的表达.结果:成功分离、培养和传代SD大鼠AF-MSCs,流式细胞术检测提示大鼠AF-MSCs的G0/G1期细胞比例约为87.5%、S+G2+M期比例为12.5%,表达CD44为98.3%、CD29为70%、和CD105为33.2%、不表达CD45为0.5%,CD34为1%,DLA-DR(MHCclassⅡ)为0.1%.诱导后,AF-MSCs能表达神经细胞标示物NSE和GFAP,且可在体外继续存活2wk左右.结论:羊水中也存在MSCs,与其他来源的MSCs特点相符;羊水可以作为一种新的胎儿MSCs来源,而且能在体外诱导分化为神经细胞. 展开更多
关键词 羊水细胞 间充质干细胞 神经细胞 大鼠 流式细胞 免疫细胞化学 碱性成纤维细胞生长因子 重组表皮生长因子
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兔脂肪来源间充质干细胞的生物表型及其心肌样细胞的分化潜能 被引量:4
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作者 闫小宾 李琼 +3 位作者 郭志坤 齐立杰 罗欢欢 李和 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期55-61,共7页
目的鉴定兔脂肪来源间充质干细胞(ADMSCs)的生物学表型及其向心肌细胞分化的潜能。方法成年兔肩胛区皮下脂肪组织经消化、培养,观察其形态变化。第3代细胞进行CD29、CD34、CD44、CD105免疫细胞化学显色、免疫荧光单标、双标及三标显色... 目的鉴定兔脂肪来源间充质干细胞(ADMSCs)的生物学表型及其向心肌细胞分化的潜能。方法成年兔肩胛区皮下脂肪组织经消化、培养,观察其形态变化。第3代细胞进行CD29、CD34、CD44、CD105免疫细胞化学显色、免疫荧光单标、双标及三标显色。5-氮杂胞苷(5-aza)诱导ADMSCs 7d,免疫组织化学和免疫荧光技术显示肌钙蛋白-I(Troponin-I)和肌球蛋白重链(MHC)表达。光学显微镜和激光扫描共焦显微镜观察并计数。结果ADMSCs开始为圆形,后逐渐伸展,呈现形态多样性。90%以上的第3代细胞阳性表达CD29、CD44、CD105,三者共表达于胞质中。CD34阴性表达。CD分子表达阳性的细胞70.59%±1.26%表达Troponin-I,71.98%±1.13%表达MHC。结论 90%以上的ADMSCs共表达干细胞表面标记CD29、CD44、CD105,它们具有很强的分化为心肌样细胞的潜能。 展开更多
关键词 CD分子 生物表型 脂肪来源间充质干细胞 心肌细胞 免疫组织化学 新西兰白兔
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人脂肪组织来源的干细胞体外诱导为角膜上皮样细胞的分化潜能 被引量:3
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作者 钟刘学颖 刘小伟 +3 位作者 戴荣平 秦梅 董方田 李莹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第1期14-19,共6页
目的初步探讨人脂肪组织来源的干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSC)体外诱导为角膜上皮样细胞的分化潜能。方法分离、纯化、体外扩增hADSC,流式细胞术鉴定所获得细胞的CD29+、CD34-、CD49d+、CD105+、CD106-的表达情况。成... 目的初步探讨人脂肪组织来源的干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSC)体外诱导为角膜上皮样细胞的分化潜能。方法分离、纯化、体外扩增hADSC,流式细胞术鉴定所获得细胞的CD29+、CD34-、CD49d+、CD105+、CD106-的表达情况。成脂、成骨诱导鉴定其多向分化潜能。在DMEM/F12体系、KM体系及上述二者等体积混合的KM/DMEM/F12体系内添加不同梯度浓度的生长因子对hADSC进行体外诱导:0μg·L-1、10μg·L-1、20μg·L-1、30μg·L-1、40μg·L-1、50μg·L-1的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF),及50μg·L-1EGF+10μg·L-1碱性成纤维细胞生长因子(basicfibro blast growth factor,bFGF)和50μg·L-1EGF+20μg·L-1bFGF。连续诱导21d,观察hADSC形态学的改变及第21天时角膜特异性蛋白AE5(CK3/CK12)的免疫化学表达情况,比较不同培养体系及不同浓度生长因子对hADSC诱导作用的差异。结果流式细胞仪测定传3-5代的细胞CD34-、CD106-、CD29+、CD49d+、CD105+。成脂、成骨体外诱导14d后,油红O、碱性磷酸酶染色阳性率分别为74.6%和29.3%。KM体系中加入终浓度为0~50μg·L-1EGF诱导21d后,hADSCAE5阳性细胞率均占90%以上。其中,40μg·L-1EGF诱导下的AE5阳性细胞率为98.7%,50μg·L-1EGF可达到100%。而加入bFGF的hADSC则为AE5弱阳性。而另2个体系对各浓度EGF、bFGF诱导的hADSC的作用均为阴性。结论人吸脂术废弃液中可获得大量高纯度脂肪组织来源的干细胞,经体外条件诱导具备向角膜上皮样细胞分化潜能。添加EGF的角质细胞培养液有利于其分化,并具有浓度依赖性,bFGF则对分化有抑制性作用。 展开更多
关键词 吸脂术 人脂肪组织来源干细胞 角膜上皮细胞 表皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 体外诱导
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大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞向心肌样细胞分化的细胞特征 被引量:2
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作者 李树雯 郭志坤 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期99-103,共5页
目的探索大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞定向诱导分化的细胞特征。方法胰酶消化法分离出ADMSCs,对培养第3代细胞分别进行HE染色和CD44免疫细胞化学染色,利用光镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其细胞特征和CD44的表达;5... 目的探索大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞定向诱导分化的细胞特征。方法胰酶消化法分离出ADMSCs,对培养第3代细胞分别进行HE染色和CD44免疫细胞化学染色,利用光镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其细胞特征和CD44的表达;5-氮杂胞苷(5-aza)诱导,应用肌球蛋白重链(MHC)抗体进行免疫细胞化学染色,鉴定分化后的心肌样细胞;利用免疫组织化学观察脂肪组织中CD44阳性细胞的表达分布。结果大鼠脂肪组织分离的细胞生长迅速,培养后分为两类:一类为大型细胞,其数量较多、体积较大;另一类为小型细胞,其数量较少、体积较小。免疫细胞化学和激光共聚焦显微镜观察显示大细胞呈CD44弱阳性反应,小细胞呈强阳性反应。5-aza诱导后,发现7处细胞团明显分化为心肌样细胞,肌球蛋白呈强阳性反应。HE染色显示呈典型的心肌细胞的特征。脂肪组织中CD44阳性细胞位于脂肪小叶之间,数量较少,形态较小。结论培养的大鼠脂肪组织来源的ADMSCs分为大、小两类,小型细胞可能具有较强的分化为心肌样细胞的能力。 展开更多
关键词 脂肪组织来源间充质干细胞 诱导分化 CD44 心肌细胞
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人羊水来源干细胞的体外培养及其生物学性状分析 被引量:1
11
作者 李保伟 刘慧 +5 位作者 刘大庆 吕洋 陈琳 岳文 李艳华 裴雪涛 《生物技术通讯》 CAS 2010年第5期655-659,665,共6页
目的:体外分离培养人羊水来源干细胞(hAFSC),观察分析其基本的生物学性状。方法:取孕中期产前诊断所抽取的羊水,离心收集细胞,然后贴壁培养获得hAFSC。在细胞培养的基础上,观察hAFSC的形态;研究其增殖能力;用流式细胞术测定细胞周期及... 目的:体外分离培养人羊水来源干细胞(hAFSC),观察分析其基本的生物学性状。方法:取孕中期产前诊断所抽取的羊水,离心收集细胞,然后贴壁培养获得hAFSC。在细胞培养的基础上,观察hAFSC的形态;研究其增殖能力;用流式细胞术测定细胞周期及不同代次细胞表面阶段特异性胚胎抗原4(SSEA-4)表达率的变化;利用RT-PCR方法检测细胞干性基因的表达;利用诱导培养基诱导,检测其向肝样细胞与成骨细胞分化的潜能。结果:在体外培养条件下,hAFSC表现为成纤维细胞形态;具有良好的增殖能力,群体倍增时间约为36 h;细胞周期检测G0/G1期细胞约占86.7%,S+G2/M期细胞约占13.3%;流式细胞术检测结果表明,hAFSC表达SSEA-4,且SSEA-4阳性率随传代次数呈现先上升后下降的趋势;hAFSC在mRNA水平上表达Nanog、Oct4和Rex1等胚胎干细胞标志性基因;经诱导培养基诱导后,hAFSC可以向肝样细胞与成骨细胞分化。结论:hAFSC是一群呈成纤维细胞样,有良好增殖能力,且具有多向分化潜能的细胞,加之其来源方便,伦理学限制较少,因此在细胞治疗及组织工程等方面有着广泛的应用前景。 展开更多
关键词 人羊水来源干细胞 细胞培养 多潜能性
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诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内抗肝纤维化 被引量:2
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作者 程钢 黄邓高 梁颖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1384-1389,共6页
背景:诱导多功能干细胞具有与胚胎干细胞相似的自我更新、增殖及分化能力,无来源限制,又不存在伦理问题,有望成为治疗肝病的细胞来源。目的:观察诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内移植对肝纤维化的改善作用。方法:采用三步法将诱导多功... 背景:诱导多功能干细胞具有与胚胎干细胞相似的自我更新、增殖及分化能力,无来源限制,又不存在伦理问题,有望成为治疗肝病的细胞来源。目的:观察诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内移植对肝纤维化的改善作用。方法:采用三步法将诱导多功能干细胞诱导分化为肝样细胞,采用糖原染色、LDL摄取实验、免疫组织化学法检测诱导分化细胞合成糖原能力、摄取LDL能力和甲胎蛋白、白蛋白、CK18蛋白表达。取成年雄性SD大鼠45只(由中南大学湘雅医学院附属海口医院医学实验动物中心提供),随机分为3组,分别为正常对照组、模型组、细胞移植组,每组15只。模型组、细胞移植组以腹腔注射四氯化碳方法建立肝纤维化模型,造模后第3天,细胞移植组尾静脉注射0.5 mL诱导分化21 d的肝样细胞,细胞浓度为2×10~9 L^(-1)。细胞移植后4周,取静脉血与肝组织标本,分析肝功能及肝纤维化指标变化与肝病理改变。结果与结论:(1)诱导分化21 d后,人诱导多能干细胞克隆团已经松散,以类圆形或多角形为主,呈铺路石样分布并密集排列,糖原染色可见细胞胞浆内有大量聚集的粉红色糖原,具备摄取LDL的能力,免疫组织化学法观察甲胎蛋白、白蛋白与CK18呈阳性表达;(2)细胞移植后4周,与正常组比较,模型组白蛋白水平显著降低(P <0.05),直接胆红素、间接胆红素、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及Ⅳ型胶原、血清透明质酸酶、血清Ⅲ型前胶原水平均显著升高(P <0.05)。与模型组比较,细胞移植组白蛋白水平显著升高(P <0.05),直接胆红素、间接胆红素、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及Ⅳ型胶原、血清透明质酸酶、血清Ⅲ型前胶原水平均显著降低(P <0.05);(3)细胞移植后4周,细胞移植组炎性细胞浸润、肝细胞变性与坏死程度较模型组均有不同程度的改善;(4)结果表明,诱导多功能干细胞来源的肝样细胞对大鼠肝纤维化具有明显改善作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 诱导多功能干细胞 干细胞来源细胞 细胞移植 海南省自然科学基金 肝硬化 细胞 组织工程
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人羊水、脐带、胎盘来源间充质干细胞体外增殖、分化、运输和免疫学特性的比较 被引量:8
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作者 赵姝灿 郑桂纯 +4 位作者 林连蓬 梅展图 王丙云 陈胜锋 陈志胜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第25期4028-4034,共7页
背景:随着再生医学推进,干细胞在疾病治疗中的使用频率逐步增高。目前在临床使用中,细胞数量、分化能力、异体接种时产生免疫排斥的可能性等因素都需要考虑,因此筛选出更适合临床使用的细胞种类显得十分有意义。目的:比较人羊水、脐带... 背景:随着再生医学推进,干细胞在疾病治疗中的使用频率逐步增高。目前在临床使用中,细胞数量、分化能力、异体接种时产生免疫排斥的可能性等因素都需要考虑,因此筛选出更适合临床使用的细胞种类显得十分有意义。目的:比较人羊水、脐带、胎盘来源间充质干细胞的体外增殖能力、分化能力、运输液中细胞活性、免疫学特性,为临床应用提供选择依据。方法:分别对3种细胞进行分离培养和免疫荧光鉴定,在体外诱导3种细胞成骨、成脂、成神经分化;q PCR检测成神经分化后的Nestin、NT-3、MANF表达量;流式细胞术定量分析HLA-ABC、HLA-DR的表达量;将3种细胞放于细胞运输液内常温放置24,48,72 h,计算活细胞数量。结果与结论:(1)脐带间充质干细胞成脂能力最强,胎盘间充质干细胞成骨能力最好,3种细胞均可以表达神经细胞标志Nestin和GFAP;(2)成神经诱导后的胎盘间充质干细胞高表达NT-3,脐带间充质干细胞高表达MANF,分别可以用于不同类型的神经损伤修复;(3)羊水干细胞低表达HLA-ABC,不表达HLA-DR,更适合异体接种,产生免疫排斥的可能最低;(4)细胞运输液内储存72 h后羊水干细胞的存活率最高;(5)由于羊水、胎盘、脐带间充质干细胞在生物学特性上稍有差异,因此可根据其特点用于不同临床疾病治疗。 展开更多
关键词 人羊水间充质干细胞 人胎盘来源间充质干细胞 人脐带来源间充质干细胞 生物学特性 组织相容性抗体 干细胞 羊水 胎盘 脐带 细胞增殖 细胞分化 组织工程
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羊水来源干细胞骨向分化的研究进展
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作者 缪喆 史俊 《组织工程与重建外科杂志》 2014年第5期279-281,共3页
羊水来源干细胞的属性介于胚胎干细胞与成体干细胞之间,保留有间充质干细胞类似的未分化属性,因无致瘤性、不促发同种异体免疫反应而受到关注。目前,有关其细胞来源及特性、骨向诱导分化及培养,以及在组织工程的应用等方面的研究日益增... 羊水来源干细胞的属性介于胚胎干细胞与成体干细胞之间,保留有间充质干细胞类似的未分化属性,因无致瘤性、不促发同种异体免疫反应而受到关注。目前,有关其细胞来源及特性、骨向诱导分化及培养,以及在组织工程的应用等方面的研究日益增多。研究认为,羊水来源干细胞的骨向分化有望成为骨缺损修复的新的骨组织来源。本文对羊水来源干细胞骨向分化的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 羊水来源干细胞 骨向分化 组织重建
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氯倍他索干预鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化及机制
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作者 王秋平 徐众华 +5 位作者 卞璐 赵俊 陈昌胜 王震 史文涛 张志坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期779-783,共5页
背景:氯倍他索是临床工作中常用的糖皮质激素类药物,鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在体外具有向少突胶质样细胞分化的潜能,氯倍他索能否促进其向少突胶质样细胞分化及其潜在的机制尚不得知。目的:观察氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质... 背景:氯倍他索是临床工作中常用的糖皮质激素类药物,鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞在体外具有向少突胶质样细胞分化的潜能,氯倍他索能否促进其向少突胶质样细胞分化及其潜在的机制尚不得知。目的:观察氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化的影响,探讨其可能的机制。方法:贴壁筛选法分离培养获取SD大鼠鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,免疫荧光法鉴定其特性和纯度。MTT法检测0-10μmol/L氯倍他索对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞增殖能力的影响。取生长良好的第3代鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞,用含氯倍他索的无血清诱导分化培养液使其向少突胶质样细胞分化,氯倍他索浓度为0,2.5和5μmol/L。倒置显微镜观察细胞形态的变化,免疫荧光和免疫印迹方法检测少突胶质细胞相关蛋白MBP和OLIG2的表达,免疫印迹法检测SHH信号通路相关蛋白SHH表达水平。结果与结论:(1)体外培养的鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞高表达vimentin和nestin;(2)低浓度的氯倍他索可促进细胞增殖;高浓度的氯倍他索则抑制细胞增殖,其中5μmol/L可能为最适增殖浓度;(3)鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞成少突胶质样细胞诱导3 d后,氯倍他索组出现多极化形态,少突胶质细胞相关蛋白MBP、OLIG2以及SHH信号通路相关蛋白SHH的表达明显高于对照组;(4)结果表明,氯倍他索可能通过SHH信号通路促进鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞向少突胶质样细胞分化。 展开更多
关键词 鼻黏膜 间充质干细胞 氯倍他索 少突胶质细胞 细胞分化 鼻黏膜来源细胞 国家自然科学基金 鼻粘膜 间质干细胞 少突神经胶质 组织工程
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骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化及其在神经修复中的应用 被引量:4
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作者 袁章 杨拯 +1 位作者 徐艳 张晓 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期766-769,共4页
近几年来.干细胞已成为生物学和医学领域的研究热点。间充质干细胞来源于中胚层,具有很强的自我更新、增殖能力以及多向分化的潜能。而骨髓间充质干细胞 (bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)因具有易于分离、培养、扩增、... 近几年来.干细胞已成为生物学和医学领域的研究热点。间充质干细胞来源于中胚层,具有很强的自我更新、增殖能力以及多向分化的潜能。而骨髓间充质干细胞 (bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)因具有易于分离、培养、扩增、长期培养的过程中始终保持多向分化的潜能、免疫原性低、遗传背景稳定等特性,使之成为干细胞研究领域的焦点。最近的研究表明BMSCs在体外能被诱导成神经元样细胞,且植人体内能改善神经损伤症状。因此.本文结合最新研究进展就体外诱导BMSCs向神经元样细胞的分化及其在神经修复中的应用作一综述。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经元细胞分化 神经修复 BMSCS 多向分化 长期培养 体外诱导 干细胞来源
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hASCs的单克隆培养及干细胞相关标志物表达的实验研究 被引量:6
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作者 顾繁 高建华 鲁峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1067-1069,1075,共4页
目的通过对人体脂肪组织来源干细胞(hASCs)进行单克隆培养,以获得单克隆hASCs。并比较不同克隆干细胞相关标志物的表达。方法①临床手术切取脂肪组织,经胶原酶消化法原代培养,细胞培养并传至第2代后,有限稀释法进行克隆形成实验。②针... 目的通过对人体脂肪组织来源干细胞(hASCs)进行单克隆培养,以获得单克隆hASCs。并比较不同克隆干细胞相关标志物的表达。方法①临床手术切取脂肪组织,经胶原酶消化法原代培养,细胞培养并传至第2代后,有限稀释法进行克隆形成实验。②针对获得的单克隆hASCs,用流式细胞仪检测不同克隆CD29、CD34、CD44、CD54、CD106、ABCG2的表达。结果①通过克隆形成实验共获得10个单克隆细胞群,并成功扩增到第9代后冻存。②不同克隆细胞群体具有相似的成纤维细胞样形态,但增殖活力各异。③干细胞相关标志检测显示:各个群体均高表达CD29(92.9±7.4%)、CD44(94.6±6.8%),低表达ABCG2(2.5±1.4%),但CD34、CD54和CD106的表达在不同群体间有明显差异。结论酶消化法获得hASCs是含有不同分化潜能干细胞以及其他多种细胞的混合群体。用单克隆培养的方法可能获得纯化的单一细胞群,不同的克隆之间的表面抗原表达既有共性和又有差异,这种差异可能与不同克隆间分化潜能的不同相关。 展开更多
关键词 脂肪组织来源干细胞 组织工程 克隆形成实验 免疫表型
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干细胞来源的新视点:羊水干细胞
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《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1340-1340,共1页
美国韦克福里斯特大学和哈佛大学的研究人员于2007-01-07出版的《自然·生物技术》杂志上报道,他们找到了易于获得并有很强增殖能力的干细胞新来源。
关键词 干细胞来源 羊水 视点 生物技术 研究人员 哈佛大学 增殖能力
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胚胎干细胞源表皮样干细胞分化潜能的初步研究 被引量:2
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作者 张仁礼 李海标 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期65-68,共4页
目的 探讨胚胎干细胞 (ES)源表皮样干细胞的分化潜能 ,为研究其分化的调控及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。 方法 将Hoechst33342标记或未标记的小鼠ES细胞 ,与人羊膜共培养 4d ,诱导其定向分化为表皮样干细胞克隆 ,胰酶消... 目的 探讨胚胎干细胞 (ES)源表皮样干细胞的分化潜能 ,为研究其分化的调控及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。 方法 将Hoechst33342标记或未标记的小鼠ES细胞 ,与人羊膜共培养 4d ,诱导其定向分化为表皮样干细胞克隆 ,胰酶消化后移植于裸鼠皮下 ,10、2 0、30和 4 5d ,对移植后细胞的分化进行形态学和免疫组织化学观察分析。 结果  10~ 2 0d后 ,标记的细胞可分化为由单层或复层上皮样细胞构成的管状或泡状结构 ,它们分别呈 β1 整合素、CK19、CK15、PK、套膜蛋白 (involucrin)和CEA阳性 ;移植 4 5d后 ,可见角化复层扁平上皮、皮脂腺样、汗腺样和毛囊样等组织结构。 结论 小鼠ES源表皮样干细胞具有分化为角化复层扁平上皮和毛囊样、汗腺样和皮脂腺样等结构的潜能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞源表皮干细胞 分化潜能 调控 克隆 形态学 免疫组织化
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全克隆在肿瘤干细胞研究中的应用和局限性 被引量:1
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作者 曾文清 罗佐杰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3458-3459,共2页
全克隆指细胞在体外通过克隆培养法形成的一种紧密规则的克隆。具体方法是使单细胞悬液重新繁衍成新的细胞群体,其中紧密、规则、具备连续传代能力的是全克隆。研究已证实全克隆来源于干细胞.而近年来的肿瘤干细胞(TSC)研究发现肿... 全克隆指细胞在体外通过克隆培养法形成的一种紧密规则的克隆。具体方法是使单细胞悬液重新繁衍成新的细胞群体,其中紧密、规则、具备连续传代能力的是全克隆。研究已证实全克隆来源于干细胞.而近年来的肿瘤干细胞(TSC)研究发现肿瘤组织中存在小部分细胞在克隆培养中形成全克隆,其具有自我增殖、分化的能力,并具有很强的成瘤性. 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 克隆培养 应用 细胞悬液 细胞群体 连续传代 肿瘤组织 克隆来源
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