白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中优化表达及人群血清抗体水平分析

目的 构建白喉毒素突变体CRM197的原核表达载体,在大肠杆菌中表达CRM197蛋白。分析健康人群血清中的CRM197抗体水平。方法 对CRM197基因进行大肠杆菌密码子优化并克隆至pET28a(+)中,经表达条件优化后采用镍柱亲和层析和离子交换层析对重组蛋白CRM197进行纯化,对纯化的CRM197进行Western blot鉴定。最后,经纯化后的CRM197蛋白与健康人群血清进行反应,检测人群血清中针对该蛋白的抗体水平。结果 CRM197蛋白进行了密码子及表达条件优化后,获得了可溶性表达蛋白。经镍柱亲和层析和离子交换层析后其纯度可达95%以上,Western Blot鉴定后能得到单一的特异性条带。经纯化的CRM197蛋白与不同年龄阶段健康人群血清均发生不同程度的抗原抗体反应。结论 利用本研究的策略,CRM197得到高效的可溶性表达,但人群血清中含有高水平的CRM197抗体,这些抗体的存在可能会影响到应用CRM197结合多糖作为抗原进行特异免疫效果的评价以及作为诊断抗原的应用。

1999-2008年辽宁省朝阳市布鲁氏菌病流行病学监测分析

目的通过对朝阳市1999-2008年布鲁氏菌病(布病)的流行病学监测资料进行分析,推断布病流行菌种,找出主要传染源,为布病防治工作提供科学依据。方法采用流行病学监测方法,于1999-2008年对重点地区的重点人群、全市7个县(市、区)的散发病例及暴发病例、畜间牛、羊开展血清学检测。通过对3类群体的血清进行抗体检测,运用Spearman相关的分析方法,找出人群年发病数与牛、羊存栏数,人群年发病数与牛、羊血清抗体阳性率,重点人群血清抗体阳性率与牛、羊血清抗体阳性率的关系。结果人群年发病数与牛、羊存栏数及与羊血清阳性率明显相关(r=0.779,P<0.01;r=0.816,P<0.01;r=0.857,P<0.01);2009年对18例布病患者进行病原菌血培养,有2株为布鲁氏菌羊种菌3型。结论朝阳市布病以羊种菌为主要流行菌种,在防治中羊应作为主要的监管对象。

凤台县2005～2010年钩端螺旋体病监测分析

钩端螺旋体病（简称”钩体病”）是一种分布广泛、危害严重的自然疫源性疾病，在世界各大洲均有流行，我国钩端螺旋体宿主种类繁多，菌群复杂，临床类型多种多样，对人畜危害较为严重。安徽省自1962年证实钩端螺旋体病以来每年都有不同程度的疫情发生。凤台县七十年代洪涝灾害后，1972年和1975年先后发现2次钩体病暴发，1991年发生第3次钩体病暴发，流行形式均为洪水型，流行菌群以波摩那群为主，占83．3％，猪是主要传染源，未发现黄疸出血群钩体病。