人羧酸酯酶1结构和功能的研究进展

人羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,HCE1)是丝氨酸水解酶多基因家族的重要成员之一,它是一种参与肝脏外源物质解毒及代谢的肝羧酸酯酶。HCE1还能参与人体内胆固醇酯和游离脂肪酸的运输和代谢过程,与肝细胞肝癌的发生发展密切相关。文中就近十年来人羧酸酯酶1的分子结构、药物代谢、毒物代谢、脂质代谢及早期诊断肝细胞肝癌等功能方面的相关研究进展进行综述。

肝细胞癌中差异表达N-连接糖蛋白的分析鉴定

目的分析鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素(ConA)、晶状体凝集素(LCH)和雪花凝集素(GNA)组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳(2DE)比较分析差异表达的蛋白质点、串联质谱鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证人羧酸酯酶1(hCE1)、触珠蛋白(HP)及组织蛋白酶D(CD)的差异表达;体外侵袭实验检测CD表达沉默后对HCC的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术鉴定了28个与HCC相关的差异表达蛋白(HCC中高表达和低表达的蛋白均为14个),Western blotting验证hCE1、HP在HCC中明显低表达,组织蛋白酶D前体(pCD)在HCC中高表达;而ConA亲和层析柱富集的ConA-CD在HCC中显著高表达。CD-siRNA介导的CD表达沉默能够显著降低肝癌细胞系SNU449、SNU473的体外侵袭能力。结论 HP、hCE1蛋白表达变化和CD N-糖链变异可能参与了HCC发生发展过程。

荧光检测人羧酸酯酶的研究进展

羧酸酯酶是丝氨酸酯酶大家族的一员,它们主要是对脂类物质起水解作用,其活性直接与许多的疾病相关,人体中主要存在人羧酸酯酶1和人羧酸酯酶2。因此,在检测酶活性方面受到了广大研究者的青睐。传统的检测方法过程繁琐,费时费力,设备昂贵,检测不出酶的活性。近年来荧光探针技术成为测量生物样本中人羧酸酯酶1、人羧酸酯酶2真实活性的实用、敏感、高选择性、高精确度的检测方法。本文主要针对近年来用于检测酶活性的荧光探针进行总结。