黄连素对人结肠癌细胞株THC-8307奥沙利铂耐药性的影响

目的探讨黄连素对人结肠癌细胞株THC-8307奥沙利铂(OXA)耐药性的影响。方法(1)人结肠癌细胞株THC-8307和耐OXA结肠癌细胞株THC-8307/OXA均分为空白对照组、黄连素5μg/mL组、黄连素10μg/mL组、黄连素20μg/mL组进行实验,除空白对照组(不加入任何药物)外,各组加入相应浓度的黄连素进行干预。干预48 h后,观察各组细胞形态并检测各组细胞存活率。(2)THC-8307细胞和THC-8307/OXA细胞均分为OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组进行实验,给予相应的药物进行干预48 h后,观察各组细胞形态,检测各组细胞存活率,并计算各组的半数抑制浓度(IC 50)及逆转倍数。结果(1)空白对照组、黄连素5μg/mL组、黄连素10μg/mL组、黄连素20μg/mL组的THC-8307细胞和THC-8307/OXA细胞形态和生长状态无明显差异,各组细胞存活率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)在THC-8307细胞中,OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组的细胞形态、生长状态、存活率均无差异。在THC-8307/OXA细胞中,OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组的细胞存活率依次降低,各黄连素组的IC 50低于OXA对照组,而逆转倍数高于OXA对照组(均P<0.05)。结论黄连素可逆转耐OXA结肠癌细胞株THC-8307/OXA的耐药性,从而提高OXA对细胞的抑制作用。

干扰REV3L基因表达逆转结肠癌的耐药性

目的探讨跨损伤DNA合成途径(TLS)关键基因REV3L的靶向下调对人耐药结肠癌细胞系耐药性的逆转作用。方法用RNA干扰技术(RNAi)沉默REV3L基因在人耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3L基因mRNA及蛋白均低表达的细胞作为实验组。运用四甲基噻唑蓝(MTT)、流式细胞术和细胞形态学的方法检测肿瘤细胞耐药系数变化、耐药性相对逆转率及细胞凋亡的情况。结果转染mU6pro-siREV3质粒的实验组细胞REV3L基因的表达被成功抑制。基因低表达的细胞耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组,相对耐药逆转率显著高于阴性对照组(P<0.05)。细胞凋亡指标显示实验组细胞凋亡率显著高于两对照组(P<0.05)。结论下调REV3L基因的表达,可逆转人结肠癌细胞的耐药性并促进细胞凋亡,REV3L可以作为肿瘤基因治疗的潜在靶点。