人耳软骨移植抗原性及脱细胞处理对其的影响

目的 研究人耳软骨的移植抗原性及脱细胞处理对其的影响。 方法 用低渗的 Triton X- 10 0为主的方法脱去人耳软骨细胞 ,然后通过抗人主要组织相容性复合体 - I(MHC- I)免疫组织化学染色 ,与单个核细胞共同培养来研究人耳软骨的移植抗原性及脱细胞处理对其的影响。 结果 软骨细胞胞浆抗人 MHC- I为阳性 ,抗原的分布以细胞核周边的细胞质为主。细胞外基质抗人 MHC- I为阴性。而经过脱细胞处理后的人耳软骨则呈抗人 MHC- I阴性。单个核细胞与软骨共同培养时则显示出较高 DNA合成能力 ,与对照组比较有统计学意义 (P<0 .0 5 )。单个核细胞与脱细胞处理的软骨共同培养后的 DNA合成能力较低 ,与单纯的单个核细胞培养展示出新的 DNA合成能力 ,但无显著差异 (P>0 .0 5 )。单个核细胞与正常人耳软骨共同培养的过程中 ,可见移向软骨的单个核细胞随时间增加而增加。相反 ,单个核细胞与脱细胞处理的软骨共同培养后 ,却少见单个核细胞移向脱细胞处理的软骨 (P<0 .0 1)。 结论 软骨具有移植抗原性 ;以低渗的 Triton X- 10 0为主的脱细胞方法可以有效的去除移植物的抗原性 ,从而避免同种异体组织移植排斥反应的发生。

小鼠骨髓基质干细胞与人耳脱细胞软骨复合培养的研究

目的 探讨以小鼠骨髓基质干细胞 (MSCs)作为组织工程软骨的种子细胞 ,在人耳脱细胞软骨支架上生长的可行性。 方法 将人耳软骨经脱细胞处理 ,得到脱细胞软骨支架。抽取鼠的骨髓 ,经离心得到单个核细胞 ,进行体外分离培养得到 MSCs。将鼠的第 2代 MSCs种植于脱细胞软骨支架上 ,体外立体培养 10天 ,在光镜及电镜下观察细胞生长及胶原纤维排列情况。 结果 MSCs在人耳脱细胞软骨支架上能立体培养成活 ,细胞分布不均 ,靠近培养液的一面细胞分布较多 ,其中大部分细胞进入已脱细胞的软骨陷窝内 ,每个陷窝内的细胞数为 1～ 2个。 结论 以鼠 MSCs为种子细胞 ,可在人耳脱细胞软骨支架上良好生长 ,构建组织工程软骨。

利用聚合物-软骨细胞复合物构建人耳状组织工程化软骨

采用自体软骨进行全外耳重建目前仍然是修复重建外科领域的难题之一。外科医生的目的在于制作一个与对侧耳外形相似的新耳,因此要求使用与外耳三维结构相同的可塑性支架。 进行全外耳重建的方法主要有两种:假体植入和自体软骨移植。虽然临床上多用自体软骨移植,但假体移植拥有更多的优点:采用硅橡胶或聚丙烯的假体植入不受供源限制,因预先塑形而节省手术时间,且具有恒定的预构形状。但这些植入物同样具有其它植入性假体的缺点:容易感染,耐久性差,存在异物排斥反应,许多材料尤其是硅橡胶可与受者发生免疫反应。