血小板型磷酸果糖激酶在恶性肿瘤中的研究进展

在恶性肿瘤中,有氧糖酵解一直是研究的热点,在氧气充足的条件下,肿瘤细胞会通过糖酵解途径代谢葡萄糖。磷酸果糖激酶-1(PFK-1)是糖酵解过程中的一种限速酶,可以调节细胞中葡萄糖的氧化。PFK-1包括3种亚型,其中血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)在肿瘤中的表达水平高于其他两种亚型,它是细胞代谢的重要介质。本文对PFKP在恶性肿瘤中的研究进展进行综述。

玉米果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶基因的全长cDNA克隆及表达

以来自“掖单 4号”的玉米果糖 6 磷酸 ,2 激酶 果糖 2 ,6 二磷酸酶 (F2KP)基因cDNA片段 (AF0 0 75 82 )为基础 ,运用RT PCR和RACE技术 ,从“紫玉糯 1号”中获得了 1个 2 4 6 9bp的玉米F2KP基因cDNA克隆 ,命名为mF2KP ,GenBank登录号为AF33414 3。该cDNA包含 1个 2 2 2 6bp的开放阅读框 ,编码 74 1个氨基酸。序列分析表明 ,两个玉米品种的F2KP基因存在一定差异 :mF2KP基因的 3′端非编码区比AF0 0 75 82序列短 38bp ;在mF2KP的15 92、15 93和 16 0 5位置上 ,分别比AF0 0 75 82序列多出了 1个碱基 ,导致阅读框在一个小范围内发生了移位。North ern杂交表明 :不同玉米组织中mF2KP的表达差异明显。在茎中mF2KP的表达水平比叶片、苞叶以及雄花序中的表达水平低 ,但比未成熟种子中的表达水平高。在未成熟种子中 。

中国北方汉族人群肌型肌酸激酶基因(CKMM)A/G多态研究

为研究中国汉族群体CKMM基因NcoⅠ酶切位点的遗传多态性以及该位点的具体多态形式,采用PCRRFLP技术,对306例无血缘关系的健康中国北方汉人的染色体进行检测,并对3种基因型的扩增产物进行基因测序。用卡方检验对所得等位基因频率、基因型频率与其他种族进行比较。结果表明:NcoⅠ位点多态性为A/G颠换;等位基因频率是A=86%,G=14%;基因型频率为:A/A=74%,A/G=24%,G/G=2%;经卡方检验符合HardyWeinberg遗传平衡定律;认为中国汉族群体CKMM基因NcoⅠ酶切位点具有遗传多态性。其基因型频率和等位基因频率在男女间没有显著性差异,与欧美人群相比有极显著差异,而与韩国人相比没有显著性差异。

甘蔗果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶基因的cDNA克隆及序列分析

以高等植物玉米、水稻的果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶(F2KP)的保守区域设计引物,并采用逆转录——聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从甘蔗叶片中扩增F2KP的cDNA片段,命名为SoF2KP-L.该cDNA片段长2 178 bp,含2 085 bp的完整开放阅读框,编码694个氨基酸.序列分析表明,甘蔗F2KP与其它已知的高等植物F2KP具有很高的同源性.

2型糖尿病患者动脉内中膜厚度与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因变异的相关性

目的探讨与2型糖尿病患者动脉内中膜厚度(TMT)进展与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因rs2071023位点的变异的相关性。方法新诊断2型糖尿病患者121例超声测量颈动脉、股动脉和髂动脉的IMT,多聚酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测基因型,比较不同基因型IMT进展的情况,随访5年后复查IMT。结果基线状态下rs2071023位点不同基因型(CC,CG,GG)各组年龄、IMT、BM[、FPG、HbAlc、血脂比较差异无统计学意义。5年后随访患者中有16例失访或指标不全,共105例患者,与基线比较随访5年后颈动脉IMT增厚(0.84 mm比0.92 mm,P=0.004)。按rs2071023基因型分组,结果发现CC基因型组颈动脉IMT在随访5年后增厚(0.86 mm比0.97 mm),不同基因型对IMT增厚的贡献,差异具有统计学意义(P=0.012)。结论

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在极端嗜酸性氧化硫硫杆菌中的表达

构建了含大肠杆菌磷酸果糖激酶 (EC 2 .7.1 .1 1 )基因pfkA的重组质粒pSDK 1 ,利用大肠杆菌pfk缺陷株筛选含目的基因的重组质粒 ,通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌Tt Z2中 ,接合转移频率达 2 6× 1 0 - 6 。重组质粒在Tt Z2中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下传代 5 0次基本保持稳定 (重组质粒保留 68%以上 )。酶活性测定、SDS PAGE及RT PCR结果表明 ,pfkA基因在氧化硫硫杆菌中得到表达 ,但其表达水平低于大肠杆菌。葡萄糖可促进含pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt Z2的生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 。

黑龙江汉族人群肌型肌酸激酶基因CKMM-Nco Ⅰ多态研究

目的:研究黑龙江汉族群体CKMM基因Nco Ⅰ位点的遗传多态性分布。方法:应用PCR-RFLP法测定120名黑龙江籍汉族健康大学生CKMM基因Nco Ⅰ位点的基因型和等位基因的频率分布。结果:等位基因频率是A=87%,G=13%,基因型频率为A/A=76%,A/G=22%,G/G=2%,经卡方检验符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,其基因型频率和等位基因频率在男女间无显著性差异,与欧美人群相比有非常显著性差异,而与我国北方汉族人及韩国人相比没有差异不显著性。

玉米6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶基因的克隆

以玉米Ｆ１减弱表达基因的ｃＤＮＡ片段为探针，从建立的玉米ｃＤＮＡ的文库中分离到相应的ｃＤＮＡ克隆．经测序和序列同源分析证明，该ｃＤＮＡ编码６－磷酸果糖－２－激酶／果糖－２，６－二磷酸酶，其氨基酸序列与人类、大鼠、牛和鸡等动物肝脏相同基因对应区段的相似性分为为６５．７％，６３．４％，６３．７％和６１．２％．

黑龙江汉族速滑运动员优秀耐力能力与肌型肌酸激酶基因(CKMM) A/G多态的关联研究

目的:研究黑龙江汉族速滑运动员优秀耐力能力与肌型肌酸激酶基因(CKMM)A/G多态的关联性。方法:应用PCR-RFLP法测定120名黑龙江籍汉族健康大学生及25名黑龙江汉族耐力型速滑运动员CKMM基因A/G位点的基因型和等位基因的频率分布。结果:大学生等位基因频率为A=87%,G=13%,基因型频率为A/A=76%,A/G=22%,G/G=2%;速滑运动员等位基因频率为A=84%,G=16%,基因型频率为A/A=68%,A/G=32%,经卡方检验符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,两组的基因型频率和等位基因频率在男女间无显著性差异,与欧美人群相比有显著性差异,与我国北方汉族人及韩国人相比差异不具有显著性。两组间基因型频率和等位基因频率无显著性差异。结论:黑龙江汉族耐力型速滑运动员的优秀耐力素质与CKMM基因N coⅠ多态性无关,该位点不能作为其耐力素质选材的遗传学标记。

新生儿缺氧缺血性脑病肌酸磷酸激酶心型同工酶、血清血管内皮生长因子的临床研究

目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)时肌酸磷酸激酶心型同工酶(CK-MB)、血清血管内皮生长因子(VEGF)的动态变化及其意义。方法:以51例HIE的足月新生儿为HIE组,50例足月正常健康新生儿为对照组。分别在出生后24h、72h、7d采集空腹静脉血,检测血清中总CK-MB及VEGF。结果:HIE组血清CK-MB及VEGF均在24h表达为最高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),随后下降;两者均随病情加重而升高;其中,HIE中度组第7天CK-MB降至正常水平,重度组仍明显高于对照组(P<0.01),而VEGF在72h、7d时与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:CK-MB、VEGF是HIE患儿心、脑损伤的早期敏感指标,对HIE的早期诊断、病情程度判断及预后评估具有重要的参考价值。

我国优秀冬季项目运动员肌型肌酸激酶基因(CKMM)A/G多态分布研究

目的:研究我国优秀冬季项目运动员肌型肌酸激酶基因(CKMM)A/G多态分布及其与优秀耐力能力的关联性。方法:应用MALDI-TOF技术测定120名我省汉族健康大学生及50名我国优秀冬季项目运动员CKMM基因A/G位点的基因型和等位基因的频率分布。结果:等位基因在对照组中的频率为A=87%,G=13%,基因型频率为A/A=76%,A/G=22%,G/G=2%;冬季项目运动员等位基因频率为A=86%,G=14%,基因型频率为A/A=72%,A/G=28%,其中名25耐力项目运动员等位基因频率为A=85%,G=15%,基因型频率为A/A=70%,A/G=30%,基因型频率和等位基因频率在对照组与耐力运动员组间差异也不显著。结论:我国耐力型冬季项目运动员的优秀耐力素质与CKMM基因N coⅠ多态性无关,该位点不能作为其耐力素质选材的遗传学标记。

CRPPA基因变异导致肢带型肌营养不良症1例

报告1例CRPPA基因变异所致常染色体隐性遗传性肢带型肌营养不良症患者,总结CRPPA基因相关肌病的临床特点和致病变异谱。患者主要临床表现为双下肢无力7年,进行性加重。血清肌酸激酶水平轻度增高。肌电图提示肌源性损害。肌肉MRI表现为双侧大腿、小腿多发肌群信号异常。骨骼肌活检组织电镜下可见肌细胞胞浆内肌浆网轻度扩张,小脂滴轻度增多,可见少量萎缩肌细胞。基因检测提示携带CRPPA基因c.1114_1116delGTT(p.V372del)纯合变异。患者父母携带该位点杂合变异。根据ACMG指南将该变异分类为致病性变异。患者明确诊断为肌营养不良-抗肌萎缩相关糖蛋白病C7型。本文拓展了CRPPA基因和抗肌萎缩相关糖蛋白病的遗传变异谱和临床表型谱。

脑卒中患者血清同型半胱氨酸和血清肌酸磷酸激酶的改变

目的:探讨脑卒中患者血清同型半胱氨酸(Hcy)和血清肌酸磷酸激酶(CK)的改变.方法:收集100例脑卒中患者的血样,其中脑梗死58例,脑出血42例;80例健康对照者的血样,测定Hcy、CK、HDL-ch、LDL-ch、Glu.结果:脑卒中患者Hcy、CK、HDL-ch、LDL-ch与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),脑梗死和脑出血两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:Hcy和CK两项指标的联合检测对于指导脑卒中的临床诊断和治疗具有重要价值.

血小板型磷酸果糖激酶介导的代谢重编程机制及其在疾病中的作用研究进展

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)是细胞能量代谢糖酵解途径中重要的限速酶,在细胞内的表达保持动态平衡且相对稳定,发挥着调控细胞生物合成和能量代谢的作用,是代谢类疾病和癌症领域的研究热点。当细胞所处微环境发生变化时,如氧供应不足、代谢底物匮乏或细胞癌变时,细胞内出现PFKP介导的通过改变自身代谢模式而形成的代谢重编程,从而改善环境变化引起的不利影响;另一方面,PFKP在调控以Warburg效应为主的代谢模式中发挥重要作用,使代谢模式向糖酵解转移,形成有氧糖酵解方式。本文主要围绕PFKP介导的代谢重编程作用机制及其参与肿瘤、呼吸系统等疾病的病理生理机制和靶向治疗研究进展进行综述。

基于快速康复理念的团队康复模式对缺血型股骨头坏死患者术后肌酸磷酸激酶、Harris评分及改良Barthel指数的影响

目的调研和分析基于快速康复理念的团队康复模式对缺血型股骨头坏死患者术后肌酸磷酸激酶、Harris评分及改良Barthel指数的影响。方法将2016年7月至2018年7月收治的60例缺血型股骨头坏死患者纳入至本次研究,依照数字随机表法将其分为对照组与观察组,每组30例。2组患者皆行髋关节置换术,在此基础上,对照组给予基础护理,观察组则行基于快速康复理念的团队康复模式,比较2组患者血清肌酸磷酸激酶水平变化情况,统计Harris评分以及改良Barthel指数,观察生活质量变化情况。结果对照组患者术后血清肌酸磷酸激酶水平显著高于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组患者的Harris评分、改良Barthel指数以及生活质量各项评分明显低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于快速康复理念的团队康复模式在缺血型股骨头坏死患者术后康复治疗的效果显著,值得在临床治疗中推广。

磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3在增生型糖尿病性视网膜病变患者玻璃体和血清中的表达及其相关性分析

目的定量检测增生型糖尿病性视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者玻璃体和血清中磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3(phospofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平,探讨PFKFB3在PDR患者中可能的作用机制。方法纳入确诊为PDR拟行单眼玻璃体切割术的患者42例(42眼)作为试验组,并根据术前是否行玻璃体内注射抗VEGF药物进一步将试验组分为非注药组和注药组,纳入同期诊断为全层黄斑裂孔(full thickness macular hole,FTMH)及黄斑前膜(preretinal membrane of the macula,PRMM)的20例(20眼)患者作为对照组。收集各组患者的玻璃体和血清标本,定量检测各组标本中的PFKFB3和VEGF表达水平,并进行统计学分析。结果试验组患者玻璃体中PFKFB3水平为(463. 17±381. 28) ng·L^-1,明显高于对照组[(158. 43±86. 88)ng·L^-1](t=4. 919,P <0. 001),试验组血清中PFKFB3水平为(153. 45±83. 78) ng·L^-1,明显高于对照组[(92. 72±32. 42)ng·L^-1](t=4. 098,P <0. 001)。非注药组患者玻璃体中PFKFB3水平为(797. 29±387. 44) ng·L^-1,明显高于注药组[(257. 56±181. 49) ng·L^-1](t=5. 230,P <0. 001),而非注药组血清中PFKFB3水平与注药组差异无统计学意义(t=0. 679,P=0. 501)。非注药、注药组和对照组患者玻璃体与血清中的PFKFB3水平无相关性(非注药组:r=0. 194,P=0. 471;注药组:r=0. 071,P=0. 731;对照组:r=0. 254,P=0. 279)。试验组患者玻璃体中VEGF水平为(1713. 50±1386. 90) ng·L^-1,明显高于对照组[(205. 52±92. 93) ng·L^-1](t=7. 014,P <0. 001);试验组血清中VEGF水平为(224. 98±168. 08) ng·L^-1,明显高于对照组[(86. 80±36. 51) ng·L^-1](t=5. 082,P <0. 001)。非注药组患者玻璃体中VEGF水平为(3399. 72±510. 06) ng·L^-1,明显高于注药组[(675. 82±242. 57) ng·L^-1](t=20. 014,P <0. 001),非注药组血清中VEGF水平为(373. 40±174. 23) ng·L^-1,明显高于注药组[(133. 65±73. 10) ng·L^-1](t=5. 228,P <0. 001)。非注药、注药组和对照组患者玻璃体与血清中的VEGF水平均存在正相关关系(非注药组:r=0. 952,P <0. 001;注药组:r=0. 423,P=0. 031;对照组:r=0. 776,P <0. 001)。非注药组、注药组和对照组患者玻璃体中PFKFB3与VEGF水平均存在正相关关系(非注药组:r=0. 865,P <0. 001;注药组:r=0. 587,P=0. 002;对照组:r=0. 807,P <0. 001),而在血清中仅注药组的PFKFB3与VEGF水平存在正相关关系(r=0. 444,P=0. 023)。结论PFKFB3可能参与了PDR的发生发展过程;VEGF可能通过上调PFKFB3的表达而参与PDR的发生发展。

多花黄精果糖激酶和GDP-甘露糖焦磷酸化酶的基因克隆及酶结构性质

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua,PC)果糖激酶(PCFRK)和GDP-甘露糖焦磷酸化酶(PCGMPP)是黄精多糖生物合成中重要的关键酶,为探究它们在黄精多糖生物合成途径中的作用,基于转录组测序数据分析,利用RT-PCR技术对这两种关键酶基因进行克隆,并分析酶蛋白的理化性质及结构特点。PCFRK开放读码框(ORF)为1725 bp,编码574个氨基酸,具有两个磷酸果糖激酶B家族的特征保守基序;PCGMPP的ORF为1086 bp,编码361个氨基酸,具有焦磷酸化酶家族的保守位点和活性位点。系统进化树分析发现在已知数据库中PC FRK与深圳拟兰FRK亲缘关系最近;而PC GMPP与芦笋GMPP亲缘关系最近。基因表达分析说明PCFRK和PCGMPP在根状茎中的基因表达总量明显高于其他组织,这与多花黄精根茎中多糖含量高于其他组织是一致的。研究为PCFRK和PCGMPP两种关键酶功能的进一步研究及黄精多糖生物合成途径的解析奠定基础。

老化对磷酸烯醇型丙酮酸激酶基因转录作用的影响

使用６～２６月龄Ｆｉｃｈｅｒ３４４禁食雄性大鼠肝脏研究了老化对磷酸烯醇型丙酮酸激酶（ＧＴＰ）（ＰＥＰＣＫ．ＥＣ．４．１．１．３２）基因表达的影响，结果表明６～２６月龄大鼠肝脏提取物中的ＰＥＰＣＫ活力约下降５０％，且与年龄相关的ＰＥＰＣＫ活性的下降与ＰＥＰＣＫｍＲＮＡ水平的下降相平行。因此，ＰＥＰＣＫ活性的下降可能是因用于进行转译作用的ｍＲＮＡ的转录作用下降，且６月龄到２６月龄大鼠肝脏的ＰＥＰＣＫｍＲＮＡ的稳定性与半衰期是近似的。进一步实验发现２６月龄大鼠肝脏ＰＥＰＣＫ的核转录作用比６月龄大鼠肝脏ＰＥＰＣＫ的核转录作用减少４０％。因此，禁食大鼠肝脏ＰＥＰＣＫｍＲＮＡ水平与年龄相关的下降，是由于ＰＥＰＣＫ基因转录作用的下降。

大围山微型鸡和艾维茵肉鸡PFKM基因表达量与pH值及肌糖原含量相关性研究

为研究家禽肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)m RNA表达量与p H_(45min)值及肌糖原含量的相关性,检测了大围山微型鸡和艾维茵肉鸡不同日龄肌肉组织中PFKM mRNA表达量、pH_(45min)值和肌糖原含量。结果显示:大围山微型鸡肌肉中PFKM mRNA表达量与肌糖原含量整体上均高于艾维茵肉鸡,而pH_(45min)值则是艾维茵肉鸡高于大围山微型鸡;PFKM mRNA表达量与pH_(45min)值呈显著负相关(P<0.05),与肌糖原含量呈正相关;肌糖原含量与pH_(45min)值呈负相关,但相关性不显著(P>0.05)。研究表明PFKM基因可能是影响家禽肉品质的重要候选基因。

伴肌酸磷酸激酶增高的低钾型周期性麻痹2例报告

发现2例低钾型周期性麻痹患者有血清肌酸磷酸激酶（CPK）为主的肌酶升高情况,且与病情好转呈负相关性、报告如下。病历资料例1：患者,男,45岁。平素体健,为首次发病,诱因有劳累,夜间,双下肢肌肉疼痛,痛醒,发现四肢乏力。无寒战、发热。