人肝内胆管癌相关成纤维细胞的分离、纯化和鉴定及对胆管癌细胞生长和迁移的影响

目的探讨人肝内胆管癌相关成纤维细胞(iCAF)的分离、纯化和鉴定,并初步探究其对肿瘤细胞的影响作用。方法肝内胆管癌标本通过酶消化法(Ⅰ型胶原酶与RPMI 1640混合消化液)分离获得原代细胞,并通过密度梯度离心法进行纯化,iCAF的鉴定通过免疫化学、荧光染色及流式细胞检测进行。通过CCK8及Transwell实验观察iCAF条件培养基对胆管癌细胞的影响作用。结果获得的iCAF以长梭形为主,细胞生长密集相互交织形成网状或漩涡状;免疫细胞化学染色及荧光染色显示:α-SMA阳性、FSP-1阳性;流式细胞检测FSP-1阳性率为98.2%。iCAF条件培养基明显促进了肿瘤细胞增殖和迁移。结论成功分离并纯化了人iCAF,并初步证明iCAF可促进胆管癌细胞增殖和迁移能力,为进一步研究iCAF在肿瘤发生发展中的具体作用机制奠定了重要基础。