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姜黄素对人肝星状细胞株LX-2瘦素和脂联素表达的影响 被引量:3
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作者 吕霞 舒建昌 +2 位作者 付景 叶国荣 朱海燕 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1641-1644,共4页
目的观察姜黄素对人肝星状细胞株LX-2瘦素和脂联素表达的影响,探讨瘦素和脂联素在姜黄素抗肝纤维化中的作用。方法体外培养人肝星状细胞株LX-2,分别给予0、10、20、30、40、50、60、70、80μmol/L的姜黄素处理,MTT法检测细胞增殖并绘制... 目的观察姜黄素对人肝星状细胞株LX-2瘦素和脂联素表达的影响,探讨瘦素和脂联素在姜黄素抗肝纤维化中的作用。方法体外培养人肝星状细胞株LX-2,分别给予0、10、20、30、40、50、60、70、80μmol/L的姜黄素处理,MTT法检测细胞增殖并绘制增殖曲线;根据增殖检测结果,选取30、40、50μmol/L姜黄素分别作用于LX-2,免疫细胞化学染色方法分别检测细胞中瘦素、脂联素的表达,计算阳性表达率。结果 10、20μmol/L姜黄素作用下LX-2增殖与0μmol/L姜黄素比较差异无统计学意义(P>0.05);在30~80μmol/L浓度范围内,LX-2增殖明显降低(P<0.05)。正常LX-2的瘦素和脂联素表达率分别为(90.40±8.37)%和(29.88±3.79)%,30~50μmol/L姜黄素处理24 h后,瘦素表达减少,依次为(78.83±6.81)%、(52.60±4.67)%和(34.02±4.50)%,而脂联素表达升高,依次为(48.69±8.34)%、(73.86±5.73)%和(83.22±3.92)%,与正常LX-2细胞比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素可通过抑制肝星状细胞中瘦素表达,诱导脂联素表达而发挥抑制细胞增殖、抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 瘦素 脂联素 星状细胞lx-2 增殖 纤维化
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基于代谢组学研究肝复乐胶囊抑制LX-2细胞激活机制
2
作者 柯畅 刘艳菊 +3 位作者 涂济源 张方蕾 高建龙 周仲实 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期672-678,共7页
目的 研究肝复乐胶囊对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞LX-2激活的影响。方法 LX-2细胞分为对照组、模型组和肝复乐125、250、500μg/mL组。除对照组外,其余各组LX-2细胞给予5 ng/mL TGF-β1刺激24 h建立肝纤维化模型。通过... 目的 研究肝复乐胶囊对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞LX-2激活的影响。方法 LX-2细胞分为对照组、模型组和肝复乐125、250、500μg/mL组。除对照组外,其余各组LX-2细胞给予5 ng/mL TGF-β1刺激24 h建立肝纤维化模型。通过分子生物学手段(RT-qPCR及Western blot等)检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1A1)表达。结合GC-MS法和代谢组学技术检测各组细胞代谢变化,寻找与肝星状细胞激活相关差异代谢物,进行通路富集,预测可能代谢通路。结果 与模型组比较,肝复乐各剂量组LX-2细胞α-SMA、COL1A1的mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。代谢组学分析显示,丙酸、丁酸、苯丙氨酸、L-苏氨酸、肌醇、D-半乳糖、甘油、油酸、D-甘油酯与肝星状细胞激活关系密切,且在给药后回调,并富集得到4条代谢途径。结论 肝复乐胶囊能够剂量依赖性地抑制TGF-β1对LX-2细胞的激活,并缓解其代谢异常,其机制可能是通过调节半乳糖代谢,甘油酯代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢等途径实现的。 展开更多
关键词 复乐胶囊 星状细胞lx-2 TGF-Β1 GC-MS 代谢组学
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橘皮素的提取分离、改性及对人体肝星状细胞LX-2的抑制作用 被引量:1
3
作者 徐兰英 赵辉 +3 位作者 张婷 吴伦 龙涛 李士明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期43-46,共4页
通过分离纯化及改性得到橘皮素和5-去甲氧基橘皮素,并研究其对人体肝星状细胞株LX-2的抑制作用。通过无水乙醇提取、氯仿萃取从陈皮中得到多甲基黄酮混合物,再以不同浓度的乙酸乙酯和石油醚的混合液为洗脱剂,采用硅胶柱层析分离纯化多... 通过分离纯化及改性得到橘皮素和5-去甲氧基橘皮素,并研究其对人体肝星状细胞株LX-2的抑制作用。通过无水乙醇提取、氯仿萃取从陈皮中得到多甲基黄酮混合物,再以不同浓度的乙酸乙酯和石油醚的混合液为洗脱剂,采用硅胶柱层析分离纯化多甲基黄酮混合物,得到橘皮素纯品。将橘皮素置于盐酸乙醇溶液中回流,对所得产物进行纯化即可得5-去甲氧基橘皮素,采用质谱和核磁共振谱进行结构确证。利用人体肝星状细胞株LX-2细胞作为工具细胞,研究其生物活性。结果表明,5-去甲氧基橘皮素在12.5μmol/L条件下对人肝星状细胞株LX-2的抑制率即可达到50%,而橘皮素需要在近150μmol/L条件下才能达到50%的抑制率,即改性后的橘皮素对人体肝细胞的抑制有效率增加了10倍以上。 展开更多
关键词 橘皮素 5-去甲氧基橘皮素 多甲氧基黄酮 星状细胞lx-2
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护肝布祖热对CCl4诱导人肝星状细胞LX-2活化的作用及机制研究 被引量:2
4
作者 杨建华 杨秀娟 +2 位作者 赵耀 杜超 胡君萍 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1315-1321,共7页
目的探讨护肝布祖热(HGBZR)抗肝损伤的作用及机制。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,采用MTT法检测LX-2细胞存活率以确定四氯化碳(CCl)造模浓度和药物干预浓度。细胞实验分为6组:空白组、模型组、阳性组(水飞蓟素,10μg·mL)及HGBZR... 目的探讨护肝布祖热(HGBZR)抗肝损伤的作用及机制。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,采用MTT法检测LX-2细胞存活率以确定四氯化碳(CCl)造模浓度和药物干预浓度。细胞实验分为6组:空白组、模型组、阳性组(水飞蓟素,10μg·mL)及HGBZR低、中、高剂量组(5、10、20μg·mL),除空白组以外,其余各组分别加入终浓度5 mmol·L^(-1)CCl损伤干预24 h,然后再进行药物干预24 h。采用MTT法检测各组细胞存活率;Annexin V/PE双染法检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测各组细胞α-平滑肌动蛋白(SMA)、TIMP-1、PTP1B、转化生长因子(TGF)-β、Smad3、Smad4、Smad7、CHOP、PERK、IRE1、ATF6 mRNA表达情况;Western Blot法检测各组细胞Jak1、Stat3、TGF-β、Smad3、Smad4、Smad7、CHOP、Caspase12、核因子(NF)-κB p65蛋白表达情况。结果随着CCl浓度(5~30 mmol·L^(-1))升高,LX-2细胞存活率逐渐下降,当CCl浓度为5 mmol·L^(-1)时细胞呈现增殖状态,故选择5 mmol·L^(-1)CCl处理24 h作为肝损伤模型复制条件。与模型组比较,HGBZR中、高剂量组的细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显升高(P<0.05);LX-2细胞的α-SMA、TIMP-1、TGF-β、Smad3、Smad4、CHOP、PERK、IRE1、ATF6 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),PTP1B、Smad7 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);LX-2细胞的Jak1、Stat3、TGF-β、Smad4、CHOP、Caspase12及NF-κB p65(核蛋白)蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Smad7、NF-κB p65(质蛋白)蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论HGBZR可能通过调控TGF-β/Smad、Jak/Stat和内质网应激信号通路相关目标基因转录水平及蛋白表达,促进活化LX-2细胞的凋亡,对CCl诱导的化学性肝损伤具有一定保护作用。 展开更多
关键词 布祖热 损伤 人肝星状细胞lx-2 四氯化碳 TGF-Β/SMAD信号通路 JAK/STAT信号通路 内质网应激信号通路
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IL-10-HGF融合基因对肝星状细胞LX-2增殖的抑制作用
5
作者 蒋红艳 杨林 +2 位作者 欧阳贵 谢小明 王伟 《中南医学科学杂志》 CAS 2013年第3期233-237,共5页
目的探讨人白介素-10(IL-10)与人肝细胞生长因子(HGF)融合基因对肝星状细胞LX-2增殖的抑制作用。方法采用PCR方法,分别构建pcDNA3.1-flag-IL-10、pcDNA3.1-flag-HGF与pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF真核表达载体,瞬时转染肝星状细胞LX-2;利用R... 目的探讨人白介素-10(IL-10)与人肝细胞生长因子(HGF)融合基因对肝星状细胞LX-2增殖的抑制作用。方法采用PCR方法,分别构建pcDNA3.1-flag-IL-10、pcDNA3.1-flag-HGF与pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF真核表达载体,瞬时转染肝星状细胞LX-2;利用RT-PCR和Western blot检测LX-2细胞中IL-10、HGF的表达;选用MTT法检测转染24、48和72 h后LX-2细胞的增殖情况。结果成功构建了IL-10-HGF融合基因真核表达载体pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF。与pcDNA3.1-flag-IL-10和pcDNA3.1-flag-HGF组比较,pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF融合组48 h和72 h LX-2细胞数减少(n=3,P<0.05)。结论 IL-10-HGF融合基因可有效抑制肝星状细胞LX-2的增殖。 展开更多
关键词 人白介素10 人肝细胞生长因子 融合基因 星状细胞lx-2
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Reversine对人肝星状细胞系LX-2凋亡的影响
6
作者 张强 黄迪 +6 位作者 黄宇 麦振豪 张汉意 张帅 李宁 翁杰锋 古维立 《广州医药》 2017年第1期59-62,共4页
目的探讨Reversine对人肝星状细胞系LX-2凋亡的影响。方法设对照组和Reversine干预组,其中Reversine干预组分为7个浓度,分别为1,5,10,20,40,80,120μg/m L,CCK-8法检测Reversine对LX-2增殖的影响,选取最佳浓度。将细胞重悬在加入5μL FI... 目的探讨Reversine对人肝星状细胞系LX-2凋亡的影响。方法设对照组和Reversine干预组,其中Reversine干预组分为7个浓度,分别为1,5,10,20,40,80,120μg/m L,CCK-8法检测Reversine对LX-2增殖的影响,选取最佳浓度。将细胞重悬在加入5μL FITC-Annexin V和5μL PI,用流式细胞仪进行了凋亡率分析,免疫荧光检测凋亡蛋白bcl-2及caspase 3。结果 Reversine可促进LX-2细胞凋亡,随着Reversine浓度增加,LX-2的凋亡可呈剂量依赖关系,其中10μg/m L为最佳浓度,LX-2细胞的bcl-2蛋白的表达显著下降而cleaved-caspase 3的表达显著上升。结论 Reversine可通过促进caspase-3蛋白活化、抑制bcl-2蛋白表达的方式诱导LX-2凋亡。 展开更多
关键词 Reversine 纤维化 星状细胞lx-2
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委陵菜酸通过阻断核因子κB(NF-κB)信号通路抑制LX-2人肝星状细胞增殖并促进其凋亡 被引量:1
7
作者 李艳 张晓琳 +3 位作者 韦园园 温淑娟 林兴 黄权芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期897-903,共7页
目的研究委陵菜酸(TA)对核因子κB(NF-κB)信号通路的调控作用,分析其对LX-2人肝星状细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将培养的LX-2细胞分为正常组、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激组(20 ng/mL)、1-吡咯烷二硫代羧酸铵盐(PDTC)组(P... 目的研究委陵菜酸(TA)对核因子κB(NF-κB)信号通路的调控作用,分析其对LX-2人肝星状细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将培养的LX-2细胞分为正常组、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激组(20 ng/mL)、1-吡咯烷二硫代羧酸铵盐(PDTC)组(PDGF-BB联合10 mmol/L PDTC)、TA处理组[PDGF-BB分别联合(35、25、15)μmol/LTA]。噻唑蓝(MTT)法检测TA对细胞增殖的影响,试剂盒检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况。实时定量PCR检测核因子κBp65(NF-κB p65)mRNA水平,Western blot法检测NF-κB p65、磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB p65抑制蛋白α(IκBα)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β(TGF-β)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达。结果与模型组相比,TA明显抑制LX-2细胞的活化增殖,降低α-SMA和TGF-β的蛋白表达;同时,TA处理可降低细胞中ASL、ALT和TBIL的水平,减少细胞损伤;TA明显诱导LX-2细胞凋亡,下调Bcl2表达同时上调BAX的表达。TA能明显抑制NF-κB p65 mRNA和蛋白表达,抑制NF-κB p65和IκBα蛋白的磷酸化。结论TA通过阻断NF-κB信号通路抑制肝星状细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 委陵菜酸(TA) lx-2人肝星状细胞 核因子κB(NF-κB) 细胞增殖 细胞凋亡
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IRF3抑制LPS诱导肝星状细胞LX-2的炎症因子的分泌 被引量:1
8
作者 刘云洁 程玮 +2 位作者 李丽 顾萌 徐涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期178-182,共5页
目的研究干扰素调节因子3(IRF3)对LPS诱导的肝星状细胞中LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α分泌的影响。方法利用脂质体将质粒pc DNA3-IRF3瞬时转染到人肝星状细胞LX-2中过量表达IRF3,qRT-PCR和Western blot法检测转染效率,并检测炎症因子IL-6... 目的研究干扰素调节因子3(IRF3)对LPS诱导的肝星状细胞中LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α分泌的影响。方法利用脂质体将质粒pc DNA3-IRF3瞬时转染到人肝星状细胞LX-2中过量表达IRF3,qRT-PCR和Western blot法检测转染效率,并检测炎症因子IL-6及TNF-α的表达。结果qRT-PCR和Western blot结果显示用2μg/ml的LPS刺激LX-2细胞12 h后,与正常组比较,IRF3的表达量明显降低,而诱导产生的炎症因子TNF-α及IL-6的表达量则明显上升。而pc DNA3转入LX-2细胞12 h后,与pc DNA3空载体对照组比较,pc DNA3转染组中炎症因子IL-6及TNF-α表达量在LX-2细胞中被显著抑制。结论在肝星状细胞中,IRF3能够抑制LPS诱导的肝星状细胞LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α的表达。 展开更多
关键词 IRF3 TNF-Α 星状细胞 lx-2细胞 炎症因子
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葫芦茶苷通过调控Nrf2/HO-1信号通路抑制肝星状细胞增殖活化的作用 被引量:4
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作者 韦璐莹 卢清华 +2 位作者 甘昌鑫 谢冬梅 唐爱存 《广西医学》 CAS 2022年第10期1125-1130,共6页
目的分析葫芦茶苷对肝星状细胞(HSC)增殖活化的抑制作用,并基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路探讨其可能的作用机制。方法将人肝星状细胞系LX-2细胞分为空白对照组、模型组和葫芦茶苷不同剂量组。除空白对照组外... 目的分析葫芦茶苷对肝星状细胞(HSC)增殖活化的抑制作用,并基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路探讨其可能的作用机制。方法将人肝星状细胞系LX-2细胞分为空白对照组、模型组和葫芦茶苷不同剂量组。除空白对照组外,其余各组加入含转化生长因子β1(TGF-β1)的培养液使细胞增殖活化;刺激24 h后,葫芦茶苷不同剂量组加入相应剂量的葫芦茶苷干预24 h。检测各组LX-2细胞的增殖情况,细胞上清液Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,以及细胞中α-SMA、ColⅠ、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果(1)与空白对照组比较,模型组细胞增殖明显(P<0.05);与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组LX-2细胞的增殖均受到抑制,且随着药物剂量的增加抑制效果越明显(均P<0.05)。选取抑制率适宜的剂量20、40、80μg/mL(葫芦茶苷低、中、高剂量组)进行后续实验。(2)与空白对照组比较,模型组细胞上清液ColⅠ、ColⅢ和α-SMA表达水平升高,α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白表达水平上调,Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平下调(均P<0.05);与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组细胞上清液ColⅠ、ColⅢ和α-SMA表达水平降低,α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白表达水平下调,Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平上调(均P<0.05);葫芦茶苷低、中、高剂量组细胞上清液ColⅠ和α-SMA表达水平、细胞中ColⅠ的mRNA表达水平依次降低,Nrf2和HO-1蛋白表达水平依次升高(均P<0.05)。结论葫芦茶苷可显著抑制HSC的活化与增殖,具有抗肝纤维化的作用,其可能是通过调节Nrf2/HO-1信号途径的表达而发挥作用。 展开更多
关键词 纤维化 葫芦茶苷 星状细胞lx-2 细胞活化 细胞增殖 核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1信号通路
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miR-223-3p调控人肝星状细胞增殖及迁移的作用及分子机制
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作者 胡毅翔 左清平 +3 位作者 刘任祝 闫庆梓 邢琪昌 刘湘 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第9期1089-1095,共7页
目的探讨miR-223-3p抑制人肝星状细胞LX-2增殖、迁移的作用及分子机制。方法以TGF-β1诱导活化的LX-2细胞为研究对象,分为空白对照组、miR-223-3p mimics组、NC mimics组,分别采用空白溶剂、miR-223-3p mimics、模拟物对照(NC mimics)... 目的探讨miR-223-3p抑制人肝星状细胞LX-2增殖、迁移的作用及分子机制。方法以TGF-β1诱导活化的LX-2细胞为研究对象,分为空白对照组、miR-223-3p mimics组、NC mimics组,分别采用空白溶剂、miR-223-3p mimics、模拟物对照(NC mimics)转染干预24,48 h。采用CCK-8法检测miR-223-3p mimics对LX-2细胞增殖活性的影响,划痕实验检测miR-223-3p mimics对LX-2细胞迁移的抑制作用。采用miRNA靶基因预测数据库Targetscan、miRanda预测miR-223-3p的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验验证靶基因,RT-qPCR和Western blot法分别检测miR-223-3p mimics对NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达的影响。结果与空白组及NC mimics相比,miR-223-3p mimics组LX-2细胞增殖和迁移能力显著降低(P<0.05)。靶基因预测结果显示NLRP3与miR-223-3p碱基序列存在8个连续的碱基互补配对,表明NLRP3可能为miR-223-3p的下游靶基因。双荧光素酶报告基因实验显示,NLRP3为miR-223-3p的靶基因。实时荧光定量PCR及Western blot检测结果显示,与空白组及阴性对照NC mimics组相比,miR-223-3p mimics组LX-2细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论miR-223-3p通过靶向作用于NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路进而抑制人肝星状细胞株LX-2的增殖及迁移。 展开更多
关键词 miR-223-3p 人肝星状细胞 lx-2细胞 NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路 MIMICS
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委陵菜酸调控PI3K/Akt/mTOR通路对肝星状细胞活化增殖的影响 被引量:4
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作者 李艳 张晓琳 +3 位作者 韦园园 温淑娟 林兴 黄权芳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1965-1969,共5页
目的 探讨委陵菜酸对人肝星状细胞(LX-2)细胞增殖、活化以及对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响,分析其抗肝纤维化的作用机制。方法 用人血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激LX-2构建细胞模型。试剂盒检测细胞中LDH水平,MTT法检测LX-2细胞增... 目的 探讨委陵菜酸对人肝星状细胞(LX-2)细胞增殖、活化以及对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响,分析其抗肝纤维化的作用机制。方法 用人血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激LX-2构建细胞模型。试剂盒检测细胞中LDH水平,MTT法检测LX-2细胞增殖,细胞划痕和集落生成实验观察LX-2细胞迁移和增殖情况,RT-qPCR检测Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达,Western blot检测Col-I、PI3K、AKT、mTOR等信号通路相关蛋白表达。结果 与正常组比较,PDGF-BB促进LX-2细胞增殖,增加Col-I mRNA和蛋白表达,提高PI3K、Akt、p70S6K、mTOR蛋白的磷酸化水平;与刺激组比较,委陵菜酸和LY294002均能抑制细胞增殖和迁移,减少Col-I蛋白表达、降低Col-Ⅰ和Col-ⅢmRNA表达,抑制细胞内PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平。结论 委陵菜酸能抑制LX-2细胞的活化、增殖,减少纤维化胶原的表达,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 委陵菜酸 人肝星状细胞(lx-2) PI3K/Akt/mTOR信号通路
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鹅不食草心菊内酯对肝星状细胞PI3K/Akt和NF-κB 信号通路的调控作用 被引量:4
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作者 温淑娟 白法承 +3 位作者 李艳 韦园园 黄权芳 林兴 《中药材》 CAS 北大核心 2021年第5期1224-1228,共5页
目的:研究鹅不食草心菊内酯对IL-1β刺激下LX-2人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)PI3K/Akt和NF-κB信号通路的影响。方法:将LX-2细胞分为正常对照组、模型组、LY294002组及鹅不食草心菊内酯高(2μmol/L)、中(1μmol/L)、低(0.5... 目的:研究鹅不食草心菊内酯对IL-1β刺激下LX-2人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)PI3K/Akt和NF-κB信号通路的影响。方法:将LX-2细胞分为正常对照组、模型组、LY294002组及鹅不食草心菊内酯高(2μmol/L)、中(1μmol/L)、低(0.5μmol/L)浓度组。除正常对照组外,其余各组均采用白细胞介素1β(IL-1β)刺激30 min使其增殖活化后,再加入相应药物干预24 h。采用MTT法检测LX-2细胞增殖;试剂盒法检测细胞上清液AST、ALT、LDH水平;实时荧光定量PCR检测相关mRNA表达;Western blot法检测PI3K/Akt和NF-κB信号通路中相关蛋白表达。结果:鹅不食草心菊内酯能显著抑制IL-1β刺激下LX-2细胞活化与增殖,降低细胞内Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、P70S6K、Akt、NF-κB P65 mRNA表达,并能显著降低PI3K、P70S6K、Akt、P65、IκBα蛋白磷酸化水平。结论:鹅不食草心菊内酯可显著抑制IL-1β激活的LX-2细胞活化与增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt和NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 鹅不食草心菊内酯 星状细胞 lx-2细胞 PI3K/AKT信号通路 NF-ΚB信号通路
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过表达Raf激酶抑制蛋白(RKIP)抑制人肝星状细胞增殖
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作者 聂金兰 黄权芳 +1 位作者 谭实美 林兴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1491-1494,共4页
目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对LX-2人肝星状细胞增殖的影响。方法用重组质粒pc DNA3.1-RKIP转染LX-2细胞,G418筛选并培养稳定转染的细胞。MTT法和集落形成试验检测过表达RKIP对LX-2细胞增殖、集落生成的影响;Western blot法检测RKIP... 目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对LX-2人肝星状细胞增殖的影响。方法用重组质粒pc DNA3.1-RKIP转染LX-2细胞,G418筛选并培养稳定转染的细胞。MTT法和集落形成试验检测过表达RKIP对LX-2细胞增殖、集落生成的影响;Western blot法检测RKIP、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(Col1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2及胞外信号调节激酶/丝裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照细胞相比,过表达RKIP明显抑制LX-2细胞增殖和集落形成,下调Col1、α-SMA、MMP-1和MMP-2蛋白表达,降低ERK/MAPK磷酸化水平。结论过表达RKIP抑制LX-2细胞的增殖,其机制与抑制ERK/MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 Raf激酶抑制蛋白(RKIP) 星状细胞 lx-2细胞 增殖 胞外信号调节激酶/丝裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)
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疏肝健脾活血方含药血清对TGF-β1诱导活化的LX-2中CUGBP1、IFN-γ、Smad7的影响
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作者 王志丽 郭文琴 +2 位作者 邵畅 孙希光 张俊杰 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期5169-5174,共6页
目的:观察疏肝健脾活血方含药血清对TGF-β1诱导活化的人肝星状细胞株LX-2中CUGBP1、IFN-γ、Smad7的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的可能作用机制。方法:20只SD大鼠制备含药血清,CCK8测定含药血清细胞毒性;慢病毒转染建立CUGBP1... 目的:观察疏肝健脾活血方含药血清对TGF-β1诱导活化的人肝星状细胞株LX-2中CUGBP1、IFN-γ、Smad7的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的可能作用机制。方法:20只SD大鼠制备含药血清,CCK8测定含药血清细胞毒性;慢病毒转染建立CUGBP1过表达和敲减LX-2细胞稳转株,在此基础上对CUGBP1过表达空载(LV空载)及敲减空载(sh空载)、CUGBP1过表达(LV-CUGBP1)及敲减(sh-CUGBP1)稳转株,分别予相应空白血清、TGF-β1、疏肝健脾活血方含药血清干预。RT-PCR检测各组α-SMA、CUGBP1、IFN-γ、Smad7 mRNA表达;ELISA检测各组上清液中IFN-γ含量。结果:CCK8法测定含药血清对LX-2的半数抑制浓度约为40%。完成CUGBP1过表达和敲减稳转株构建。与LV-CUGBP1组比较,LV-CUGBP1+TGF-β1组中α-SMA、CUGBP1 mRNA表达升高(P<0.01),IFN-γ、Smad7 mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05);与LV-CUGBP1+TGF-β1组比较,LV-CUGBP1+TGF-β1+中药组中α-SMA、CUGBP1 mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05);Smad7 mRNA表达升高(P<0.01)。与sh-CUGBP1组比较,sh-CUGBP1+TGF-β1组中α-SMA mRNA表达升高(P<0.01)、Smad7 mRNA表达降低(P<0.01);与sh-CUGBP1+TGF-β1组比较,sh-CUGBP1+TGF-β1+中药组中α-SMA、CUGBP1 mRNA表达降低(P<0.05),Smad7 mRNA表达升高(P<0.01)。疏肝健脾活血方含药血清干预后LX-2细胞上清液中IFN-γ含量增加,CUGBP1过表达后IFN-γ含量减少,CUGBP1敲减后IFN-γ含量增加。结论:疏肝健脾活血方含药血清可有效抑制LX-2细胞活化,可通过抑制CUGBP1对IFN-γ的降解发挥作用,并上调IFN-γ和Smad7表达。 展开更多
关键词 纤维化 人肝星状细胞株lx-2 健脾活血方 CUGBP1 Γ干扰素 SMAD7
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HBV对肝内TGF-β1蛋白表达和人肝星状细胞系LX-2活性的影响 被引量:2
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作者 张香梅 乐晓华 +6 位作者 徐六妹 苟继周 张明霞 王敏 唐奇远 刘赛云 何清 《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》 CAS 2012年第6期47-50,共4页
目的探讨HBV对肝内TGF-β1蛋白表达及人肝星状细胞系LX-2细胞活性的影响。方法运用免疫组织化学方法检测对照组(HBV阴性)和慢性乙型肝炎组肝组织内TGF-β1的表达;采用细胞培养、Western blot、MTT和Transwell实验体外观察HBV对LX-2细胞... 目的探讨HBV对肝内TGF-β1蛋白表达及人肝星状细胞系LX-2细胞活性的影响。方法运用免疫组织化学方法检测对照组(HBV阴性)和慢性乙型肝炎组肝组织内TGF-β1的表达;采用细胞培养、Western blot、MTT和Transwell实验体外观察HBV对LX-2细胞形态及活性的影响。结果慢性乙型肝炎组肝组织内TGF-β1的表达水平显著高于对照组(t=4.2268、P=0.000);在慢性乙型肝炎组,TGF-β1在肝纤维化处于S1~S2期的肝组织内表达较高,与肝纤维化S3~S4期肝组织内的表达比较差异具有显著性(t=6.9107、P=0.000)。HBV可引起LX-2细胞的形态学改变,并增加其增殖和运动迁移能力。结论 HBV主要在慢性乙型肝炎肝纤维化形成的早期阶段发挥作用。HBV感染可引起肝组织内TGF-β1蛋白表达增加和人肝星状细胞系LX-2的形态改变和活性增强。 展开更多
关键词 炎病毒 乙型 转化生长因子Β1 星状细胞lx-2 乙型 慢性 纤维化
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六味五灵片抗肝纤维化作用的谱效关系 被引量:14
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作者 程玲 郑娟 +7 位作者 徐平华 沈刚 李娟娟 邱玲 张利红 武娜 韩晋 袁海龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期820-825,共6页
目的研究六味五灵片(南五味子、女贞子、连翘等)抗肝纤维化作用的谱效关系,探索其药效物质基础。方法拉丁超立方法将六味五灵片中6味药材随机抽样成20个不同比例的组合,HPLC法获取其提取物的指纹图谱。以LX-2肝星状细胞为药效模型,MTT... 目的研究六味五灵片(南五味子、女贞子、连翘等)抗肝纤维化作用的谱效关系,探索其药效物质基础。方法拉丁超立方法将六味五灵片中6味药材随机抽样成20个不同比例的组合,HPLC法获取其提取物的指纹图谱。以LX-2肝星状细胞为药效模型,MTT法测定各组的抗肝纤维化作用。利用主成分分析及相关分析法,对药效数据和指纹图谱信息进行处理。结果 20个不同比例组合提取物对LX-2细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱有23个共有峰,其中14(五味子醇甲)、20(五味子甲素)、17、19、21号峰与药效关系密切。结论六味五灵片的抗肝纤维化作用可能是多成分相互影响的结果。 展开更多
关键词 六味五灵片 纤维化 lx-2星状细胞 谱效关系 HPLC MTT
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IL-13促进肝星状细胞增殖和胶原蛋白表达 被引量:5
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作者 陈厚文 吴超 +5 位作者 李香龙 郭梦舟 熊志勇 范杰 朱孟博 石小玉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第8期873-879,共7页
肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝纤维化发展过程中过量细胞外基质的主要来源。该研究首先利用MTT法检测IL-13实验剂量和时间条件下肝星状细胞增殖情况;然后运用RT-PCR技术检测IL-13对人肝星状细胞LX-2细胞系IL-13Rα1、IL-4... 肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝纤维化发展过程中过量细胞外基质的主要来源。该研究首先利用MTT法检测IL-13实验剂量和时间条件下肝星状细胞增殖情况;然后运用RT-PCR技术检测IL-13对人肝星状细胞LX-2细胞系IL-13Rα1、IL-4Rα、TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白转录水平的影响;最后通过羟脯氨酸法定量分析各组细胞培养上清液中的胶原蛋白含量。结果发现:IL-13能促进肝星状细胞的增殖;在不改变IL-13Rα1和IL-4Rα转录水平的同时,对TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达以及细胞总胶原蛋白含量的上调作用均呈现出较为明显的剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 IL-13 星状细胞 lx-2 胶原蛋白
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基于肝星状细胞增殖的复方鳖甲软肝片的溶出度初步研究 被引量:4
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作者 戴领 白金霞 +2 位作者 尹蓉莉 韩晋 袁海龙 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期2018-2021,共4页
目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法从细胞增殖角度、结合高效液相色谱法(HPLC),探讨生物方法评价中药固体制剂体外溶出度的可行性,旨在弥补单纯化学方法难以客观反映中药固体制剂溶出度检测的不足。方法以复方鳖甲软肝片为模型药,考察... 目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法从细胞增殖角度、结合高效液相色谱法(HPLC),探讨生物方法评价中药固体制剂体外溶出度的可行性,旨在弥补单纯化学方法难以客观反映中药固体制剂溶出度检测的不足。方法以复方鳖甲软肝片为模型药,考察在pH 7.4 PBS溶出介质中,不同溶出时间的复方鳖甲软肝片溶出液对LX-2肝星状细胞的抑制作用,提出基于细胞抑制率所得复方鳖甲软肝片的累积溶出度,结合HPLC测定芍药苷指标成分所得溶出度,运用f2相似因子法进行相关性评价。结果 f2相似因子小于50,表明单纯化学方法所测的指标成分溶出度不能等同于全方的生物效价。结论生物方法有望成为评价中药固体制剂体外溶出度的手段之一。 展开更多
关键词 MTT比色法 lx-2星状细胞溶出度 复方鳖甲软
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去氢木香内酯对人肝星状细胞增殖及凋亡的影响研究 被引量:6
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作者 程剑 林彬 +1 位作者 沈晓洁 刘燕 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第28期3906-3908,3911,共4页
目的探讨去氢木香内酯(Dehy)对人肝星状LX-2细胞增殖及凋亡的影响,分析其可能的作用机制。方法人肝星状LX-2细胞经不同浓度Dehy处理后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术检测LX-2细胞增殖和周期分布,Hoechst33342染色法及AV-PI双... 目的探讨去氢木香内酯(Dehy)对人肝星状LX-2细胞增殖及凋亡的影响,分析其可能的作用机制。方法人肝星状LX-2细胞经不同浓度Dehy处理后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术检测LX-2细胞增殖和周期分布,Hoechst33342染色法及AV-PI双染法检测LX-2细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达。结果给予不同浓度的Dehy作用48h后,能够明显抑制LX-2细胞的增殖,阻滞细胞周期于S、G2/M期,同时诱导LX-2细胞的凋亡,呈浓度依赖性;Western blot结果显示,Dehy可促进P27、Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调。结论 Dehy通过调节Bax、Bcl-2和P27的表达诱导人肝星状LX-2细胞的凋亡和周期的阻滞。 展开更多
关键词 去氢木香内酯 星状细胞lx-2 细胞周期 细胞凋亡
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新疆假龙胆调控TGF-β1/Smad通路抑制肝星状细胞活化的作用机制 被引量:2
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作者 杨建华 居博伟 +1 位作者 向雪滢 胡君萍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期7392-7396,共5页
目的:探讨新疆假龙胆提取物通过调控转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路发挥防治肝纤维化的具体作用机制。方法:采用TGF-β1(10 ng/mL)诱导LX-2细胞构建肝纤维化模型,对肝纤维化模型细胞给予不同浓度(100、200、300μg/mL)新疆假龙胆提... 目的:探讨新疆假龙胆提取物通过调控转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路发挥防治肝纤维化的具体作用机制。方法:采用TGF-β1(10 ng/mL)诱导LX-2细胞构建肝纤维化模型,对肝纤维化模型细胞给予不同浓度(100、200、300μg/mL)新疆假龙胆提取物,干预时间均为48 h,采用CCK8法检测干预后各组细胞的增殖抑制情况,流式细胞技术检测各组细胞的凋亡情况,荧光定量PCR和Western blot法检测各组Smad相关信号Smad3、Smad4、Smad7、TGF-β1 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,高、中浓度新疆假龙胆提取物可抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖与活化(P<0.05),上调细胞内Smad3、Smad4、TGF-β1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),下调Smad7 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:新疆假龙胆提取物对TGF-β1诱导的LX-2细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,并通过良性调控TGF-β1/Smad通路,从而延缓肝纤维化进程。 展开更多
关键词 新疆假龙胆 纤维化 lx-2细胞 转化生长因子Β1 SMAD 星状细胞
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