当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射增敏作用

目的:探讨当归、红芪提取物对直线加速器(X射线)辐射后人肝癌细胞SMMC-7721的增敏作用。方法:96孔板培养人肝癌细胞SMMC-7721,设9个组,对照组(N)即正常对照组,纯辐射组(F)给以源皮距100cm 4Gy的X射线,另设3个纯药物组(DH),设高(H:8mg/mL)、中(M:6mg/mL)、低(L:4mg/mL)三个药物浓度梯度,3个辐射加药组(F+DH)和1个空白组(只有培养液无细胞)。每组设6个复孔。采用MTT法计算当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射前后增殖活性的影响。流式细胞术检测不同组细胞的周期情况,透射电镜及倒置显微镜分别观察各组细胞结构变化,用蛋白印记法检测不同组细胞中p21蛋白表达情况。结果:MTT法证明当归、红芪提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用,对于辐射后的肝癌细胞具有很好的周期抑制作用。不同剂量当归、红芪提取物作用于细胞24h后,抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖呈剂量依赖关系,药物浓度越高,抑制作用越显著。SMMC-7721细胞经辐射后,细胞的抑制率为37.58%,辐射后加不同浓度当归、红芪提取物(4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL),联合作用对细胞的抑制率升高,分别为45.27%、51.86%、59.34%,且呈药物浓度依赖关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。辐射组肝癌细胞较正常组细胞G0/G1期细胞数明显增多,由44.70%升至71.60%(P<0.01),S期细胞减少,高浓度药物也可以使G0/G1期细胞比例有所升高(P<0.01)。辐射加药组细胞G0/G1期阻滞最为明显,并呈药物浓度梯度关系。高浓度药物组、辐射组细胞p21蛋白表达较正常组升高,辐射组+高浓度药物组细胞p21蛋白表达较辐射组明显升高。结论:当归、红芪提取物对于人肝癌SMMC-7721细胞具有很好的抑制作用,对经X线辐射后的细胞具有很好的增敏作用。

抗癌扶正方对人肝癌细胞SMMC-7721的P^(53)基因表达的调控作用

目的:探讨国医大师经验方"抗癌扶正方"的抗肝癌作用及机制。方法:提取抗癌扶正方,针对人肝癌细胞SMMC-7721,经过细胞培养、MTT法、流式细胞仪检该方对肝癌细胞生长抑制率的影响及对突变型P53基因表达的调控作用。结果:抗癌扶正方具有良好的抑制肝癌细胞生长作用,尤其以1mg/mL,10mg/mL剂量组的效果最佳,作用程度与化疗药物类似。此方可以下调凋亡抑制基因突变型P53的表达。结论:抗癌扶正方能够抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性。其机理在于降低肝癌凋亡抑制基因的表达,促进细胞凋亡的产生。

β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。

藤黄酸促进bax和p53表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡(英文)

目的:观察藤黄酸(gambogicacids,GA)对肝癌细胞凋亡的诱导作用并探讨其分子作用机制。方法与结果: 采用MTT比色法检测藤黄酸对人肝癌和人正常肝细胞增殖作用的影响,结果表明,藤黄酸对人肝细胞性肝癌SMMC 7721 细胞株和QGY 7701细胞株有明显增殖抑制作用,并呈剂量依赖性,而对正常人肝组织L 02细胞株作用相对较弱;光镜及电镜形态学观察结果显示,给予GA后,肝癌细胞发生明显的细胞凋亡形态学变化,如细胞体积变小,细胞核固缩,出现凋亡小体等;采用RT PCR和Westernblotting方法检测baxmRNA以及bax和p53蛋白表达变化,结果表明GA可诱导baxmR NA及bax和p53蛋白表达上调;琼脂糖凝胶电泳显示,给予GA后,SMMC-7721裸小鼠移植瘤组织呈现典型的DNAladder 电泳梯状条带。结论:藤黄酸可显著抑制人肝癌细胞的增殖,其分子作用机制可能通过促进bax和p53表达上调,从而诱导人肝细胞性肝癌细胞凋亡。

刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。

褪黑素、顺铂协同抑制人肝癌细胞SMMC-7721的机制研究

目的 研究褪黑素 (melatonin ,MLT)、顺铂 (cisplatinumum ,DDP)联用对人肝癌细胞SMMC 772 1的抑制作用机制。方法 用不同浓度的褪黑素、顺铂及二者联用处理人肝癌细胞株SMMC 772 1,采用MTT法测定细胞抑制率 ;流式细胞仪分析细胞周期及凋亡 ;通过酶解可见光底物DEVD pNp测定Caspase3的活性 ;Westernblot分析p2 7Kip1蛋白表达。结果 ①褪黑素、顺铂单独应用和联合应用均能抑制SMMC 772 1生长 ,且低浓度联合应用可达到甚至超过单用高浓度顺铂的抑制效果。②褪黑素无论与顺铂联用与否均能激活Caspase3,诱导细胞凋亡 ,而顺铂单独使用无此效应。③褪黑素与顺铂均可导致细胞周期阻滞 ,二者联用更明显。④褪黑素无论与顺铂联用与否均明显诱导p2 7Kip1的表达 ,而顺铂单独使用无此作用。结论 褪黑素能够通过诱导细胞凋亡和促进p2 7Kip1表达协同增强顺铂抑制肝癌细胞作用。

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。

薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响

目的研究薏苡仁脂肪酸类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增值的影响及作用机制初探。方法采用MTT法考察不同给药剂量,不同给药时间下薏苡仁脂肪酸类成分对SMMC-7721细胞的增值抑制作用及其与时间、剂量的关系;碘化丙啶PI单染色法检测薏苡仁脂肪酸作用后,SMMC-7721细胞周期DNA水平变化;Annexin V-EGFP/PI双染法研究薏苡仁脂肪酸对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。结果不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸作用SMMC-7721细胞24、48、72 h后,均呈现出较好的细胞增殖抑制作用,且具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);不同质量浓度的薏苡仁脂肪酸处理SMMC-7721细胞22 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,(P<0.001);作用36 h后,可显著降低G2/M期细胞比例,(P<0.001)。结论薏苡仁脂肪酸对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用并可诱导其凋亡,其作用是通过抑制G2/M细胞周期实现的。

熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。

壳寡糖抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖及其机制探讨

探讨壳寡糖抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖作用及其分子机制。采用噻唑蓝(MTT)法检测壳寡糖的细胞增殖抑制作用;利用流式细胞仪检测肝癌细胞的凋亡情况;用RT-PCR和Western blot方法研究壳寡糖引起凋亡的原因。结果显示,0.8mg/mL的壳寡糖能够抑制SMMC-7721细胞增殖,并且促进SMMC-7721细胞的凋亡,其原因是壳寡糖能够上调促凋亡蛋白Bax的表达。

氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究

目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的生长,作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(19.5±1.8)、(3.8±0.2)、(2.8±0.1)mg/L;Hoechst33258染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,氯化两面针碱处理后凋亡细胞比例增加;流式细胞仪检测到G2/M细胞比例增加,G0/G1、S期细胞比例下降。药物作用于SMMC-7721细胞后,随浓度增加细胞凋亡率增加。结论氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用,可能与改变细胞周期并诱导细胞凋亡有关。

水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721的影响

目的:研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及时效量效关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法观察水红花子黄酮类成分作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及细胞凋亡率。结果:水红花子黄酮类成分能调节SMMC-7721人肝癌细胞株G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且具有明显的时效及量效关系。结论:水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,且抑制作用和时间剂量成线性关系,其作用机制为抑制肿瘤细胞的增殖和诱导该细胞的凋亡。

没食子酸诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡机制的探讨

目的探讨没食子酸（gallic acid，GA）抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用，揭示其促凋亡的相关分子机制。方法体外培养人肝癌细胞SMMC-7721，MTT法观察细胞在GA作用24、48、72h后的增殖情况；用倒置显微镜观察细胞形态学的变化；透视电镜观察细胞内部结构变化；AnnexinV-FITC／PI检测细胞凋亡；采用RT-PCR技术研究p53mRNA的变化；应用Westernblot法检测p53蛋白水平的表达。探讨GA对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导凋亡作用及机制。结果剂量为6．25—50umol·L-1 GA作用SMMC-7721细胞48h有明显的增殖抑制活性，引起核固缩、凝聚、碎裂，诱导细胞凋亡，并呈剂量依赖性；RT-PCR和Western blot结果显示，GA能升高p53mRNA水平和p53蛋白表达。结论GA可抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖，诱导凋亡，可能与其上调肿瘤相关抑癌基因p53有关。

姜黄素对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

目的 研究姜黄素对人肝癌细胞 SMMC- 772 1生长的影响 .方法 应用 MTT方法、流式细胞术及透射电镜超微结构观察来分析姜黄素对 SMMC- 772 1细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变 .结果 姜黄素明显抑制人肝癌细胞SMMC- 772 1细胞的生长 ,半数生长抑制剂量 ( IC5 0 )为 5 .4mg.L- 1 .流式细胞术证实 ,姜黄素能将肿瘤细胞聚集在 S期 .透射电镜超微结构观察发现姜黄素可使肿瘤细胞超微结构改变 .结论 姜黄素通过改变 SMMC- 772

氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用

目的研究氯化镉(CdCl2)对人肝癌细胞(SMMC-7721)的抑制作用并探讨其作用机制。方法应用生长曲线法、四甲基偶氮噻唑蓝法(MTT)、流式细胞术(FCM)检测CdCl2对SMMC-7721的生长抑制及对细胞周期的影响。结果CdCl2对肝癌细胞SMMC-7721有明显的生长抑制作用,且存在剂量-效应关系;影响细胞周期进程并出现G0/G1期阻滞。结论CdCl2能有效抑制肝癌细胞株的生长,其抑制作用可能与影响细胞周期进程有关。

白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的影响

目的研究白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制率、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法采用MTT法研究白茅根水提物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率及抑制率与时间剂量关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究白茅根水提物作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞24,48,72,96 h后,均呈现出显著的细胞增殖抑制作用,抑制作用具有明显的时间-剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期与细胞凋亡实验结果显示不同浓度的白茅根水提物处理肝癌SMMC-7721细胞46 h后可显著增加肝癌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P<0.001),作用36 h后,可增加S期比例同时降低G2/M期细胞比例,差异有统计学意义(P<0.001)。结论白茅根水提物对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的增殖抑制作用并可诱导其凋亡,该作用是通过抑制G2/M期细胞比例,将细胞周期阻滞在S期实现的。

白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721基因表达的影响

目的:检测白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721细胞生长及肝癌相关基因表达的影响。方法:利用MTT比色法检测白花蛇舌草对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖方面的影响;利用以肝癌cDNA抑制性消减文库构建的肝癌相关基因微阵列,检测白花蛇舌草作用肝癌细胞SMMC-7721 36 h后基因的表达变化。结果:白花蛇舌草作用肝癌细胞SMMC-7721后36 h,观察到有1个基因的表达上调,14个基因表达下调。结论:证实白花蛇舌草对肝癌细胞的作用是通过影响多基因的表达改变实现的。本研究发现的差异表达基因为进一步研究白花蛇舌草抗肝癌的分子机制提供了线索,并为中草药筛选提供了一种可能的依据方法。

羟基喜树碱通过线粒体途径诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的观察

目的:研究羟基喜树碱是否可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡.方法:将不同浓度的羟基喜树碱作用于肝癌细胞SMMC-7721,用MTT法检测细胞增殖,光镜观察细胞形态;用荧光染料MitocaptureTM检测线粒体跨膜电位、用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放;用AnnexinⅤ-FITC,hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况.结果:羟基喜树碱对肝癌细胞SMMC-7721的增殖有明显的抑制作用,IC50约是80 mg/L.当用80 mg/L羟基喜树碱作用不同时间后:线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放;细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核染色质固缩,呈致密浓染的凋亡状态.结论:羟基喜树碱通过线粒体途径引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.