黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响

目的研究黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,应用MTT法检测黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用;通过免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因bcl-2、bax、P53蛋白表达的改变。结果 MTT结果表明,黄芩苷在体外对人肝癌HepG-2细胞有明显的诱导细胞凋亡作用,且这种抑制作用呈现浓度和时间依赖性。免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因Bcl-2、P53蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低。结论黄芩苷对人肝癌HepG-2细胞具有较强的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调P53基因表达和降低Bcl-2/Bax比例有关。

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞ERK信号通路的影响

研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对ERK、p-ERK蛋白表达的影响,探讨其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制.采用Western Blot方法检测人肝癌HepG-2细胞内ERK及p-ERK蛋白的表达.结果表明,10、20、40μmol/L的SFN作用人肝癌HepG-2细胞48 h可显著下调HepG-2细胞内p-ERK蛋白的表达,而对ERK的表达无明显影响.提示SFN可抑制ERK信号通路,这可能是其诱导HepG-2细胞的凋亡的机制之一.

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的JNK途径

探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡过程中,JNK途径的作用.采用荧光显微镜观察凋亡细胞形态;采用Western Blot法检测人肝癌HepG-2细胞内JNK和p-JNK蛋白的表达.结果表明,10、20、40μmol/L的SFN作用人肝癌HepG-2细胞48 h后,荧光显微镜下可见随着药物浓度的增大,凋亡细胞数量逐渐增多,并呈现典型的凋亡细胞形态;HepG-2细胞内p-JNK蛋白表达量逐渐升高,而对JNK的表达无明显影响.提示SFN可诱导HepG-2细胞的发生凋亡,激活JNK信号通路可能是其主要机制之一.

七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的实验研究

目的：观察研究七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响,探讨七叶皂苷抗肿瘤作用的机制。方法：噻唑蓝（MTT）法检测七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞周期及凋亡的影响。结果：七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖有明显的抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示七叶皂苷有诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用。七叶皂苷可通过诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡并将细胞阻滞在G0~G1期,使细胞不能进入S期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论：七叶皂苷抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡,七叶皂苷可能在其抗肝癌作用中具有重要意义。

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG-2细胞G2／M期阻滞作用及机制研究

目的：莱菔硫烷（sulforaphane，SFN）是一种异硫氰酸盐类物质，广泛存在于十字花科植物中，在西兰花芽及西兰花根茎中的含量最高。研究表明，SFN可通过调节多个参与癌症发生、发展的分子靶点，有效地预防肝癌、肺癌、前列腺癌等多种癌症，是一种潜在的肿瘤预防和治疗药物，因此近年来受到广泛关注。近年来相继发现SFN可通过影响细胞周期及诱导肿瘤细胞的凋亡发挥抗肿瘤作用。

异鼠李素对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡影响的实验研究

目的观察异鼠李素对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)法检测异鼠李素对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测异鼠李素对肿瘤细胞周期及凋亡的影响。结果 MTT结果提示异鼠李素对人肝癌细胞的增殖有明显抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强,以100mg/L的异鼠李素培养基抑制作用最明显。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示异鼠李素有诱导人肝癌细胞凋亡作用。异鼠李素可通过诱导人肝癌细胞凋亡并将细胞阻滞在G0～G1期,使细胞不能进入S期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论异鼠李素抑制人肝癌细胞的增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,可能具有一定抗肝癌作用。

全氟辛酸对人肝癌HepG-2细胞周期影响的机制研究

目的:探讨全氟辛酸对人肝癌HepG-2细胞增殖和细胞周期的影响机制。方法:应用荧光显微镜、四氮甲唑蓝(MTT)方法和流式细胞仪分析PFOA对HepG-2细胞形态学、生长、细胞周期及p16和CycinD1蛋白表达的影响。结果:PFOA能促进人肝癌细胞的增殖,呈剂量依赖性。以2.4×10-10μM作用72h增殖作用最明显,增殖率达126.2%;2.4×10-9μM作用72h时,G0/G1期缩短,S期和G1期细胞比例增加,增殖指数上升;CycinD1蛋白表达的升高和p16蛋白表达的降低随着作用剂量的变化而变化,且呈剂量依赖性。结论:PFOA在体外对HepG-2细胞具有增殖作用,通过缩短G0/G1期,使G1和S期细胞比例增加,从而加快细胞周期进程,参与细胞周期调控,而细胞周期调节因子CycinD1蛋白的过度表达和p16蛋白表达的降低,可能促进HepG-2肿瘤细胞的生长,使肿瘤细胞呈现恶性增殖。

红花注射液对人肝癌HepG-2细胞AKT表达的影响

目的探讨红花注射液对肝癌HepG-2细胞增殖的影响及分子机制。方法应用红花注射液(0、50、150、250 g/L)处理HepG-2细胞,经AnnexinⅤ-FITC/PI双染荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变,实时荧光定量PCR检测AKT mRNA表达,蛋白质印迹(Western blot)检测AKT、p-AKT蛋白表达。结果 50、150、250g/L的红花注射液作用于HepG-2细胞48 h后,荧光显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态;细胞内AKT mRNA表达水平显著降低,AKT、p-AKT蛋白表达水平也显著下调,且变化趋势均呈一定的剂量依赖关系。结论红花注射液可能通过抑制AKT信号通路,阻碍肝癌HepG-2细胞的增殖及诱导凋亡。

裙带菜多糖诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的研究

目的:检测裙带菜多糖(UPPS)对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡和抗肿瘤作用的关系。方法:采用MTT法、流式细胞术检测UPPS对HepG-2细胞生长的抑制作用和诱导细胞凋亡的作用;采用免疫细胞化学染色,观察Bax和Bcl-2表达水平的变化。结果:UPPS能抑制HepG-2细胞增殖,明显高于对照组(P<0.01)。诱导细胞凋亡作用发生在UPPS处理24～48h;UPPS处理HepG-2细胞后,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达下调。结论:UPPS对HepG-2的抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的,可能与Bcl-2和Bax表达水平的变化有关。

青蒿琥酯对人肝癌HEPG-2细胞株凋亡、周期的体外作用

目的研究青蒿琥酯(Art)对肿瘤细胞凋亡、周期的影响。方法采用MTT法测定Art与5-FU联用对人肝癌细胞系HEPG-2的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布。结果Art能明显抑制HEPG-2细胞的生长,并呈明显的时间-剂量效应。24、48、72 h的IC50分别为103.1±8.6、75.3±4.1、65.7±6.0μg.ml-1。当10、20μg.ml-1Art与2.5、5.0μg.ml-15-Fu联合使用时,表现出明显的协同作用,并可诱导细胞凋亡,影响细胞周期的分布。结论Art对人肝癌细胞系HEPG-2的增殖有显著抑制作用。与5-FU联合使用有协同作用,其机制可能是诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期。

壳聚糖-磺酸甜菜碱对人肝癌HepG-2细胞的siRNA递送实验研究

目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行结构表征;CCK-8检测材料的细胞相容性;荧光显微镜观察siRNA的转染效率;Real-time PCR检测转染siRNA后对Bcl-2 mRNA的沉默效率。结果核磁共振氢谱数据表明:DMAAPS已成功枝接到CS上。荧光显微镜观察结果显示:质量比(m0/mt:CS-DMAAPS/siRNA)为32、16、8、4、2的复合颗粒分别转染人肝癌HepG-2细胞24 h后,转染率分别为33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR检测结果显示:质量比为4的CS-DMAAPS/siRNA复合颗粒转染人肝癌HepG-2细胞48 h后,对人肝癌HepG-2细胞的Bcl-2基因沉默效率为26.8%。结论壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物能实现siRNA对人肝癌HepG-2细胞的转染,且细胞相容性良好,能实现目标基因的部分沉默。

土贝母苷甲对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的影响实验研究

①通过观察土贝母苷甲对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响，阐明土贝母苷甲是否对人肝癌HepG-2细胞有抑制作用；②通过观察土贝母苷甲对人肝癌HepG-2细胞的细胞增殖，细胞周期和凋亡以及相关凋亡基因Bax表达的影响，为进一步阐明土贝母苷甲的抑癌作用提供理论依据。

裙带菜多糖硫酸酯诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制研究

目的探讨裙带菜多糖硫酸酯S-UPPSⅠB体外诱导人肝癌Hep G-2细胞凋亡的作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测S-UPPSⅠB对Hep G-2细胞增殖作用的影响;激光共聚焦显微镜测定Hep G-2细胞内[Ca^(2+)]i水平;流式细胞仪测定细胞凋亡率及Bcl-2、Bax、Cyt-c、p53的表达;Caspase-3,-9试剂盒检测蛋白表达。结果 S-UPPSⅠB抑制Hep G-2细胞的IC_(50)值为50.09μg·m L^(-1),随着给药剂量的增加,凋亡率亦增加,并且对Ca^(2+)及其通路的相关蛋白有明显的调节作用,其中[Ca^(2+)]i的水平及Cyt-C、Caspase-3,-9、p53的表达均有显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低。结论裙带菜多糖硫酸酯S-UPPSⅠB可显著抑制人肝癌Hep G-2细胞增殖,并可通过启动线粒体途径诱导Hep G-2细胞发生凋亡。

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞Bcl-2与Bax基因转录及蛋白表达的影响

目的:研究莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)在体外对HepG-2细胞Bcl-2、Bax基因转录和蛋白表达的影响,探讨SFN诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:不同浓度SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48 h,采用SRB法测定SFN对HepG-2细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测SFN作用后的细胞凋亡率;Western blot法和RT-PCR法检测SFN在蛋白和mRNA水平上对Bcl-2和Bax表达的影响。结果:SFN对HepG-2细胞的GI50为9.40μmol/L,TGI为26.68μmol/L;10、20、40μmol/L的SFN作用于HepG-2细胞48 h后,激光共聚焦显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞凋亡率分别为(27.42±0.43)%、(46.53±0.35)%和(58.92±0.48)%(P<0.01);细胞内Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),而20、40μmol/L的SFN作用后细胞内Bax蛋白和mRNA的表达水平均显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA均随SFN剂量的增加显著降低(P<0.01),且变化趋势均呈一定的剂量依赖关系。结论:SFN能抑制HepG-2细胞的增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2、上调Bax的表达,这可能是SFN诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。

八角中莽草酸对人肝癌HepG-2细胞增殖及NF-κB蛋白表达的影响

目的:探讨八角中莽草酸对人肝癌细胞HepG-2细胞增殖及其核因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达的影响。方法:用不同浓度的莽草酸处理HepG-2细胞,MTT法测定莽草酸对HepG-2细胞的生长抑制率;倒置显微镜下观察莽草酸作用HepG-2细胞后的形态学变化;采用hoechest33342荧光染色观察莽草酸作用于人肝癌HepG-2细胞48 h后细胞凋亡形态变化。Western blot试验观察莽草酸对人肝癌HepG-2细胞NF-κB(p65)蛋白表达的影响。结果:MTT实验结果表明,莽草酸对人肝癌HepG-2细胞的生长抑制作用呈现时间依赖性和剂量依赖性;倒置显微镜下观察细胞形态可以发现,经莽草酸处理48 h后的各组细胞中,可观察到随着药物浓度的增加,细胞凋亡形态变化越来越明显,细胞数量逐渐变少。荧光染色观察随着药物浓度增加,凋亡细胞增多且明显,当莽草酸质量浓度达1 g·L-1时,出现较多的凋亡小体。NF-κB(p65)蛋白的表达随莽草酸浓度升高而显著下降。结论:莽草酸对人肝癌细胞HepG-2有较显著的生长抑制作用,莽草酸对人肝癌HepG-2细胞表达NF-κB(p65)明显减弱,其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用机制可能下调NF-κB表达水平有关。

野西瓜总皂苷诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的初步研究

[目的]探讨野西瓜总皂苷(CSS)对人肝癌HepG-2细胞的杀伤作用和诱导凋亡的作用。[方法]四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究CSS对HepG-2细胞的杀伤作用;荧光显微镜观察细胞凋亡形态;碘化吡啶(PI)单染经流式细胞仪检测CSS对HepG-2细胞周期及凋亡的影响。[结果]CSS对HepG-2细胞的生长增殖具有抑制作用;经CSS作用后,HepG-2细胞在出现特征性凋亡形态特征,并出现了G1期阻滞,G2期比例下降,高剂量组出现了G2期消失的现象,50mg/L剂量作用48h,凋亡细胞比率高达66.652%。[结论]CSS对人肝癌HepG-2有明显的杀伤和诱导凋亡作用,并出现细胞周期的改变。

云芝氯仿萃取物诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用的研究

目的探讨云芝氯仿萃取物诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用。方法常规培养人肝癌HepG-2细胞,分为对照组、云芝氯仿萃取物处理组(终浓度分别为100,200,400 mg/L),通过HE染色、PCR和Western Blotting方法检测云芝氯仿萃取物对人肝癌HepG-2细胞组织形态学变化、DNA降解片段、Bc1-2,Bax和Caspase-3蛋白表达变化。结果100,200mg/L和400 mg/L云芝氯仿萃取物作用48 h后,人肝癌HepG-2细胞DNA降解成DNA片段,且随着剂量增加,降解作用越明显;随剂量增加Bc1-2/Bax值逐渐下降、Caspase-3蛋白表达显著升高。结论云芝氯仿萃取物可以诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡。

小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞Caspase-3和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究小白菊内酯对人肝癌细胞Hep G-2增殖抑制和诱导凋亡作用的机制。为小白菊内酯在临床上早日应用于肝癌患者提供理论及实验依据。方法:用体外培养的方法培养人肝癌Hep G-2细胞;用四唑盐(MTT)比色法检测小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的抗增殖及细胞毒作用;用倒置显微镜、HE染色光学显微镜;用免疫组织化学染色法检测小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2前后Caspase-3、NF-κB蛋白阳性表达变化的情况。通过以上实验研究小白菊内酯在体外对人肝癌Hep G-2在细胞增殖、细胞凋亡等方面的影响及其作用机制。结果:(1)MTT法结果显示:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的作用影响具有浓度和时间依赖性;(2)细胞形态学观察:倒置显微镜观察到对照组细胞贴壁生长,伸展性良好,细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密。小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2 24h以后,增殖速度减慢,细胞贴壁能力下降,细胞之间连接疏松。药物作用48h以后,增殖速度大大减慢,大部分细胞变圆漂浮在培养瓶中。药物作用72h以后,几乎无活细胞,并且可见死细胞碎片;HE染色光学显微镜下观察:对照组细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密,细胞胞浆丰富,细胞核完整;药物作用24h以后,细胞伸展减弱,有一部分细胞呈现圆形,细胞之间连接疏松,核浓缩,染色质出现边聚;药物作用48h后视野中可见凋亡细胞和死亡细胞,细胞浆浓缩、染色质浓缩成新月形和"出泡"现象的变化;(3)免疫组化结果显示:实验组Caspase-3表达增加,NF-κB表达降低,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞有明显的抑制增殖作用,呈现出浓度和时间的依赖性;小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞株有诱导凋亡作用,其诱导人肝癌Hep G-2细胞凋亡机制可能与NF-k B、Caspase-3等信号转导有关。

野西瓜皂苷诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的初步研究

目的：探讨从维吾尔族民间常用药野西瓜提取的总皂苷（Capparis spinosa L．saponin，CSS）对人肝癌HepG-2细胞的杀伤作用和诱导凋亡的作用。方法：MTT比色法研究CSS对HepG-2细胞的毒性杀伤作用，用MK3型酶标仪在参考波长490nm，检测波长570nm条件下测定光密度值（OD），以溶剂对照处理的肿瘤细胞为对照组计算CSS对肿瘤细胞的抑制率；

三种去甲基斑蝥素衍生物体外对人肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

目的:探讨去甲基斑蝥素酸钠、去甲基斑蝥素酸钾、去甲基斑蝥素酸钙体外对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法:采用磺酰罗丹明(SRB法)、细胞集落形成实验、流式细胞技术检测三种去甲基斑蝥素衍生物对HepG-2细胞增殖和凋亡的影响。qRT-PCR技术考察三种去甲基斑蝥素衍生物对HepG-2细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的影响。结果:三种去甲基斑蝥素衍生物能明显抑制HepG-2细胞的增殖,其抑制率呈剂量时效依赖性;与空白对照组相比,三种去甲基斑蝥素衍生物能显著性减少HepG-2细胞集落形成数量,并且可诱导HepG-2细胞的凋亡,凋亡率分别为8±0.56%、6.93±0.91%、6.16±0.37%;qRT-PCR显示,三种去甲基斑蝥素衍生物能抑制HepG-2细胞Bcl-2mRNA的表达,增强Bax mRNA的表达。结论:三种去甲基斑蝥素衍生物可通过下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA表达,诱导HepG-2细胞的凋亡,从而抑制HepG-2细胞的增殖;三种衍生物中,去甲基斑蝥素酸钠对HepG-2细胞的增殖的抑制作用最强。