目的观察高氧对人肺泡上皮细胞(HPAEC)凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HPAEC细胞,随机分为高氧组和对照组。对照组细胞不作处理,放置于50 m L/L CO2培养箱中培养;高氧组细胞换液1次后,以3 L/min速度通入含900 m L/L O2和50 m...目的观察高氧对人肺泡上皮细胞(HPAEC)凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HPAEC细胞,随机分为高氧组和对照组。对照组细胞不作处理,放置于50 m L/L CO2培养箱中培养;高氧组细胞换液1次后,以3 L/min速度通入含900 m L/L O2和50 m L/L CO2高纯混合气,通入时间10 min;两组细胞均培养24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化,免疫共聚焦检测细胞组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)转位情况,Western blotting法检测细胞SENP1蛋白、乙酰化p53蛋白。结果高氧组和对照组细胞凋亡率分别为24.77%±2.17%、5.33%±2.60%,两组比较,P<0.05。高氧组细胞从正常的长梭形、多角形变成圆形、椭圆形,细胞间的间隙增宽,悬浮的细胞较多;对照组细胞大多为长梭形、多角形,贴壁较好,细胞间的间隙较小,悬浮的细胞较少。高氧组和对照组细胞SIRT1蛋白转位率分别为88.89%、16.23%,两组比较,P<0.05。高氧组和对照组细胞SENP1蛋白相对表达量分别为0.76±0.12、0.67±0.02,乙酰化p53蛋白相对表达量分别为0.81±0.07、0.52±0.03,两组比较,P均<0.05。结论高氧可促进HPAEC细胞凋亡,其机制可能是高氧诱导HPAEC细胞SENP1蛋白表达增加,进而SIRT1蛋白从胞核转位到胞质,使乙酰化p53蛋白表达增加。展开更多
文摘目的观察高氧对人肺泡上皮细胞(HPAEC)凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HPAEC细胞,随机分为高氧组和对照组。对照组细胞不作处理,放置于50 m L/L CO2培养箱中培养;高氧组细胞换液1次后,以3 L/min速度通入含900 m L/L O2和50 m L/L CO2高纯混合气,通入时间10 min;两组细胞均培养24 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化,免疫共聚焦检测细胞组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)转位情况,Western blotting法检测细胞SENP1蛋白、乙酰化p53蛋白。结果高氧组和对照组细胞凋亡率分别为24.77%±2.17%、5.33%±2.60%,两组比较,P<0.05。高氧组细胞从正常的长梭形、多角形变成圆形、椭圆形,细胞间的间隙增宽,悬浮的细胞较多;对照组细胞大多为长梭形、多角形,贴壁较好,细胞间的间隙较小,悬浮的细胞较少。高氧组和对照组细胞SIRT1蛋白转位率分别为88.89%、16.23%,两组比较,P<0.05。高氧组和对照组细胞SENP1蛋白相对表达量分别为0.76±0.12、0.67±0.02,乙酰化p53蛋白相对表达量分别为0.81±0.07、0.52±0.03,两组比较,P均<0.05。结论高氧可促进HPAEC细胞凋亡,其机制可能是高氧诱导HPAEC细胞SENP1蛋白表达增加,进而SIRT1蛋白从胞核转位到胞质,使乙酰化p53蛋白表达增加。
