回药爱康方含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖及周期的影响

目的探讨回药爱康方(AKF)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖及周期的影响。方法雄性SD大鼠80只,按体重随机分为8组:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKFL、AKFM、AKFH)组,环磷酰胺(CTX)组,AKFL、AKFM、AKFH联合CTX组。分别给予相应AKFL、AKFM、AKFH浓缩水煎剂灌胃,连续5d;CTX组和联合组再按20mg·kg-1给予环磷酰胺于第1、3、5天腹腔注射。NS组给予等量生理盐水。上述各组动物取血制备含药血清,体外培养人肺鳞癌SK-MES-1细胞。应用MTT法检测各组含药血清对SK细胞增殖的影响,流式细胞仪进行细胞周期时相分析。结果 AKF含药血清作用不同时间对SKMES-1细胞生长有抑制作用(P<0.05)。AKF联合CTX含药血清能够抑制SK细胞增殖,其中AKFH联合CTX组的抑制率明显高于其他组,48h之内抑制程度呈时间和浓度依赖性。5%、10%、20%浓度组的含药血清作用SK-MES-1细胞24、48、72h后,与NS比较,除AKFL外,其余各组抑制率均有升高(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,AKF含药血清及联合CTX含药血清能使SK细胞阻滞于G1期,随着药物浓度的增加,G1期细胞增多、S期细胞减少,和NS组比较,高剂量以及联合组尤为明显(P<0.05)。10%、20%浓度含药血清组与NS组比较,各组的G0/G1期细胞增多、S期细胞逐渐减少(P<0.05);而与CTX组比较,G0/G1期细胞少于CTX组,S期细胞多于CTX组(P<0.05),各联合组G0/G1期细胞多于CTX组,S期细胞少于CTX组(P<0.05)。结论 AKF含药血清可抑制SK细胞增殖,并与CTX有协同作用,其机制可能与其阻滞细胞于G1期有关。

苦参碱诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制

目的:探讨苦参碱(MT)诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制。方法:培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞,用MTT法检测MT对SK-MES-1细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、bax、caspase-3表达。结果:MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比,苦参碱处理后的SK-MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。Bax和capase-3表达增强,Bcl-2表达下调。结论:MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系,可能与抑制Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关。

长链非编码RNA SFTA1P在肺鳞状细胞癌中的表达及其对肺鳞状细胞癌细胞生物学功能的影响

目的探究长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(surfactant associated 1 pseudogene,SFTA1P)在肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)中的表达水平及其对肺鳞癌细胞生物学功能的影响。方法提取癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库数据,分析SFTA1P在肺鳞癌组织及正常肺组织中的表达差异;qRT-PCR检测SFTA1P在人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和肺鳞癌细胞系(H520和SK-MES-1)中的表达;通过转染SFTA1P过表达质粒及SFTA1P小干扰RNA分别构建SFTA1P过表达及干扰细胞模型;通过CCK-8及Transwell实验检测SFTA1P对肺鳞癌细胞生物学功能的影响;通过差异分析、相关性分析和功能富集分析探讨SFTA1P影响肺鳞癌细胞生物学功能的潜在机制。结果TCGA数据库肺鳞癌样本分析结果显示,SFTA1P在肺鳞癌组织中表达较正常肺组织低(P<0.05);SFTA1P在肺鳞癌细胞中表达也较人正常肺上皮细胞低(P<0.05);在肺鳞癌细胞系中,相比于H520细胞株,SFTA1P在SK-MES-1细胞株中相对低表达(P<0.05);细胞功能实验结果发现,过表达SFTA1P可抑制肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),敲低SFTA1P可增强肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05);差异分析、相关性分析和功能富集分析结果表明,SFTA1P在肺鳞癌中可能抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路。结论SFTA1P在肺鳞癌中具有抑癌功能,其可能通过抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路影响肺鳞癌细胞的生物学功能。

回药爱康方含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响

目的探讨回药爱康方(AKR)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响。方法将80只大鼠分为8组,每组10只:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKRL、AKRM、AKRH)组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低、中、高剂量联合环磷酰胺(AKRL/AKRM/AKRH+CTX)组。制备含药血清。MTT法检测各组含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖的影响,免疫细胞化学法检测细胞Bcl-2以及p53蛋白的表达。结果和NS组比较,回药爱康方对SK-MES-1细胞生长增殖有抑制作用(P<0.05)。回药爱康方高剂量联合CTX组的抑制率最高(P<0.05)。免疫细胞化学法检测结果显示,在不同浓度的含药血清作用下,和NS组相比,各实验组细胞的IOD值逐渐减小,差异有统计学意义(P<0.05);20%浓度的含药血清各实验组IOD值低于5%、10%浓度的含药血清组(P<0.05)。分别干预细胞24h、48h、72h后,与NS组比较,各实验组细胞的IOD值逐渐减小(P<0.05);20%浓度含药血清干预细胞72h,各实验组的阳性表达逐渐减弱,IOD值较低(P<0.05),AKRH+CTX组细胞的抑制率最高,故阳性表达最弱,IOD值最低。结论回药爱康方可以降低人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白的表达,抑制SK-MES-1细胞增殖。

血清TK1、SCC、CYFRA21-1联合预测老年早期肺鳞癌术后复发的效能

目的探讨血清胸苷激酶(TK)1、鳞状上皮细原(SCC)、细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA)21-1联合预测老年早期肺鳞癌术后复发的效能。方法回顾性分析手术治疗的84例老年早期肺鳞癌患者的临床资料,所有患者术后随访1年,根据术后是否复发分为复发组和非复发组。统计患者术后复发率,对比两组术后1 d血清TK1、SCC、CYFRA21-1水平,Logistic回归分析血清TK1、SCC、CYFRA21-1水平与术后复发的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对术后复发的预测价值。结果早期肺鳞癌患者术后1年复发率为26.19%,复发患者术后1 d血清TK1、SCC、CYFRA21-1水平显著高于未复发患者(P<0.05);复发患者低分化、Ⅱ期、术后辅助化疗1~2个周期的占比显著高于未复发患者(P<0.05);Logistic回归分析表明,低分化、Ⅱ期、术后辅助化疗1~2个周期、血清TK1、SCC、CYFRA21-1水平均是术后复发的危险因素(P<0.05);血清TK1、SCC、CYFRA21-1预测患者术后复发的临界值分别为2.45 pmol/L、2.08μg/L、8.85 ng/L。三者联合预测患者术后复发的灵敏度、特异度、曲线下面积(AUC)分别为95.45%、85.48%、0.907,AUC显著高于单独预测(P<0.05)。结论老年早期肺鳞癌术后复发患者血清TK1、SCC、CYFRA21-1水平较高,与低分化、Ⅱ期、术后辅助化疗周期短同是术后复发的危险因素。血清TK1、SCC、CYFRA21-1联合预测早期肺鳞癌术后复发的效能高,可用于指导临床治疗。

肺鳞癌LC-42及腺癌SELS细胞中PDHA1及GBP1表达的测定

目的:探索肺鳞癌LC-42及肺腺癌SELS细胞中PDHA1及GBP1基因活性的相互关系。方法:肺鳞癌LC-42及肺腺癌SELS细胞分别分为CT组、siRNA CT组、PDHA1 siRNA组及GBP1 siRNA组。其中CT组为空白对照组,siRNA CT组为siRNA对照组,PDHA1 siRNA组及GBP1 siRNA组为siRNA转染试剂分别沉默PDHA1或GBP1基因,转染48 h后收取细胞。采用RT-PCR检测各组细胞PDHA1及GBP1 mRNA的表达,再用免疫细胞化学染色及Western blot分析各组细胞PDHA1及GBP1蛋白的表达。结果:RT-PCR结果显示,与CT组相比,PDHA1 siRNA组的GBP1 mRNA表达水平上调(P<0.05)。免疫细胞化学染色及Western blot结果显示,与CT组相比,PDHA1 siRNA组的GBP1蛋白表达水平上调(P<0.05)。结论:肺鳞癌LC-42及肺腺癌SELS细胞中,GBP1可能是PDHA1的下游基因,PDHA1直接或间接参与了GBP1基因的负调控。

细胞代谢解毒酶CYP1A1、GSTM1基因多态性与吸烟对男性肺鳞癌发病的影响

目的探讨细胞代谢解毒酶细胞色素P450酶1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽S-转硫酶M1(GSTM1)基因多态性和吸烟因素对男性肺鳞癌发病的影响。方法采用基因芯片技术对125例男性肺鳞癌患者和125例男性健康对照者CYP1A1、GSTM1基因多态性进行检测。结果 CYP1A1m2位点GG基因型和GSTM1缺失基因型在肺鳞癌组与健康对照者间存在显著性差异(P<0.05)。吸烟者携带CYP1A1m2位点至少一个变异G等位基因或携带GSTM1缺失型者患肺鳞癌的危险性进一步显著增加,OR值分别为4.50和3.81(P<0.01)。结论吸烟与CYP1A1、GSTM1基因多态性与男性肺鳞癌的发生有关。

PEDF对肺鳞状细胞癌SK-MES-1细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的:探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对肺鳞状细胞癌(鳞癌)SK-MES-1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,阐明PEDF与肺鳞癌发生发展的关系。方法:培养SK-MES-1细胞,设不加PEDF的细胞为阴性对照组,PEDF干预组细胞分别加入180、360和720nmol·L-1 PEDF;MTT法检测各组SK-MES-1细胞增殖抑制率,细胞侵袭实验测定阴性对照组和720nmol·L-1 PEDF干预组SK-MES-1细胞穿透数,倒置显微镜观察各组SK-MES-1细胞形态学,流式细胞术检测各组SK-MES-1细胞凋亡率。结果:PEDF干预组细胞增殖抑制率均显著高于阴性对照组(P<0.01),不同剂量PEDF干预组间比较差异也有统计学意义(P<0.05)。阴性对照组细胞贴壁生长良好,PEDF干预组细胞排列逐渐稀疏,形态改变明显。720nmol·L-1 PEDF干预组SK-MES-1细胞穿透数(31.6±15.8)低于阴性对照组(75.4±19.3),差异有统计学意义(P<0.01)。随着PEDF干预剂量增加,细胞凋亡率逐渐升高,不同剂量PEDF干预组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PEDF抑制SK-MES-1细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,对肺鳞癌生长和转移发挥对抗效应。提示PEDF可能成为肺鳞癌患者预后判定、抗癌治疗的有效因子。

IL-1β促进肺鳞癌细胞增殖的机制研究

目的探究白细胞介素-1β(IL-1β)对肺鳞癌细胞增殖的影响及其机制。方法利用CBA试剂盒检测肺鳞癌患者(n=20)血浆和健康对照者(n=20)血浆中IL-1β含量。运用平板克隆形成实验评价IL-1β对肺鳞癌细胞增殖的影响。qRT-PCR检测IL-1β对肺鳞癌SK-MES-1细胞内miR-223-3p表达的影响。TargetScan软件预测、双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-223-3p潜在的下游靶基因。CCK-8法检测下调p27kip1对细胞增殖的影响。共聚焦显微镜观察肺鳞癌SK-MES-1细胞p27kip1的分布情况。Western blot检测IL-1β对肺鳞癌SK-MES-1细胞p27kip1表达的影响。结果肺鳞癌患者血浆中IL-1β含量中位数为11.96(7.55,29.20)ng/L,高于健康对照组2.52(1.64,3.48)ng/L,差异有统计学意义(Z=-5.06,P<0.001);IL-1β可促进肺鳞癌SK-MES-1细胞克隆形成并使细胞内miR-223-3p表达降低;miR-223-3p可直接与CDKN1B(p27kip1)的3′UTR直接结合进而抑制其表达;下调p27kip1后,肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖能力降低;p27kip1主要分布于肺鳞癌SK-MES-1细胞的胞质,IL-1β可促进p27kip1表达。结论IL-1β通过调控肺鳞癌细胞miR-223-3p和p27kip1表达促进细胞增殖。

Keap1/Nrf2信号通路对人肺鳞癌细胞生长、转移和耐药的影响

目的探讨Keap1/Nrf2信号通路对人肺鳞癌细胞株H520生长、转移和耐药的影响。方法使用慢病毒转染体系建立稳定高表达Keap1的H520细胞株模型(H520-Keap1),同时以Keap1失活的细胞株(H520-GFP)为阴性对照组;采用Western印迹法检测各组细胞中Keap1、Nrf2蛋白表达,RT-PCR检测Keap和Nrf2下游靶基因mRNA表达;通过SRB比色法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、体外细胞药敏实验分别检测各组细胞生长、转移和耐药情况。结果 H520-Keap1细胞中Keap1蛋白表达量明显高于H520-GFP细胞,Nrf2蛋白表达量明显低于H520-GFP细胞(P<0.01)。H520-Keap1细胞中Keap1 mRNA表达量明显高于H520-GFP细胞,H520-Keap1细胞中Nrf2下游靶基因Akr1c1、Nqo1、Gclc、Gclm mRNA相对表达量明显高于H520-GFP细胞(P<0.01)。SRB比色法检测显示,第1~3天,H520-GFP与H520-Keap1细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05);第4天起H520-Keap1细胞增殖率明显低于H520-GFP(P<0.05)。H520-GFP细胞迁移率明显高于H520-Keap1细胞(P<0.01);H520-GFP细胞的侵袭数明显高于H520-Keap1细胞(P<0.01)。H520-Keap1细胞对卡铂、吉西他滨的敏感性增加。结论 Keap1过表达可影响人肺鳞癌H520细胞中Nrf2及其下游靶基因表达,抑制癌细胞生长和转移,提升对卡铂和吉西他滨的敏感性。

37例肺鳞癌中细胞周期蛋白D1的表达及其与预后的关系

目的 研究肺鳞癌中细胞周期蛋白D1的表达及其与预后的关系。方法 采用免疫组化S -P法检测37例肺鳞癌组织中细胞周期蛋白D1的蛋白质表达水平 ,并研究其与临床及预后参数的关系。结果 细胞周期蛋白D1阳性组肿瘤直径 10 0 %大于 3cm ,肺门淋巴结转移率为 5 2 .6 % ,3年病死率为 78.9% ;阴性组肿瘤直径大于 3cm者为 6 1.1% ,肺门淋巴结转移率为 16 .7% ,3年病死率为 38.9% ,三者组间均有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 肺鳞癌中细胞周期蛋白D1的表达与年龄、性别、吸烟及组织学分级无关 ,与肿瘤大小、淋巴结转移及 3年病死率有关。细胞周期蛋白D1参与肺鳞癌的发生、发展 。

隐丹参酮对肺鳞癌KAL^(△LU)细胞增殖和周期以及干细胞抗原1的影响

目的探究隐丹参酮对肺鳞癌KAL^(△LU)细胞增殖、凋亡、周期以及干细胞抗原1(stem cell antigen,Sca-1)的影响。方法复苏KAL^(△LU)细胞,取对数生长期KAL^(△LU)细胞,分成对照组(DMSO组)与隐丹参酮组(DMSO+隐丹参酮组),调整隐丹参酮终浓度为6.25、12.5、25、50μM,加药24、48、72小时后,采用四甲基偶氮唑蓝法检测隐丹参酮对肺鳞癌KAL^(△LU)细胞增殖的影响。取对数生长期KAL^(△LU)细胞,调整隐丹参酮终浓度为25μM,培养24、48、72小时后收集细胞,分别加入Annexin V、7-AAD、PI/RNase染色缓冲液以及Sca-1-FITC抗体染色,采用流式细胞术检测隐丹参酮对KAL^(△LU)细胞凋亡、周期、Sca-1的影响。结果(1)12.5、25、50μM隐丹参酮干预24、48、72小时后KAL^(△LU)细胞存活率均降低(P<0.05),提示细胞增殖受抑制。(2)隐丹参酮25μM干预24、48、72小时后,与对照组相比,隐丹参酮组早期凋亡率无明显统计学差异(P>0.05)。(3)隐丹参酮25μM干预48、72小时后,与对照组相比,隐丹参酮组G0/G1期比例降低、S期比例增加(P<0.05)。(4)隐丹参酮25μM干预24、48、72小时后,与对照组相比,各时间点Sca-1表达比例均降低(P<0.05)。结论隐丹参酮能抑制KAL^(△LU)细胞增殖,具有浓度依赖性和时间依赖性,阻滞KAL^(△LU)细胞周期于S期,降低KAL^(△LU)细胞干性,在抑制肺鳞癌方面具有一定的潜力。

SCC-Ag、PD-L1、RRM1表达对中晚期肺鳞癌患者化疗效用的评估价值及与患者预后的关系分析

目的分析鳞细胞癌抗原(SCC-Ag)、程序性死亡分子配体1(PD-L1)、核苷酸还原酶M1(RRM1)表达对中晚期肺鳞癌患者化疗效用的诊断价值及与患者预后的相关性。方法回顾性分析2020年1月至2021年6月入我院接受化疗的肺鳞癌患者共122例。观察患者化疗后临床疗效,并根据患者病情建立PR组、SD组、PD组,对比各组患者化疗前后SCC-Ag、PD-L1、RRM1水平变化情况,采用ROC曲线分析SCC-Ag、PD-L1、RRM1单一指标及联合检测模式对患者化疗效果的评估价值。对比各组患者生活质量评分,采用Pearson相关系数分析SCC-Ag、PD-L1、RRM1与患者生活质量(KPS)评分的相关性。结果所有患者化疗结束后均接受临床评估且未见完全缓解患者,PR患者共37例(占比30.32%)纳入PR组,SD患者51例(占比41.80%)纳入SD组,PD患者共34例(占比27.87%)纳入PD组;化疗后PR组、SD组各指标水平较化疗前相比均明显降低,PD组各指标水平较化疗前相比均明显升高(均P<0.05),化疗后各组间各指标对比均P<0.05;采用ROC曲线分析显示单一指标检测的ROC曲线下面积均较低,3者联合检测的ROC曲线下面积最高(AUC=0.912);化疗结束后,各组KPS评分随着化疗疗效的升高而升高(P<0.05);采用Pearson相关系数分析显示SCC-Ag、PD-L1、RRM1与患者KPS评分结果呈负相关(P<0.05)。结论中晚期肺鳞癌患者SCC-Ag、PD-L1、RRM1表达与患者化疗后疗效具有相关性,上述3项指标会影响到患者预后及生活质量,后续临床可通过SCC-Ag、PD-L1、RRM13项指标检测并密切关注患者的病情发展情况,针对性地调整并完善诊疗方案,有助于改善患者预后。

P63和TTF-1在肺小细胞癌与低分化鳞癌中的鉴别诊断价值

目的探讨P63、TTF-1对肺小细胞癌与低分化鳞癌的鉴别诊断价值。方法采用免疫组织化学法检测32例肺小细胞癌与肺低分化鳞癌手术标本P63、TTF-1蛋白表达及部分神经内分泌标记物Syn、CgA、NSE蛋白表达,对其结果进行分析。结果肺小细胞癌21例P63、TTF-1阳性表达分别为9.5%(2/21)、90.5%(19/21);Syn、CgA、NSE均为阳性表达。肺低分化鳞癌11例P63、TTF-1阳性表达分别为81.8(9/11)、18.2%(2/11);Syn、CgA、NSE部分表达。P63、TTF-1在肺小细胞癌与低分化鳞癌的阳性表达有显著差异(P<0.01)。结论P63与TTF-1联合检测,对肺小细胞癌与低分化鳞癌具有鉴别诊断价值。

PD-1抑制剂治疗肺鳞癌诱发的暴发性1型糖尿病1例

免疫检查点包括了程序性死亡受体(PD-1)及其配体(PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4),肿瘤细胞通过与T细胞的免疫检查点结合来逃避T细胞的检测和杀伤,而免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICIs)可阻断肿瘤细胞与上述两者之间的结合^([1])。随着ICIs在肺癌治疗领域中的应用普及^([2]),其相关毒性造成的包括免疫相关的不良事件(immune-relatedadverseeffects,irAEs)也相继出现。irAEs的发作可立即发生或延迟长达2年,且可影响任何器官系统^([3])。

PLK1表达对肺鳞癌细胞肿瘤生物学行为的影响的研究

目的研究Polo样激酶1(PLK1)基因沉默对肺鳞癌SK-MES-1细胞肿瘤生物学行为的影响并探讨其相关的分子机制。方法将PLK1 siRNA和空白对照siRNA转染SKMES-1细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测SK-MES-1细胞PLK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测SK-MES-1细胞中PLK1、E-cadherin、Vimentin和C-myc蛋白的表达水平;流式细胞术检测SK-MES-1细胞周期分布; Transwell实验检测SK-MES-1细胞侵袭能力的改变。结果采用PLK1siRNA抑制PLK1 mRNA和蛋白表达后可以下调C-myc蛋白表达,将细胞周期阻滞在G2/M期;同时可以通过减少Vimentin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达降低细胞的侵袭能力,与空白对照siRNA组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论 PLK1在肺鳞癌的生长转移中具有重要作用,PLK1可能通过下调E-cadherin蛋白表达,增加Vimentin蛋白表达促进肿瘤细胞上皮-间质细胞转化进程。

Musashi2基因在肺鳞癌中的表达及其对Notch1信号通路介导的CD44v6(+)肺癌干细胞维持的研究

目的:研究Musashi2基因对CD44v6(+)肺癌干细胞干性的维持作用并探讨机制。方法:收集50例临床肺鳞癌组织,并使用qRT-PCR法检测Musashi2和CD44v6的表达。使用微珠分选分离法分选CD44v6(+)和CD44v6(-)的SK-MES-1细胞。CD44v6(-)细胞分为pcDNA-Musashi2组和pcDNA-NC组;CD44v6(+)细胞分为对照组、Notch1抑制剂RO4929097组。pcDNAMusashi2转染的CD44v6(-)细胞分为pcDNA-Musashi2组和pcDNA-Musashi2+RO4929097组。成球实验检测各组的成球能力。蛋白免疫印迹实验检测干细胞标志物Nanog、Oct4、Sox2、Notch1和Hey1以及Musashi2的蛋白表达。结果:Musashi2和CD44v6在肺鳞癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05)。与CD44v6(-)细胞比较,CD44v6(+)细胞的成球能力增强,Musashi2、Nanog、Oct4、Sox2、Notch1和Hey1表达上调(均P<0.05)。与pcDNA-NC相比较,pcDNA-Musashi2组的成球能力增强,且Musashi2、Nanog、Oct4、Sox2、Notch1和Hey1表达上调(均P<0.05)。与对照组比较,RO4929097组的成球能力降低,且Musashi2、Nanog、Oct4、Sox2、Notch1和Hey1表达下调(均P<0.05);与pcDNA-Musashi2组比较,pcDNA-Musashi2+RO4929097组成球能力降低,且Musashi2、Nanog、Oct4、Sox2、Notch1和Hey1表达均下调(均P<0.05)。结论:Musashi2通过Notch1信号来维持CD44v6(+)肺癌干细胞的干性。

顺铂对肺鳞癌PD-L1表达影响的初步研究

目的探讨顺铂对肺鳞癌肿瘤免疫微环境模型中程序性死亡因子配体1(PD-L1)及淋巴细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测不同浓度顺铂(0、0.5、1、2、4、8 mg/L)处理对NCI-H520细胞表面PD-L1表达的影响。分别将顺铂(1.0 mg/L)预处理前后的NCI-H520细胞与活化的淋巴细胞进行共孵育,共分为6组:T-为仅有未经顺铂处理的淋巴细胞组;T^+为仅有经顺铂预处理的淋巴细胞组;T-H-为未经顺铂处理的淋巴细胞与未经顺铂处理的NCI-H520细胞系共孵育组;TH^+为未经顺铂处理的淋巴细胞与经顺铂处理的NCI-H520细胞系共孵育组;T^+H-为经顺铂处理的淋巴细胞和未经顺铂处理的NCI-H520细胞系共孵育组;T^+H^+为分别经顺铂处理的淋巴细胞与NCI-H520细胞系共孵育组。采用流式细胞仪检测各组淋巴细胞(CD4^+及CD8^+T细胞)的凋亡情况,ELISA法检测各组上清中干扰素-γ(IFN-γ)分泌情况。结果 MTT检测结果显示,顺铂可呈浓度梯度抑制NCI-H520细胞增殖;顺铂处理组较未处理组NCI-H520细胞系表面PD-L1表达上调(P<0.05);各组CD4^+及CD8^+T细胞亚群中,PD-1^+T细胞的凋亡率高于PD-1-T细胞,差异有统计学意义(P<0.05);与未经顺铂预处理的NCI-H520细胞共孵育组相比,与经顺铂处理的NCI-H520细胞共孵育后,CD4^+及CD8^+T细胞的凋亡率均较高,且IFN-γ分泌量较少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论顺铂可能通过诱导肺鳞癌细胞系PD-L1表达抑制免疫微环境,为以顺铂为基础的化疗联合抗PD-L1靶向治疗肺鳞癌提供了理论基础。

血sICAM-1、sVCAM-1水平与肺鳞癌关系的研究

目的探讨细胞间黏附分子（slCAM—1）、血管细胞黏附分子（sVCAM-1）水平在肺鳞癌临床诊治中的价值。方法利用ELISA法检测正常人群血中slCAM．1、sVCAM．1水平，确定其正常值范围。同时测定肺鳞癌患者术前2d、术后10d血slCAM．1、sVCAM．17．k平，并进一步分析其与肺鳞癌癌细胞分化程度、淋巴结转移、临床病理分期的关系。结果肺鳞癌患者术前血slCAM．1、sVCAM．1水平明显高于正常人群，差异具有显著性。术后10d血slCAM．1、sVCAM—l水平明显降低，与术前2d相比，差异具有显著性。术后10d血slCAM-1、sVCAM．1水平，与正常人群无显著差异。低分化肺鳞癌组血slCAM．1、sVCAM．1水平明显高于高分化肺鳞癌组，差异具有显著性。术后临床病理分期Ⅲ期组血sICAM．1、sVCAM-1水平明显高于术后临床病理分期I期组，差异具有显著性。有淋巴结转移组slCAM-1、sVCAM．1水平明显高于无淋巴结转移组，差异具有显著性。结论slCAM-1、sVCAM-1可能与肺鳞癌的生长、侵袭、转移有着密切关系，血slCAM-1、sVCAM-1检测在肺癌诊治中具有一定的临床意义。