体外扩增CIK细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901

目的：观察CIK细胞增殖情况，了解扩增后的最佳应用时机，并观察体外对SGC-7901的杀伤作用。方法：健康人外周血单核细胞（PBMC）在体外条件下经过多种细胞因子的共同刺激诱导成CIK细胞，计数培养不同时间的CIK细胞，用流式细胞术检测CIK细胞的表型特征。用MTT法检测杀伤活性，对比CIK细胞与5-FU对SGC-7901的杀伤作用，并观察了两者联合应用的效果。结果：CIK细胞随体外培养时间的延长，数量及杀伤活性均增加。体外培养20d增殖124倍，CD3^＋、CD56^＋双阳性细胞的比例达66．1％，其后两者数量增长缓慢；体外实验显示CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用，最高杀伤效率为73．13％，其杀伤作用优于5-FU，P〈0．05。二者联合应用杀伤作用降低。结论：CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性；体外培养15～20d时应用较为合适；联合应用时5-FU可降低CIK细胞的杀伤效率。

白藜芦醇对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖和凋亡作用的实验研究

目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制。方法:使用不同浓度Res处理SGC-7901细胞不同时间后,采用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;FCM和TUNEL法检测分析细胞周期和细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞中bcl-2、bax、caspase-3和Fas蛋白的表达;RT-PCR检测Fas、bcl-2、bax、caspase-3 mRNA的表达。结果:Res对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用随着Res作用时间的延长和浓度的增加而明显增强(P<0.01,P<0.05),同时能诱导其发生凋亡(P<0.01);Res(150μmol/L)能明显上调SGC-7901细胞中bax、caspase-3、Fas mRNA及其蛋白的表达,下调bcl-2 mRNA及其蛋白的表达。结论:Res抑制SGC-7901细胞的增殖、诱导细胞凋亡呈浓度、时间依赖性;这可能与Res上调肿瘤细胞Fas、bax和caspase-3的表达及下调bcl-2的表达有关。

羊栖菜多糖对SGC-7901人胃癌细胞内[Ca^(2+)]i的影响

[目的]观察羊栖菜多糖对人胃癌细胞内Ca2 + 含量的变化 ,揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]采用Fluo -3/AM探针标记 ,激光共聚焦技术观测细胞内[Ca2 +]i。[结果]SFPS可使SGC -7901细胞内[Ca2 +]i先升高然后下降 ,给CaCl2 后 ,[Ca2 +]i又升高。[结论]SFPS诱导肿瘤细胞凋亡是通过升高SGC -7901细胞内[Ca2 +]i而达到的 ,[Ca2 +]i升高时Ca2

CIK细胞及上清液抗胃癌细胞株SGC-7901活性的研究

目的:探讨由多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在体外的增殖情况,分析体外CIK细胞对胃癌细胞株SGC-7901的杀伤作用。方法:健康人外周血单核细胞(PBMC)在体外诱导成CIK细胞,计数培养不同时间的CIK细胞,并用流式细胞术动态分析其表型特征。倒置显微镜下观察CIK细胞作用于SGC-7901胃癌细胞的形态学变化;流式细胞仪检测CIK细胞培养上清液对胃癌细胞的诱导凋亡作用;采用MTT法检测CIK细胞对SGC-7901胃癌细胞株的杀伤活性。结果:CIK细胞随体外培养时间的延长,数量及杀伤活性均增加。体外培养21d,细胞总数增殖倍数111.63±10.97,CD3+CD56+双阳性细胞数量亦增加,比例达(35.8±9.7)%,其后两者数量逐渐降低。CIK细胞上清液能够诱导胃癌细胞株凋亡;CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤率为(74.91±2.71)%。结论:CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性,体外培养14～21d时具有较强的抗瘤活性,其主要通过直接杀伤及释放细胞因子诱导凋亡的作用杀伤肿瘤细胞。

胃复康对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达的影响

目的探讨中药胃复康对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达的影响。方法PRMI1640血清培养的人SGC-7901胃癌细胞株分为胃复康实验组、生理盐水对照组和顺铂(DDP)化疗组。利用血清药理学方法制备药物血清,作用48h后,应用免疫细胞化学方法和图像分析方法观察胃复康、DDP对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达影响。结果免疫细胞化学法显示抑癌基因p53和癌基因bcl-2主要定位在细胞质内。胃复康、DDP药物血清作用后,p53表达明显增强,bcl-2表达明显降低;随着作用时间延长,两种基因表达改变更明显。胃复康、DDP药物血清组p53和bcl-2表达的光密度值(AOD)与对照组差异显著(P<0.01)。结论中药胃复康药物血清上调p53和下调bcl-2的表达可能是其抑制胃癌细胞株SGC-7901的作用机制之一。

木黄酮对人胃癌细胞SGC-7901作用的研究

目的 探讨木黄酮对体外培养的人胃癌细胞SGC_790 1生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法 用MTT法检测药物效应 ,透射电镜及流式细胞仪观察木黄酮处理SGC_790 1细胞后细胞周期和细胞凋亡。细胞免疫化学观察木黄酮处理SGC_790 1细胞后 ,SGC_790 1细胞PCNA ,FAS ,C myc的变化。结果 ①MTT法证实木黄酮对SGC_790 1细胞生长有抑制作用 ,并呈剂量_效应关系。②流式细胞仪分析木黄酮处理SGC_790 1细胞后细胞滞留于G2 /M期 ,并可见凋亡峰。③透射电镜可见SGC_790 1细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变。④木黄酮下调PCNA及C_myc表达 ,上调FAS表达。结论 木黄酮对人胃癌细胞SGC_790 1有抑制作用 ,其抑制作用可能通过下调C_myc基因表达 ,上调Fas蛋白表达 ,下调PCNA表达 ,从而多途径诱导胃癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程 ,抑制SGC_790

TGFβ1对胃腺癌细胞SGC-7901Bcl-2表达的影响

目的：研究转化生长因子β1（transforminggrowthfactorβ1，TGFβ1）对胃癌细胞Bcl-2表达的影响．方法：TGFβ1作用于人胃癌细胞SGC－7901，48h后收集细胞爬片．用抗Bcl－2mAb和免疫组织化学SABC法及图像分析技术分析Bcl－2．结果：TGFβ1作用的胃腺癌细胞Bcl－2表达量A值122．624±0．385，较对照组细胞108．925±0．094下降显著（P＜0．05）．结论：TGFβ1对胃癌细胞的凋亡诱导作用可能与其影响Bcl－2表达有关．

散癖平胃方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移的影响

目的观察散癖平胃(SPPW)方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响。方法 SPPW方含药血清干预人胃癌细胞SGC-7901 48h后,应用黏附实验、侵袭实验及迁移实验,检测SPPW方对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响。应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测SPPW对与侵袭转移有关的MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响。结果 SPPW方各组含药血清干预人胃癌细胞48h后,SGC-7901细胞黏附抑制率、侵袭抑制率及迁移抑制率均增加且呈剂量依赖关系,与阴性对照组比较有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。SPPW方三个剂量组对MMP-2mRNA的表达无统计学差异,对MMP-9mRNA的表达具有统计学差异(P<0.01)。结论 SPPW方可抑制人胃癌细胞SGC-7901黏附、侵袭和迁移能力,其抑制有明显的剂量依赖性,其抑制的机制可能与下调MMP-9的表达有关。

紫杉醇诱导体外培养胃腺癌细胞系SGC-7901凋亡

目的 研究紫杉醇对胃腺癌细胞系SGC 790 1的凋亡诱导作用。方法 紫杉醇不同浓度、不同作用时间分别处理胃腺癌细胞系SGC 790 1。采用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率 ,通过组织学观察、TUNEL等手段检测胃腺癌细胞系SGC 790 1细胞凋亡情况。结果 紫杉醇对胃腺癌细胞系SGC 790 1有明显的抑制作用 ,并在一定剂量和时间范围内诱导胃腺癌细胞系SGC 790 1凋亡 ,随着药物浓度的增加及时间的延长 ,凋亡细胞明显增多 ,当紫杉醇作用浓度为 2 0 μmol L以上时 ,细胞出现破碎、坏死。结论 紫杉醇对胃腺癌细胞系SGC 790 1有明显的抑制作用 ,诱导凋亡是其发挥抗癌作用的机制之一。

性激素对胃癌细胞株SGC-7901体外培养的影响

目的：探讨性激素在体外对胃癌细胞生长的影响。方法：选对数生长期细胞，加入不同浓度的雌二醇和睾酮，７ｄ后显微镜下计数，观察生长情况。结果：生理浓度的雌二醇和睾酮均促进胃癌细胞生长（Ｐ＜０．０１），高浓度睾酮抑制胃癌细胞生长；睾酮能拮抗雌二醇作用。

运用产气袋法制造微缺氧培养人胃癌细胞株SGC-7901

目的:运用GasPaK产气袋法制造微缺氧条件培养人胃癌细胞株SGC-7901并观察该细胞在微缺氧条件下超微结构的变化。方法:运用产气袋法(GasPaK)制造微缺氧条件,血气分析监测1640培养液中PO2、PCO2和pH值变化。透射电镜观察微缺氧对SGC-7901细胞超微结构的改变。结果:(1)GasPaK产气袋法在0·5-48h内PO2、PCO2和pH稳定,并能达到微缺氧细胞培养的条件;(2)微缺氧导致部分SGC-7901细胞超微结构发生改变。结论:通过GasPaK产气袋法制造的微缺氧肿瘤细胞培养环境,具有条件稳定、重复性好的持点。

塞来昔布联合PDTC对人胃癌细胞株SGC-7901生长的抑制作用

目的:研究塞来昔布及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对人胃癌细胞株SGC-7901的生长抑制作用及其相关机制。方法:分别应用塞来昔布50、100μmol/L,PDTC50、100μmol/L及2药联合25/25、50/50μmol/L处理SGC-7901胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率。TUNEL法检测细胞的原位凋亡。RT-PCR检测环氧合酶-2(COX-2)、核因子(NF)-κB、caspase-3mRNA的表达。结果:塞来昔布、PDTC及2药联合作用于胃癌细胞72h细胞的生长均受到抑制(P<0.05),72h时25/25μmol/L的2药联合组与50μmol/L塞来昔布组相比,细胞的生长抑制率无明显差异(P>0.05),50/50μmol/L的2药联合组细胞生长抑制率高于100μmol/L的单独用药组(P<0.01)。100μmol/L的单独用药组和50/50μmol/L的2药联合组在作用于细胞24h后,细胞凋亡指数均高于阴性对照组,且2药联合组凋亡指数高于单独用药组(P<0.01)。100μmol/L的塞来昔布及PDTC单独作用于细胞12h后均可见COX-2、NF-κB表达降低(P<0.05),100μmol/L的塞来昔布和PDTC及2种浓度的2药联合caspase-3表达升高(P<0.05)。结论:塞来昔布与PDTC联合应用具有显著抗胃癌细胞增殖,促进其凋亡的作用,其机制可能与抑制COX-2、NF-κB的表达,促进caspase-3表达有关。

一氧化氮抑制胃癌细胞系SGC-7901增殖及C-FOS和C-JUN表达

目的探讨一氧化氮(NO)对胃癌细胞系SGC-7901增殖的影响及其机制。方法MTT法测定细胞的生长,RT-PCR和W estern印迹法检测C-FOS和C-JUN的mRNA和蛋白表达。结果硝普钠(SNP)抑制SGC-7901细胞的生长(P<0.05),并呈剂量和时间性降低C-FOS和C-JUNmRNA及蛋白表达。结论NO可能通过下调C-FOS和C-JUN的表达而抑制胃癌细胞的增殖。

胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖影响的机制研究

目的研究胃热消炎合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法取对数生长期的人胃癌细胞SGC-7901进行体外实验,其中空白血清组加入含10%正常血清培养,低剂量含药血清组加入含2.5%药物血清+7.5%正常血清培养,中剂量含药血清组加入含5%药物血清+5%正常血清培养,高剂量含药血清组加入含10%药物血清培养,胃热消炎合剂含药血清通过给大鼠灌胃的方式获得。分别采用CCK-8法、EdU染色法和免疫荧光法检测各组细胞增殖情况,采用RT-PCR法检测各组细胞增殖信号通路p53-p21的相关基因p21、p53、CyclinD1、CDX2、CDK7mRNA的表达情况,采用Western blot法检测各组细胞中p21、p53、CyclinD1、CDX2蛋白表达水平。结果各含药血清组SGC-7901细胞增殖受到明显抑制,且呈浓度依赖性。各含药血清组p21、p53 mRNA表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),CyclinD1 mRNA表达水平均明显低于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;各组CDX2、CDK7mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各含药血清组p21蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),且呈浓度依赖性;低剂量含药血清组和中剂量含药血清组p53蛋白表达水平均明显高于空白血清组(P均<0.05),而高剂量含药血清组p53蛋白表达水平明显低于空白血清组(P<0.05);各组CyclinD1、CDX2蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论胃热消炎合剂可能通过作用于细胞周期来抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,其可能具有预防和治疗早期胃癌的作用。

曲古菌素A对人胃癌细胞SGC-7901中组蛋白H3乙酰化水平及细胞凋亡的影响

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古菌素A(TSA)对胃癌细胞系SGC-7901中组蛋白H3乙酰化水平及细胞凋亡的影响.方法:流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测75μg/LTSA干预前胃癌细胞系SGC-7901中乙酰化组蛋白H3的表达.结果:TSA干预后胃癌细胞系SGC-7901中乙酰化组蛋白H3的表达水平明显升高,乙酰化组蛋白H3阳性细胞数从1.12±1.06上升至35.43±6.05,与未干预相比两者表达有显著性差异(P<0.01),流式细胞仪分析显示细胞凋亡率增加到22.13%±3.49%.结论:TSA可诱导细胞凋亡,促进胃癌细胞系SGC-7901中乙酰化组蛋白H3的表达.

癌宁诱导人胃腺癌细胞SGC-7901凋亡的形态学变化及未端标记

目的:探索癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法:采用体外细胞培养技术,通过形态学、分子生物学方法,对中药复方癌宁和顺铂诱导胃癌细胞凋亡进行了深入研究。结果:经癌宁及顺铂处理后的细胞出现凋亡形态学改变;癌宁在1 g/L浓度对细胞的凋亡诱导率是46.36％,与25 mg/L顺铂对细胞的凋亡诱导率49.12％间无显著差异(P>0.05),两者均与空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:癌宁及顺铂对人胃癌细胞具有诱导凋亡作用,中药复方癌宁可望成为一种有前途的新的癌细胞凋亡诱导剂。

miR-93转染对胃癌细胞株SGC-7901侵袭迁移能力的影响及机制探讨

目的观察上调miR-93表达对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法将miR-93模拟物及其阴性对照物分别转染胃癌细胞株SGC-7901,qRT-PCR检测转染细胞的miR-93,细胞划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测转染细胞的迁移及侵袭能力,qRT-PCR和Western blotting检测转染细胞的染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)mRNA和蛋白。结果与转染阴性对照物的SGC-7901细胞相比,转染miR-93模拟物的SGC-7901细胞miR-93表达明显增加(P<0.01)、迁移和侵袭能力增强(P均<0.05)、CHD5mRNA及蛋白表达下调(P均<0.05)。结论过表达miR-93可促进SGC-7901细胞的迁移和侵袭,其机制可能与CHD5表达下调有关。

黄独乙素对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响及其机制

目的研究黄独乙素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及相关的作用机制。方法用RPMI-1640培养液对SGC-7901细胞进行传代培养,用不同浓度（0~160μg/m L）黄独乙素分别对SGC-7901细胞进行处理,应用CCK-8法检测细胞的增殖率;光学显微镜观察细胞形态学改变;Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1表达的变化。结果黄独乙素以计量依赖方法抑制胃癌细胞生长,抑制率最高达57.26%;细胞形态发生明显改变;Cyclin D1蛋白水平表达显著下调。结论黄独乙素能显著抑制SGC-7901细胞的增殖,其机制可能与下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达有关。

丙戊酸盐对胃癌细胞株SGC-7901/VCR耐药性的逆转作用

目的探讨丙戊酸盐对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR耐药的逆转作用。方法 MTT法检测SGC-7901/VCR对VCR的耐药指数;MTT法检测丙戊酸盐对SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞增殖的抑制作用和对VCR耐药逆转的效果;用流式细胞术检测丙戊酸盐诱导细胞凋亡的作用,将SGC-7901/VCR细胞用VCR联合丙戊酸盐处理48h后,检测各组凋亡率的差别;用Western blot检测丙戊酸盐处理后蛋白质的表达水平,分别用不同浓度(0、0.5、1.0、2.0mmol/L)的丙戊酸盐作用于48h或同一浓度(1mmol/L)作用12、24、48h后,检测SGC-7901/VCR细胞中乙酰化组蛋白3(AcH3)表达水平对丙戊酸盐所呈现的剂量或时间依赖性变化。结果与亲代细胞SGC-7901相比,耐药细胞SGC-7901/VCR对VCR高度耐药,耐药指数为36.0(P<0.05);亲代细胞SGC-7901和耐药细胞SGC-7901/VCR对丙戊酸盐的敏感性相似,二者的IC50差异无统计学意义(P>0.05),丙戊酸盐与VCR联用能逆转SGC-7901/VCR细胞对VCR的耐药性,并增加细胞的凋亡(P<0.05);丙戊酸盐能增加SGC-7901/VCR细胞AcH3的表达,且具有浓度和时间依赖性。结论丙戊酸盐可通过诱导细胞凋亡和增加组蛋白的表达逆转SGC-7901/VCR细胞的耐药性。

5-氟脲嘧啶及丝裂霉素C对人胃癌细胞株SGC-7901及BGC-823的相互作用的体外观察

目的 :体外观察 5 -氟脲嘧啶及丝裂霉素C对人胃癌细胞株 (SGC - 790 1及BGC - 82 3)的相互作用。方法 :采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两种药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应也增加 ;两药大剂量 (大于中效剂量 )合用时是协同作用 (CI<1 ) ,小剂量 (小于中效剂量 )合用时是拮抗作用 (CI >1 ) ;两药给药时间次序不同不会影响效应大小。结论 :上述两种药合用大剂量是协同 ,而小剂量则拮抗 。