目的:探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用及其对COX-2、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)和前列腺素E2(p...目的:探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用及其对COX-2、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影响.方法:采用M T T法分别检测丙谷胺和塞来昔布单独及联合应用对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响;RT-PCR法检测COX-2和15-PGDH m RNA的表达;Western blot检测COX-2和15-PGDH蛋白质的表达;ELISA检测细胞培养液中PGE2含量变化.结果:丙谷胺和塞来昔布呈剂量和时间依赖性地抑制胃癌BGC-823细胞的增殖.采用低于细胞增殖半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50)的丙谷胺(6mmol/L)和塞来昔布(50μm o l/L)联合应用,48 h时对胃癌细胞B G C-823的增殖抑制率为65.1%±7.7%,显著高于单独应用丙谷胺(6 mmol/L,38.1%±7.1%)和塞来昔布(50μmol/L,32.6%±3.3%)时的抑制率(P值均<0.05).丙谷胺和塞来昔布两药均能下调胃癌BGC-823细胞中COX-2及上调15-PGDH m RNA和蛋白的表达,联合应用比单独用药更为显著(P值分别<0.05,<0.01).同时,两药也能降低BGC-823细胞分泌PGE2,联合用药作用更加明显(P值分别<0.05,<0.01).结论:丙谷胺、塞来昔布均呈时间和剂量依赖性抑制胃癌细胞株BGC-823的增殖,其可能机制之一为通过下调COX-2 m RNA和蛋白的表达,同时上调15-PGDH mRNA和蛋白的表达,进而减少PGE2合成与分泌而实现.两药联合应用可能具有协同抗癌作用.展开更多
目的观察蛋白激酶B(PKB/AKT1)小干扰RNA(si RNA)对人胃癌细胞株BGC-823增殖与迁移的影响,探讨PKB/AKT1在胃癌发生中的可能作用机制。方法体外培养BGC-823细胞,分为空白对照组、阴性对照组和PKB/AKT1 si RNA转染组。实时荧光定量聚合酶...目的观察蛋白激酶B(PKB/AKT1)小干扰RNA(si RNA)对人胃癌细胞株BGC-823增殖与迁移的影响,探讨PKB/AKT1在胃癌发生中的可能作用机制。方法体外培养BGC-823细胞,分为空白对照组、阴性对照组和PKB/AKT1 si RNA转染组。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot法分别检测BGC-823细胞PKB/AKT1的m RNA和蛋白表达;噻唑蓝法测定细胞增殖抑制率;划痕实验测定细胞迁移。Western blot法检测β-Catenin,侵袭转移相关的上皮性钙黏附蛋白(E-Cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-Cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达。结果与两组对照组比较,PKB/AKT1 si RNA转染组PKB/AKT1的m RNA和蛋白表达降低,并抑制BGC-823细胞的增殖和迁移,β-Catenin,N-Cadherin及MMP-9的蛋白表达下降,E-Cadherin表达增加。结论 PKB/AKT1 si RNA抑制胃癌细胞株BGC-823的增殖和迁移,其机制可能与si RNA下调PKB/AKT1表达进而抑制WNT/β-Catenin信号通路有关。展开更多
目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡...目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。展开更多
背景与目的：探讨丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡA，TanⅡA）对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响。材料与方法：采用0～10μg／ml Tan ⅡA分别作用于BGC-823细胞48h及72h，MTT比色法观察药物对细胞生长的抑制效应；2、5、10μg／ml TanⅡA...背景与目的：探讨丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡA，TanⅡA）对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响。材料与方法：采用0～10μg／ml Tan ⅡA分别作用于BGC-823细胞48h及72h，MTT比色法观察药物对细胞生长的抑制效应；2、5、10μg／ml TanⅡA分别作用于细胞72h，应用HE染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析药物对细胞凋亡的影响。结果：TanⅡA明显抑制BGC-823细胞增殖、诱导细胞凋亡，镜下可见BGC-823细胞明显的凋亡特征性改变；5、10μg／ml Tan ⅡA处理组细胞DNA电泳可见典型的“梯状”条带；FCM结果显示5、10μg／ml TanⅡA处理组细胞，凋亡率分别为（20．60±1．84）％、（31．03±1．47）％，与对照组（5．23±0．39）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在一定条件下，TanⅡA可抑制人胃癌BGC-823细胞增殖，诱导其凋亡。展开更多
文摘目的:探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用及其对COX-2、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影响.方法:采用M T T法分别检测丙谷胺和塞来昔布单独及联合应用对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响;RT-PCR法检测COX-2和15-PGDH m RNA的表达;Western blot检测COX-2和15-PGDH蛋白质的表达;ELISA检测细胞培养液中PGE2含量变化.结果:丙谷胺和塞来昔布呈剂量和时间依赖性地抑制胃癌BGC-823细胞的增殖.采用低于细胞增殖半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50)的丙谷胺(6mmol/L)和塞来昔布(50μm o l/L)联合应用,48 h时对胃癌细胞B G C-823的增殖抑制率为65.1%±7.7%,显著高于单独应用丙谷胺(6 mmol/L,38.1%±7.1%)和塞来昔布(50μmol/L,32.6%±3.3%)时的抑制率(P值均<0.05).丙谷胺和塞来昔布两药均能下调胃癌BGC-823细胞中COX-2及上调15-PGDH m RNA和蛋白的表达,联合应用比单独用药更为显著(P值分别<0.05,<0.01).同时,两药也能降低BGC-823细胞分泌PGE2,联合用药作用更加明显(P值分别<0.05,<0.01).结论:丙谷胺、塞来昔布均呈时间和剂量依赖性抑制胃癌细胞株BGC-823的增殖,其可能机制之一为通过下调COX-2 m RNA和蛋白的表达,同时上调15-PGDH mRNA和蛋白的表达,进而减少PGE2合成与分泌而实现.两药联合应用可能具有协同抗癌作用.
文摘目的观察蛋白激酶B(PKB/AKT1)小干扰RNA(si RNA)对人胃癌细胞株BGC-823增殖与迁移的影响,探讨PKB/AKT1在胃癌发生中的可能作用机制。方法体外培养BGC-823细胞,分为空白对照组、阴性对照组和PKB/AKT1 si RNA转染组。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot法分别检测BGC-823细胞PKB/AKT1的m RNA和蛋白表达;噻唑蓝法测定细胞增殖抑制率;划痕实验测定细胞迁移。Western blot法检测β-Catenin,侵袭转移相关的上皮性钙黏附蛋白(E-Cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-Cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达。结果与两组对照组比较,PKB/AKT1 si RNA转染组PKB/AKT1的m RNA和蛋白表达降低,并抑制BGC-823细胞的增殖和迁移,β-Catenin,N-Cadherin及MMP-9的蛋白表达下降,E-Cadherin表达增加。结论 PKB/AKT1 si RNA抑制胃癌细胞株BGC-823的增殖和迁移,其机制可能与si RNA下调PKB/AKT1表达进而抑制WNT/β-Catenin信号通路有关。
文摘目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。
文摘背景与目的：探讨丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡA，TanⅡA）对人胃癌BGC-823细胞增殖及凋亡的影响。材料与方法：采用0～10μg／ml Tan ⅡA分别作用于BGC-823细胞48h及72h，MTT比色法观察药物对细胞生长的抑制效应；2、5、10μg／ml TanⅡA分别作用于细胞72h，应用HE染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析药物对细胞凋亡的影响。结果：TanⅡA明显抑制BGC-823细胞增殖、诱导细胞凋亡，镜下可见BGC-823细胞明显的凋亡特征性改变；5、10μg／ml Tan ⅡA处理组细胞DNA电泳可见典型的“梯状”条带；FCM结果显示5、10μg／ml TanⅡA处理组细胞，凋亡率分别为（20．60±1．84）％、（31．03±1．47）％，与对照组（5．23±0．39）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在一定条件下，TanⅡA可抑制人胃癌BGC-823细胞增殖，诱导其凋亡。
