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半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究
被引量:
6
1
作者
张锋
吴震
+2 位作者
徐宁
杜红蕾
郭海彦
《药物评价研究》
CAS
2022年第4期686-692,共7页
目的研究半枝莲总黄酮(TF-SB)对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制.方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测TF-SB(0、25、50、100、200μg·mL^(-1))作用24 h对AGS细胞存活率的影响.将AGS细胞分为对照组、溶剂对...
目的研究半枝莲总黄酮(TF-SB)对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制.方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测TF-SB(0、25、50、100、200μg·mL^(-1))作用24 h对AGS细胞存活率的影响.将AGS细胞分为对照组、溶剂对照(含相同浓度的甲醇)组、TF-SB(100μg·mL^(-1))组、质粒空载体(pcDNA,200nmol·L^(-1))组、迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)过表达质粒(pcDNA-MIIP,200nmol·L^(-1))组、TF-SB(100μg·mL^(-1))+小干扰RNA对照(si-con,200nmol·L^(-1))组、TF-SB(100μg·mL^(-1))+MIIP小干扰RNA(si-MIIP,200nmol·L^(-1))组,转染质粒后TF-SB处理24h,CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-x1(Bcl-x1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleavedCaspase-3)、MIIP表达;不同照射量X射线(0、2、4、6、8 Gy)照射后,克隆形成实验检测细胞存活率,并绘制单击多靶模型拟合曲线,Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达.结果与TF-SB 0μg·mL^(-1)组比较,TF-SB25、50、100、200μg·mL^(-1)组AGS细胞存活率显著降低(P<0.05);与对照组及溶剂对照组比较,TF-SB 100μg·mL^(-1)组AGS细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-x1蛋白表达显著降低(P<0.05),cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高(P<0.05);放疗后,TF-SB组细胞存活率显著降低(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P<0.05),放疗敏感性增加.与pcDNA组比较,pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加,细胞存活率显著降低,Bcl-x1蛋白表达显著降低,cleaved Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05);放疗后,pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P<0.05),敏感性增加.与TF-SB+si-con组比较,TF-SB+si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低,细胞存活率显著增加,Bcl-x1蛋白表达显著增加,cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05);放疗后,TF-SB+si-MIIP组细胞存活率显著升高(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著降低(P<0.05),敏感性降低.结论TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高其放疗敏感性.
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关键词
半枝莲总黄酮
人胃腺癌细胞ags
迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)
细胞
增殖
凋亡
放疗敏感性
原文传递
微小RNA-766-5p通过调控组氨酸磷酸酶基因表达影响胃癌细胞增殖和放射敏感性
被引量:
3
2
作者
刘国成
官一平
+1 位作者
王成
黄国军
《安徽医药》
CAS
2022年第2期274-278,共5页
目的研究微小RNA(miR)-766-5p对人胃腺癌细胞(AGS)细胞增殖和放射敏感性的影响及潜在作用机制。方法以胃上皮细胞GES-1为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901中组氨酸磷酸酶(LH...
目的研究微小RNA(miR)-766-5p对人胃腺癌细胞(AGS)细胞增殖和放射敏感性的影响及潜在作用机制。方法以胃上皮细胞GES-1为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901中组氨酸磷酸酶(LHPP)mRNA和miR-766-5p的表达,AGS细胞转染anti-miR-766-5p,确定抑制miR-766-5p表达对细胞的影响,克隆形成实验检测不同放射剂量处理后细胞存活分数,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定AGS细胞存活率,蛋白质印迹法(Westernblotting)检测细胞中LHPP、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和γ-H2AX蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR-766-5p和LHPP的调控关系。结果与GES-1相比,miR-766-5p在胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901表达量升高[(3.30±0.24)、(2.89±0.19)、(2.05±0.21)、(1.99±0.19)比(1.00±0.10),P<0.05],LHPPmRNA[(0.85±0.09)、(1.01±0.11)、(0.75±0.08)、(0.99±0.10)比(4.46±0.25)]、蛋白表达量[(0.45±0.05)、(0.35±0.05)、(0.30±0.04)、(0.46±0.05)比(1.08±0.12)]降低(P<0.05);抑制miR-766-5p表达可抑制胃癌AGS细胞增殖并增强细胞的放射敏感性;miR-766-5p靶向负调控LHPP的表达;敲减LHPP可逆转anti-miR-766-5p对AGS细胞增殖和放射敏感性的作用。结论miR-766-5p通过靶向促进LHPP表达增强胃癌AGS细胞的放射敏感性并抑制癌细胞增殖。miR-766-5p有望成为胃癌临床放射增敏靶点。
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关键词
胃肿瘤
人胃腺
癌细胞
(
ags
)
miR-766-5p
组氨酸磷酸酶(LHPP)
放射敏感性
增殖
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职称材料
题名
半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究
被引量:
6
1
作者
张锋
吴震
徐宁
杜红蕾
郭海彦
机构
河北省保定市第二中心医院
出处
《药物评价研究》
CAS
2022年第4期686-692,共7页
文摘
目的研究半枝莲总黄酮(TF-SB)对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制.方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测TF-SB(0、25、50、100、200μg·mL^(-1))作用24 h对AGS细胞存活率的影响.将AGS细胞分为对照组、溶剂对照(含相同浓度的甲醇)组、TF-SB(100μg·mL^(-1))组、质粒空载体(pcDNA,200nmol·L^(-1))组、迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)过表达质粒(pcDNA-MIIP,200nmol·L^(-1))组、TF-SB(100μg·mL^(-1))+小干扰RNA对照(si-con,200nmol·L^(-1))组、TF-SB(100μg·mL^(-1))+MIIP小干扰RNA(si-MIIP,200nmol·L^(-1))组,转染质粒后TF-SB处理24h,CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-x1(Bcl-x1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleavedCaspase-3)、MIIP表达;不同照射量X射线(0、2、4、6、8 Gy)照射后,克隆形成实验检测细胞存活率,并绘制单击多靶模型拟合曲线,Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达.结果与TF-SB 0μg·mL^(-1)组比较,TF-SB25、50、100、200μg·mL^(-1)组AGS细胞存活率显著降低(P<0.05);与对照组及溶剂对照组比较,TF-SB 100μg·mL^(-1)组AGS细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-x1蛋白表达显著降低(P<0.05),cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高(P<0.05);放疗后,TF-SB组细胞存活率显著降低(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P<0.05),放疗敏感性增加.与pcDNA组比较,pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加,细胞存活率显著降低,Bcl-x1蛋白表达显著降低,cleaved Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05);放疗后,pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P<0.05),敏感性增加.与TF-SB+si-con组比较,TF-SB+si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低,细胞存活率显著增加,Bcl-x1蛋白表达显著增加,cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05);放疗后,TF-SB+si-MIIP组细胞存活率显著升高(P<0.05),γ-H2AX蛋白表达显著降低(P<0.05),敏感性降低.结论TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高其放疗敏感性.
关键词
半枝莲总黄酮
人胃腺癌细胞ags
迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)
细胞
增殖
凋亡
放疗敏感性
Keywords
total flavonoids of Scutellaria barbata
gastric cancer cell
ags
migration and invasion inhibitory protein(MIIP)
cell proliferation
apoptosis
radiosensitivity
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
微小RNA-766-5p通过调控组氨酸磷酸酶基因表达影响胃癌细胞增殖和放射敏感性
被引量:
3
2
作者
刘国成
官一平
王成
黄国军
机构
成都市郫都区人民医院普外科
成都市郫都区人民医院胃肠外科
成都市郫都区人民医院医务科
成都市郫都区人民医院肿瘤科
出处
《安徽医药》
CAS
2022年第2期274-278,共5页
文摘
目的研究微小RNA(miR)-766-5p对人胃腺癌细胞(AGS)细胞增殖和放射敏感性的影响及潜在作用机制。方法以胃上皮细胞GES-1为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901中组氨酸磷酸酶(LHPP)mRNA和miR-766-5p的表达,AGS细胞转染anti-miR-766-5p,确定抑制miR-766-5p表达对细胞的影响,克隆形成实验检测不同放射剂量处理后细胞存活分数,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定AGS细胞存活率,蛋白质印迹法(Westernblotting)检测细胞中LHPP、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和γ-H2AX蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR-766-5p和LHPP的调控关系。结果与GES-1相比,miR-766-5p在胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901表达量升高[(3.30±0.24)、(2.89±0.19)、(2.05±0.21)、(1.99±0.19)比(1.00±0.10),P<0.05],LHPPmRNA[(0.85±0.09)、(1.01±0.11)、(0.75±0.08)、(0.99±0.10)比(4.46±0.25)]、蛋白表达量[(0.45±0.05)、(0.35±0.05)、(0.30±0.04)、(0.46±0.05)比(1.08±0.12)]降低(P<0.05);抑制miR-766-5p表达可抑制胃癌AGS细胞增殖并增强细胞的放射敏感性;miR-766-5p靶向负调控LHPP的表达;敲减LHPP可逆转anti-miR-766-5p对AGS细胞增殖和放射敏感性的作用。结论miR-766-5p通过靶向促进LHPP表达增强胃癌AGS细胞的放射敏感性并抑制癌细胞增殖。miR-766-5p有望成为胃癌临床放射增敏靶点。
关键词
胃肿瘤
人胃腺
癌细胞
(
ags
)
miR-766-5p
组氨酸磷酸酶(LHPP)
放射敏感性
增殖
Keywords
Stomach neoplasms
ags
MiR-766-5p
Phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase(LHPP)
Radiosensitivity
Proliferation
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究
张锋
吴震
徐宁
杜红蕾
郭海彦
《药物评价研究》
CAS
2022
6
原文传递
2
微小RNA-766-5p通过调控组氨酸磷酸酶基因表达影响胃癌细胞增殖和放射敏感性
刘国成
官一平
王成
黄国军
《安徽医药》
CAS
2022
3
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