僧帽牡蛎天然活性多肽BPO-1抗人胃腺癌BGC-823细胞活性研究

运用细胞生物学、生物化学等手段 ,观察鉴定分离提取的牡蛎天然活性肽BPO 1对人胃腺癌细胞的生物学效应 .实验结果表明 ,BPO 1能有效抑制人胃腺癌BGC 82 3细胞增殖活动 ,细胞生长受到抑制 ,分裂指数下降 .细胞周期检测出现凋亡峰 .光镜观察显示经BPO 1处理后的BGC 82 3细胞失去原有的恶性表型 ,表现出明显不同于对照组细胞 .

大蒜素对人胃腺癌BGC-823细胞影响的研究

目的 :探讨大蒜素诱导胃癌BGC - 82 3细胞凋亡的作用及机制。 方法 :传代培养人胃腺癌BGC - 82 3细胞 ,使细胞浓度为 5× 10 5个 /ml。分别加入 10 -5g/L(大蒜素 1)和 10 -3 g/L(大蒜素 2 )的大蒜素 ,另设对照组 ,培养时间分别为 6h、2 4h、48h、72h。 结果 :与对照组相比 :①大蒜素可明显提高胃癌细胞凋亡率、降低PI值 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,且表现出明显的细胞凋亡的形态学变化。②大蒜素可明显降低胃癌细胞CEA、GST -π的水平 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。③大蒜素可明显提高胃癌细胞的cAMP水平 (P <0 0 1) ,降低PKC水平 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。④大蒜素能够显著增加胃癌细胞fas基因及bax基因蛋白的表达 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;降低bcl- 2基因蛋白的表达 (P <0 0 1)。 结论 :大蒜素可通过对第二信号系统cAMP、PKC的影响 ,增强细胞凋亡始动基因fas、凋亡促进基因bax的表达 ,抑制凋亡抑制基因bcl- 2的表达 ,增加细胞凋亡率 ,并使胃癌细胞调亡 ,并抑制其增殖活性 ;并可导致胃癌细胞CEA、GST -π的合成减少 ,从而降低其水平。

牡蛎天然活性肽对人胃腺癌BGC-823细胞周期与基因表达的调控

目的比较研究牡蛎天然活性肽(BPO)对人胃腺癌BGC-823细胞凋亡的生物学效应,并进一步探索其对胃癌细胞的作用机制。方法采用酸抽提、凝胶柱层析等方法,从牡蛎体内分离提取到牡蛎天然活性多肽组分BPO-1,以姜黄素和HMBA处理组为平行对照,流式细胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测相关癌基因、抑癌基因表达变化。结果BPO-1能有效抑制BGC-823细胞增殖活动,出现亚G1期细胞,细胞进入凋亡现象。BPO-1,姜黄素及其组合均能不同程度地上调BGC-823细胞p16,c-myc,Fas,p21WAF1/CIP1蛋白表达,下调突变型p53,bcl-2蛋白表达。结论BPO-1对胃癌细胞具有显著的诱导凋亡作用。其诱导癌细胞凋亡机制与其调节和干预bcl-2,c-myc等癌基因和p53,p16,p21WAF1/CIP1等抑癌基因的表达有关。

rh-bFGF抑制顺铂诱导的人胃腺癌BGC-823细胞凋亡

目的 :评价外源加入的rh -bFGF对抗肿瘤药物顺铂所致人胃腺癌细胞凋亡的影响 方法 :利用顺铂诱导人胃腺癌BGC - 82 3细胞产生的凋亡作模型 ,体外培养时在顺铂作用前或作用后加入不同浓度的rh -bFGF ,观察细胞形态的变化和细胞凋亡比率的变化 结果 :预培养时rh -bFGF质量浓度为 10ng/mL及 1ng/mL时抑制细胞凋亡的发生 ;共培养时则在质量浓度为 1ng/mL时产生抑制凋亡的作用 结论 :外源加入的rh -bFGF在一定的浓度范围内 ,不论预培养还是与顺铂的共培养 12h ,均可不同程度的抑制顺铂诱导的人胃腺癌BGC - 82 3细胞的凋亡 ,并且这种剂量效应与rh -bFGF影响BGC - 82

姜黄素对人胃腺癌细胞株BGC-823生长抑制及诱导凋亡的作用

目的探讨姜黄素对人胃腺癌细胞BGC-823的生长抑制及诱导凋亡作用。方法 MTT法检测不同浓度姜黄素对人胃腺癌BGC-823细胞的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);将1.2μmol/L姜黄素作用于BGC-823细胞24、48、72h,用DAPI染色检测细胞凋亡;用RT-PCR、Western blotting法分别检测姜黄素对Bax、Bcl-2基因以及Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白的影响。结果不同浓度的姜黄素作用于BGC-823细胞0～72h后,细胞呈不同程度的抑制作用,随着药物浓度的增加,抑制率明显上升,作用48h的IC50为1.2μmol/L。DAPI染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。RT-PCR、Western blotting结果显示1.2μmol/L姜黄素可以增加Bax表达、减少Bcl-2表达和激活caspase-3。结论姜黄素对人胃腺癌BGC-823细胞有生长抑制和诱导凋亡的作用,这可能与增加Bax表达、减少Bcl-2表达、激活caspase-3有关。

蜘蛛毒素对人胃腺癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用

为比较不同蜘蛛毒素对肿瘤细胞的抑制作用,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定了不同浓度的虎纹单柄蛛(Ornithocton huwen)、海南单柄蛛(Ornithoctonus hainana)、敬钊缨毛蛛(Chilobrachy jingzhao)和雷氏大疣蛛(Macrothele raveni)4种蜘蛛毒素对人胃腺癌细胞株BGC-823的抑制作用。结果表明:4种蜘蛛毒素对人胃腺癌细胞株BGC-823的细胞增殖均有不同的抑制作用;同一蜘蛛毒素浓度越高抑瘤作用越好,蜘蛛毒素作用时间越长抑瘤效果越强,量效关系和时效关系良好;不同蜘蛛毒素对BGC-823细胞增殖的抑制作用效果不同,以敬钊缨毛蛛毒素作用最强,IC50为0.109μg/μL。

新型TopoⅠ抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制。采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用;体外实验以pBR322DNA为底物,依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析。用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡。口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用;用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响;采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中TopoⅠ及凋亡相关蛋白表达的改变。结果表明,CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖。随着剂量的增加,CPUY013对TopoI松弛活性的抑制趋势增强。100μmol·L-1CPUY013和拓扑替康(TPT)对TopoⅠ松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势。CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期,并诱导细胞凋亡;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,线粒体膜电位降低,荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。同时,CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长,150mg·kg-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%。CPUY013使BGC823细胞内TopoI和bcl-2蛋白表达均有所下调,p53和bax蛋白表达有明显上调趋势,bcl-2/bax比值明显降低,caspase-3蛋白表达增高。新型TopoⅠ抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长,体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖,其机制可能与抑制TopoI,从而下调bcl-2,上调bax和p53蛋白的表达有关。

伊立替康联合去甲斑蝥素对人胃癌细胞作用的考察及协同作用机制研究

研究了伊立替康(CPT-11)联合去甲斑蝥素(NCTD)对人胃癌细胞BGC-823增殖的影响及协同作用机制.分别利用CPT-11 30、60、90、120、150μmol/L,NCTD 30、60、90、120、150μmol/L和两药按上述浓度1∶1联用,以及两药上述浓度完全交叉组合作用BGC-823细胞24、48和72 h,并且以不同序贯方式作用BGC-823细胞24 h.MTT法检测BGC-823细胞的增殖,采用中效原理评价两药联合作用;流式细胞术测定CPT-11 60μmol/L、NCTD 60μmol/L和联合用药(60∶60)μmol/L,以及不同序贯方式作用BGC-823细胞24 h后细胞周期及凋亡的情况;Western blot法检测CPT-11 30、60μmol/L,NCTD 30,60μmol/L和联合用药(30∶30,60∶60)μmol/L作用BGC-823细胞24 h后Pdcd4和p53蛋白表达水平.结果显示:CPT-11及NCTD联合用药比单独用药对细胞增殖的抑制作用增强,IC50明显减小(P<0.05),单独使用CPT-11或NCTD作用24、48和72 h时的IC50分别是联合使用时的2.83、3.15、2.19倍以及2.66、3.11、2.45倍,并且两药联合用药具有协同作用效应;两药合用24 h时先给CPT-11方案抑制作用优于先给NCTD方案,且优于同时给药方案(P<0.05);CPT-11 60μmol/L作用24 h引起BGC-823细胞S和G2-M期阻滞(P<0.01),NCTD 60μmol/L作用24 h引起细胞G2-M期阻滞(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05),联合用药(60∶60)μmol/L作用24 h,主要引起细胞G2-M期阻滞(P<0.01),与先给NCTD 6h方案及同时给药相比,先给CPT-11 6h方案主要引起细胞S期阻滞增加(P<0.05)以及细胞凋亡增加;CPT-11 30、60μmol/L作用12 h后Pdcd4上调表达,p53下调表达(P<0.05),NCTD 30、60μmol/L作用12 h后Pdcd4下调表达,p53上调表达(P<0.05),联合用药(30∶30,60∶60)μmol/L作用24 h后Pdcd4及p53蛋白表达均上调(P<0.05).上述结果表明:CPT-11联合NCTD对人胃癌BGC-823细胞有协同抑制作用,其机制主要是诱导细胞G2-M期阻滞,并与抑癌基因蛋白Pdcd4及p53上调表达有关;两种药物联用时序贯次序对联合作用有影响,先给CPT-11方案要优于先给NCTD方案及同时给药方案,其机制主要是引起S期阻滞增加以及细胞凋亡增加;抑癌基因蛋白Pdcd4与p53之间可能存在负调控关系.

抑癌基因Pdcd4的表达对羟基喜树碱细胞毒活性的影响

目的:探讨抑癌基因Pdcd4的表达对羟基喜树碱细胞毒活性的影响及其机制.方法:采用脂质体转染法将带有全长Pdcd4cDNA的质粒转入BGC-823细胞,MTT法测定羟基喜树碱对Pdcd4cDNA转染BGC-823细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测羟基喜树碱作用前后细胞周期和凋亡率的变化,Western blot蛋白印迹法检测Pdcd4蛋白表达.结果:建立了稳定转染Pdcd4cDNA的BGC-823细胞系;羟基喜树碱作用转染细胞24,72h后,药物对Pdcd4cDNA转染组细胞的半数抑制浓度均低于两对照组(pCDNA3.1与pCDNA-Pdcd4-D418A)(74.48μmol/L vs87.67,102.30μmol/L;14.30μmol/L vs40.59,29.54μmol/L,均P<0.05);流式细胞仪测定结果表明,80μmol/L羟基喜树碱作用转染细胞24h,处于细胞周期G0/G1期的细胞比例下降,S期细胞比例升高,出现细胞周期S期阻滞,72h,细胞凋亡率显著升高(pCDNA3.1:45.40%vs5.65%;pCDNA-Pdcd4-D418A:36.21%vs3.07%;pCDNA-Pdcd4:46.17%vs4.25%,P<0.05);Western blot结果表明80μmol/L羟基喜树碱作用转染细胞72h,Pdcd4蛋白表达水平升高.结论:提高人胃腺癌细胞BGC-823中Pdcd4蛋白的表达能增强其对羟基喜树碱的敏感性;羟基喜树碱能引起BGC-823细胞S期阻滞,并能诱导细胞凋亡;羟基喜树碱本身也可上调BGC-823中Pdcd4的表达.

胃泌素及其受体拮抗剂L－365260对BGC－823细胞系细胞微丝作用的研究

细胞表面微绒毛和细胞微丝状态与细胞运动密切相关。在人胃癌ＢＧＣ－８２３细胞系体外培养液中加用胃泌素及其受体拮抗剂，发现经胃泌素作用后的ＢＧＣ－８２３细胞微丝紊乱，细胞表面微绒毛多而密集，经Ｌ－３６５２６０作用后则微丝长而粗，排列规则，表面微绒毛少。提示，胃泌素能增强ＢＧＣ－８２３细胞系的运动，可能有促进肿瘤细胞转移的作用，这种作用可被Ｌ－３６５２６０所拮抗。

地花菌提取物Albaconol的抗肿瘤活性研究

目的:研究地花菌提取物albaconol的抗肿瘤活性。方法:以人白血病K 5 62、人乳腺癌Bcap 3 7、人胃腺癌BGC 82 3和人非小细胞肺癌A5 49为模型,采用MTT法测试albaconol对肿瘤细胞增殖的影响;以小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H2 2为移植性肿瘤模型,检测albaconol静脉给药对肿瘤生长的影响。结果:Albaconol对K5 62、Bcap 3 7、BGC 82 3、A5 49的IC50 分别为2 .42±1.77、1.88±1.41、1.0 4±0 .64、1.18±1.10 μg/ml ;Albaconol 0 .87、1.73、3 .46mg/kg剂量组对S180的抑瘤率分别为2 8.2 %、43 .2 %、47.4% ,对H2 2的抑瘤率分别为15 .6%、2 2 .4%、3 7.8%。结论:Albaconol具有较强的体内、外抗肿瘤活性。

细胞毒性T淋巴细胞和细胞因子诱导杀伤细胞在荷人胃癌裸鼠体内的迁徙与分布

为了研究细胞毒性T淋巴细胞（cTL）和细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞在荷人胃癌裸鼠体内的迁徙与分布特点，南开大学医学院普通外科武增瀛等采用皮下注射人低分化胃腺癌细胞株BGC-823的方法建立荷人胃癌裸鼠模型。将荷瘤裸鼠分为2组，每组9只，

青龙衣胶囊在荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性的研究

目的:研究青龙衣胶囊的抗肿瘤活性及对S 180荷瘤小鼠血清中SOD和MDA的影响。方法:采用人胃腺癌BGC-823,S 180肉瘤和肝癌H 22腹水瘤,分别以环磷酰胺为阳性对照组、生理盐水为阴性对照组,将青龙衣药物以高、中、低3个剂量对实验裸鼠、小鼠组ig给药。结果:青龙衣胶囊明显抑制人胃腺癌BGC-823荷瘤裸鼠瘤体的增长,监测结果显示对给药后期抑瘤作用增强,抑瘤率可达到68.1%(P<0.01);能抑制肉瘤S 180荷瘤小鼠瘤体的增长,抑瘤率达到61.2%(P<0.01),具有较强的抗氧化能力,显著提高SOD水平(P<0.05),降低MDA水平(P<0.05);能明显提高肝腹水小鼠的生存质量,延长肝腹水小鼠的带瘤生存时间,生命延长率达到86.6%(P<0.01)。结论:青龙衣胶囊具有明显的体内抗肿瘤活性。

信宜润楠的化学成分研究

通过萃取、正相硅胶、Sephadex LH-20、闪式柱色谱以及反相HPLC柱色谱等多种分离方法相结合,从信宜润楠乙醇提物中首次分离得到21个化合物;借助红外、质谱和核磁共振等波谱学分析方法鉴定了它们的结构,其中包括8个丁内酯类(1～8),8个木脂素类(9～16)和5个萜类化合物(17～21),化合物16是降七碳木脂烷类新天然产物。经体外活性筛选发现化合物5对胃癌(BGC-823)和卵巢癌(A2780)人肿瘤细胞株有选择性抑制活性,IC50分别为0.13×10-6,2.66×10-6mol.L-1;在1×10-5mol.L-1时,化合物8和9具有明显抑制PAF刺激大鼠多形核白细胞β-葡萄糖苷酸酶释放作用,抑制率分别为60.0%,54.2%。