姜黄素对幽门螺杆菌及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响

对姜黄素抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也有明显的抑制作用,半数抑制浓度为1.735 mmol/L。通过噻唑蓝实验分析姜黄素对人胃GES-1细胞和Hp感染人胃GES-1细胞的影响。结果显示,短时间内(12 h)较低浓度(68μmol/L)姜黄素对人胃GES-1细胞增殖无明显影响,但姜黄素浓度的增加和作用时间的延长可使细胞存活率明显下降。经68μmol/L姜黄素作用12 h后,损伤模型组细胞形态有一定程度的复原,细胞存活率略有升高,但不显著(P>0.05);高浓度(136、680μmol/L)姜黄素会导致细胞存活率明显下降。因此,姜黄素对Hp生长和脲酶活力有明显的抑制作用,但不足以缓解Hp对人胃GES-1细胞的损伤作用。

槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞的毒性作用研究

本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP),测定GES-1细胞还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活力、三磷酸腺苷(ATP)酶活力。测定肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)水平。结果表明,与空白对照组相比,槟榔碱刺激后GES-1细胞形态发生改变,细胞活力最低降低至24%,活性氧水平最高升至12.5倍,线粒体膜电位最低下降至10.4%。在150μg/mL槟榔碱刺激下,总ATP酶以及Na^(+)K^(+)-ATP酶活力分别下降至42.31%和39.84%,GSH和SOD分别下降了40.23%和34.1%,LDH上升了30.46%,TNF-α、IL-6、VEGF、TGF-β水平分别上升了4.67%、10.2%、23.14%和22.83%。结果表明槟榔碱能够产生氧化应激并诱发炎症因子,对GES-1细胞造成毒性损伤。

康复新液对非甾体抗炎药诱导的人胃黏膜上皮细胞 GES-1细胞损伤的影响

目的:观察康复新液对非甾体抗炎药引起的GES-1细胞形态损伤和凋亡相关蛋白变化的影响,为其临床治疗胃溃疡提供科学依据。方法:采用非甾体抗炎药制备胃黏膜上皮细胞损伤模型,MTT法测定不同浓度康复新液对其增殖和形态变化影响;Hoechst/PI染色检测凋亡发生情况;Western blot测定细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结果:浓度过高或过低的康复新液均会对GES-1细胞的生长有一定的抑制作用,适当浓度的康复新液能一定程度减轻非甾体抗炎药引起的细胞损伤,减少凋亡细胞和死细胞数量;与非甾体抗炎药组相比较,康复新液组和非甾体抗炎药+康复新液组Bcl-2和Bax水平比值升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:康复新液能抑制非甾体抗炎药引起的GES-1细胞损伤,其作用机制可能与减轻非甾体抗炎药引起的GES-1细胞凋亡有关。

泮托拉唑联合枫蓼肠胃康胶囊对乙醇损伤的人胃黏膜上皮GES-1细胞的保护作用

目的:观察泮托拉唑联合枫蓼肠胃康胶囊对乙醇损伤的人胃黏膜上皮GES-1细胞的保护作用。方法:用不同浓度的乙醇孵育体外培养的人胃黏膜上皮GES-1细胞,于不同的时间段中观察以建立稳定的胃黏膜损伤模型,将泮托拉唑、枫蓼肠胃康胶囊分别配制成不同浓度,MTT法观察两药单独及联用对GES-1细胞的干预。结果:人胃黏膜上皮GES-1细胞在7%的乙醇中孵育3 h细胞抑制率达到40%,是最佳的胃黏膜损伤细胞模型。对GES-1细胞的保护,各浓度泮托拉唑和枫蓼肠胃康胶囊均有一定作用,最佳浓度分别为60μg/m L和200μg/m L,两药联用后能够减少药物剂量,且可以提高对胃黏膜的保护作用。结论:泮托拉唑与枫蓼肠胃康胶囊联用后可以提高用药安全,减少用药剂量,在低剂量下即可保护损伤的人胃黏膜上皮GES-1细胞,临床上值得推广。

黄芪甲苷对脂多糖诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1的抗炎作用及机制研究

目的研究黄芪甲苷对脂多糖(LPS)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1的抗炎作用及有关机制。方法采用LPS不同浓度(0.25、0.5、1、1.5、2μg·mL-1)及时间(15、30、45、60、120 min)诱导GES-1细胞炎症反应,筛选LPS诱导的合适浓度、时间。将GES-1细胞分为空白对照组、模型组及黄芪甲苷0.1、1、10μg·mL-1浓度组;黄芪甲苷预处理2 h后,以筛选出的LPS浓度、时间诱导GES-1细胞。采用MTS法检测细胞存活率;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)的含量;采用RT-qPCR法检测细胞诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达;采用Western Blot法检测细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白(Erk、Jnk/SAPK、P38 MAPK)的磷酸化水平。结果选择0.25μg·mL-1及30 min作为LPS诱导GES-1细胞炎症模型的浓度及时间。黄芪甲苷浓度≤100μg·mL-1时对GES-1细胞存活率无明显影响。与空白对照组比较,模型组细胞的炎症因子IL-6水平明显升高(P<0.01),iNOS、COX-2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),p-P38、p-Jnk、p-Erk蛋白表达明显上调(P<0.001)。与模型组比较,0.1、1、10μg·mL-1不同浓度黄芪甲苷组的细胞IL-6水平均明显降低(P<0.01),iNOS及COX-2(10μg·mL-1浓度组)mRNA表达均明显下调(P<0.01),p-P38(1、10μg·mL-1浓度组)及p-Jnk(0.1、10μg·mL-1浓度组)、p-Erk(0.1、10μg·mL-1浓度组)蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论黄芪甲苷可能通过抑制MAPK信号通路的激活来抑制LPS诱导的GES-1细胞炎症相关因子产生,从而发挥抗炎作用。

益气清热方及其拆方的兔含药血清对Ⅰ型幽门螺杆菌致GES-1细胞凋亡的影响

目的:观察益气清热方及其拆方对Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞凋亡的影响,探讨益气清热法治疗Hpylori感染的机制.方法:按生理盐水、阿莫西林、益气清热方、黄芪、黄芩分组,制备兔含药血清.建立Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞病变的模型,分别加入100mL/L各组兔含药血清的完全培养液,继续培养48h,收集与固定细胞,用流式细胞仪和Hoechst33258荧光染料检测细胞凋亡情况.结果:经Ⅰ型Hpylori感染后,GES-1细胞凋亡率显著增加,阿莫西林、黄芪、黄芩及益气清热方均能降低其凋亡率(1.3633±0.4229,2.1925±0.6779,1.7967±0.6987,1.4740±0.4156vs16.6229±8.5087,P<0.01或0.05),Hoechst33258荧光染料的检测结果与流式细胞仪检测结果有较好的一致性.结论:益气清热方可能通过抑制细胞的凋亡,减轻Hpylori对胃上皮细胞的损伤,维持细胞的正常生长,达到治疗目的.

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨柴胡陷胸汤含药血清对脂多糖诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞的作用机制

目的:探讨柴胡陷胸汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,以揭示该方治疗慢性胃炎可能的作用机制。方法:GES-1细胞分为4组:空白组:GES-1细胞+正常大鼠血清;模型组:GES-1细胞+LPS诱导+正常大鼠血清;柴胡陷胸汤组:GES-1细胞+LPS诱导+柴胡陷胸汤含药血清;吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)组:GES-1细胞+LPS诱导+PDTC。运用MTT检测LPS的细胞毒性;运用CCK8法检测细胞活性;运用ELISA法检测细胞炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;运用Western Blot法检测TLR4、NF-κB、p-NF-κB、核苷酸寡聚结合域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组细胞炎症因子IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.01),与模型组比较,给予柴胡陷胸汤含药血清作用后,GES-1细胞IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.01);与空白组比较,模型组GES-1细胞TLR4、NLRP3蛋白表达及NF-κB磷酸化水平显著升高(P<0.01),与模型组比较,柴胡陷胸汤组GES-1细胞TLR4、NLRP3蛋白表达及NF-κB磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结论:柴胡陷胸汤可通过TLR4/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的IL-1β和IL-6分泌,减轻GES-1细胞损伤。

三种中药有效成分对转化的人胃黏膜上皮细胞的抑制作用

目的明确三种中药有效成分三七皂甙(PNS)、黄芪皂甙(AS)及黄芩甙(Ba)单用或配伍对永生化的人胃黏膜上皮细胞GES1以及经过幽门螺杆菌(HP)培养滤液转化后的GES1细胞(HP细胞)增殖能力的影响。方法以HP培养上清滤液作用GES1细胞,通过描绘细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验检测细胞恶性转化程度。分别以不同浓度的三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙处理两种细胞,四甲基谷氮唑盐(MTT)法及软琼脂集落形成试验检测三种药物单用及配伍对细胞增殖活性的影响。结果HP滤液作用后的GES1细胞增殖活性升高,软琼脂集落形成能力增强,但仍不能在裸鼠体内成瘤。PNS、AS及Ba对GES1和HP细胞的增殖活性有明显的抑制作用,并有随剂量增加作用增强的趋势。三药配伍应用对两种细胞的抑制作用增强,还能明显抑制HP细胞的软琼脂集落形成能力。结论HP滤液能促进GES1细胞的进一步转化。三种药物有效成分显著抑制GES1及HP细胞的增殖,三药配伍抑制作用有不同程度的增强。

人胃黏膜上皮细胞介电谱的实验研究

在0.01~100 MHz范围内,使用交流电阻抗方法测量了人胃上皮GES-1细胞悬浮液的介电谱,通过介电谱的实部和虚部以及复平面图的分析,观察体积分数对GES-1细胞介电谱特性的影响.结果表明GES-1细胞的介电行为具有3个特征：（1）频率依赖性,即随电场频率的增加,其介电常数增量（Δε=ε-εh）减小,电导率增量（Δκ=κ-κL）增加;（2）体积分数依存性,即当体积分数增加时,介电常数最大增量（Δεmax）、电导率最大增量（Δκmax）和峰值（P1、P2、P3）随之增加;（3）具有3个特征频率（f1、f2、f3）,分别来源于细胞膜（f1）、细胞核膜（f2）和细胞核仁（f3）.

Polo样激酶1在幽门螺杆菌感染慢性萎缩性胃炎癌前病变中的表达及意义

目的探讨Polo样激酶1(PLK1)在幽门螺杆菌(Hp)感染慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变中的表达及意义。方法选取2017年1月-2021年1月在河北省廊坊市人民医院接受胃镜检查的260例患者,根据胃黏膜病理检查分为浅表性胃炎组95例、CAG伴低级别上皮内瘤变(L-IN)组70例、伴高级别上皮内瘤变(H-IN)组65例、胃癌组30例,检测各组Hp感染情况,并采用实时荧光定量聚合酶联反应检测患者胃黏膜中PLK1表达量。取人胃上皮细胞GES-1,采用完全随机化方式分为空白组、对照组、BI2536组,空白组不做处理,对照组、BI2536组建立Hp与GES-1细胞共培养模型。对照组加入正常DMEM培养基培养,BI2536组加入终浓度为20 nmol/L的BI2536S培养。二甲基噻唑(MTT)实验检测增殖能力;AnnexinV/PI双染法检测凋亡能力。结果与浅表性胃炎组和CAG伴L-IN组比较,CAG伴H-IN组及胃癌患者胃黏膜PLK1表达量升高,且胃癌组高于CAG伴H-IN组(P<0.05);浅表性胃炎组和CAG伴L-IN组比较胃黏膜PLK1表达量无差异(P>0.05)。与Hp阴性CAG患者比较,Hp阳性CAG患者PLK1表达量升高(P<0.05)。与Hp阳性浅表性胃炎组和CAG伴L-IN组比较,Hp阳性CAG伴H-IN组及胃癌患者胃黏膜PLK1表达量升高,且胃癌组高于CAG伴H-IN组(P<0.05);Hp阳性浅表性胃炎组和CAG伴L-IN组比较胃黏膜PLK1表达量无差异(P>0.05)。与空白组比较,对照组、BI2536组细胞PLK1表达量升高,且对照组高于BI2536组(P<0.05)。与空白组比较,对照组24、48、72 h三个时刻MTT实验A值均降低,凋亡率升高(P<0.05);与对照组比较,BI2536组24、48、72 h三个时刻MTT实验A值均升高,凋亡率降低(P<0.05)。结论胃黏膜PLK1表达量在Hp感染的CAG癌前病变进程中逐渐升高。PLK1抑制剂BI2536可显著降低Hp对人胃上皮细胞GES-1增殖的抑制作用,并抑制GES-1细胞凋亡。

奥美拉唑联合荆花胃康胶丸对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用

目的探讨奥美拉唑联合荆花胃康胶丸对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞GES-1,将GES-1细胞用4%～8%的乙醇孵育2～5 h建立稳定的胃黏膜损伤模型。将实验细胞分为正常组、模型组、奥美拉唑组、荆花胃康胶丸组、奥美拉唑联合荆花胃康胶丸组(联合用药组),正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,奥美拉唑组、荆花胃康胶丸组、联合用药组再加相应的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT实验检测各组细胞活性。采用蛋白免疫印迹法检测各组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达情况。结果 7%的乙醇孵育GES-1细胞3 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对细胞的抑制率达到40%。奥美拉唑组中,浓度为0～60μg/mL时细胞增殖呈剂量依赖性;荆花胃康胶丸组中,在浓度为200μg/mL时细胞增殖最明显;联合用药组细胞的活性均高于相应浓度的奥美拉唑组和荆花胃康胶丸组。模型组bFGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,奥美拉唑组和荆花胃康胶丸组中bFGF的表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,联合用药组bFGF的表达水平进一步增加(P<0.01)。结论奥美拉唑与荆花胃康胶丸联用后在低剂量情况下可以保护胃黏膜损伤的人胃黏膜上皮细胞,可以减少用药剂量,提高用药安全性。

LINC00943靶向调控miR-125a-5p对幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响

目的探讨LINC00943对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及其分子机制。方法将GES-1细胞分为Control组、Hp组、Hp+si-NC组、Hp+si-LINC00943组、Hp+miR-NC组、Hp+miR-125a-5p组、Hp+si-LINC00943+anti-miR-NC组和Hp+si-LINC00943+anti-miR-125a-5p组,实时荧光定量PCR检测LINC00943和miR-125a-5p表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫蛋白印迹检测凋亡蛋白表达;酶联免疫吸附法检测白细胞介素-8(IL-8)和IL-1β、乳酸脱氢酶(LDH)水平;双荧光素酶报告基因实验检测LINC00943和miR-125a-5p靶向关系。结果与Control组比较,Hp组LINC00943表达、凋亡率、Bax蛋白、IL-8、IL-1β、LDH升高,miR-125a-5p表达、Bcl-2蛋白降低(P<0.05);敲减LINC00943或过表达miR-125a-5p可减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤;LINC00943靶向调控miR-125a-5p表达,下调miR-125a-5p逆转了敲减LINC00943对Hp诱导的GES-1细胞损伤的影响(P<0.05)。结论敲减LINC00943通过靶向上调miR-125a-5p可缓解Hp诱导的GES-1细胞损伤。

幽门螺杆菌诱导人胃黏膜细胞GES-1过表达COX-2的研究

目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)对人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖和COX-2表达的影响。方法 GES-1细胞与Hp共培养后不同时间段,采用MTT法检测GES-1细胞增殖的动态变化;采用RT-PCR技术分析GES-1细胞COX-2mRNA的表达水平;采用ELISA检测GES-1细胞培养上清液中COX-2的蛋白水平。结果 Hp在低浓度(1×102、1×103cfu/ml)时,可以不同程度地促进人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖,但在高浓度(1×105、1×106cfu/ml)时,细胞的增殖活性逐渐受到抑制。在共培养后24～48 h,GES-1细胞的COX-2 mRNA表达和上清液中的蛋白含量均明显升高。结论在体外培养条件下,Hp能调节GES-1细胞的增殖活性,并能上调COX-2的表达。

黄芩苷对幽门螺杆菌诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞损伤的保护作用及机制

目的:探讨黄芩苷(baicalin)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞(human gastric epithelial GES-1 cells)损伤的保护作用及机制研究。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入baicalin(15,30,60 mg·L^(-1))和p38分裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580 20μmol·L^(-1)共培养。噻唑蓝(MTT)比色法测细胞增殖、流式细胞术测细胞凋亡、酶联免疫吸附法(ELISA)测细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及IL-8水平、比色法测细胞乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性、蛋白免疫印迹法(Western blot)测细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2,p-p38 MAPK及total-p38 MAPK(T-p38 MAPK)蛋白表达。结果:与空白组比较,Hp可抑制GES-1细胞增殖,促进GES-1细胞凋亡,诱导GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8并增加LDH活性,增加GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并降低Bcl-2蛋白表达(P<0.01);与Hp感染组比较,中、高浓度baicalin组可促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P<0.01);与高浓度baicalin组比较,SB203580可进一步促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:baicalin可通过抗炎、促增殖并抗凋亡减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制p38 MAPK通路有关。

半夏泻心汤人含药血清对HP感染GES-1细胞TGF-β/Smad信号通路的影响

目的：探讨半夏泻心汤人含药血清对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染人胃黏膜上皮GES-1细胞转化生长因子-β（TGF-β）/信号转导蛋白（Smad）信号通路的影响,以揭示该方治疗消化性溃疡可能的作用机制。方法：GES-1细胞分为空白组,HP感染模型组,健康人血清组,雷贝拉唑血清组,用药前血清组,10%半夏泻心汤血清组,20%半夏泻心汤血清组。除空白组外,其余各组均接种HP造成幽门螺杆菌感染模型,采用雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清及用药前、健康人血清进行干预,24 h后收集细胞及其上清液,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测Smad2/3,Smad7,TGF-β1及磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）,磷酸化Smad7（p-Smad7）蛋白的表达。结果：与空白组比较,HP可明显抑制GES-1细胞的增殖,降低GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1及p-Smad2/3蛋白表达,增加Smad7及p-Smad7蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）;与HP感染模型组比较,雷贝拉唑血清组及10%,20%半夏泻心汤血清组可明显降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,并明显降低Smad7,p-Smad7蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）;与用药前血清组比较,加入雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清后均可降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,其中雷贝拉唑血清组及20%半夏泻心汤血清组可增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,降低Smad7,p-Smad7蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论：半夏泻心汤能够减轻HP诱导GES-1细胞的损伤,促进GES-1细胞增殖,治疗HP相关性消化性溃疡,提高溃疡愈合质量,其机制可能与其调控TGF-β/Smad信号通路有关。

半夏泻心汤人含药血清对Hp感染GES-1细胞凋亡及XIAP表达的影响

目的探究半夏泻心汤人含药血清对幽门螺杆菌(Hp)感染人胃黏膜上皮细胞GES-1凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响及其作用机制。方法临床收集医院2018年6月-2020年8月健康志愿者血清和Hp相关消化性溃疡患者分别给予半夏泻心汤、标准三联疗法(雷贝拉唑钠肠溶片+克拉霉素+甲硝唑)治疗前、后血清,将GES-1细胞分为空白组、Hp感染组、用药前组、半夏泻心汤组、标准三联组,除空白组外均体外接种Hp建立Hp感染模型,血清干预24 h后,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡;检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)水平;检测X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、核因子κB抑制蛋白α(IKBα)、核因子κB(NF-κB)p65蛋白表达、mRNA相对表达量。结果与Hp感染组比较,半夏泻心汤组、标准三联组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、细胞内SOD水平降低,细胞内MDA、TNF-α、IL-1β、IL-8水平升高,BAX蛋白表达水平上调,BCL-2蛋白表达水平下调,XIAP蛋白表达水平和mRNA相对表达量上调,IKBα、NF-κB p65蛋白表达水平和mRNA相对表达量下调,cleaved caspase-3/caspase-3比率降低,caspase-3 mRNA相对表达量下调,均有统计学差异(P<0.05)。结论半夏泻心汤能抑制Hp感染诱导的GES-1细胞凋亡,降低其炎性反应和氧化应激,其作用机制可能与上调XIAP表达,抑制NF-κB信号通路有关。

三七总皂甙对转化的人胃粘膜上皮细胞增殖的抑制作用

通过四甲基谷氮唑盐实验及软琼脂集落形成试验 ,观察三七总皂甙 (PNS)对永生化的人胚胃粘膜上皮细胞系GES 1以及经过甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)转化后的GES 1细胞 (MC细胞 )增殖能力的影响 ,并与维甲酸进行比较。结果表明 ,PNS对GES 1和MC细胞的增殖活性有明显的抑制作用 ,并有随剂量增加作用增强的趋势 ,还能明显抑制MC细胞的软琼脂集落形成能力。维甲酸对细胞的增殖活性和软琼脂集落形成能力也有显著的抑制作用 ,但其产生作用的时间以及作用后细胞形态的变化与PNS作用后有所不同。提示PNS对GES 1及其转化细胞有显著的增殖抑制作用 ,推测其作用机制可能与维甲酸有所不同。

3种中药有效成分对幽门螺杆菌培养滤液转化的人胃黏膜上皮细胞的杀伤作用

目的明确3种中药有效成分三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用或配伍对经过幽门螺杆菌培养滤液转化后的永生化人胃黏膜上皮GES-1细胞(简称HP细胞)的凋亡诱导作用。方法以三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单独或联合作用HP细胞,AnnexinV及PI双染,流式细胞仪检测药物对HP细胞凋亡/坏死的影响;电镜和Hoechst33258及PI双染荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用可引起HP细胞凋亡及死亡比例增加并呈一定的时间依赖性,配伍应用作用强于单独应用(与对照组比较P<0.05),增强程度从大至小依次为三药合用>三七皂甙黄芪皂甙合用>黄芪皂甙黄芩甙合用>三七皂甙黄芩甙合用。结论3种中药有效成分单用及配伍对HP细胞有明显的毒性作用;引起细胞死亡的机制部分是通过诱导凋亡实现的;不同药物配伍应用的增效程度不同。

猫人参通过自噬对恶性转化的人胃黏膜上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究猫人参醇提取物(AVDE)对恶性转化的人胃黏膜上皮细胞(G-MG)增殖和凋亡的影响。方法 将G-MG细胞随机分为空白对照组和低、中、高剂量实验组。空白对照组给予常规培养液处置;低、中、高剂量实验组分别给予5,10和20 mg·mL^(-1)AVDE处置。用CCK-8法检测细胞增殖活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 低、中、高剂量实验组和空白对照组的24 h细胞活力分别为(94.78±5.19)%,(61.56±2.28)%,(33.13±4.21)%和(100.00±1.52)%,48 h细胞活力分别为(91.58±6.21)%,(59.91±2.23)%,(29.48±1.20)%和(100.00±2.80)%,细胞凋亡率分别为(9.68±0.84)%,(18.50±1.10)%,(33.24±0.55)%和(9.25±1.19)%;与空白对照组比较,低、中、高剂量实验组的细胞增殖活力均显著下降,中、高剂量实验组的细胞凋亡率均显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 AVDE对恶性转化后的人胃黏膜上皮细胞的增殖有一定的抑制作用,诱导其细胞凋亡。