非小细胞型肺癌中凋亡相关基因的表达与胎盘型谷胱甘肽硫转移酶的关系

利用临床诊断为非小细胞型肺癌的手术标本 ,通过改良的免疫电镜胶体金标记、图象分析和免疫组化方法 ,检测 GST- Pi的超微结构定位以及 BCL- 2和 BAX在肺癌中的表达。结果显示 GST- Pi与 bcl- 2的表达呈负相关性 ,而 GST- Pi与

甘蔗谷胱甘肽硫转移酶ScGSTF1与P3N-PIPO互作应答甘蔗花叶病毒侵染的研究

谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST, EC2.5.1.18)广泛分布于具有细胞结构的生物中。在植物中,GST参与调控生长发育、异生物质解毒及逆境应答。本课题组以甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)编码蛋白P3N-PIPO为诱饵,从甘蔗(Saccharumspp.hybrid)叶片cDNA酵母文库中筛选到1个GST基因,并从甘蔗原始栽培种Badila中克隆了该基因,其开放读码框(open reading frame, ORF)长度为645 bp,编码214个氨基酸。序列比对及进化树分析表明,该基因编码蛋白属于GST家族的Phi (F)类型(GSTF),因此命名为ScGSTF1。进一步的生物信息学分析表明,ScGSTF1不存在跨膜区域,为稳定的亲水性脂溶蛋白;GST蛋白在单子叶和双子叶植物中及C3和C4植物中存在明显的分化。酵母双杂交(yeast two-hybrid, Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)试验表明, ScGSTF1与SCMV-P3N-PIPO蛋白互作。亚细胞定位试验表明ScGSTF1定位于内质网。实时荧光定量PCR分析表明, ScGSTF1在甘蔗各个组织中显著差异表达,在第3节间中的表达量最高,在心叶及根中的表达量最低;SCMV侵染显著性影响ScGSTF1基因的表达水平,侵染早期上调表达,随后下调,但仍保持显著高于对照的水平。

胎盘型谷胱甘肽硫转移酶的检测对肝癌诊断的临床价值

目的 :研究谷胱甘肽硫转移酶 - π(GST- π)在肝癌患者血清中的含量及其用于肝癌的临床价值。方法 :应用酶联免疫吸附测定法 (enzyme linkedimm unosorbent assay,EL ISA)对 5 3例原发性肝癌患者和 10例转移性肝癌患者血清标本的 GST- π含量进行检测。结果 :原发性肝癌和转移性肝癌患者血清 GST- π含量平均值均显著高于正常人血清 GST- π含量平均值 (P <0 .0 1,P<0 .0 1) ,阳性率分别为 90 .6 %、90 .0 %。在高分化肝癌组 GST- π上升程度显著高于中、低分化肝癌组 (P<0 .0 5 )。GST-π的阳性率与肝癌的 TNM分期及患者年龄、肿瘤家族史、饮食习惯和居住地理位置等无关 (P >0 .0 5 )。结论 :血清 GST- π检测对肝癌具有较好的辅助诊断作用 ,特别对原发性肝癌 。

食管癌组织中胎盘型谷胱甘肽S—转移酶和γ—谷氨酰转肽酶的异常表达

胎盘型谷胱甘肽S—转移酶(GST—π)作为新的肿瘤免疫组织化学标志,在胃癌、大肠癌、肝癌及肺癌组织中表达增强,具有一定的临床意义.在这方面,本研究室曾作过系列研究报道.本文用抗GST—π抗体的免疫组织化学技术(ABC)对75例食管癌、82例食管上皮异型增生、59例食管正常上皮组织中GST—π的表达进行了检测,并用组织化学方法(改良Rutenburg氏法)同时检测了γ—谷氨酸转肽酶(γ—GT)的表达。

谷胱甘肽硫转移酶M1和T1基因多态性与燃煤型砷中毒发病的关系

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶M1和T1（GSTM1、GSTT1）基因多态性与燃煤污染型砷中毒发病风险的关系。方法采用多重等位基因特异聚合酶链反应技术检测贵州省130名燃煤型砷中毒患者及140名健康个体的GSTM1和GSTT1基因多态性，并分析不同基因型与砷中毒发病的关系。结果砷中毒病例组和对照组GSTT1纯合缺失基因型（GSTT1^（-/-））的频率分别为58．5％和45．0％，组间比较差异有统计学意义（Х^2=6．246，P〈0．05）；携带GSTT1^（-/-）基因型个体发生砷中毒的风险是携带GSTT1非纯合缺失基因型（GSTT1^（＋/＋）or（-/-））个体的2．18倍[比值比（OR）adj=2．18，95％可信区间（CI）：1．183～4．018]。砷中毒病例组和对照组间GSTM1纯合缺失基因型（GSTM1^（-/-））频率的差异无统计学意义（P〉0．05）。基因型联合分析显示：携带GSTM1^（-/-）和GSTT1^（-/-）联合基因型的个体，其砷中毒的发病风险显著增加（ORadj=2．931，95％CI：1．024～8．387）。结论GSTT1^（-/-）基因型可能是燃煤型砷中毒发生的重要危险内因之一。

肝细胞癌乙型肝炎病毒感染与人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

背景与目的:许多肿瘤癌变过程中人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneS-transferases,GST-π)的表达会异常升高,其变化早于细胞的形态改变。探讨肝细胞癌乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染与GST-π表达的关系。方法:对肝细胞癌和相关慢性肝病及正常肝组织共86例用免疫组化染色方法检测乙型肝炎表面抗原(hepatitisBsurfaceantigen,HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(hepatitisBcoreantigen,HBcAg)和GST-π,用原位分子杂交方法检测乙型肝炎病毒DNA(hepatitisBvirusDNA,HBVDNA)。结果:HBsAg,HBcAg和HBVDNA的阳性率在慢性肝炎分别为61.9%(13/21);42.9%(9/21)和75.0%(12/16);在肝硬化分别为64.0%(16/25),36.0%(9/25)和83.3%(15/18);在癌旁肝硬化分别为72.7%(16/22),61.1%(11/18)和85.7%(12/14);在肝细胞癌分别为45.2%(14/31),50.0%(14/28)和64.3%(9/14)。其中以癌旁肝硬化组阳性率最高。慢性肝炎、肝硬化和癌旁肝硬化HBVDNA阳性信号较肝细胞癌多而强。GST-π在慢性肝炎(25.0%,4/16)、肝硬化(17.6%,3/17)、癌旁肝硬化(53.3%,8/15)和肝细胞癌(60.0%,9/15)均有表达,但癌旁肝硬化组和肝细胞癌组阳性率明显增高,癌旁肝硬化组与不伴肝癌的肝硬化组差异有显著性(P<0.05),与肝细胞癌组差异无显著性(P>0.05)。结论:大多?

胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶和DNA拓朴酶在人骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的 探讨骨肉瘤组织中胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)和DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )的表达及其与预后的关系。方法 应用免疫组化SP法检测GST π、TopoⅡ在 40例骨肉瘤中的表达 ,并结合临床资料分析其对预后的影响。结果 40例骨肉瘤中GST π和TopoⅡ的阳性表达率分别为 82 5 % (3 3 40 )和 5 2 5 % (2 1 40 ) ,其中术前化疗组TopoⅡ阳性表达率为 3 8 5 % (5 13 ) ,显著低于术前无化疗组 77 8% (2 1 2 7) (P <0 0 5 ) ,GST π的阳性表达率在两组间无显著差异 ;GST π和TopoⅡ的阳性表达率与患者的预后显著相关。结论 GST π主要参与骨肉瘤原发性耐药 ,TopoⅡ不仅参与骨肉瘤原发性耐药 ,同时也参与骨肉瘤继发性耐药 ;GST π和TopoⅡ是影响骨肉瘤预后的重要因素 ,可能成为评估骨肉瘤预后的有价值的指标。

某地区健康人群谷胱甘肽硫转移酶T1基因型研究

目的探讨广东地区瑶族和汉族健康人群谷胱甘肽硫转移酶T1(GSTT1)基因多态性的分布。方法采用双重PCR方法检测226例瑶族和219例汉族人群GSTT1基因型。结果瑶族和汉族人群GSTT1缺失基因型频率分别为47.8%(108/226)及52.1%(114/219),二者之间差异无统计学意义(P>0.05);同民族不同性别之间、不同年龄之间差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论广东地区瑶族和汉族人群GSTT1基因多态性分布与中国其他地区汉族人群、韩国人和日本人相似,而与美国黑人和白人显著不同。

胎盘型谷胱甘肽转移酶基因在乳腺癌及腋窝淋巴结组织中的表达

目的：研究胎盘型谷胱甘肽转移酶（GST-π）在乳腺癌及其腋窝淋巴结组织中的表达情况与乳癌发生和临床耐药的相关性。方法：采用免疫组化及RT－PCR法分析临床乳癌标本及肢窝清扫淋巴结组织GST-π蛋白和mRNA的表达。结果：在正常乳腺组织、乳癌组织、HE阳性淋巴结、HE阴性淋巴结中GST-π蛋白阳性表达率分别为0，60%，77%，43%；GST-π mRNA阳性表达率分别为：0，88%，7l%，39% 。结论：在肿瘤启动和促进阶段GST-π表达增高，是一典型癌前病变标志酶；HE阴性淋巴结中出现GST-π阳性表达，提示预后不好，且在耐药反应性上淋巴结灵敏性强于乳癌组织；GST-π基因表达的调控可能主要发生在RNA和（或）转录前水平。

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶研究新进展

主要介绍了近年来关于胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的生化特性、基因结构和调节、在癌及癌前病变中的表达以及与肿瘤细胞耐药性关系研究的新进展。

系统性红斑狼疮病人中的谷胱甘肽硫转移酶基因型与活性

【目的】探讨谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)基因型和活性分布与系统性红斑狼疮(SLE)发生的联系。【方法】用多重PCR 分析健康对照和 SLE 病人的 GSTT1和 GSTT1基因多态性,PCR-RFLP 检测 GSTP1 lle105Val 基因多态性。参照报道的方法用紫外分光光度法测定红细胞 GSTs 活性。【结果】对照组与 SLE 病人之间 GSTM1、GSTT1与 GSTP1的基因型频率分布比较差异无统计学意义,SLE 病人的平均 GSTs 活性为(5.35±1.49)U/g Hb,比健康人的 GSTs 活性(3.89±1.44)U/g Hb 显著性增高(t=48.057,P=0.000)。在对照组,以 GSTM1基因型分组,GSTM1(-)组 GSTs 活性与 GSTM1(+)组 GSTs 活性差异无统计学意义(P=0.665);以 GSTP1三种基因型分组,杂合 I/V 基因型组的平均 GSTs 活性比野生 I/I 基因型的 GSTs 活性低(P=0.000),比突变 V/V 基因型的 GSTs 活性高(P=0.004)。而在 SLE 病人中,GSTM1基因型或 GSTP1基因型之间 GSTs 活性差异均不大。【结论】GSTs 基因多态性在成人 SLE 发生中的作用并不明显,而 GSTs 活性增高对 SLE 病人可能有重要影响。

胎盘型谷胱甘肽S－转移酶基因在胃癌中的表达

用Ｄｉｇ－ＧＳＴ－πｃＤＮＡ探针分子杂交方法，检测了正常胃组织、胃癌及相应癌旁正常组织中ＧＳＴ－πＤＮＡ和ＧＳＴ－πＲＮＡ水平．发现ＧＳＴ－πＤＮＡ水平没有明显变化，而ＣＳＴ－πＲＮＡ在８例胃癌组织中有６例高于正常胃组织，在１２例低分比腺癌中有７例癌旁正常组织高于相应癌组织．表明ＧＳＴ－π基因表达增加与胃癌有关，而且早于细胞形态的变化．

人胎盘型谷胱甘肽S转移酶在人脑胶质瘤中的表达及意义

利用异硫氰酸荧光素标记的 GST- π抗体和流式细胞技术检测 GST- π在脑胶质瘤中的表达 ,以正常脑组织作为对照。结果显示 GST-π在正常脑组织中无阳性表达 ,但在胶质瘤中呈过度表达 ,随肿瘤恶性程度增高 ,临床分期向晚期发展 ,GST- π表达阳性率增高 (χ2检验 ,P<0 .0 5 ) ,表达水平亦增高 (秩和检验 ,P<0 .0 1) ,且GST- π表达阳性胶质瘤患者的平均年龄高于阴性者 (t检验 ,P<0 .0 5 ) ,在复发与原发胶质瘤中的差异尚无统计学显著性。认为检测 GST-π表达可为胶质瘤患者的预后判断及治疗方案选择提供依据。

健康人群谷胱甘肽硫转移酶M1基因型分布

目的探讨广东地区瑶族和汉族健康人群谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性的分布。方法采用双重PCR方法检测237例瑶族和229例汉族人群GSTM1基因型。结果瑶族和汉族人群GSTM1缺失基因型频率分别为68.35%(162/237)及64.19%(147/229),2者之间差异无统计学意义(P>0.05);同民族不同性别之间差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论广东地区瑶族和汉族健康人群GSTM1基因呈多态性分布。

胎盘型谷胱甘肽S转移酶在胃癌中表达的意义

目的:探讨胎盘型谷胱甘肽S转移酶(glutathione s-transfarase,GSTπ)在胃癌中表达的临床意义。方法:利用SP免疫组织化学方法,检测58例胃癌和40例慢性萎缩性胃炎患者组织中的阳性率。结果:GSTπ在胃癌和胃炎组织中的阳性率分别为74.14%(43/58)和37.50%(15/40),两者差异显著(P<0.05)。GSTπ在胃癌低分化组阳性率偏高,但无统计学意义(P>0.05)。淋巴结转移组阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:GSTπ在胃癌组织中有较高表达,检测GSTπ对提示预后及指导化疗方案选择有指导意义。

基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性

先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中,高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的模拟酶.其中制备的3个含硒突变体15C,14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力.对非含硒突变体性质研究发现,Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失,表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用,但前者主要参与底物结合,后者更侧重于催化.

4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点。方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组。实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7mg/(kg·d)。对照组(n=12)则仅给予饮用水。实验第2周、4周、8周、12周、16周和26周末,处死大鼠,其中实验组各5只,对照组各2只。处死动物后,从会厌部至口底前缘整体分离舌体,观察其大体形态,常规组织处理,免疫组化法检测舌黏膜组织内GST-P。结果:对照组大鼠未出现任何舌黏膜病变,舌体标本均呈GST-P阴性。实验第8周末,实验组大鼠舌黏膜开始出现上皮异常增殖,实验第16周末即有1只大鼠发生舌癌,26周实验组大鼠均出现舌癌。2周时实验组大鼠舌黏膜内开始出现GST-P阳性细胞,随着时间的推移,GST-P阳性灶数目和大小逐渐增加。结论:GST-P可能与舌癌的发生有关。GST-P阳性反应早于大鼠舌黏膜的形态学改变,可作为反映癌前细胞代谢特点的良好标记。

皮肤癌组织中胎盘型谷胱甘肽转移酶蛋白和mRNA的表达

目的:检测颜面部皮肤鳞状细胞癌(SCC)、基底细胞癌(BCC)组织中胎盘型谷胱甘肽转移酶(GST-π)mRNA和蛋白的表达。方法:采用多相寡核苷酸原位杂交技术和免疫组织化学SP法分别检测20例SCC、20例BCC、10例不典型增生组织及10例正常皮肤组织中GST-π mRNA与蛋白的表达。结果:正常皮肤、不典型增生皮肤、SCC、BCC组织中GST-π mRNA的阳性表达率依次为10%,20%,70%,80%,GST-π蛋白的阳性表达率分别为10%,30%,90%,90%。SCC与BCC组织中GST-π mRNA和蛋白的阳性表达率均高于不典型增生皮肤和正常皮肤组织(P均<0.05)。结论:GST-π可能与SCC和BCC的发生发展有关,是SCC和BCC发生过程中的早期酶学变化。

高效液相层析法纯化人胎盘谷胱甘肽硫转移酶

足月分娩的新鲜胎盘组织制成匀浆后,经高速离心、超速离心,谷胱甘肽(GSH)Sepharose 6B亲合层析,Amicon pM-10膜超过滤及高效液相层析,最终经SDS-PAGE鉴定,结果呈现单一亚基区带,其亚基分子量为25000。 根据我们现有高效液相设备条件,用ODS柱代替RadulovicL等报道的特异阴离子柱,用磷酸盐洗脱液代替含谷胱甘肽、二硫苏糖醇及氯化钾的梯度洗脱液,从人胎盘组织成功地制备了谷胱甘肽硫转移酶(GST)纯酶,全过程在15min内完成,保留时间及主峰面积的重复性均较理想,7次实验结果的变异系数为0.2％,最终纯化578.9倍。本研究为各种形式GST的纯化制备提供了一个新的、重复性好、分辨率高及回收理想的简易方法。

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在喉肿瘤组织的表达

目的 :检测胎盘型谷胱甘肽S -转移酶 (GST -π)在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤、声带息肉的表达及意义。方法 :病理诊断确诊的喉鳞状细胞癌标本 3 4例 ,喉乳头状瘤 3 1例 ,声带息肉 3 8例 ,用免疫胶体金方法检测GST -π在喉肿瘤组织的表达。结果 :3 4例喉鳞状细胞癌组织GST -π表达 10 0 %阳性 ,其中有 3例化疗后表达强度增强 ;3 1例喉乳头状瘤组织 12 9%弱阳性表达 ;3 8例声带息肉全部为阴性。结论 :GST -π对喉部良、恶性肿瘤的检测及化疗耐药性的产生方面有重要意义。