人胎盘造血干细胞对非致死辐射小鼠造血功能的重建研究

目的:观察人胎盘造血干细胞对非致死辐射小鼠移植模型造血功能重建的作用。方法:采用机械处理联合酶解法提取人胎盘来源造血干细胞(PHSC),利用流式细胞术和细胞集落形成实验进行胎盘HSC鉴定。选取25只NOG小鼠随机分为空白对照组(n=5),辐照组(n=4),低剂量PHSC组(n=8)和高剂量PHSC组(n=8)。在无菌条件下对辐射组、低剂量PHSC组和高剂量PHSC组小鼠分别进行X-射线照射,每只1 Gy(100cGy/min)。给予低剂量PHSC组和高剂量PHSC组小鼠尾静脉注射0.1 ml人胎盘HSC,数量分别为2×10^6/ml和1×10^7/ml,空白对照组和辐射组小鼠给予等体积生理盐水注射。每周对小鼠进行称重并计算相对体重变化,分别于第4、8和12周抽取各组小鼠外周血进行人CD45+和髓系、淋巴系血细胞流式细胞术检测。结果:流式细胞术检测和细胞集落培养鉴定显示,人胎盘HSC占人胎盘单个核细胞的比例达到0.75%以上且具有造血干细胞的分化能力。与空白对照组小鼠比较,辐照组、低剂量PHSC组和高剂量PHSC组小鼠相对体重增长幅度显著下降;与辐照组小鼠比较,低剂量PHSC组和高剂量PHSC组小鼠相对体重增长幅度显著升高。流式细胞术结果显示,在移植后12周,高剂量PHSC组小鼠中人血液免疫系统开始长期重建,而低剂量PHSC小鼠人CD45+细胞的比例非常低。结论:将人胎盘HSC移植入非致死辐射小鼠体内,能够获得人血细胞短期重建和长期重建,证明人胎盘HSC能够在辐射小鼠体内多向分化并重建造血功能。