CYLD基因转染对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖及凋亡的影响

目的观察CYLD基因转染对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖及凋亡的影响。方法采用脂质体法将重组真核细胞表达载体pc DNA3.0(-)/CYLD转染PANC-1细胞,利用G418筛选带有pc DNA3.0(-)/CYLD的细胞。用Western blotting法检测PANC-1细胞中的CYLD蛋白,MTT法测定PANC-1细胞OD值,流式细胞仪检测凋亡PANC-1细胞并计算细胞凋亡率。结果与未转染及转染空载质粒的PANC-1细胞相比,转染pc DNA3.0(-)/CYLD的PANC-1细胞CYLD蛋白表达明显,其OD值降低、凋亡率升高(P均<0.05)。结论 CYLD基因转染可抑制人胰腺癌PANC-1细胞的增殖并诱导其凋亡。

二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1生长侵袭影响及其机制的探讨

目的:研究二甲双胍对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,给予不同浓度二甲双胍进行干预作为实验组,无药物组作为对照组。MTT法检测二甲双胍对PANC-1细胞存活率的影响;流式细胞仪检测二甲双胍对PANC-1细胞周期及细胞凋亡的影响;Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭能力;RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA的表达。结果:与对照组相比,用药组细胞增殖活性明显下降,F值分别为70.318、327.201和654.196,P<0.01,且呈时间-浓度依赖性。流式细胞仪检测细胞周期结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,G0/G1期细胞所占百分率逐渐增加,S期和G2/M期细胞所占百分率逐渐下降,F值分别为208.365、195.308和48.87,P<0.01;流式细胞仪分析对照组与实验组早期和晚期细胞凋亡率差异无统计学意义,F值分别为0.123和0.298,P>0.05。侵袭实验结果显示,随着二甲双胍浓度的增加,细胞侵袭能力逐渐下降,F=66.131,P<0.01。RT-PCR示,二甲双胍干预组Cyclin D1、MMP-2和MMP-9mRNA表达明显降低,t值分别为6.789、13.452和25.72,P<0.01;Bax、Bcl-2和Caspase-3mRNA与对照组相比差异无统计学意义,t值分别为-0.683、-1.567和0.78,P>0.05。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株PANC-1的增殖和侵袭,机制主要与其阻滞细胞周期以及影响相关基因表达有关;二甲双胍对PANC-1细胞的凋亡无明显诱导作用。

乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响

目的探讨乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡的影响。方法以1.25,2.5,5,10,25,50μmol/L乌苏酸培养PANC-1细胞24,48,72 h,采用四氮唑盐(MTT)法测定细胞活性。实验分为对照1组(等体积二甲基亚砜)及乌苏酸低、中、高剂量组(5,10,20μmol/L乌苏酸),显微镜下观察细胞形态,采用Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt),磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR),活化半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2关联X蛋白(Bax)的蛋白表达水平,采用细胞集落形成实验观察细胞增殖情况。实验分为对照2组(等体积二甲基亚砜)和乌苏酸组(10μmol/L乌苏酸),采用细胞划痕实验观察细胞培养48,72 h的迁移情况。利用分子对接实验模拟乌苏酸与PI3K和Akt2的相互作用。结果随着乌苏酸浓度的升高,PANC-1细胞活性逐渐减弱,24,48,72 h时的半数抑制浓度(IC50)分别为7.89,6.26,5.06μmol/L。与对照1组比较,乌苏酸各剂量组细胞逐渐失去原有形态,且随着浓度的增加,变形细胞数目随之增加,且细胞边界模糊不清;细胞数量显著减少(P<0.05);乌苏酸各剂量组细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白的表达水平均显著升高,乌苏酸中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白表达水平显著降低,乌苏酸各剂量组细胞p-m TOR,中、高剂量组细胞p-Akt,高剂量组细胞PI3K蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与对照2组比较,乌苏酸组细胞48 h,72 h的迁移距离缩短。乌苏酸的乌苏烷型三萜类结构可进入PI3K与Akt2中的三磷酸腺苷(ATP)结合位点竞争性结合疏水口袋,从而影响PI3K和Akt2与ATP的结合,抑制其激活。结论乌苏酸可通过抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活而抑制PANC-1细胞的增殖,促进其凋亡。

质粒介导LAPTM4B过表达胰腺癌细胞株PANC-1的构建及鉴定

目的筛选低表达LAPTM4B-35细胞株并构建质粒介导的LAPTM4B过表达胰腺癌细胞株并进行鉴定。方法通过RT-PCR及Western-Blot方法检测3种胰腺癌细胞LAPTM4B的表达,筛选出现低表达LAPTM4B细胞株。通过质粒稳定转染胰腺癌细胞PANC-1,pcDNA3.0-AE过表达LAPTM4B基因,应用RT-PCR,Western-blot进行鉴定。结果成功扩增提取pcDNA3.0-AE质粒,转染并筛选稳定细胞株。RT-PCR及Western-Blot显示相对空白对照,稳定株的过表达LAPTM4B-35明显。结论成功构建筛选低表达细胞株,并建立稳定过表达LAPTM4B的胰腺癌细胞株。

吉西他滨对胰腺癌细胞株PANC-1中TMS1/ASC基因表达及启动子甲基化的影响

目的:观察吉西他滨(GEM)对胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因(TMS1/ASC)的表达及其启动子区甲基化的影响,并讨论其疗效机制。方法:将对数生长期PANC-1分为两组,以加入4.27μg/ml的GEM作用于PANC-1细胞者为实验组(GEM组),以不加GEM者为对照组,分别继续培养24h,采用DNA原位末端标记(TUNEL)法结合激光共聚焦显微镜观察两组PANC-1细胞凋亡和细胞核形态变化;采用RT-PCR检测两组PANC-1细胞中TMS1/ASC mRNA的表达情况;采用重亚硫酸盐限制内切酶法(COBRA)检测两组PANC-1细胞中TMS1/ASC的甲基化状态。结果:(1)GEM组中PANC-1凋亡明显(FITC和PI双染阳性),对照组未见PANC-1凋亡;(2)GEM组PANC-1的TMS1/ASC mRNA表达显著高于对照组(P<0.01);(3)GEM组PANC-1中TMS1/ASC启动子区甲基化率显著低于对照组(P<0.01)。结论:GEM可能通过促进PANC-1细胞凋亡,上调TMS1/ASC mRNA表达以及抑制TMS1/ASC启动子区的甲基化而起到治疗胰腺癌的作用。

龙胆苦苷对人胰腺癌细胞PANC-1凋亡及IL-6/JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:研究龙胆苦苷对人胰腺癌细胞PANC-1凋亡的影响,并从白细胞介素6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路角度研究其作用机制。方法:以PANC-1细胞为研究模型,采用MTT法测定0(阴性对照)、2、4、8、16、32、64、128 mg/L龙胆苦苷作用于细胞72 h后的增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC50)。分别将细胞分为阴性对照组、吉西他滨组(阳性对照,4 mg/L)和龙胆苦苷低、中、高浓度组(15、30、60 mg/L)。分别于培养1、3、5、7 d后,采用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,考察各组细胞的生长情况;培养72 h后,采用克隆形成试验考察细胞的克隆形成率,采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡率,采用逆转录-聚合酶链式反应法和Western blotting法分别测定细胞中IL-6、JAK2、STAT3 mRNA及其蛋白表达水平。结果:4~28 mg/L龙胆苦苷均可显著抑制细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),并具有一定的浓度依赖性趋势,IC50为9.54 mg/L。与阴性对照组比较,吉西他滨组和龙胆苦苷中、高浓度组活细胞计数(作用3、5、7 d)和细胞中IL-6、JAK2、STAT3 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.01);吉西他滨组和龙胆苦苷高浓度组细胞的克隆形成率均显著降低(P<0.01)。与吉西他滨组比较,龙胆苦苷高浓度组细胞中上述指标水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:30、60 mg/L龙胆苦苷可显著抑制PANC-1细胞的增殖、诱导其凋亡,60 mg/L龙胆苦苷的作用与吉西他滨相当;其作用机制可能与抑制细胞中IL-6/JAK2/STAT3信号通路的激活有关。

羟基喜树碱对人胰腺癌细胞PANC-1生长的抑制作用

目的研究羟基喜树碱对人胰腺癌PANC-1细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法MTT法测定羟基喜树碱对PANC-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测羟基喜树碱对PANC-1细胞周期、凋亡率和Caspase-3活性的影响。结果羟基喜树碱能抑制PANC-1细胞生长,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为51.52μg/ml;流式细胞仪检测显示低浓度羟基喜树碱处理后可将细胞先后阻滞于S期和G2/M期,高浓度的羟基喜树碱则诱导细胞凋亡;细胞凋亡率和Caspase-3活性随药物浓度升高和处理时间延长而逐渐递增。结论羟基喜树碱能抑制人胰腺癌PANC-1细胞的生长,其抗肿瘤作用机制与阻断细胞周期、诱导细胞凋亡和激活Caspase-3活性有关。

舒林酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响及机制探讨

目的以人胰腺癌细胞系PANC-1为研究对象,利用不同浓度舒林酸处理PANC-1细胞,观察其对PANC-1细胞增殖、凋亡影响,并探讨舒林酸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路杀伤PANC-1细胞的可能机制。方法实验分为阴性对照组(加入不含舒林酸的DMSO)和实验组(分别加入舒林酸浓度为0.25、0.5、1、1.5、2 mM的培养液,分别为:阴性对照组、0.25 mM组、0.5 mM组、1.0mM组、1.5 mM组、2.0 mM组,总计6组)。MTT法检测PANC-1细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和免疫细胞化学技术检测细胞内β-Catenin的表达。结果 MTT结果显示:PANC-1细胞经舒林酸干预后生长均受到不同程度抑制,且随着舒林酸浓度增加,抑制作用越强。流式细胞术检测凋亡结果显示PANC-1细胞早期凋亡率干预后均有不同程度增加,与对照组相比,0.5、1.0 mM组早期凋亡率差异无统计学意义,而1.5、2.0 mM组差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示可见各组β-catenin mRNA表达量随着舒林酸浓度增加而降低,0.5、1.0 mM组与对照组相比差异无统计学意义,而1.5及2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05);应用2.0 mM的舒林酸处理PANC-1细胞0、12、24、48、72 h,随着处理时间延长,β-catenin mRNA表达量逐渐降低,各处理组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ICC结果证实干预后PANC-1细胞内β-catenin表达量及核聚集降低,与对照组相比,0.25、0.5 mM组差异无统计学意义,而1.0、1.5、2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒林酸对PANC-1细胞具有生长抑制及促凋亡作用,这种作用具有浓度-时间依赖性,舒林酸抑制Wnt/β-catenin信号通路可能是其杀伤PANC-1细胞的可能机制之一。

化疗药物对胰腺癌细胞株Aspc-1和Bxpc-3生长抑制作用的研究

目的 探讨不同化疗药物浓度、作用时间及联合用药对胰腺癌细胞株 (Aspc 1和Bxpc 3)的生长抑制作用。方法 单独或联合使用不同浓度的 4种化疗药物 :5 氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂和表柔比星 (浓度分为d1、d2、d3、d4 ) ,分别作用 2 4、4 8和 72h后 ,用四唑盐比色法检测药物对两株细胞的生长抑制作用 ,并对计算出的每组细胞生长抑制率行t检验分析。结果 两细胞株的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升 (P <0 .0 5 ) ,联合用药能显著提高药物对两细胞株的抑制作用 (P <0 .0 5 )。结论 通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度和延长药物作用时间 。

生长抑素对人胰腺癌细胞株ASPC—1的生长调控

目的：观察生长抑素（SS）对人胰腺癌细胞ASPC－1的生长作用；测定神经鞘磷脂（SM）、环磷酸腺苷（cAMP）和细胞内[Ca^2+]i水平。方法：细胞培养，分别加入不同浓度的的SS。应用MTT法来观察细胞增殖程度；薄层层析法测定细胞内SM，放射免疫法测定细胞内cAMP含量；荧光法测定[Ca^2+]i。结果：不同浓度的SS（10^-6～10^-12mol/L）均能有效地抑制ASPC－1的生长，能抑制ASPC－1细胞内SM，cAMP生成和细胞内[Ca^2+]i水平（P＜0．01），cAMP生成量和细胞内[Ca^2+]i水平与SS浓度呈负相关。结论：生长抑素能抑制ASPC－1细胞的生长，经过特异性受体调节。

吉西他滨对胰腺癌细胞PANC-1活性和蛋白表达的影响

目的:研究吉西他滨(健择,Gemcitabine,GEM)对胰腺癌细胞PANC-1活性及蛋白表达的影响。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测吉西他滨在不同时间(12h、24h、36h、48h)下对胰腺癌细胞PANC-1存活率的影响,透射电镜观察吉西他滨对胰腺癌细胞PANC-1形态的影响,蛋白印迹法观察经吉西他滨作用前后蛋白的表达。结果:吉西他滨对PANC-1细胞生长的抑制有时间依赖性,透射电镜观察胰腺癌细胞发生核质疏松,核膜分层、起泡甚至破裂,核质溢出,胞浆也出现空泡,细胞膜和细胞器发生明显改变,随而质膜渗透性增加并细胞溶解,蛋白印迹法显示,GEM影响蛋白质表达。结论:吉西他滨对胰腺癌细胞PANC-1的生长具有显著抑制作用。药物敏感性降低和作用时间延长能导致蛋白的表达及改变。

着色性干皮病D组蛋白对胰腺癌PANC-1细胞紫杉醇敏感性的影响

目的研究表明化疗药物耐药和与消化道肿瘤相关的一系列基因分子突变密切相关。文章研究野生型人剪切修复基因XPD转染人胰腺癌PANC-1细胞后对结合型紫杉醇敏感性的影响。方法将空载质粒p EGFP-N_2及重组质粒p EGFP-N_2/XPD通过瞬时转染于人胰腺癌PANC-1细胞。设正常对照组(不作任何处理)、空载质粒转染组(空载质粒p EGFPN_2转染)、重组质粒XPD转染组(重组质粒p EGFP-N_2/XPD转染)。使用RT-PCR和Western blot方法检验转染后XPD mRNA及蛋白表达;MTT实验检测结合型紫杉醇对XPD转染后PANC-1细胞增殖活性的变化;流式细胞仪检测XPD转染后PANC-1细胞在结合型紫杉醇作用下凋亡反应的差异。结果重组质粒XPD转染组中XPD mRNA表达量(9.572±0.345)和蛋白表达量(1.055±0.012)较正常对照组(1.125±0.043,0.302±0.002)及空载质粒转染组(1.273±0.057,0.378±0.004)明显升高(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组XPD mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组的A值均明显低于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.05);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组细胞凋亡率均明显高于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过XPD转染PANC-1细胞可明显增强PANC-1细胞对结合型紫杉醇的化疗敏感性。

仓鼠胰腺癌细胞株移植性肝癌模型的建立及其生物学特性

目的:建立仓鼠胰腺癌细胞株(pGHAM-1)移植性肝癌模型,并研究其生物学特性.方法:将pGHAM-1培养后配成4×1010/L,取0.5mL接种于仓鼠皮下,成瘤后,接种于仓鼠肝脏.分别于第20、30、40天用B超仪检测肝脏肿瘤大小.于接种后第40天处死动物,观察肿瘤的生长、转移及腹水量.解剖取出肝脏,用游标卡尺测量肿瘤大小,切开肝脏直接观察肿瘤,再进行HE染色的组织病理学检查,免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)及肿瘤转移相关蛋白(nm23-H1)的表达.结果:pGHAM-1种植性肝癌模型成功率达100%.B超仪检测仓鼠肝脏,第20、30、40天肿瘤体积分别为84.1±21.9mm3,413.7±208.4mm3,2187.3±1882.8mm3,与10d前者相比,有非常显著性差异(P<0.01);接种后第40天处死动物,解剖观察肿瘤,直接测量肿瘤体积为2948.0±2188mm3,其大小与第40天B超仪测量结果无显著性差异(P>0.05).部分仓鼠可见血性腹水;肝内未见肿瘤卫星结节;HE染色组织病理学检查为低分化胰腺癌;免疫组织化学检测结果显示VEGF及nm23-H1蛋白低表达.结论:pGHAM-1种植性肝癌模型建立方法简便,易复制,是理想的肝癌研究模型.

吉西他滨白蛋白纳米粒对胰腺癌细胞株体外抑制效应的实验研究

目的:通过体外实验,探讨406nm吉西他滨白蛋白纳米颗粒(406nm-GEM-NP)对人胰腺癌细胞株CFPAC-1体外增殖的抑制效应。方法:以人胰腺癌细胞株CFPAC-1为研究对象,分为4个给药组:406nm-GEM-NP组、单纯GEM组、空白纳米颗粒组和无药对照组,采用MTT法(四甲基偶氮唑蓝)观察不同药物浓度对肿瘤细胞生长的抑制作用;并同时观察给药后48h和72h肿瘤细胞的增殖抑制率。结果:MTT试验检测提示406nm-GEM-NP和GEM均具有显著的细胞抑制作用,且406nm-GEM-NP的细胞抑制率在50μg/mLGEM浓度时,超过了单纯GEM(P<0.05),且有明显的时间依赖性,提示有显著的药物缓释作用;空白纳米颗粒对细胞抑制轻微,且不具有时间和浓度依赖性。结论:406nm-GEM-NP对人胰腺癌细胞株CFPAC-1具有显著的体外细胞增殖抑制作用。

胰腺癌细胞在低氧状态中HIF-1、VEGF蛋白的表达及可溶性VEGF水平变化的生物学意义

目的研究胰腺癌细胞在缺氧条件下HIF-1α、VEGF蛋白的表达以及可溶性VEGF的表达水平。方法利用CoCl2造成化学性缺氧,采用S-P免疫组织化学法,检测胰腺癌细胞株Patu8988、Sw1990在缺氧条件下,HIF-1α、VEGF蛋白的表达情况;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测实验组及对照组可溶性VEGF的水平。结果实验组中可溶VEGF的水平与与缺氧时间成正相关,随缺氧时间的延长,可溶VEGF水平明显升高;缺氧9h,HIF-1α、VEGF蛋白表达明显增强。结论在缺氧条件下,HIF-1α蛋白表达与VEGF蛋白表达及可溶性VEGF分泌的升高有密切关系;HIF-1α蛋白的表达可能是肿瘤细胞适应缺氧环境、促进肿瘤性血管形成的重要因子。

PIEZO2通过改变细胞功能促进胰腺癌细胞的发生发展

目的探讨压电型机械敏感离子通道元件2(piezoelectric type mechanosensitive ion channel component 2,PIEZO2)对胰腺癌细胞发生发展的影响。方法采用免疫组织化学技术检测胰腺癌与癌旁组织的PIEZO2阳性率;将PIEZO2干扰片段转染到胰腺癌细胞Panc-1中,通过实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测PIEZO2的转录水平及蛋白水平。以细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK8)检测细胞增殖情况,transwell法检测细胞的迁移侵袭能力。通过Illumina HiSeq^(TM)X Ten进行cDNA文库构建并测序,分析干扰PIEZO2后Panc-1细胞内差异基因并通过GO富集分析参与基因富集的相关通路。结果胰腺癌组织中PIEZO2表达水平高于癌旁组织,且高PIEZO2表达的胰腺癌患者总生存率较低。敲减PIEZO2基因后,qPCR和WB结果显示PIEZO2的表达量较对照组减低,差异具有统计学意义。敲减组的增殖、迁移、侵袭能力均低于对照组,且差异具有统计学意义。对两组进行转录组分析发现,两组分别获得15521,15325个基因,与敲减组相比,对照组有3411个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)上调,2830个DEGs下调,GO富集分析发现DEGs基因主要富集于细胞内解剖结构、细胞连接和细胞外基质。结论敲除PIEZO2可抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,PIEZO2通过调控细胞解剖结构、细胞连接和细胞外基质参与胰腺癌的发生发展,靶向PIEZO2将是胰腺癌新的治疗策略。

CYB5A对胰腺癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的探究细胞色素b5(CYB5A)对胰腺癌细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养人胰腺癌细胞株AsPC-1,分别转染SiRNA和质粒对CYB5A进行抑制和过表达,CCK8法检测AsPC-1细胞增殖活性,Western blot与荧光定量PCR(RT-PCR)分析半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)、增殖细胞核抗原(PCNA)与B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)等增殖相关蛋白的表达情况,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果抑制CYB5A表达可导致AsPC-1细胞caspase-3的mRNA水平及蛋白水平增高(P<0.05),PCNA及Bcl-2的mRNA水平及蛋白水平降低(P<0.05),并可进一步降低细胞增殖率(P<0.05),阻滞AsPC-1细胞于G2/M期(P<0.05);诱导CYB5A则可使AsPC-1细胞高表达PCNA与Bcl-2的mRNA水平及蛋白水平(P<0.05),而低表达caspase-3的mRNA水平及蛋白水平(P<0.05),并进一步促进AsPC-1细胞增殖(P<0.05),降低G2/M期细胞比例(P<0.05)。结论CYB5A可通过调控胰腺癌细胞AsPC-1增殖相关蛋白的表达,降低G2/M期细胞比例,进而促进胰腺癌细胞的增殖。

KiSS-1基因表达减弱或缺失在胰腺癌发生和进展中的作用

目的研究人胰腺癌细胞株、胰腺癌及其转移灶、慢性胰腺炎和正常胰腺组织中KiSS-1表达,探讨其在胰腺癌发病及进展中的作用。方法应用RT-PCR方法检测KiSS-1基因mRNA在人胰腺癌细胞株(AsPC- 1,BxPC-3)、40例胰腺癌及27例转移灶、15例慢性胰腺炎、9例正常胰腺组织中的表达情况。结果KiSS-1基因在正常胰腺组织和慢性胰腺炎组织中表达呈下降趋势,但无统计学差异(P>0.05),人胰腺癌细胞株BxPC-3中未检测到Kiss-1mRNA表达。人胰腺癌细胞株AsPC-1和胰腺癌原发灶中KiSS-1mRNA表达分别为(0.124±0.046),(0.241±0.172),均显著低于正常胰腺组织的表达水平(P均<0.01)。KiSS-1mRNA的表达与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,与临床分期、有无转移密切相关。在Ⅲ,Ⅳ期胰腺癌组织中KiSS-1基因的表达为(0.137±0.110),明显低于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05)。Kiss-1基因在无转移、有转移的胰腺癌原发灶和转移灶组织中表达水平呈降低趋势,差异显著(P<0.05和P<0.01),肝转移灶中的未检测到KiSS-1表达。结论KiSS-1基因表达降低或缺失与胰腺癌发生及其侵袭和转移密切相关,可能参与胰腺癌发病及其侵袭和转移的调控。

miR-96通过靶同HERG1对胰腺癌细胞系PANC-1放疗敏感性的影响

HERG1也被称为KCNH2或KvlLl,是快速延迟整流的电压门控钾离子通道家族成员之一[1],有越来越多的证据表明HERG1在多种肿瘤细胞中高表达[2-6],对肿瘤细胞增殖、调亡、分化及侵袭密切相关,而在相应正常细胞中不表达[4-7]。miR-96胰腺癌组织中表达下调,其靶基因HERG1可通过调控相关信号通路影响细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力。有关研究表明过表达miR-96的胰腺癌细胞PANC-1增殖能力、集落形成能力、迁移和侵袭能力都明显减弱,细胞凋亡增加[8]。本研究以PANC-1细胞为研究对象,研究miR-96对其放射敏感性的作用,以期为胰腺癌的临床治疗提供新思路。