人脐带血清器官培养液保存猪角膜的实验研究

目的 观察胎牛血清器官培养液和人脐带血清器官培养液对猪角膜内皮细胞形态学、组织学、超微结构、酶活性及代谢等的影响。方法 器官培养方法:4周以内31℃密闭培养,之后脱水24 h。选择猪眼113只,其中100只角膜分为两组进行配对器官培养保存。第1组(50只角膜):应用培养液Ⅰ(含10％胎牛血清);第2组(50只角膜,第1组的对侧角膜):应用培养液Ⅱ(含10％人脐带血清)。13只角膜作为正常对照。器官培养每周每组各取出12只角膜进行内皮细胞形态学分析、HE染色、酶组织化学染色。保存2周、4周时行扫描电镜检查。检测保存前后培养液的pH值和葡萄糖、乳酸浓度。器官培养过程中行微生物学检测。结果 器官培养期间角膜内皮细胞单层保持完整,多形性增加,两组之间角膜内皮细胞密度、细胞面积的变异系数和六边形细胞比例在保存4周内差异无显著意义。保存4周的猪角膜与正常猪角膜相比,平均内皮细胞丢失率第1组为10.98％,第2组为10.85％。两组角膜器官培养后的组织学、超微结构、酶活性无明显区别。扫描电镜显示内皮细胞层完整,细胞形态改变。酶组织化学染色显示上皮、内皮细胞酶活性旺盛,基质细胞的酶活性随保存时间的延长而降低。角膜代谢状态良好。器官培养液污染率为6％。结论

人脐带血清不同组分对 CD3AK 细胞增殖的影响

人脐带血清有很好的支持ＣＤ３ＡＫ细胞增殖的活性，本文证明这种活性主要在大分子血清物质中。用截留分子量为１０５的滤膜超滤合并的人脐带血清，分成上下两部分，各占全血清的１／４和３／４。膜上部分为＞１０５血清；膜下部分为＜１０５血清。促进ＣＤ３ＡＫ细胞增殖的活性，主要在＞１０５血清；＜１０５血清的活性较低，尤其是对４天以上的增殖，即使增加浓度，添加＜１０５血清组的ＣＤ３Ａ细胞数目还是随培养天数下降。培养液中添加全脐带血清、＞１０５血清或重混合脐血清、ＣＤ３单抗和白细胞介素－１（ＩＬ－１），促进ＣＤ３ＡＫ细胞增殖；若培养液中改加＜１０５血清，则ＣＤ３单抗和ＩＬ－１反而使ＣＤ３ＡＫ细胞减少。此外，这两部分血清组分对ＣＤ３ＡＫ细胞合成ＤＮＡ和ＲＮＡ、对其表型、细胞表面分子表达和其杀伤活性均有不同影响。上述结果提示，人脐带血清中有分子量超过１０５的促进ＣＤ３ＡＫ细胞增殖的物质。

人脐带血清用于人未成熟卵母细胞体外成熟培养并获得妊娠的观察

目的:以人脐带血清作为卵母细胞体外成熟培养(IVM)培养液的主要成份开展IVM技术研究,旨在为IVM临床妊娠率的提高,IVM技术的进步探索一条新路。方法:47例、47个周期的PCOS患者接受了IVM技术的治疗。未成熟卵母细胞分别入IVM培养液Ⅰ(含人成熟卵泡液,卵泡液组)和IVM培养液Ⅱ(含脐带血清,脐带血清组)行体外成熟培养,分析人脐带血清对IVM结果影响。结果:脐带血组:15周期,160枚未成熟卵母细胞,体外成熟过程中,成熟率、优质胚率及临床妊娠率分别为93.75%(150/160)、50.00%(60/120)和40.00%(6/15),已分娩4例,另2例处于妊娠阶段;卵泡液组:32周期,未成熟卵母细胞349枚,成熟率、优质胚率分别为77.08%(269/349)和23.77%(53/223),胚胎移植31周期,获得7例临床妊娠,妊娠率为22.58%(7/31),目前已分娩4例,3例流产。成熟率和优质胚率方面,脐带血组高于卵泡液组。结论:人脐带血清作为IVM液的主要成份相对于人成熟卵泡液,将更加有助于未成熟卵母细胞的体外成熟培养、改善胚胎质量,并获得较好的妊娠结局。

男女新生儿脐带血血清蛋白质组的比较

为发现不同性别新生儿之间蛋白质表达谱的差异,利用胰蛋白酶对上述血清蛋白分别进行酶解,并通过反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对肽段混合物进行了分离,进一步通过电喷射离子化串联质谱法(ESI-MS/MS)鉴定了分离的肽段。本研究中共鉴定出837种非冗余蛋白质,其中不同类型血清中共有的蛋白质有282种,另有239种和213种分别属于男性新生儿和女性新生儿特有蛋白质。对其中53种差异蛋白质进行了分析,初步探讨了它们在胎儿生长发育以及性别分化过程中的作用。

消除类风湿因子对乙型肝炎核心抗体检出干扰作用的初步探讨

根据感染乙型肝炎病毒(HBV)后典型的血清学反应模式,在表面抗原(HBsAg)阳性患者的血清中应同时能检出乙型肝炎核心抗体(抗HBc)。但在实际检测中,有时却发现少数HBsAg阳性、抗HBc阴性。曾有人报道类风湿因子(RheumatoidFactor,简称RF)可干扰抗HBc的检出。本文用3种方法消除RF对抗HBc检出的干扰作用进行了探讨,并作了比较。材料与方法材料在330份HBsAg阳性中(RPHA,滴度1:64以上,均为各型病毒性肝炎及正常携带者),发现28份抗HBc阴性。该28份血样品为本文实验材料。方法消除RF对杭HBc检出干扰作用的方法,