儿童人腺病毒7型肺炎临床预后不良的危险因素分析及相关预测模型构建

目的探讨儿童人腺病毒7(HAdV-7)型肺炎临床预后不良的危险因素及构建相关预测模型。方法选择2018年1月至2022年1月广西壮族自治区柳州市人民医院就诊的160例HAdV-7型肺炎患儿,按照预后情况分为预后良好组(130例)和预后不良组(30例)。分析儿童HAdV-7型肺炎预后不良的危险因素,并建立风险预测模型,绘制受试者操作特征曲线检验模型预测效果。结果预后不良组发热≥38.5℃时间长于预后良好组,C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、降钙素原(PCT)、天冬氨酸转氨酶(AST)高于预后良好组,胸腔积液占比高于预后良好组(P<0.05)。CRP(OR=1.314)、LDH(OR=1.018)、PCT(OR=7.268)、AST(OR=1.148)、胸腔积液(OR=31.406)是儿童HAdV-7型肺炎预后不良的独立危险因素(P<0.05)。预测模型方程为Y=-43.761+0.273×CRP+0.018×LDH+1.983×PCT+0.138×AST+3.447×胸腔积液。模型的曲线下面积为0.979(95%CI:0.950~1.000),灵敏度为93.3%,特异度为95.4%,约登指数为0.887,截断值0.360。结论儿童HAdV-7型肺炎预后不良与CRP、LDH、PCT、AST、胸腔积液有关,以此构建预测模型,能有效预测儿童HAdV-7型肺炎的预后情况。

成人腺病毒7型感染的临床特征分析

目的分析成人腺病毒(human adenovirus,HAdV)7型感染的临床特征,感染后炎症指标变化,为腺病毒感染的防控和临床诊疗提供参考。方法纳入所有暴露的524名成人,RT-PCR检测ADV核酸,连续监测30 d,对血常规、降钙素原和淋巴细胞亚群进行统计分析。结果累计73例HAdV-7感染者,均为男性,年龄19~33岁。临床症状以发热(100.0%)、咽痛(68.5%)为主。感染组白细胞计数、PCT升高,总CD3^(+)T细胞和CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例,CD4/CD8比值均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。感染第6天WBC达最高值,第3天PCT达最高值,第3、6、9天总CD3^(+)T细胞、CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例和CD4/CD8比值逐渐降低(P<0.05)。结论HAdV-7感染发病急,以发热、咽痛症状为主,WBC、PCT、淋巴细胞亚群随病情发展改变。

人腺病毒7型感染致重症肺炎并发中毒性脑病1例

人腺病毒感染性肺炎是一种常见的肺炎,我国婴幼儿的腺病毒肺炎发生率呈现上升趋势,绝大多数呈自限性,容易误漏诊,部分可以致死亡,后遗症发生风险明显上升[1]。近期我院收治人腺病毒7型感染致重症肺炎并发中毒性脑病患儿1例,现报告如下。

人腺病毒7型DNA结合蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

目的原核表达人腺病毒(HAdV)7型DNA结合蛋白(DBP),制备DBP蛋白多克隆抗体。方法合成HAdV-7 DBP基因并克隆至pET30a载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导进行原核表达。经镍离子金属螯合层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,使用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定该抗体效价;使用Western blotting方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测抗体特异性。以rDBP包被ELISA反应板使用间接ELISA对HAdV感染儿童急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体进行检测。结果成功构建HAdV-7 DBP原核表达载体,表达的重组DBP蛋白经镍柱亲和层析纯化后纯度>95%,间接ELISA方法测得制备的多克隆抗血清的抗体效价为1∶1024000,Western blotting方法和IFA方法显示该抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法检测HAdV感染儿童急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体的阳性率分别为50.0%(19/38)和63.2%(24/38)。结论成功构建HAdV-7 DBP蛋白的原达表达载体,获得了HAdV-7型DBP重组蛋白和高效价的兔多克隆抗体。

儿童人腺病毒7型混合肺炎支原体感染肺炎36例临床特征分析

目的总结儿童人腺病毒7型混合肺炎支原体感染肺炎的临床特征。方法选择2018年12月1日至2019年9月1日在武汉儿童医院确诊的36例人腺病毒7型混合肺炎支原体感染肺炎儿童为研究对象(混合感染组),回顾性分析36例患儿的临床表现、实验室检查和影像学资料,并选取同期住院的94例单纯人腺病毒7型感染肺炎患儿作为单纯感染组。采用t检验、非参数秩和检验及χ^(2)检验进行比较分析。结果混合感染组患儿中,男25例,女11例,平均年龄3.11岁;主要临床表现为发热(97.2%)、咳嗽(100.0%),且多表现为高热,平均体温为40.0℃,热峰约4次/d,平均热程11 d;重症肺炎率高(86.1%),与单纯感染组(69.1%)比较差异有统计学意义(χ^(2)=3.878,P<0.05);可合并心肌损害(55.5%)、心力衰竭(16.7%)、肝功能损害(25.0%)、消化道出血(5.5%)、中毒性脑病(11.0%)、噬血细胞综合征(16.7%)、闭塞性细支气管炎(50.0%)等并发症。细胞因子,如白细胞介素(IL)-6[237.84(108.59,606.36)ng/L]、IL-10[31.44(12.13,69.60)ng/L]、干扰素γ[(102.85±92.23)ng/L]均明显升高,其中IL-6、IL-10与单纯感染组[148.35(57.43,390.82);19.67(10.96,35.35)]比较升高更为明显,差异均有统计学意义(Z=-1.984、-2.077,均P<0.05)。混合感染组肺实变(50.0%)及胸腔积液(38.9%)均较常见,且胸腔积液发生率较单纯感染组(19.1%)明显升高,差异有统计学意义(χ^(2)=5.594,P<0.05)。结论儿童腺病毒7型混合肺炎支原体感染肺炎多为重症肺炎,可能与细胞因子风暴有关。

呼吸道腺病毒7型感染致凝血筛查指标变化及其对临床分型的诊断价值

目的 回顾性分析呼吸道人腺病毒7型(human adenovirus-7, HAdV-7)感染造成凝血筛查指标的变化及其对鉴别患者临床分型的诊断价值。方法 选取2015年1月20日—2月21日我院参与救治的82例呼吸道HAd V-7感染者作为研究对象,根据病情严重程度分为上呼吸道感染(upper respiratory infection, URI)组(42例),普通肺炎(common pneumonia, CP)组(30例)和重症肺炎(severe pneumonia, SP)组(10例),对比分析不同组别患者的一般资料、血常规、凝血筛查指标等。结果82例患者均为青年男性,平均年龄为(18.8±1.5)岁。3组间凝血酶时间(thrombin time, TT)比较差异有统计学意义,两两比较,SP组较URI组和CP组均有明显延长(P均<0.05)。3组间D-二聚体(D-dimmer, DD)和纤维蛋白原降解产物(fibrinogen degradation product, FDP)比较差异均有统计学意义,两两比较,SP组DD和FDP较URI组和CP组均有显著升高(P均<0.05)。TT在鉴别诊断URI和SP时,AUC为0.855(95%CI:0.741~0.968,P <0.05),在临界值为12.75 s时,其灵敏度为82.8%,特异度为60.4%;TT在鉴别诊断CP和SP时,AUC为0.853(95%CI:0.729~0.976,P <0.05),在临界值为12.95 s时,其灵敏度为73.3%,特异度为70.0%。DD在鉴别诊断URI和SP时,AUC为0.924(95%CI:0.849~1.000,P <0.05),在临界值为149.00μg/L时,其灵敏度为88.9%,特异度为86.5%;DD在鉴别CP和SP时,AUC为0.913(95%CI:0.822~1.000,P <0.05),在临界值为155.50μg/L时,其灵敏度为89.5%,特异度为82.4%。FDP在鉴别诊断URI和SP时,AUC为0.861(95%CI:0.755~0.993,P <0.05),在临界值为2.25 mg/L时,其灵敏度为77.8%,特异度为91.9%;FDP在鉴别诊断CP和SP时,AUC为0.875(95%CI:0.757~0.993,P <0.05),在临界值为1.55 mg/L时,其灵敏度为84.2%,特异度为76.5%。结论 呼吸道HAdV-7感染可导致患者凝血和纤溶功能出现紊乱。评估、监测凝血筛查指标特别是DD、FDP和TT,对早期识别呼吸道HAdV-7感染高危病例和预测疾病进展,及时干预有重要意义。

人腺病毒7型流行病学及检测方法研究进展

人腺病毒(human adenovirus,HAd V)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属,最先于1953年由Rowe等在儿童手术切除的扁桃体组织细胞培养液中发现,1956年国际病毒命名委员会将其正式命名为人腺病毒,可分为分为A~G 7个亚群,103个型别。人腺病毒7型(HAdV-7)易感染婴幼儿、免疫力低下人群以及军人,容易在学校、医院、军营等人员聚集性场所引起聚集性暴发疫情。

人腺病毒7型感染激活NLRP3炎症小体的机制研究

目的探讨人腺病毒7型(human adenovirus type 7,HAdV-7)感染对于炎症小体激活的影响及作用机制。方法采用免疫荧光检测HAdV-7对于THP-1分化的巨噬细胞的感染;应用ELISA方法检测HAdV-7感染对于IL-1β的激活;实时荧光定量PCR检测病毒感染对于NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1等mRNA表达的影响;蛋白质免疫印迹实验(western blot,WB)检测病毒感染后细胞内NLRP3、pro-IL-1β的表达及上清中caspase-1和IL-1β蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示HAdV-7可感染THP-1分化的巨噬细胞,WB显示HAdV-7感染诱导细胞内pro-IL-1β蛋白表达上调,ELISA检测表明HAdV-7感染可诱导IL-1β的分泌表达(MOI=0.5,P=0.0008)。使用Ac-YVDK-cmk抑制caspase-1表达后,HAdV-7感染上清中IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0025);HAdV-7感染caspase-1缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达同样被显著抑制(P=0.0191)。荧光定量PCR检测HAdV-7感染可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3 mRNA表达上调(NLRP3:P=0.0004;pro-IL-1β:P=0.0007),同时WB显示HAdV-7可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3蛋白表达上调;使用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞,可抑制HAdV-7感染的细胞上清中IL-1β的表达(P=0.0027);HAdV-7感染NLRP3缺陷的THP-1分化的巨噬细胞,IL-1β的表达被明显抑制(P=0.0189)。分别使用TLR2、TLR4、TLR7/9信号传导抑制剂,抑制HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制TLR4信号传导,细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调(P=0.0122);使用ROS抑制剂、组织蛋白酶B抑制剂,或抑制K+外流,分别处理HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞,结果显示抑制组织蛋白酶B(P=0.0292),或抑制K+外流时(KCl,P=0.0022;Glibenclamide,P=0.0275),细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调。结论HAdV-7感染THP-1细胞激活NLRP3炎症小体,NLRP3炎症小体激活的第一信号通过Toll样受体4(TLR4)信号传导,第二信号主要通过半通道模型介导K+外流的和溶酶体破坏模型释放组织蛋白酶B的激活NLRP3炎症小体。

人腺病毒疫苗研究进展

人腺病毒(HAdVs)主要通过飞沫、粪口途径或接触污染物传播。自被发现以来,世界各地一直暴发由其引发的严重的相关呼吸道感染,特别是在军营中暴发频率较其他场所更高。针对HAdVs暴发流行,仍然无特效抗病毒药物,疫苗是降低HAdVs感染最有效的措施。美国最早开始研究腺病毒疫苗,也是现在全球范围内唯一一个持有口服活疫苗的国家。目前我国还未有腺病毒疫苗上市。本文针对HAdVs疫苗研究进展进行综述,为疫苗研制提供参考依据。