人舌鳞癌Tca8113细胞株中c-erbB-2、bcl-2表达

目的探讨口腔癌肿瘤细胞中c-erbB-2、bcl-2基因的表达水平及其在肿瘤形成、发展过程中的作用.方法采用荧光定量RT-PCR实验技术检测人舌鳞癌Tca8113细胞株中c-erbB-2、bcl-2基因mRNA表达水平.结果分光光度计检测纯度A260/A280均在1.8～2.0,通过基因表达扩增曲线图与看家基因GAPDH校正,得出目的基因的相对含量高.结论 bcl-2与c-erbB-2基因的表达水平在人舌鳞癌Tca8113细胞株中显著升高,可能在肿瘤形成、发展过程中起到一定的作用.

人舌鳞癌TCA8113细胞在不同温度下nm23-H_1基因的表达及其意义

目的:通过测定肿瘤细胞内nm23-H,基因的表达情况,探讨高温治癌与转移抑制基因nm23-H_1之间的关系,以期阐明高温抑制肿瘤侵袭及转移的机理。方法:将人舌鳞癌细胞株Tca-8113细胞分为37℃对照组和43℃实验组,43℃组又分为10、20、30和40min共4个时间亚组。经相应的温度和时间处理后,通过MTT法、免疫组织化学技术及RT-PCR等方法对细胞进行观察、分析,以研究加热后舌癌细胞的生物学行为及nm23-H_1表达量的改变。结果:加温能抑制Tca-8113细胞的增殖活性,在43℃随着加热时间的延长,细胞中nm23-H_1表达量增加,并且在加热30min时达到最高.而在加热40min时有所下降.此变化不随加热后培养时间的延长而改变。结论:高温治疗可能是通过增加细胞中转移抑制基因nm23-H_1表达量来抑制肿瘤细胞的侵袭、转移能力;43℃加热30min可能是临床治疗的理想位点。

姜黄素联合顺铂对人舌鳞癌Tca-8113细胞的影响

目的姜黄素或姜黄素联合顺铂在体外作用于人舌鳞癌Tca-8113细胞,观察其对人舌鳞癌细胞增殖的影响,并探讨可能的抗肿瘤作用机制。方法将培养的Tca-8113细胞随机分为姜黄素组、顺铂组、姜黄素联合顺铂组和对照组。MTT法检测各组药物对舌鳞癌Tca-8113细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色法观察各组药物对舌鳞癌细胞核的形态影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测各组药物对舌鳞癌Tca-8113细胞Notch1和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达的影响。结果 MTT法结果显示,姜黄素联合顺铂组抑制舌鳞癌Tca-8113细胞增殖的作用明显高于姜黄素组和顺铂组(P<0.05)。流式细胞分析结果显示,姜黄素联合顺铂组的细胞凋亡率明显高于姜黄素组和顺铂组(P<0.05)。Western blotting结果显示,与姜黄素联合顺铂组比较,姜黄素组和顺铂组Notch1表达明显上调,EGFR表达则明显下调,而姜黄素联合顺铂组对Notch1和EGFR表达调控的影响与姜黄素组和顺铂组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素与顺铂在抑制人舌鳞癌Tca-8113细胞增殖时具有协同效应,其机制可能与上调Notch1信号通路、下调EGFR信号通路有关。

Bcl-2与HER-2反义寡核苷酸联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞的干预作用

目的探讨Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸(ASODN)联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的干预作用及其分子机制。方法实验分成正常对照组、Bcl-2正义干预组、HER-2正义干预组、Bcl-2反义干预组、HER-2 反义干预组、Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合干预组,共6组。脂质体转染后不同时间分别进行电镜观察、 RT-PCR检测,以观察不同条件处理后各组细胞的凋亡、Bcl-2与HER-2基因表达有无差别。结果 Bcl-2与HER-2 基因反义寡核苷酸联合干预组,转染后出现凋亡小体和各期凋亡细胞;Bcl-2基因表达下降36％,HER-2基因表达下降51％。联合转染作用优于单反义基因转染作用。结论 Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合转染能够促进肿瘤细胞凋亡并下调Bcl-2与HER-2基因的表达。

β-榄香烯对Tca8113细胞株诱导分化的研究

目的 :研究 β -榄香烯对Tca8113(口腔舌鳞癌细胞株 )细胞株诱导凋亡机制。 方法 :应用MTT比色法和流式细胞仪测定细胞周期的变化 ,并应用电子显微镜技术观察诱导分化后的亚细胞结构。结果 :β -榄香烯对Tca8113细胞株有明显的抑制作用。流式细胞仪分析不同的药物浓度、不同的作用时间细胞凋亡的发生均有显著意义 ,G1期细胞减少 ,S期细胞增多。亚细胞结构细胞线粒体肿胀变性 ,核固缩。结论 :β -榄香烯能抑制Tca8113细胞增殖 ,促进细胞凋亡 ,阻止S期细胞过程。

高温对人舌鳞癌细胞中nm23-H_1基因表达影响的实验研究

目的研究高温治疗癌症与转移抑制基因nm23-H1之间的关系,探讨高温抑制肿瘤细胞侵袭及转移的机理。方法对人舌鳞癌Tca8113细胞行体外43℃加温,采用电镜、免疫组织化学及流式细胞术等方法,分析加热后舌癌细胞超微结构的变化及nm23-H1表达量的改变。结果加温使Tca8113细胞中细胞器增多,形态趋向良性分化。在加热43℃时随加热时间延长,细胞中nm23-H1表达量增加,在加热30min时达到最高,此变化不随加热后培养时间的增加而改变。结论高温能使肿瘤细胞中nm23-H1表达量增加,并使细胞形态出现一定分化,从而抑制肿瘤细胞的侵袭、转移能力。43℃加热30min可能是临床治疗舌鳞癌的理想位点。

特非那定衍生物结构变化对肿瘤细胞Tca-8113凋亡的影响

目的观察特非那定不同取代基结构化合物与肿瘤细胞凋亡作用之间的关系。方法培养人舌鳞癌细胞株Tca-8113,以Hoechst33258染色法及吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法测定不同取代基孵育24h后,诱导人舌鳞癌细胞株Tca-8113凋亡的作用。结果不同取代基(正丙基、丙烯基、溴代物和乙烯基)的特非那定衍生物对肿瘤细胞均具有诱导凋亡的作用,Hoechst33258染色法检测凋亡率分别为(35.20±3.50)%,(59.69±4.70)%,(44.55±4.20)%和(56.32±5.10)%;AO/EB染色法检测凋亡率分别为(55.14±9.70)%,(88.23±11.80)%,(72.47±9.30)%和(92.46±13.10)%。结论 4种不同取代基的特非那定衍生物均表现出促进肿瘤细胞凋亡的作用,其中具有烯基结构的取代基的化合物促凋亡效应更为明显,其效应可能与不饱和键数目增加有关。

加温43℃对舌癌细胞VEGF表达的影响及其意义

目的:测定肿瘤细胞内VEGF的表达情况,探讨加温治癌与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)之间的关系,以期阐明加温抑制肿瘤侵袭及转移的相关机理。方法:对人舌癌细胞株Tca-8113进行体外43℃加温处理40min,ELISA法、免疫组化及RT-PCR等方法检测细胞VEGF表达量的改变。结果:加温处理后的Tca-8113细胞VEGF表达量明显降低,但随着培养时间的延长没有明显的变化。结论:加温能通过减少细胞中VEGF的表达量来抑制肿瘤细胞的血管生成,从而抑制了肿瘤的侵袭、转移能力。