流体剪应力对人脐静脉内皮细胞葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的影响

目的探索流体剪应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法以HUVECs作为实验细胞,设计并构建流体动力学模拟实验系统,控制流体动力学模拟实验系统中灌流液的流速,以实现对实验细胞施加不同的流体剪应力。按实验细胞在实验系统中所承受的不同流体剪应力,将实验细胞分为低剪应力组(A组;0.4 Pa)、中剪应力组(B组;0.8 Pa)和高剪应力组(C组;1.2 Pa)。每组HUVECs包含3个细胞玻片,每个玻片经实验系统灌流液反复循环流经12 h。采用蛋白质印迹法对各组细胞中GRP78和CHOP蛋白水平进行检测,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术测定各组细胞GRP78和CHOP蛋白及其信使RNA(mRNA)相对水平。应用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析。结果(1)A、B、C组HUVECs中GRP78蛋白相对表达水平分别为1.33±0.46、0.93±0.34、0.64±0.30;多组间比较差异有统计学意义(F=36.17,P<0.05)。A组GRP78蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组GRP78蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0013)。3组HUVECs中CHOP蛋白相对表达水平分别为:A组1.29±0.38,B组0.90±0.34,C组0.59±0.29;多组间比较差异有统计学意义(F=41.27,P<0.05)。A组CHOP蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组CHOP蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0004)。(2)A、B、C组HUVECs中GRP78 mRNA相对表达水平分别为18.3±3.4、11.3±1.8、5.4±2.2;多组间比较差异有统计学意义(F=189.20,P<0.05)。A组GRP78 mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组GRP78 mRNA相对表达水平高于C组(P<0.01)。3组HUVECs中CHOP mRNA相对表达水平分别为:A组20.4±3.8,B组14.2±2.1,C组7.8±1.3;多组间比较差异有统计学意义(F=171.80,P<0.05)。A组CHOP mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组CHOP mRNA相对表达水平高于C组(P<0.01)。结论低流体剪应力可能增加HUVECs中GRP78、CHOP的蛋白及其mRNA表达水平。

血清葡萄糖调节蛋白78在多发性骨髓瘤病人中的表达及其预后意义

目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在初诊多发性骨髓瘤(MM)病人血清中的表达,及其对病人治疗反应及预后的预测价值。方法选择2017年1月至2020年12月大竹县人民医院收治的78例MM病人为MM组,同期该院门诊就诊的62例健康成人作为对照组。收集所有参与者的外周静脉血样本,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中GRP78的表达,分析GRP78表达与临床特征及治疗反应的关系。通过受试者操作特征曲线(ROC曲线)确定血清GRP78预测MM病人预后的最佳临界值,采用Kaplan-Meier曲线与Cox比例风险模型评估血清GRP78表达与MM病人预后的关系。结果MM病人的血清GRP78表达水平显著高于对照组(Z=4.12,,P<0.001),中位表达量分别为2.49(1.23,5.13)mg/L和1.29(0.75,2.14)mg/L。与多发性骨髓瘤国际预后分期(ISS)Ⅰ、Ⅱ期病人2.05(1.09,4.40)mg/L相比,血清GRP78表达在ISSⅢ期病人2.99(1.66,5.63)mg/L显著升高(Z=2.18,P=0.030)。然而,血清GRP78表达与接受硼替佐米诱导方案的MM病人的治疗反应无关。ROC曲线显示血清GRP78预测总体生存(OS)的最佳临界值为1.68 mg/L,曲线下面积(AUC)为0.70,95%CI:(0.58,0.81),灵敏度与特异度分别为78.7%和58.4%。Kaplan-Meier曲线表明GRP78高表达(≤1.68 mg/L,n=50)组生存期明显短于低表达组(>1.68 mg/L,n=28),差异有统计学意义(χ^(2)=10.99,P=0.001)。单、多因素Cox分析揭示ISS分期[HR=2.04,95%CI:(1.11,3.76),P=0.022]、治疗反应[HR=2.42,95%CI:(1.28,4.58),P=0.007]和血清GRP78表达[HR=2.96,95%CI:(1.43,6.12),P=0.003]是MM病人的独立预后因素。结论GRP78在MM病人血清中呈现异常高表达,且与ISS分期及不良预后有关,或许是MM诊断与预后风险分层的重要标志物。

过表达葡萄糖调节蛋白78人乳腺癌细胞系HS578T、MDA-MB-231的构建

目的构建过表达内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(Glucose-regulated protein 78,GRP78)的人乳腺癌细胞系HS578T、MDA-MB-231,为探讨GRP78在乳腺癌发生发展中的作用机制提供基础。方法采用分子克隆技术构建表达GRP78的慢病毒载体pCDH-CMV-GRP78-HA-EF1-Puro质粒,采用PCR法扩增质粒,后使用EcoRⅠ、NotⅠ限制性内切酶切割质粒,对酶切产物进行测序鉴定,成功构建pCDH-CMV-GRP78-HA-EF1-Puro质粒。取对数生长期293FT细胞系(克隆分离株),在培养皿中加入pCDH-CMV-GRP78-HA-EF1-Puro混合液,培养48 h收集含GRP78慢病毒颗粒的上清液,保存备用。另取对数生长期人乳腺癌细胞系HS578T及MDA-MB-231,置于含GRP78慢病毒颗粒上清液的培养基中培养,培养48 h时在培养基中加入1∶500稀释嘌呤霉素,筛选GRP78过表达的HS578T、MDA-MB-231细胞系。加入嘌呤霉素培养48 h采用Western Blotting法检测HS578T、MDA-MB-231细胞GRP78。采用激光共聚焦显微镜对HS578T、MDA-MB-231细胞中GRP78蛋白进行定位。结果构建表达GRP78的慢病毒载体pCDH-CMV-GRP78-HA-EF1-Puro质粒。GRP78过表达的HS578T、MDA-MB-231细胞系在78 kD左右可见明显GPR78蛋白电泳条带。HS578T细胞系中存在GRP78蛋白表达,主要分布在细胞质中。结论成功构建GRP78过表达的MDA-MB-231、HS578T细胞系,GRP78主要表达于细胞质中。

外周血血小板内皮细胞黏附分子-1、葡萄糖调节蛋白78水平与冠心病患者经皮冠状动脉介入术后支架内再狭窄的关系

目的探讨外周血血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)水平与冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选取2020年1月至2021年12月期间于邯郸市第二医院确诊为冠心病并行PCI治疗的165例患者,根据患者术后1年支架内狭窄程度分为ISR组37例和非ISR组128例。收集患者术后1个月超敏C反应蛋白(hs-CRP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者术后1个月外周血PECAM-1和GRP78水平。Spearman相关分析法分析外周血PECAM-1和GRP78水平与患者PCI术后冠状动脉狭窄支数和Gensini积分的相关性;多因素Logistic回归分析影响PCI术后发生ISR的因素。结果ISR组与非ISR组患者支架数量、支架长度、支架直径、hs-CRP水平、糖尿病史比较,差异有统计学意义(t/χ2=3.334、3.575、4.612、14.445、7.885,P<0.01);ISR组患者外周血PECAM-1和GRP78表达水平均较非ISR组高,差异有统计学意义(t=17.764、19.422,P<0.01);外周血PECAM-1和GRP78表达水平与ISR患者狭窄支数、Gensini积分均呈正相关(r=0.453、0.501、0.412、0.484,P<0.01);PECAM-1、GRP78、hs-CRP、糖尿病史、支架直径是冠心病患者PCI术后发生ISR的影响因素(OR=1.374、1.381、1.369、1.342、0.894,P<0.05)。结论外周血PECAM-1和GRP78水平在PCI术后发生ISR的冠心病患者中升高,两者均为冠心病患者PCI术后发生ISR的影响因素。

葡萄糖调节蛋白75在糖尿病肾病发生、发展机制中的作用研究进展

糖尿病肾病(DN)是引起终末期肾功能衰竭的主要病因之一,且会显著增加心脑血管疾病的发病率和病死率~([1])。根据国际糖尿病联合会预测,到2045年全世界糖尿病患者人数将达到7亿人,其中30%~40%患者将发展为DN~([2])。

葡萄糖调节蛋白94和转化生长因子-β1与房颤患者预后的相关性

目的探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。方法选择因房颤行射频消融术的住院患者共202例,统一归于房颤组,再依据房颤发生及持续的时间进一步分为阵发性房颤组(n=132)和持续性房颤组(n=70);另选择窦性心律且既往无房颤心律的健康体检者作为对照组(n=55)。通过酶联免疫吸附试验测定患者的血清GRP94及TGF-β1水平,并收集基线资料。出院后以门诊或电话形式对房颤患者进行随访,利用受试者工作特征曲线和Kaplan-Meier生存分析评估血清GRP94、TGF-β1水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。结果在对照组、阵发性房颤组、持续性房颤组中,血清GRP94及TGF-β1水平依次升高。二元Logistic回归分析提示,血清TGF-β1、GRP94和体重指数是房颤发生的独立危险因素。Spearman相关性分析显示,在房颤患者血清中GRP94和TGF-β1水平呈正相关。复发组的TGF-β1高于非复发组,GRP94低于非复发组。二元Logistic回归分析表明,TGF-β1是房颤术后复发的独立危险因素,GRP94是房颤复发的独立保护因素。Kaplan-Meier曲线分析显示,GRP94高水平、TGF-β1低水平的房颤患者消融术后复发的风险低,且未复发时间更长。结论GRP94及TGF-β1水平与房颤密切相关,可能为房颤患者消融术后复发的早期识别、诊断及预防提供依据。

葡萄糖调节蛋白78在原发性肝癌患者癌组织中表达及其与预后的关系

目的探讨葡萄糖调节蛋白78在原发性肝癌(PHC)患者癌组织中表达及其与预后的关系。方法96例PHC患者癌组织(PHC)组和45例正常肝脏组织(对照组)的石蜡包埋标本,采用免疫组化法(IHC)检测GRP78的表达情况。另收集3例PHC患者的癌组织和癌旁组织及3例对照组的正常肝脏组织,采用Western印迹检测癌组织、癌旁组织和正常肝脏组织中GRP78蛋白表达水平的差异。根据GRP78免疫组化结果差异,将96例PHC患者分为GRP78高表达组和低表达组。采用独立样本t检验、χ^(2)检验及方差分析,PHC患者术后生存的影响因素采用Cox风险比例模型分析,Kaplan-Meier生存分析评估PHC患者癌组织中GRP78表达水平与患者5年生存情况的关系。结果PHC组GRP78高表达73例,低表达23例;对照组GRP78高表达9例,低表达36例。与对照组比较,PHC组GRP78高表达率显著升高(P<0.001)。PHC患者癌组织中GRP78表达水平与肿瘤直径、肿瘤细胞分化程度、微血管侵犯和美国癌症联合委员会(AJCC)分期显著相关,随着肿瘤体积的增大及肿瘤细胞分化程度的降低,PHC患者癌组织中GRP78高表达率逐渐升高(P<0.05),GRP78在有微血管侵犯及Ⅲ~Ⅳ期病例中的高表达率显著高于无微血管侵犯和Ⅰ~Ⅱ期的病例组(P<0.05)。Western印迹结果显示,PHC患者癌组织和癌旁组织及对照组正常肝脏组织中GRP78蛋白表达水平有显著差异(P=0.010);与正常肝脏组织相比,PHC患者癌组织和癌旁组织中GRP78蛋白表达水平显著升高(P<0.05),与癌旁组织比较,PHC患者癌组织中GRP78蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。单因素分析结果显示,PHC患者5年生存状态与肿瘤直径、肿瘤细胞分化程度、微血管侵犯、AJCC分期和GRP78表达水平有关(P<0.05);多因素分析结果显示微血管侵犯、AJCC分期和GRP78表达水平是影响PHC患者预后的独立危险因素(P<0.001)。GRP78高表达组5年生存率显著低于GRP78低表达组(Log Rank=4.951,P=0.026)。结论PHC患者癌组织中GRP78表达水平显著升高,且GRP78高表达是患者预后的独立危险因素之一,GRP78有可能作为PHC治疗的潜在靶点。

人葡萄糖调节蛋白94在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞生物学行为的影响

探讨人GRP94(葡萄糖调节蛋白94)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响。收集2015年1月至2016年7月成都医学院第一附属医院有完整病历资料的46例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中GRP94表达水平;采用脂质体转染法将GRP94表达质粒转染入宫颈癌Hela细胞,上调细胞内源GRP94表达;活细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测GRP94对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响。46例宫颈癌患者癌组织中GRP94表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析宫颈癌患者癌组织中GRP94表达与患者临床指标发现,GRP94的表达水平与患者的年龄无关(P>0.05),而与FIGO分期以及病例分级密切相关(P<0.05);转染GRP94表达质粒后,上调宫颈癌Hela细胞内源GRP94表达;相比于对照组和空白组,GRP94转染组的宫颈癌细胞增殖能力显著升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05),细胞的侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。结果显示GRP94在宫颈癌组织中的表达量显著升高,其表达水平的升高与宫颈癌的FIGO分期以及分化程度密切相关;在宫颈癌细胞中的上调GRP94的表达,能够明显提高其细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,表明GRP94的表达与宫颈癌发生发展密切相关。

葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的差异表达

为探讨葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的生物学意义,利用蛋白质免疫印迹、免疫荧光及RNA印迹技术,检测了发育不同时期小鼠脑组织中GRP78、GRP94的表达及分布情况.结果显示:小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94的表达在时间和空间上呈现出显著差异,在脑发育的早中期GRP78表达水平高于GRP94,随发育的进程GRP78不断下降而GRP94逐渐升高,至胚胎发育晚期GRP94表达水平高于GRP78.在E16.5的不同脑区,GRP78的表达呈现出从端脑到后脑逐渐递减的“浓度梯度”分布,而GRP94在不同脑区中表达相同.小鼠出生后,二者作为应激蛋白在脑组织中的表达没有明显的差异性.免疫荧光结果显示,GRP78和GRP94在大脑组织中的分布基本相同,神经细胞和神经胶质细胞的细胞质均有分布.这些观察得到的结果提示,GRP78和GRP94与神经细胞分化和脑的形态建成有关,它们分别在脑发育的不同时期起作用.

胃癌中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达的临床意义及与预后的相关性

目的确定葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)与胃癌(gastric cancer,GC)临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC和切缘组织中GRP78和GRP94的表达;Kaplan-Meier或卡方检验GRP78、GRP94和临床病理资料与GC术后整体生存期相关性。结果 GRP78和GRP94蛋白主要表达于胃癌细胞的胞质及胞膜,其阳性表达与淋巴结转移、TNM分期呈负相关,与分化程度正相关(P<0.05);GRP78、GRP94高表达及低表达GC患者术后平均生存时间分别为(23.51±2.32)个月和(37.54±3.24)个月、(21.31±1.46)个月和(40.02±2.19)个月,5年整体生存率分别为21.23%和41.42%、20.73%和43.86%(log-rank test,P<0.01),TNM分期、GRP78和GRP94是影响GC预后的独立因素。结论 GRP78和GRP94高表达可能是GC预后不良的分子标志物之一。

人乳腺癌中葡萄糖调节蛋白94(Grp94/Gp96)的表达及意义

目的 探讨人乳腺浸润性导管癌中葡萄糖调节蛋白 94 (glucose -regulatedprotein ,GRP94 )的表达与乳腺癌生长、浸润及转移的关系。方法 采用DakoEnvision免疫组织化学染色法对 30例乳腺癌中的GRP94进行免疫组化染色。结果 乳腺浸润性导管癌 30例 ,其中有淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 1例 ,弱阳性 5例 ,阴性 9例 ;无淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 10例 ,弱阳性 2例 ,阴性 3例 ;有淋巴结癌转移组GRP94表达低 ,无淋巴结癌转移组GRP94表达高 ;(P <0 0 5 ) ,两组之间存在显著差异。结论 在乳腺浸润性导管癌中GPR94的表达与转移有关 ,低表达者往往有转移。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对沉默信息调节因子1信号通路的调控作用及其在糖尿病肾病中发挥肾脏保护作用的机制研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病主要并发症之一,是导致终末期肾病的主要原因。钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂是一种新型降糖药物,与其他降糖药物相比,SGLT2抑制剂的降糖优势并不明显,但其肾脏保护作用却很突出。SGLT2抑制剂可以激活沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路促进肾脏细胞自噬,降低氧化应激,改善肾脏缺氧从而保护肾脏,延缓糖尿病肾病进展。SGLT2抑制剂发挥肾脏保护作用的机制可能与其对SIRT1信号通路的影响有关。本文对SGLT2抑制剂通过调控SIRT1发挥肾脏保护作用的研究进展进行综述,旨在总结SGLT2抑制剂对糖尿病肾脏保护作用的机制。

葡萄糖调节蛋白94在结肠腺癌中的表达及其意义

目的探讨结肠腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及其与结肠腺癌分化程度、临床分期及转移等的关系。方法采用免疫组织化学S-P法分别检测结肠腺癌组织、结肠腺瘤组织及正常结肠组织GRP94表达情况,结合临床病理特征光学显微镜下用半定量方法对结果进行统计分析。结果正常组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有GRP94表达,其表达程度呈递增趋势。其表达程度随着细胞分化的降低、临床分期的增加及肿瘤转移而增高,与患者性别、年龄无关。结论GRP94的高表达可能参与结肠癌的发生、发展,对结肠癌肿瘤细胞有保护作用,抑制GRP94的表达有可能抑制肿瘤生长。

葡萄糖调节蛋白94在人胚胎发育中的表达

目的为探讨葡萄糖调节蛋白９４（ＧＲＰ９４）在胚胎发育中的作用，研究了１０～３１周人胎组织ＧＲＰ９４的定位及表达。方法用ＳＰ免疫组织化学方法。结果结肠粘膜上皮、肾小管上皮及肝细胞的胞质内，在１０周已有ＧＲＰ９４的表达，１８～２０周时表达增多，一直维持较高水平。胃粘膜上皮及心肌细胞也有较强的表达。肺、骨骼肌、脊髓及胸腺未见表达。结论ＧＲＰ９４存在着基础表达，可能在某些器官的发育过程中起作用。

葡萄糖激酶调节蛋白基因rs780094多态性与冠心病痰瘀互阻证的关系探讨

目的分析葡萄糖激酶调节蛋白基因rs780094多态性与冠心病痰瘀互阻证之间的关系。方法收集206例冠心病病人病史及实验室数据资料,提取DNA测序并进行rs780094多态性分析。依据是否为痰瘀互阻证将病人分为两组,进行统计分析。结果痰瘀互阻证冠心病病人较非痰瘀互阻证病人的血糖稍高[(6.09±2.36)mmol/L与(5.98±2.13)mmol/L,P=0.574],但未达到统计学意义。冠心病痰瘀互阻组中,rs780094 CC基因型的比例高于非痰瘀互阻证组(28.75%与14.29%,P=0.013),其等位基因C的比例也高于非痰瘀互阻证组(53.75%与39.68%,P=0.006)。Logistic回归结果显示,rs780094 CC基因型与冠心病痰瘀互阻证显著相关。结论冠心病痰瘀互阻证型与rs780094多态性存在显著关联,其分子机制有待进一步研究。

葡萄糖调节蛋白78表达与非小细胞肺癌临床病理特征相关性Meta分析

目的:应用Meta分析探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理学特征的相关性。方法:检索考克兰图书馆(Cochrane Library)、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献服务系统(Sino Med)、维普(VIP)、万方(Wanfang Data)、Pub Med数据库、Embase数据库中关于GRP78的表达与非小细胞肺癌临床病理学特征的相关性文献,根据纳入及排除标准筛选文献。采用Rev Man5.4和Stata SE12.0软件分析纳入文献资料中GRP78蛋白的表达与非小细胞肺癌的年龄、性别、分化程度、淋巴结转移、临床分期及病理类型的相关性。结果:纳入的11篇文献中,将共计1177例非小细胞肺癌患者样本进行分析。结果显示:GRP78在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织[OR=8.49,95%CI(3.50,20.59),Z=4.73,P<0.00001];GRP78的高表达与非小细胞肺癌组织低分化[OR=2.75,95%CI(1.69,2.37),Z=2.37,P=0.02]、Ⅲ-Ⅳ期(TNM分期)[OR=0.37,95%CI(0.25,0.55),P<0.00001]、淋巴结转移[OR=0.65,95%CI(0.45,0.94),Z=2.30,P=0.02]有统计学意义;GRP78的表达与非小细胞肺癌的病理类型[OR=1.19,95%CI(0.86,1.65),Z=1.08,P=0.28]无统计学意义;GRP78的表达在不同性别[OR=1.02,95%CI(0.77,1.35),Z=0.11,P=0.91]和不同年龄段[OR=1.03,95%CI(0.57,1.88),Z=0.1,P=0.92]的非小细胞肺癌患者中的表达无统计学差异。结论:GRP78的高表达与非小细胞肺癌患者的临床病理特征密切相关,并且参与非小细胞肺癌的发生和发展。

中医药干预葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达在糖尿病周围神经细胞凋亡的实验研究进展

糖尿病周围神经病变是威胁糖尿病患者健康的重要隐患。在多民族成人2型糖尿病的一项INTERPRET-DD研究中,该病的总体患病率为26.71%[1];据统计,2017年世界范围内糖尿病患者大约有4.51亿,预计到2045年被确诊患有糖尿病的人将增长到6.93亿[2]。

葡萄糖调节蛋白94在宫颈病变中的表达

目的研究葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)在宫颈病变及HPV感染中的表达及意义.方法选取2014年10月至2016年6月在昆明医科大学第二附属医院妇科门诊就诊或住院部行宫颈癌筛查(HPV、TCT),并因任一结果异常行阴道镜下活检术的患者,留取宫颈组织备用,最终根据病检结果选取正常宫颈组织40例;CIN I30例;CINII^III 30例;年龄范围为25~55岁.已行宫颈病变治疗及妊娠患者不纳入研究范围.用Western Blot法检测正常宫颈组织中以及CIN I、CINⅡ/Ⅲ组织中GRP94蛋白表达.结果正常宫颈组织中GRP94阴性、阳性表达分别占65.0%、35.0%;CINI组织中阴性、阳性分别为40.0%、60.0%;CINⅡ/Ⅲ组织中阴性、阳性分别占26.6%、73.3%.3个组阳性率总体上差异有统计学意义(P<0.05),两两比较发现:CINⅡ/Ⅲ的阳性率高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);CIN I的阳性率与正常组、CINⅡ/Ⅲ的阳性率相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 GRP94在宫颈上皮内瘤变中呈现高表达,而在正常宫颈组织中呈现低表达,GRP 94与宫颈病变进展的发生发展密切相关.

肿瘤相关糖蛋白72和葡萄糖调节蛋白94在乳腺良恶性病变组织中的表达及其意义

目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中TAG72和GRP94的表达,并进行评分。应用Kaplan-Meier法对乳腺癌患者进行生存分析。结果:乳腺癌组织中TAG72和GRP94表达的阳性率分别为68.3%和63.3%,其总评分分别为2.53±1.86和2.73±2.23;乳腺良性病变组织的TAG72和GRP94表达阳性率分别为10.0%和13.3%,其总评分分别为0.37±1.13和0.47±1.22;乳腺癌组织与乳腺良性病变组织相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。导管内癌、组织学分级为Ⅰ或Ⅱ级、肿瘤最大径≤3cm、无淋巴结转移、雌激素受体阳性、p53阴性及CA15-3阴性乳腺癌患者的TAG72和GRP94表达阳性率及其评分均明显低于浸润性导管癌(P<0.05)、组织学分级Ⅲ级(P<0.01)、肿瘤最大径>3cm(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、雌激素受体阴性(P<0.05)、p53阳性(P<0.01)和CA15-3阳性(P<0.01)的乳腺癌患者。TAG72和GRP94表达阳性的乳腺癌患者及两者均表达阳性的乳腺癌患者的术后生存期明显短于阴性表达者(P<0.01)。COX多因素分析结果显示,TAG74和(或)GRP94表达阳性均与术后生存率呈负相关,与死亡率呈正相关,均是独立的预后因素。结论:TAG72和GRP94表达在乳腺癌的发生、发展、临床生物学行为及预后方面可能具有重要作用,TAG72和(或)GRP94表达阳性的乳腺癌患者预后不良。

葡萄糖调节蛋白94在膀胱肿瘤中的表达及其对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响

目的观察葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在膀胱肿瘤组织和细胞中的表达情况,并下调膀胱肿瘤细胞内GRP94表达,检测其对肿瘤细胞凋亡及迁移能力的影响,探讨其可能机制。方法选取35例膀胱尿路上皮癌组织和35例癌旁组织,应用免疫组化方法检测GRP94在两种组织中的表达,同时应用Western blot法检测GRP94在正常膀胱上皮细胞株和膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达;设计合成可靶向结合GRP94序列的小干扰RNA(siGRP94),将其导入膀胱尿路上皮癌SW780细胞株,随后应用Western blot法检测SW780细胞内GRP94的表达情况;并分别应用流式细胞术检测凋亡率,Transwell法检测迁移能力;同时应用Western blot法检测细胞内caspase-9、Bcl-2、Bax和vimentin表达情况。结果膀胱尿路上皮癌组织中GRP94表达的平均光密度值明显高于癌旁组织(P<0.01),膀胱尿路上皮癌细胞株中GRP94表达明显高于正常膀胱上皮细胞株(P<0.01);siGRP94转染后48 h,SW780细胞内GRP94表达较空白组和阴性对照组明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显上升(P<0.01),同时迁移能力明显下降(P<0.01);凋亡调控蛋白中,caspase-9前体表达下调同时剪切体表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调同时Bax表达上调(P<0.01);细胞迁移相关蛋白波形蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论GRP94在膀胱尿路上皮癌中呈高表达,下调其表达水平可诱导膀胱肿瘤细胞发生凋亡并抑制细胞迁移能力,GRP94可能具有成为膀胱肿瘤治疗靶基因的潜力。