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人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)与BcL-2家族中促凋亡蛋白分子Bim的相互作用 被引量:2
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作者 夏鹏 陈金中 +2 位作者 王臻臻 鄢进 董长垣 《长江大学学报(自科版)(下旬)》 CAS 2012年第9期1-4,79,共4页
目的:探讨人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)与Bcl-2家族中的促凋亡蛋白分子Bim之间的相互作用。方法:借助PlexA-bimL技术从人胎脑文库筛选PSMB4,借助显微共聚焦技术探讨PSMB4与Bim相互作用的亚细胞定位,应用免疫共沉淀技术探讨PSMB4与Bim的... 目的:探讨人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)与Bcl-2家族中的促凋亡蛋白分子Bim之间的相互作用。方法:借助PlexA-bimL技术从人胎脑文库筛选PSMB4,借助显微共聚焦技术探讨PSMB4与Bim相互作用的亚细胞定位,应用免疫共沉淀技术探讨PSMB4与Bim的相互作用。结果:PSMB4与Bim存在于同一细胞中,PSMB4和Bim在空间上存在相互作用。结论:PSMB4和Bim有可能存在空间位置上的共定位;PSMB4在细胞内能够与Bim发生相互作用。 展开更多
关键词 人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4) BIM 相互作用
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人蛋白酶体β亚基4型在肝细胞癌中的表达及与预后的关系
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作者 陆谦 朱李瑢 +2 位作者 程欣 黄华 陈钟 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期372-376,共5页
目的 探讨人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)在肝细胞癌(以下简称肝癌)组织及正常肝组织中的表达及其在临床预后中的意义。方法 收集2017年1月-10月在南通大学附属医院行手术治疗的8例肝癌组织及癌旁组织标本,应用Western Blot法检测肝癌组织... 目的 探讨人蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)在肝细胞癌(以下简称肝癌)组织及正常肝组织中的表达及其在临床预后中的意义。方法 收集2017年1月-10月在南通大学附属医院行手术治疗的8例肝癌组织及癌旁组织标本,应用Western Blot法检测肝癌组织及相应癌旁组织中PSMB4蛋白的表达情况。另收集2009年1月-2012年10月南通大学附属医院留存的105例肝癌组织和25例正常肝组织的石蜡包埋标本,应用免疫组化法进一步检测PSMB4的表达情况。根据PSMB4免疫组化结果差异将105例肝癌患者分为PSMB4高表达组(n=57)和PSMB4低表达组(n=48)。计量资料2组间比较采用独立样本t检验;计数资料2组间比较采用χ2检验。Cox风险回归模型分析2组患者临床病理特征及预后的关系,Kaplan-Meier生存曲线分析不同PSMB4水平患者的生存情况。结果 2组间HBV感染、肿瘤最大直径、肿瘤分化程度、TNM分期比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为22.482、8.219、14.964、6.587,P值均<0.05)。105例肝癌患者中57例(54.29%)为PSMB4 高表达,48例(45.71%)为PSMB4低表达;而25例正常肝组织中8例(32%)为PSMB4高表达,17例(68%)为PSMB4低表达或不表达,2组表达情况比较差异有统计学意义(χ^2=4.011, P<0.05)。PSMB4染色主要分布于细胞浆和细胞核内,染色呈棕色及棕黄色颗粒样。8例新鲜肝癌及癌旁组织样本中有7例肝癌组织的PSMB4蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P值均<0.05)。单因素分析显示患者的5年生存状态与肿瘤大小(P=0.01)、转移情况(P<0.001)、分化程度(P=0.01)、TNM分期(P=0.003)以及PSMB4表达水平(P<0.001)有关;多因素结果显示肿瘤转移[风险比(HR)=11.375,95%可信区间(95%CI):4.911~26.348)]和PSMB4高表达(HR=6.834,95%CI: 2.939~15.889)是肝癌患者的独立危险因素(P值均<0.001)。PSMB4高表达组患者5年生存率明显低于PSMB4低表达组(27.6% vs 79.2%, χ^2=22.96,P<0.05)。结论 PSMB4在肝癌组织中的表达增高,并且其高表达是肝癌患者预后的独立危险因素,PSMB4有可能作为肝癌预后的潜在标志及治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝细胞 人蛋白酶体β亚基4型 分子靶向治疗 预后
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蛋白酶体β亚基4型对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响 被引量:1
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作者 陆谦 程欣 +1 位作者 夏振国 陈钟 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期592-595,共4页
目的旨在探讨蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响及其可能的机制。方法利用特异性短发夹RNA(shRNA)技术构建干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞;运用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞... 目的旨在探讨蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响及其可能的机制。方法利用特异性短发夹RNA(shRNA)技术构建干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞;运用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western Blot检测相关蛋白的表达变化。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果成功构建了干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞(shRNA1:t=22.67,P<0.0001;shRNA2;t=30.88,P<0.0001;shRNA3:t=67.82,P<0.0001)。MTT实验显示第4天(0.4770±0.0135 vs 0.3237±0.0127,t=8.286,P=0.0012)、第5天(0.5893±0.0088 vs 0.3847±0.0090,t=16.220,P<0.0001)实验组细胞OD490值显著低于对照组。克隆形成实验显示细胞集落数显著减少。流式细胞术显示实验组细胞的早期凋亡率[(5.5570±0.2589)%vs(3.8870±0.3324)%,t=3.964,P=0.0166]、晚期凋亡率[(12.6300±0.4198)%vs(5.3100±0.3062)%,t=14.080,P=0.0001]及总凋亡率[(18.1800±0.6785)%vs(9.1970±0.6313)%,t=9.967,P=0.0006]均明显高于对照组,且干扰PSMB4表达的实验组细胞中核因子-κB亚基p65蛋白表达降低(0.8015±0.0120 vs 0.2841±0.0110,t=31.830,P<0.0001),核因子-κB抑制蛋白α表达增加(0.4816±0.0112 vs 0.6583±0.0142,t=9.774,P=0.0006)。结论干扰PSMB4表达可能通过抑制NF-κB信号通路,从而导致肝癌SMMC7721细胞的增殖存活能力下降。 展开更多
关键词 肝细胞 蛋白酶体β亚基4 细胞增殖 细胞存活
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中国地鼠26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13的表达鉴定及生物信息学分析
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作者 郭民 原梦 +6 位作者 秦轲茹 霍怡彤 王文桃 杜凯艳 张瑞虎 王海龙 陈朝阳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期15-21,共7页
目的鉴定26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13(PSMD13)在Ⅱ型糖尿病中国地鼠的表达及对其理化性质、信号肽、亚细胞定位、功能结构域等进行分析,为深入研究其功能提供理论依据。方法荧光定量PCR法检测PSMD13 mRNA在中国地鼠和糖尿病地鼠肝、... 目的鉴定26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13(PSMD13)在Ⅱ型糖尿病中国地鼠的表达及对其理化性质、信号肽、亚细胞定位、功能结构域等进行分析,为深入研究其功能提供理论依据。方法荧光定量PCR法检测PSMD13 mRNA在中国地鼠和糖尿病地鼠肝、骨骼肌、脂肪和小肠组织的表达;PSMD13氨基酸序列从NCBI网站下载,氨基酸同源性分析采用DNAman软件;PSMD13蛋白的理化性质分析采用Prot Param在线工具;PSMD13蛋白的亲疏水性、信号肽、亚细胞定位采用Prot Scale软件分析;PSMD13蛋白结构域、二级结构分别采用Conserved Domain数据库和SOPMA工具分析;PSMD13蛋白质的互作蛋白及功能网络采用STRING数据库分析。结果RT-qPCR结果显示PSMD13 mRNA在糖尿病地鼠脂肪组织中表达下降;PSMD13位于中国地鼠第3号染色体,含有13个外显子,相对分子质量为42942.48,含有378个氨基酸残基;PSMD13理论等电点为6.1,属酸性蛋白;其与小鼠、大鼠、果蝇、猩猩和人PSMD13的氨基酸序列同源性高达97.78%;PSMD13蛋白质无信号肽、无跨膜结构,主要位于细胞质中;PSMD13蛋白质羧基端含有一个PCI结构域,与PSMD7、PSMD8、PSMA3、PSMC1和USP14等相互作用,参与泛素依赖性蛋白质分解代谢过程。结论PSMD13在糖尿病中国地鼠脂肪组织中表达下降,该蛋白质在进化上高度保守,参与蛋白质的蛋白酶体降解途径,其表达下调可能参与糖尿病的发生发展。 展开更多
关键词 中国地鼠 糖尿病 26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13蛋白 生物信息学
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合浦珠母贝26S蛋白酶体S4,S7亚基基因片段的分离与分析 被引量:4
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作者 姜铁民 张勇 +3 位作者 黄洁 谢莉萍 吴移谋 张荣庆 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期28-34,共7页
26S蛋白酶体是真核生物中一种具有ATP依赖性的蛋白酶复合体 ,主要通过泛肽途径选择性降解细胞内与代谢调控、细胞周期有关的功能蛋白及异常蛋白 ,参与多种细胞活动的调控过程。26S蛋白酶体由具有催化活性的20S亚复合体和一个具有调节作... 26S蛋白酶体是真核生物中一种具有ATP依赖性的蛋白酶复合体 ,主要通过泛肽途径选择性降解细胞内与代谢调控、细胞周期有关的功能蛋白及异常蛋白 ,参与多种细胞活动的调控过程。26S蛋白酶体由具有催化活性的20S亚复合体和一个具有调节作用的19S亚复合体组成 ,其中19S亚复合体中的ATP酶亚基是调节26S蛋白酶体活性的重要组件。本文通过简并引物PCR手段 ,从软体动物合浦珠母贝(Pinctadafucata)中扩增到参与构成19S亚复合体的S4和S7(MSS1)两个亚基的基因片段。这两个基因片段所编码的ATP酶组件包含有Gx4GKT,DEID ,SAT和H/QRxGRxxR等26S蛋白酶体ATP酶亚基的共同功能基序。这是首次在软体动物中报道26S蛋白酶体的ATP酶亚基基因序列 。 展开更多
关键词 合浦珠母贝 26S蛋白酶体 S4亚基 S7亚基 分离 基因序列 软体动物 AIP酶亚基
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人蛋白酶体α亚基3型(PSMA3)对促细胞凋亡蛋白分子Bim的影响
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作者 鄢进 陈金中 +2 位作者 王臻臻 夏鹏 黎七雄 《长江大学学报(自科版)(下旬)》 CAS 2013年第5期1-4,114,共4页
目的:探讨人蛋白酶体α亚基3型(PSMA3)和Bc1-2家族中的促细胞凋亡蛋白分子Bim之间是否存在相互作用,并初步了解PSMA3对细胞凋亡的影响。方法:借助PlexA-bimL技术从人胎脑PB42AD文库筛选PSMA3;借助显微共聚焦技术探讨PSMA3与BIM相互作用... 目的:探讨人蛋白酶体α亚基3型(PSMA3)和Bc1-2家族中的促细胞凋亡蛋白分子Bim之间是否存在相互作用,并初步了解PSMA3对细胞凋亡的影响。方法:借助PlexA-bimL技术从人胎脑PB42AD文库筛选PSMA3;借助显微共聚焦技术探讨PSMA3与BIM相互作用的亚细胞定位;应用免疫共沉淀技术、Western技术探讨PSMA3与BIM的相互作用;通过流式细胞仪技术初探PSMA3能否通过调节BIM来对细胞凋亡产生影响。结果:在人胎脑pB42AD文库用pLexA-bim L筛选得到121个阳性克隆,测序分析发现其中有11条基因重复1次以上。其中TUBB5、GRB10、MIF、FHC等基因都有文献报道其与细胞凋亡有直接关系;内共定位表明,PSMA3-RFP(红色)和GFP-BimL(绿色)的荧光分布区域主要存在于细胞胞浆区,并且在相同视野下的PSMA3-RFP和GFP-BimL的荧光分布图叠加,提示在细胞内PSMA3和Bim在空间上存在相互作用的可能性;免疫共沉淀结果表明,外源表达的PSMA3能与GFP-tagged BimL在HEK293细胞内相互作用,特别是在过表达Bim的凋亡细胞中。结论:PSMA3可以与Bim相结合并对细胞凋亡有一定的影响。 展开更多
关键词 人蛋白酶体α亚基3 BIM 细胞凋亡
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烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体α亚基Btα4基因的克隆和序列分析 被引量:2
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作者 姚明德 杨亦桦 +1 位作者 武淑文 吴益东 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期61-66,共6页
利用RT-PCR和RACE技术,对烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基的1个基因进行了克隆和序列分析。获得的烟粉虱nAChRα亚基基因的全长cDNA序列含有2 090 bp,其开放阅读框编码564个氨基酸。根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫乙酰胆... 利用RT-PCR和RACE技术,对烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基的1个基因进行了克隆和序列分析。获得的烟粉虱nAChRα亚基基因的全长cDNA序列含有2 090 bp,其开放阅读框编码564个氨基酸。根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫乙酰胆碱受体α亚基氨基酸序列之间的相似性,将该基因命名为Btα4(GenBank注册号为EF590120)。Btα4编码的α亚基含有2个结构域:N端的胞外结构域和C端的跨膜结构域,N端的胞外结构域含有2个相邻的半胱氨酸(α亚基特征序列)、15个氨基酸构成的半胱氨酸环和乙酰胆碱结合区。研究结果对于揭示烟粉虱潜在的对新烟碱类杀虫剂靶标抗性的分子机制具有重要意义。 展开更多
关键词 烟粉虱 烟碱乙酰胆碱受体 Α亚基 Bta4 新烟碱类杀虫剂
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α4亚基Arg-188和Pro-198突变促进α4β2烟碱型乙酰胆碱受体开放
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作者 俞柳彤 王柳珺 +2 位作者 长孙东亭 吴勇 罗素兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期673-679,共7页
目的:探讨乙酰胆碱、尼古丁、伐尼克兰和金雀花碱4种激动剂与α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)及其突变体相互作用的活性关键位点。方法:体外转录法制备野生型(wt)与突变型α4亚基cRNAs,注射入非洲爪蟾卵母细胞,应用电生理方法,测定4... 目的:探讨乙酰胆碱、尼古丁、伐尼克兰和金雀花碱4种激动剂与α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)及其突变体相互作用的活性关键位点。方法:体外转录法制备野生型(wt)与突变型α4亚基cRNAs,注射入非洲爪蟾卵母细胞,应用电生理方法,测定4种激动剂对α4β2 nAChRs及其突变体的门控活性。结果:乙酰胆碱对wtα4β2、α4(R188I)β2、α4(P198Q)β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的半数有效浓度(EC50)分别为67.15、63.83、22.43和1.37μmol/L,尼古丁对wtα4β2、α4(R188I)β2、α4(P198Q)β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的EC50分别为1.43、0.63、1.05和0.27μmol/L。与乙酰胆碱(10 mmol/L)诱导的峰值电流幅度相比,金雀花碱对wtα4β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的最大激动效率(E_(max))从37.62%提升至95.14%,伐尼克兰对wtα4β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的E_(max)也从67.94%提升至94.69%。结论:α4亚基第188位精氨酸(argi⁃nine,Arg,R)和第198位脯氨酸(proline,Pro,P)分别突变成异亮氨酸(isoleucine,Ile,I)和谷氨酰胺(glutamine,Gln,Q)后,增强了α4β2 nAChRs对乙酰胆碱和尼古丁的敏感性,并提高了α4β2 nAChRs对金雀花碱与伐尼克兰的通道开放效率。 展开更多
关键词 α4β2烟碱乙酰胆碱受体 α4亚基突变 双电极电压钳
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朱砂叶螨烟碱型乙酰胆碱受体α4亚基基因的克隆与序列特征分析
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作者 高品 王帅 +2 位作者 管学琼 卜春亚 师光禄 《北京农学院学报》 2015年第4期1-8,共8页
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编... 烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编码544个氨基酸。预测分子量(Mr)为62.20kDa,等电点(pI)为5.00。根据同源性及系统发育分析,将其命名为Tcα4,提交至NCBI数据库,获得GenBank登陆号为KP694228。Tcα4具有nAChRα亚基典型结构特征:N端胞外结构域和C端跨膜结构域。Tcα4与二斑叶螨nAChRα4亚基基因序列同源性高达98.71%,与二斑叶螨其他nAChR亚基基因同源性仅在20.07%~43.16%之间,与其他昆虫nAChRα4亚基基因同源性在45.96%~56.07%之间。系统发育分析结果表明朱砂叶螨与二斑叶螨和肩突硬蜱nAChRα4亚基基因在同一分支,与其他昆虫nAChRα4亚基基因则较远。朱砂叶螨nAChRα4亚基基因的克隆为朱砂叶螨其他nAChR亚基基因的研究及以nAChR为作用靶标的新型杀螨剂的研究提供了一种新途径,奠定了基础。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 烟碱乙酰胆碱受体 α4亚基 基因克隆 序列分析
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烟碱型乙酰胆碱受体β4亚基点突变体的构建
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作者 张璐 朱晓鹏 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《热带生物学报》 2019年第4期307-313,共7页
利用PCR介导的定点突变技术构建包含β4亚基的烟碱型乙酰胆碱受体点突变体模型,同时采用双电极电压钳技术,对激动剂ACh和拮抗剂α-CTx RegIIA对突变受体的活性进行检测。结果表明:β4亚基胞外N端序列第168位的异亮氨酸(Ile)成功突变成... 利用PCR介导的定点突变技术构建包含β4亚基的烟碱型乙酰胆碱受体点突变体模型,同时采用双电极电压钳技术,对激动剂ACh和拮抗剂α-CTx RegIIA对突变受体的活性进行检测。结果表明:β4亚基胞外N端序列第168位的异亮氨酸(Ile)成功突变成了丝氨酸(Ser),突变后的受体对激动剂ACh的活性降低,对拮抗剂α-CTx RegIIA的活性降低了1.4倍,半阻断剂量(IC50)为170 nmol·L^-1。 展开更多
关键词 烟碱乙酰胆碱受体 β4亚基 PCR介导的定点突变 双电极电压钳技术
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五指山小型猪PMSA6基因cDNA克隆及生物信息学分析 被引量:3
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作者 刘涛 申明霞 +4 位作者 杜丽 程立生 王凤阳 成鹰 李治深 《海南大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第2期134-138,143,共6页
为了对海南五指山小型猪蛋白酶体亚基α型6(proteasome subunit alpha type 6,PMSA6)cDNA基因进行克隆和生物信息学分析,笔者以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到PMSA6全长cDNA,并向GenBank递交... 为了对海南五指山小型猪蛋白酶体亚基α型6(proteasome subunit alpha type 6,PMSA6)cDNA基因进行克隆和生物信息学分析,笔者以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到PMSA6全长cDNA,并向GenBank递交了该序列(登录号:FJ358606).同时运用生物信息学软件对该基因核苷酸序列进行了分析,并预测了其编码蛋白的理化性质及二级结构等.生物信息学分析表明:该cDNA全长1029 bp,5′非翻译区长96 bp,3′非翻译区长192 bp,含有一个741 bp完整的开放阅读框,编码246个氨基酸.该蛋白的分子量为37.680 kD,等电点为8.76.进一步比对分析发现,五指山小型猪PMSA6基因的核酸序列及其氨基酸序列与人、牛等哺乳动物具有很高的相似性.本研究成功克隆了海南五指山小型猪PM-SA6基因cDNA,并进行了相关生物信息学分析,为进一步研究PMSA6在动物体内的作用机理奠定了基础. 展开更多
关键词 五指山小 CDNA文库 蛋白酶体亚基α6 克隆 生物信息学分析
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红麻RPT4全长cDNA的克隆及其在红麻花药中的表达 被引量:1
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作者 李刚 关和新 +2 位作者 牛英 周琼 周瑞阳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1323-1330,共8页
【目的】克隆红麻细胞质雄性不育系与保持系花药中差异表达蛋白RPT4相应基因的cDNA全长,分析该基因在花药中的表达。【方法】采用同源克隆法和RACE技术相结合,从保持系L23B花药总RNA中克隆RPT4全长cDNA。通过半定量RT-PCR检测花粉小孢... 【目的】克隆红麻细胞质雄性不育系与保持系花药中差异表达蛋白RPT4相应基因的cDNA全长,分析该基因在花药中的表达。【方法】采用同源克隆法和RACE技术相结合,从保持系L23B花药总RNA中克隆RPT4全长cDNA。通过半定量RT-PCR检测花粉小孢子败育前、败育期间和败育晚期该基因在不育系和保持系间花药中的表达差异。【结果】克隆得到1 596 bp的cDNA全长,最长开放阅读框(ORF)1 197 bp,编码398个氨基酸的肽序列;该蛋白与蓖麻中直系同源蛋白的相似性最高,达91.93%,内含3个模体Walker A、Walker B和arginine finger的保守域,暗示其具有复杂多样的重要功能。RPT4的mRNA在红麻不育系和保持系花药中均有表达,但在四分体前(败育前),不育系和保持系中的表达量一致;在小孢子单核期(败育期),不育系花药中的表达量比保持系中的低;而小孢子双核期(败育晚期)的表达变化则相反。【结论】RPT4参与红麻小孢子的发育过程,可能具有与红麻细胞质雄性不育相关的复杂分子功能。 展开更多
关键词 红麻 细胞质雄性不育 26S蛋白酶体调节亚基4 同重标签相对与绝对定量
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高浓度氧暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸表达的影响 被引量:1
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作者 黄光焰 常立文 +4 位作者 汪鸿 蔡成 刘伟 李文斌 陈燕 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期516-518,共3页
目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态... 目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态时随机分为高氧组和空气组。高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧体积分数>900mL/L,CO2体积分数为50mL/L;空气组仍置于含50mL/L CO2培养箱中。二组分别于高氧或空气暴露6、12、24h提取细胞RNA,采取半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定ND4 mRNA的表达;采用免疫细胞化学染色法检测细胞爬片ND4蛋白的表达。结果与空气组比较,免疫细胞化学结果显示高氧暴露6、12h ND4的表达无显著性差异(Pa>0.05),高氧暴露24h ND4的表达显著减弱(P<0.05);RT-PCR检测显示高氧暴露6h ND4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05),高氧暴露12、24h ND4 mRNA表达显著减弱(Pa<0.05)。结论高氧暴露下调早产SD大鼠AECⅡ ND4 mRNA和蛋白水平的表达,这种改变可能参与高氧肺损伤的发病过程。 展开更多
关键词 高氧症 早产 肺泡Ⅱ上皮细胞 还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-脱氢酶亚基4
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miR-451通过靶向Psmb8抑制糖尿病肾病小鼠肾小球系膜细胞炎症反应 被引量:14
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作者 姜文豪 孙艳 +2 位作者 彭睿 彭惠民 张政 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期494-499,共6页
目的:探讨微小RNA-451(miR-451)对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells,MCs)炎症发生的抑制作用及靶向β型蛋白酶体亚基8(proteasome subunitβtype 8,Psmb8)基因的调控机制。方法:分别将MCs培养于低糖和高糖DMEM培养基中,q ... 目的:探讨微小RNA-451(miR-451)对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells,MCs)炎症发生的抑制作用及靶向β型蛋白酶体亚基8(proteasome subunitβtype 8,Psmb8)基因的调控机制。方法:分别将MCs培养于低糖和高糖DMEM培养基中,q PCR检测miR-451的表达水平;q PCR检测过表达miR-451后炎症相关因子IL-18和TNF-α的m RNA表达水平;Western blot检测IL-18、TNF-α及Psmb8的蛋白表达水平;Western blot检测低表达Psmb8的MCs中IL-18和TNF-α蛋白的相对表达水平。结果:高糖组MCs的miR-451表达水平较低糖组明显降低(P<0.01),而Psmb8表达却显著增高(P<0.01)。进一步在高糖组过表达miR-451后,Psmb8的表达水平明显降低(P<0.01),炎症相关因子IL-18和TNF-α表达水平亦明显降低(P<0.01)。同时,在高糖组中沉默Psmb8后,IL-18和TNF-α表达水平降低(P<0.01)。结论:miR-451在高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞中靶向抑制Psmb8的表达,降低炎症相关因子IL-18和TNF-α蛋白的表达,从而缓解高糖诱导的肾小球系膜细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 微小RNA-451 炎症 β蛋白酶体亚基8 肾小球系膜细胞
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内源性大麻素对海马神经元AMPA受体GluR2的作用 被引量:2
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作者 刘曌宇 高杨 +2 位作者 孙思斯 陈绍洋 王强 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2015年第3期229-233,共5页
目的探索内源性大麻素预处理对小鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经元α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体2亚基(GluR2)表达的影响及机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、2-花生酰基甘油(2-AG)处理组、大麻素1... 目的探索内源性大麻素预处理对小鼠全脑缺血再灌注损伤后海马神经元α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体2亚基(GluR2)表达的影响及机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、2-花生酰基甘油(2-AG)处理组、大麻素1型受体(CB1R)拮抗剂(AM251)+2-AG组和溶剂组。2-AG处理组腹腔注射2-AG 5 mg/kg;AM251+2-AG组腹腔注射AM251 1 mg/kg,30 min后腹腔给予2-AG 5 mg/kg;溶剂组腹腔给予0.1 ml二甲基亚砜(DMSO)。各组小鼠在预处理后30 min采用夹闭双侧颈总动脉20 min行再灌注的方法制备全脑缺血再灌注损伤模型。再灌注2 h取材行Western blot及免疫荧光检测。结果 GluR2高表达于正常小鼠海马CA1区锥体神经元;C57小鼠全脑缺血20 min,再灌后2 h海马组织GluR2表达明显下调(P<0.05);与模型组比较,2-AG处理组海马组织GluR2明显增高(P<0.05);与2-AG处理组比较,AM251+2-AG组海马组织GluR2明显下降(P<0.05)。结论内源性大麻素2-AG作用于神经元CB1R,逆转全脑缺血损伤导致的海马神经元GluR2表达下降。 展开更多
关键词 内源性大麻素 全脑缺血 α-氨基-3羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体2亚基 内源性大麻素1受体 小鼠
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PI4KⅡα通过调控HIF-1α影响肿瘤诱导的血管新生
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作者 李江美 陆宇 +2 位作者 张锦华 秦志海 陈畅 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期212-213,共2页
背景:肌醇磷脂4位激酶(PI4K),作为PI信号通路中第一个起重要作用的激酶在肌醇磷脂循环过程中能催化肌醇磷脂(PI)
关键词 肌醇磷脂4位激酶α(PI4KⅡα) 肿瘤诱导的血管新生 缺氧诱导因子α亚基(HIF-1α)
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SMARCA4缺失的肿瘤2例并文献回顾 被引量:1
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作者 郭珊珊 高萌 +1 位作者 陈文文 孙蕾芳 《中国临床研究》 CAS 2021年第6期811-814,共4页
目的探讨SWI/SNF染色体重塑复合体的亚基之一——SMARCA4缺失肿瘤2例的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2018年6月-2019年11月青岛市中医医院的SMARCA4缺失肿瘤2例,复阅病理形态特征,采用免疫组织化学方法检测SMARCA4/BRG1、AE... 目的探讨SWI/SNF染色体重塑复合体的亚基之一——SMARCA4缺失肿瘤2例的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2018年6月-2019年11月青岛市中医医院的SMARCA4缺失肿瘤2例,复阅病理形态特征,采用免疫组织化学方法检测SMARCA4/BRG1、AE1/AE3、Ki-67、Syn等的表达,并分析2例病例在病理学特征上以及免疫组织化学的表型上的相关性,且结合文献复习进行讨论。结果病理结果证实,1例为SMARCA4缺失的未分化肉瘤和1例为SMARCA4缺失的高钙血症型小细胞癌。2例在病理组织学形态上相似,低倍镜下肿瘤细胞呈弥漫浸润性或巢团状生长,常围绕血管生长,肿瘤性坏死明显;高倍镜下见肿瘤细胞主要呈横纹肌样或上皮样形态,胞质嗜酸性或者透明,核圆形,核仁明显,核分裂象易见。免疫表型:2例SMARCA4/BRG1均缺失,Vimentin胞浆阳性表达、Syn局灶阳性,AE1/AE3均为阴性,Ki-671例60%,另1例80%。结论SMARCA缺失的相关性肿瘤在病理学形态上及免疫组化表达上具有一定的相似性,有待收集更多的病例予以分析证实。 展开更多
关键词 SWI/SNF染色体重塑复合体的亚基 SMARCA4缺失 未分化肉瘤 高钙血症小细胞癌 病理学特征 免疫组化
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桂皮醛抗糖尿病作用及其分子机制 被引量:3
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作者 张维 徐焱成 +3 位作者 郭方健 李鸣一 孟晔 夏茜娅 《中华糖尿病杂志》 CAS 2009年第6期-,共6页
目的 观察桂皮醛抗糖尿病的效果并探讨其药理机制.方法 将清洁级雄性Wistar大鼠40只分为正常对照组(8只,普通饮食),其余32只大鼠予高脂高糖饮食、链脲佐菌素,造成2型糖尿病成模大鼠(24只),分为糖尿病对照组、二甲双胍治疗组(200 mg·... 目的 观察桂皮醛抗糖尿病的效果并探讨其药理机制.方法 将清洁级雄性Wistar大鼠40只分为正常对照组(8只,普通饮食),其余32只大鼠予高脂高糖饮食、链脲佐菌素,造成2型糖尿病成模大鼠(24只),分为糖尿病对照组、二甲双胍治疗组(200 mg·kg-1·d-1)和桂皮醛治疗组(40 mg·kg-1·d-1),每组8只.经药物干预4周后测各组体质量、空腹血糖、血脂、空腹血胰岛素并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用Western blot对血清及组织的视黄醇结合蛋白4(RBP4)、葡萄糖转运载体4(GLUT4)蛋白水平进行分析,免疫组织化学染色分析组织p85α和胰岛素受体底物1(IRSI)蛋白表达水平.结果 与糖尿病对照组比较,桂皮醛降糖、降脂、提高胰岛素敏感性效果明显[空腹血糖:(22.7±4.0)比(7.5±1.5)mmol/L;甘油三酯:(1.53±0.13)比(0.77±0.15)mmol/L;HOMA-IR:8.0±3.0比61.2±12.1,P<0.01];糖尿病组血清RBP4升高了1.68倍,GLUT4蛋白水平与正常对照组比较下调了33%~44%,差异有统计学意义(P<0.05);与糖尿病组比较,桂皮醛明显降低了(28.6%)血清RBP4水平(P<0.05),下调肌肉p85a蛋白表达(0.51±0.05比0.43±0.04,P<0.05),同时上调IRSl蛋白表达(0.52±0.05比0.03±0.06,P<0.05),肝脏、肌肉和脂肪组织的GLUT4蛋白表达升高.结论 桂皮醛具有良好的降糖调脂、提高胰岛素敏感性的效果,其药理机制与降低血清RBP4水平以及调节肌肉组织p85α和IRSI蛋白表达有关. 展开更多
关键词 桂皮醛 糖尿病 2 视黄醇结合蛋白4 P13K调节亚基p85α 胰岛素受体底物1
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度普利尤单抗在慢性鼻窦炎伴鼻息肉治疗中的研究进展 被引量:3
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作者 石帅 郑泉(综述) 程雷(审校) 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2022年第3期36-42,共7页
慢性鼻窦炎(CRS)是一种常见的鼻窦黏膜炎症性疾病,复杂的发生机制造就了CRS的高度异质性,部分患者无法从目前标准的药物治疗和手术中得到缓解。CRS具有不同的炎症内型和临床表型,慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)一直是治疗难点,其症状相对... 慢性鼻窦炎(CRS)是一种常见的鼻窦黏膜炎症性疾病,复杂的发生机制造就了CRS的高度异质性,部分患者无法从目前标准的药物治疗和手术中得到缓解。CRS具有不同的炎症内型和临床表型,慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)一直是治疗难点,其症状相对较重还常合并哮喘,易对常规药物和手术的疗效不佳并伴有较高的复发风险。近年来,度普利尤单抗(dupilumab)在成人顽固性CRSwNP中疗效显著,其通过阻断Ⅱ型炎症中关键驱动因子IL-4和IL-13的信号传导,达到治疗作用。目前度普利尤单抗对国人CRSwNP治疗研究尚无报道。本文将对度普利尤单抗治疗CRSwNP的研究进展进行综述,以期为其在CRSwNP中的进一步应用研究提供参考。 展开更多
关键词 慢性鼻窦炎伴鼻息肉 生物制剂 度普利尤单抗 炎症 IL-4受体亚基α
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