重组人血小板源生长因子促进糖尿病大鼠创面愈合机制的初步研究

目的:研究重组人血小板源生长因子(rhPDGF)对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面的修复作用及其可能机制。方法:在26只糖尿病大鼠背部制备4个全层皮肤缺损创面,创面随机分成3组,rhPDGF治疗组,凝胶剂基质组,空白组。观察伤后3,7和14d组织肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率,以及炎症细胞的浸润情况,并采用免疫组织化学方法观察创周和创基修复细胞增殖状况。结果:伤后7d,组织学检查显示,经rhPDGF治疗的创面伤后7d肉芽组织生长活跃,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于其他组,大量的炎症细胞浸润和胶原沉积,rhPDGF治疗组伤腔容积减小至(0.03±0.03)mL,明显低于凝胶剂基质对照组(0.06±0.03)mL(P<0.05)和空白对照组(0.07±0.05)mL(P<0.05)。伤后7d,rh-PDGF治疗组的创面收缩明显,再上皮化速率达到46.1%,明显高于凝胶剂基质对照组(23.2%)和空白对照组(25.6%)。伤后14d,rhPDGF治疗组再上皮化速率达到99.9%,明显高于凝胶剂基质对照组(91.7%)和空白对照组(91.3%)。同时伤后组织中各类修复细胞PCNA的表达有显著差异。结论:rhPDGF对糖尿病大鼠创面有促修复作用,其对炎症细胞的趋化和修复细胞的增殖影响扮演重要角色。

重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡的疗效和安全性观察

目的 观察采用重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡的疗效和安全性。 方法 取慢性糖尿病足溃疡患者 108 例;分为高剂量组、低剂量组和对照组,对比 3 组治疗疗效。 结果 高、低剂量组的目标溃疡完全愈合率对比差异无统计学的意义( P>0.05 ),与对照组对比有统计学的意义( P<0.05 )。 高、低剂量组完全愈合的时间对比差异无统计学的意义( P>0.05 ),与对照组对比差异显示有统计学的意义( P<0.05 ), 3 组不良反应发生率、 3 月后溃疡复发率等对比差异不明显( P>0.05 )。 结论 100 μg/g 的重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡的疗效显著,且安全性较高,可推广。

重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡的临床疗效及安全性评价

目的评价外用不同剂量的重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡的临床疗效和安全性。方法全国11个研究中心入组的213例慢性糖尿病足溃疡患者,随机分为3组,高剂量组(n=70)予以重组人血小板源生长因子凝胶剂(含重组人血小板源生长因子100μg·g-1)治疗;低剂量组(n=73)予以重组人血小板源生长因子凝胶剂(含重组人血小板源生长因子30μg·g-1)治疗;对照组(n=70)予以空白凝胶剂治疗。3组患者均每日用药1次,总用药周期最长20周。治疗前4周每周随访1次,4周以后每2周随访1次。观察20周试验期内的病人溃疡面积完全愈合百分率、目标溃疡完全愈合时间、溃疡面积缩小率和复发率和不良事件发生率。结果治疗20周内,全分析集中高、低剂量组和对照组目标溃疡完全愈合率分别为63.77%(44/69),50.68%(37/73)和44.93%(31/69)。高、低剂量组和对照组的中位完全愈合时间分别为5.65,4.90,4.70周。高、低剂量组和对照组4周溃疡面积缩小率分别为90.20%,89.00%和95.00%。高、低剂量组和对照组溃疡复发率分别为2.27%(1/44),2.70%(1/37)和0(0/31)。以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。本试验期间,高、低剂量组和对照组不良事件发生率分别为5.80%,2.74%,2.86%;高剂量组有1例与研究药物相关的不良事件,表现为用药部位轻度疼痛;高、低剂量组均未发生严重不良事件,对照组严重不良事件发生率为1.43%。结论 100μg·g-1重组人血小板源生长因子凝胶剂治疗慢性糖尿病足溃疡是安全有效的。

重组人血小板源性生长因子与胰岛素联合局部应用对老龄糖尿病大鼠烧伤创面的作用

目的：文献报导单一局部应用重组人血小板源性生长因子或胰岛素对糖尿病创面的愈合具有促进作用。拟验证局部联合应用重组人血小板源性生长因子和胰岛素对老龄糖尿病大鼠烧伤创面愈合的作用。方法：实验于2006—10／2007—05在甘肃省中医学院SPF级动物实验室完成。①实验材料及分组：SPF级健康Wistar老龄大鼠88只，年龄1年以上，雌雄不限，体质量300～350g。随机分为烫伤对照组20只，糖尿病烫伤对照组20只，糖尿病重组人血小板源性生长因子对照组16只，糖尿病胰岛素对照组16只，糖尿病重组人血小板源性生长因子、胰岛素治疗组16只。实验用鱼精蛋白锌胰岛素为上海第一生化药业有限公司产品；重组人血小板源性生长因子凝胶剂为北京金赛狮生物制药技术开发有限公司产品。②实验过程：除烫伤对照组外，其他组大鼠通过高脂、高蛋白、高糖饲养后腹腔注射链尿佐菌素，建立老龄Ⅱ型糖尿病动物模型，并以高脂、高蛋白、高糖饲养。8周后各组给予深Ⅱ度烫伤。③实验评估：于伤后第1，3，7，14，21天时相点测量创面面积，计算创面愈合率；观察组织形态学、检测创面羟脯氨酸含量；采用免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子、CD34的表达；计算微血管密度。实验过程对动物的处理符合动物伦理学标准。结果：与糖尿病烫伤对照组、糖尿病重组人血小板源性生长因子对照组、糖尿病胰岛素对照组相比，糖尿病重组人血小板源性生长因子、胰岛素治疗组老龄大鼠创面愈合率加快（P〈0．05），创面上皮化加速，羟脯氨酸含量增加（P〈0．05），血管内皮细胞生长因子、CD34阳性表达，微血管密度值增加（P〈0．05）。结论：局部联合应用重组人血小板源性生长因子和胰岛素可通过协同作用促创面胶原的合成，增加创面的血管形成，加速老龄性糖尿病大鼠创面愈合。

重组人血小板源生长因子的发酵表达,纯化及其生物信息学分析

血小板源生长因子由血小板、巨噬细胞和内皮细胞等分泌,是由A、B两种单体构成的二聚体结构,可形成PDGF-AA,BB和AB 3种异构体。文章采用重组毕赤酵母二级种子高密度发酵,所获得的发酵液通过澄清,阳离子交换捕获,凝胶层析精细纯化等步骤,获得了纯度达99%的rh PDGF-BB蛋白样品,经过进一步鉴定,检验分析之后,其指标完全满足其制剂要求,利用相关在线软件进行生物信息学分析,为进一步研究其生物学功能奠定了基础,加速了其药学研究过程。

β-磷酸三钙联合联合重组人血小板源性生长因子BB治疗骨缺损疗效的Meta分析

系统评价在骨缺损治疗的随机临床对照实验(RCT)中,β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)联合重组人血小板源性生长因子BB(recombinant human platelet-derived growth factor BB, rhPDGF-BB)与单独使用β-TCP治疗的疗效差异。计算机检索PubMed、Web of Science、EMBASE、Cochrane library、CNKI、CBM和万方等中外文数据库,严格按照纳入排除标准筛选出β-TCP联合rhPDGF-BB对照单独使用β-TCP治疗骨缺损的RCT研究。对纳入文献进行质量评价并提取相关数据,随后应用RevMan 5.3软件进行Meta分析。共纳入7篇RCT研究,共包含629例患者;Meta分析结果显示:相比单独使用β-TCP,联合rhPDGF-BB治疗后临床附着水平(clinical attachment level,CAL)、线性骨增益(linear bone gain, LBG)、骨填充率(bone filling percentage, BF%)、探诊深度(probing depth, PD)均有明显改善,且此两组间的差异有统计学意义。β-TCP联合重组人血小板源性生长因子比单独使用β-TCP治疗骨缺损的疗效更有优势。

过敏性紫癜患儿血清sVCAM-1与PDGF的表达及临床意义

目的探讨人可溶性血管黏附因子1(soluble vasccular cell adhension molecule-1,sVCAM-1),人血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)在过敏性紫癜(Henoch-Sc觟nlein purpura,HSP)中的变化及其临床意义。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测41例HSP患儿和20名健康儿血清sVCAM-1、PDGF含量。结果急性期和恢复期HSP患儿血清sVCAM-1和PDGF含量均高于对照组(P均<0.05),HSP急性期与恢复期对比差异具有统计学意义。恢复期血sVCAM-1和PDGF含量在均数以上者半年后随访肾损害发生率较在均数以下者高。结论 HSP患儿血清sVCAM-1、PDGF含量明显升高。提示上述两项指标均参与了HSP的发病过程,且对判断病情及预后有重要临床意义。

基因修饰牙龈成纤维细胞及脱细胞真皮基质制备牙周组织工程复合物

背景:前期研究发现人血小板源性生长因子B基因转染的牙龈成纤维细胞能够在体外快速增殖,且能够向胞外分泌血小板源性生长因子BB蛋白。目的:了解人血小板源性生长因子B基因修饰牙龈成纤维细胞植入脱细胞真皮基质后,在体内形成牙周组织工程化复合物的能力。方法:将人血小板源性生长因子B基因转染与未转染的Beagle犬牙龈成纤维细胞分别接种于脱细胞真皮基质上,观察细胞在脱细胞真皮基质上的生长情况。将人血小板源性生长因子B基因转染犬牙龈成纤维细胞-脱细胞真皮基质复合物(实验组)、犬牙龈成纤维细胞-脱细胞真皮基质复合物(对照组)及脱细胞真皮基质(空白组)分别植入裸鼠背部皮下,植入后2,4,8周,取背部标本进行组织学观察。结果与结论:人血小板源性生长因子B基因转染与未转染的犬牙龈成纤维细胞均能在脱细胞真皮基质上良好生长。植入后8周,空白组周围的细胞大面积进入脱细胞真皮基质内,部分脱细胞真皮基质出现完全自体化,尽管细胞进入较多,但新生成的胶原纤维较少,细胞只是占据原有的胶原支架生长;对照组开始出现大面积新生胶原纤维,脱细胞真皮基质上原有的胶原纤维逐步被新生的胶原替代,但原有的胶原结构得到保留;实验组出现大面积完全矿化,可见沿原有胶原支架排列的矿化颗粒。表明接种人血小板源性生长因子B基因修饰牙龈成纤维细胞的脱细胞真皮基质在体内获得了成骨性能。

rhPDGF凝胶治疗神经性糖尿病足疗效和安全性系统评价

目的 系统评价重组人血小板源性生长因子（rhPDGF）凝胶治疗神经性糖尿病足的临床疗效和安全性.方法 采用Cochrane系统评价的方法,电子检索Medline（～ 2014.1）,EMBase（～ 2014.1）,CBM（～2014.1）,按照Cochrane系统评价的方法,逐一评价纳入研究的质量,提取有效数据.采用RevMan 5软件进行Meta分析.结果 共纳入5个临床随机对照试验（共1 035例）.Meta分析结果显示：100μg/g剂型的rhPDGF凝胶可以提高神经性糖尿病足的治愈率[RR 1.36,95％ CI（1.16,1.61）],而30μg/g剂型的rhPDGF凝胶作用不明显[RR 1.32,95％ CI（0.66,2.63）].rhPDGF凝胶可能会缩短溃疡的愈合时间,更有效地使溃疡面缩小.此外,rhPDGF凝胶没有明显的不良反应,使用比较安全.结论 在传统治疗的基础上加用rhPDGF凝胶治疗神经性糖尿病足,可以增加治愈率,缩短治愈时间,有利于使溃疡面的面积缩小.rhPDGF凝胶没有明显的不良反应.