RP-HPLC法测定人血浆中EXH-1626的浓度

目的:建立测定人血浆中EXH-1626浓度的HPLC方法。方法:采用美国Waters Symmetry Shield^(TM) RP_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(30:70),流速1.0 ml·min^(-1);检测波长281 nm;柱温30℃;血样品经全血沉淀剂直接沉淀蛋白后进样。结果:EXH-1626血浆浓度与峰面积线性关系良好,回归方程为A=2.566 7×10~4C+1.768 6×10~3,r=0.999 5;线性范围0.05～10.00μg·ml^(-1),定量下限为0.05μg·ml^(-1),血浆内源性杂质不干扰待测物测定。结论:该法可用于EXH-1626血药浓度的含量测定,专属准确、快速。

LC-MS/MS法测定人血浆中吡非尼酮及其代谢产物的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中吡非尼酮(pirfenidone,BT)及其主要代谢产物5-羧基吡非尼酮(5-carboxypirfenidone,SBT)的含量。方法血浆样品加入氘代同位素内标吡非尼酮-d5(d BT)和5-羧基吡非尼酮-d5(d SBT),经甲醇沉淀蛋白后进样。液相分离采用Agilent ZORBAX SB C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,流动相为水(含0.5%甲酸)/乙腈(50/50)。质谱检测采用ESI离子源,正离子多反应检测模式检测。BT、SBT、d BT和d SBT的检测目标离子对分别为m/z 185.958/77.1、215.944/77.0、190.965/81.1和220.948/99.1。结果空白溶剂、空白血浆无干扰,分析物及内标间无相互干扰。血浆中BT和SBT分别在0.020 59~25.14 mg·L-1和0.016 73~20.42 mg·L-1范围内线性关系良好。批内、批间精密度和准确度均在可接受范围内。分析物及内标储备液于4℃冰箱中放置156 d,血浆样本于室温放置4 h、-70℃冰箱中保存并反复冻融3次、-70℃冰箱保存10、29、52 d及样品处理后自动进样器(8℃)中放置24 h的情况下均稳定。BT和SBT的平均提取回收率和归一化基质因子均在可接受范围内。结论本研究所建立的测定BT和SBT血浆药物浓度的LC-MS/MS分析方法具有良好的特异性、准确度、精密度、灵敏度、稳定性和耐用性,适用于人血浆中吡非尼酮及其代谢物的浓度测定及其药动学研究。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中拉西地平药物浓度的方法学研究

目的:建立测定人血浆中拉西地平浓度的方法。方法:200μl血浆样本采用500μl叔丁基甲醚萃取浓缩,采用HPLC-MS/MS测定,以^(13)C_8-拉西地平为内标,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB C_(18)(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为水(含5 mmol·L^(-1)甲酸铵)-乙腈(15∶85,v/v),流速0.3 ml·min^(-1),柱温40℃,进样量10μl,采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,以[M+NH_4]^+作为分子离子峰,用于拉西地平定量的三对反应离子对为m/z 473.5→m/z 410.3、m/z473.5→m/z 400.1和m/z 473.5→m/z 354.3,用于内标定量的反应离子对为m/z 481.4→m/z 362.3。结果:拉西地平在0.1^(-1)0 ng·ml^(-1)范围内线性关系良好(r>0.996 9),定量下限为0.1 ng·ml^(-1);日内、日间精密度为3.15%~7.04%,相对偏差(RE)为-8.58~12.17%,提取回收率为107%~118%,RSD<15%。血浆样品在经历3次冻融(-20℃到室温)循环和冷冻放置40 d等条件下均稳定,处理后样品在室温和自动进样器中(4℃)各放置24 h均稳定(RSD<15%)。结论:该方法快速、准确、灵敏度高、专属性强,可应用于拉西地平相关的生物等效性一致性评价和药动学研究。

高效液相色谱法测定不同时间人血浆中帕拉米韦的浓度及临床观察

目的测定帕拉米韦给药后不同时间人血浆中的药物浓度,观察病人用药后安全性及疗效,为临床使用帕拉米韦提供依据。方法高效液相色谱(HPLC)法测定帕拉米韦的血药浓度,以5 mmol/L磷酸二氢钾溶液(0.1%三乙胺)-乙腈为流动相,磷酸调pH 5.0;检测波长210 nm;流速1.0 mL/min;用药后对病人进行安全性随访。结果血浆中无干扰测定的内源性物质,线性范围为1~50μg/mL,最低定量限(LLOQ)为1μg/mL,回收率102.5%~110.4%,日间精密度及稳定性均良好,5例病人不同时间血浆中的帕拉米韦均可检出;5例病人的发热缓解时间分别为33、26、26、48、54 h,流感症状缓解时间分别为89、>120、28、48、54 h,发生1例不良反应。结论HPLC检测方法可靠,适用于人血浆中帕拉米韦的测定。帕拉米韦能快速缓解流感症状,虽然出现的不良事件为轻度,但也要监测其不良反应,以保证用药安全性及有效性。

RP-HPLC法测定人体血浆中芬布芬的浓度

目的:建立测定人血浆中芬布芬浓度的高效液相色谱法。方法:采用 Diamonsil(钻石)ODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钾-乙腈(75:20:5)(用磷酸调节 pH 3.0)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长285 nm。结果:芬布芬的线性范围为0.16～16.0μg·mL^(-1),定量限为0.16μg·mL^(-1),检测限为0.06μg·mL^(-1),平均回收率为(101.2±3.5)%,RSD 为1.8%,日内及日间精密度分别为1.7%和2.7%。结论:该方法简便、快速、准确,适用于临床上芬布芬的体内研究。

HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度的效果分析

目的：分析高效液相色谱法（HPLC法）测定人血浆中氯氮平浓度的效果。方法选用Eclipse plus C18色谱柱,具体规格为100 mm＆#215;4.6 mm,3.5μm；采用0.5%三乙胺溶液作为流动性,具体规格为冰醋酸调节pH=8.0；甲醇∶水（75∶25, V/V）。流速为1 ml/min,检测波长为254 nm,柱温定为30℃,进样量为20μl,以乙醚为萃取液。碱化血浆后,以Agilent固相萃取小柱将血浆中的氯氮平提取出来,运用HPLC法对人血浆中氯氮平浓度进行检测。结果具有良好的线性关系的前提条件为血浆氯氮平的浓度在0.10～2.00 mg/L。最低检测限为5μg/L（rsn=3）。对照品血浆的回收率高浓度为（92.1±3.1）%,低浓度为（105.8±7.6）%,中间浓度为（96.7±8.2）%；日内和日间RSD高浓度分别为0.5%、7.1%,低浓度分别为7.4%、7.6%,中间浓度分别为4.6%、5.8%。结论HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度的效果良好,值得推广。

HPLC Determination of Captopril in Human Plasma with Pre-column Derivation and Solid-phase Extraction and Studies on Its Pharmacokinetic and Relative Bioavailability

A new pre-column derivation HPLC method with solid-phase extraction to determine captopril in human plasma was established. Derivation products were extracted by a solid-phase extraction method after the reagent, p-a-dibromoacetophenone(p-BPB), was added in the plasma samples. The samples were analyzed in a VP-ODS column with UV-detector. The calibration curve of captopril was linear within the range of 5~1000 ngmL-1 with r=0.9987, the recovery of this method was 98.652.04%, within day and between day RSD were no more than 3.4% and 8.4% respectively. To study the pharmacokinetics and the relative bioavailability of captopril tablets, two formulations of captopril tablets were given to 18 healthy male volunteers according to a randomized 2-way cross-over design with a 1-week washout period. The respective AUC0~6 , Cmax and Tmax values of the two formulations were 424.5125.7 and 439.4113.3 mghL-1; 505.9244.6 and 504.8172.2 mgL-1; 0.6620.181 and 0.5280.176 h. Results from statistics analysis showed that there were no significant difference between the AUC0~6 , Cmax and Tmax values of the two formulations, The relative bioavailability of tablets I with respect to II was 96.114.6% from AUC0~6 measurement. Bioequivalance was observed between the two tablets.