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转人血清白蛋白基因猪的表达分析
被引量:
2
1
作者
郑新民
乔宪凤
+1 位作者
杨在清
魏庆信
《经济动物学报》
CAS
2002年第2期24-26,共3页
整合有人血清白蛋白基因的转基因猪 ,经琼脂糖扩散、蛋白质电泳、Western杂交等分析 ,发现 3头转基因猪不同程度地表达了人血清白蛋白 ,其中最高表达水平为 2 0 3mg/mL。
关键词
转
基因
猪
人血清白蛋白基因
基因
表达
表达检测
下载PDF
职称材料
人血清白蛋白基因的打靶研究
2
作者
孙世惠
周艳荣
+3 位作者
陈红星
林艳丽
黄培堂
邓继先
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期223-228,共6页
为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片...
为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片段;构建了含有neo及tk正负筛选标记基因的人血清白蛋白基因打靶载体,并验证了neo基因的有效性。将线性化的打靶载体通过电击转染的方法整合到猪胎儿成纤维细胞基因组中,利用G418及GANC进行细胞克隆的抗药性筛选,PCR及Southern blot鉴定抗药性细胞克隆,最终获得3个发生同源重组的细胞克隆。这为下一步进行体细胞核移植制备生产人血清白蛋白转基因猪奠定了基础。
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关键词
基因
克隆
基因
打靶
人血清白蛋白基因
下载PDF
职称材料
长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
3
作者
乔宪凤
郑新民
+1 位作者
熊忠良
华文君
《湖北农业科学》
北大核心
2001年第4期73-75,共3页
从人的血液中提取基因组的DNA作为模板 ,通过对长PCR反应条件体系的优化 ,获得基因组中大片段的人血清白蛋白基因 (HSA)。
关键词
人血清白蛋白基因
大片段DNA
长PCR
反应条件
反应体系
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职称材料
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
4
作者
云妙英
王涛
+2 位作者
肖宇红
张京文
陈正华
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第5期639-642,共4页
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回...
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回收后与T载体连接,经过转化、质粒酶切、测序等一系列手段对插入情况和序列是否正确进行鉴定。用另一组带有酶切位点的引物和pfu酶进行PCR,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切PCR回收片段及pET28a表达载体,二者经过连接、转化、质粒酶切、测序等手段重新鉴定序列是否正确。结果插入到T载体和pET28a载体中的序列为1 830 bp的带有24个氨基酸信号肽的基因片段,此序列和GenBank中公布的rHSA序列相一致,并显示在485、750、1 685等位点可能有等位基因多态性。结论从胎盘中提取mRNA后,利用RT-PCR构建的人血清白蛋白基因序列完全正确,为下一步的工作提供了基础。
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关键词
人血清白蛋白基因
载体
序列鉴定
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职称材料
我国第一头转基因试管牛在上海问世
5
《农村实用技术与信息》
2000年第2期43-43,共1页
关键词
转
基因
试管牛
上海奉新农场
人血清白蛋白基因
生物医药产业
转
基因
动物
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职称材料
近七年全国卷选修3选考试题分析及复习策略
6
作者
杨重云
《教学考试》
2017年第51期22-25,共4页
一、近七年全国卷选修3选考题考点分析1.考点主要集中在基因工程、细胞工程,其次是蛋白质工程、胚胎工程和生态工程,而'生物技术的安全性和伦理性问题'专题没有考查过。2.从历年的考点分布看,既有单纯考查某个工程的试题,也有...
一、近七年全国卷选修3选考题考点分析1.考点主要集中在基因工程、细胞工程,其次是蛋白质工程、胚胎工程和生态工程,而'生物技术的安全性和伦理性问题'专题没有考查过。2.从历年的考点分布看,既有单纯考查某个工程的试题,也有几个工程融合在一起进行综合考查的试题,如基因工程与细胞工程融合、基因工程与胚胎工程融合,更有选修模块与相关必修模块知识融合在一起进行综合考查的试题。
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关键词
全国卷
基因
工程
主干知识
复习策略
人血清白蛋白基因
细胞工程
目的
基因
新课标
基因
表达载体
原文传递
题名
转人血清白蛋白基因猪的表达分析
被引量:
2
1
作者
郑新民
乔宪凤
杨在清
魏庆信
机构
湖北省农业科学院生物技术研究所
出处
《经济动物学报》
CAS
2002年第2期24-26,共3页
基金
湖北省农业科学院项目
文摘
整合有人血清白蛋白基因的转基因猪 ,经琼脂糖扩散、蛋白质电泳、Western杂交等分析 ,发现 3头转基因猪不同程度地表达了人血清白蛋白 ,其中最高表达水平为 2 0 3mg/mL。
关键词
转
基因
猪
人血清白蛋白基因
基因
表达
表达检测
Keywords
transgenic pig
human serum albumin
expression
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
人血清白蛋白基因的打靶研究
2
作者
孙世惠
周艳荣
陈红星
林艳丽
黄培堂
邓继先
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期223-228,共6页
基金
国家高技术研究与发展计划项目资助(No.2002AA206621)~~
文摘
为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片段;构建了含有neo及tk正负筛选标记基因的人血清白蛋白基因打靶载体,并验证了neo基因的有效性。将线性化的打靶载体通过电击转染的方法整合到猪胎儿成纤维细胞基因组中,利用G418及GANC进行细胞克隆的抗药性筛选,PCR及Southern blot鉴定抗药性细胞克隆,最终获得3个发生同源重组的细胞克隆。这为下一步进行体细胞核移植制备生产人血清白蛋白转基因猪奠定了基础。
关键词
基因
克隆
基因
打靶
人血清白蛋白基因
Keywords
clone, genetargetting, human serum albumin gene
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
3
作者
乔宪凤
郑新民
熊忠良
华文君
机构
湖北省农业科学院生物技术研究所
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2001年第4期73-75,共3页
文摘
从人的血液中提取基因组的DNA作为模板 ,通过对长PCR反应条件体系的优化 ,获得基因组中大片段的人血清白蛋白基因 (HSA)。
关键词
人血清白蛋白基因
大片段DNA
长PCR
反应条件
反应体系
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
4
作者
云妙英
王涛
肖宇红
张京文
陈正华
机构
中国科学院西北高原生物研究所
北京大学公共卫生学院
甘肃亚盛集团博士后工作站
甘肃农业大学农学院
出处
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第5期639-642,共4页
文摘
目的构建重组人血清白蛋白(rHSA)表达基因的克隆载体及表达载体,为下一步的蛋白表达和构建rHSA融合基因打下基础。方法从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR方法构建cDNA-mRNA杂交链,然后用人血清白蛋白表达基因的特异引物进行PCR,PCR产物回收后与T载体连接,经过转化、质粒酶切、测序等一系列手段对插入情况和序列是否正确进行鉴定。用另一组带有酶切位点的引物和pfu酶进行PCR,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切PCR回收片段及pET28a表达载体,二者经过连接、转化、质粒酶切、测序等手段重新鉴定序列是否正确。结果插入到T载体和pET28a载体中的序列为1 830 bp的带有24个氨基酸信号肽的基因片段,此序列和GenBank中公布的rHSA序列相一致,并显示在485、750、1 685等位点可能有等位基因多态性。结论从胎盘中提取mRNA后,利用RT-PCR构建的人血清白蛋白基因序列完全正确,为下一步的工作提供了基础。
关键词
人血清白蛋白基因
载体
序列鉴定
Keywords
recombinant human serum albumin(rHSA), vector
sequencing
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
我国第一头转基因试管牛在上海问世
5
出处
《农村实用技术与信息》
2000年第2期43-43,共1页
关键词
转
基因
试管牛
上海奉新农场
人血清白蛋白基因
生物医药产业
转
基因
动物
分类号
TQ460.38 [化学工程—制药化工]
Q953 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
近七年全国卷选修3选考试题分析及复习策略
6
作者
杨重云
机构
浙江省舟山中学
出处
《教学考试》
2017年第51期22-25,共4页
文摘
一、近七年全国卷选修3选考题考点分析1.考点主要集中在基因工程、细胞工程,其次是蛋白质工程、胚胎工程和生态工程,而'生物技术的安全性和伦理性问题'专题没有考查过。2.从历年的考点分布看,既有单纯考查某个工程的试题,也有几个工程融合在一起进行综合考查的试题,如基因工程与细胞工程融合、基因工程与胚胎工程融合,更有选修模块与相关必修模块知识融合在一起进行综合考查的试题。
关键词
全国卷
基因
工程
主干知识
复习策略
人血清白蛋白基因
细胞工程
目的
基因
新课标
基因
表达载体
分类号
G634.91 [文化科学—教育学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转人血清白蛋白基因猪的表达分析
郑新民
乔宪凤
杨在清
魏庆信
《经济动物学报》
CAS
2002
2
下载PDF
职称材料
2
人血清白蛋白基因的打靶研究
孙世惠
周艳荣
陈红星
林艳丽
黄培堂
邓继先
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
下载PDF
职称材料
3
长PCR扩增人血清白蛋白基因反应条件及体系的确立
乔宪凤
郑新民
熊忠良
华文君
《湖北农业科学》
北大核心
2001
0
下载PDF
职称材料
4
人重组血清白蛋白基因T载体和pET28a表达载体的构建及鉴定
云妙英
王涛
肖宇红
张京文
陈正华
《首都医科大学学报》
CAS
2006
0
下载PDF
职称材料
5
我国第一头转基因试管牛在上海问世
《农村实用技术与信息》
2000
0
下载PDF
职称材料
6
近七年全国卷选修3选考试题分析及复习策略
杨重云
《教学考试》
2017
0
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