华法林与人血清蛋白结合的动力学过程和光谱性能研究

华法林作为口服维生素K拮抗剂几十年来广泛应用于治疗血栓类疾病。因此针对华法林的物理化学性质的研究成为了人们的重点。通过含时密度泛函理论(TD-DFT),模拟了华法林分子在水溶液状态下与人血清蛋白结合过程中几种状态的紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)与荧光光谱,研究不同状态在激发过程中的跃迁方式和电荷转移过程,以及光谱的差异,探究整个动力学过程的激发态变化机理。结果表明,华法林在水溶液中紫外-可见吸收光谱表现出双吸收现象,双吸收现象主要由不同的激发态跃迁导致。未去质子化前,主要吸收峰波长为291 nm,去质子化后,吸收强度降低,波长红移,当华法林与血清蛋白结合后发生电荷转移导致吸收增益,波长307 nm吸收峰强度最高。通过计算第一激发态(S_(1))的结构和激发能模拟华法林不同状态的荧光光谱,最初状态下荧光峰为360 nm,去质子化后,荧光强度降低,波长红移,结合后结构变化导致荧光增益。根据华法林的荧光光谱变化情况,说明其在整个动力学过程中存在不同的荧光发射过程。通过分子前线轨道分析和电子-空穴分析研究整个动力学过程的电荷转移情况,表明华法林单体的荧光发射过程为局域激发,与蛋白质结合后荧光发射过程为电荷转移激发,结合后的荧光增益特征使华法林可以作为荧光探针。该研究揭示了华法林与蛋白结合过程中光谱变化机理,为以后探究分子结合动力学过程提供新型研究手段和理论支撑。

应用毛细管区带电泳测定人血清蛋白

研究了一种用于临床检测血清蛋白的毛细管区带电泳方法。弹性石英毛细管５０ μｍ ｉ．ｄ．×４７ ｃｍ （４０ ｃｍ 有效长度），检测波长２００ ｎｍ ，血清用运行缓冲液（含１２．５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ四硼酸钠、１ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ乳酸钙、０．７ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ硫酸镁，ｐＨ ９．７０）稀释４０倍，气压进样１７．２３ ｋＰａ·ｓ，分析电压２３ ｋＶ。正常血清蛋白分为６种，孕妇的分７种（多一个未知的α０峰）。将正常人、孕妇、多发性骨髓瘤和强直性脊柱炎患者的血清蛋白的毛细管电泳与传统的醋酸纤维膜电泳相比较，前者具有高分辨率、在线数据处理和自动化的特点。基于血清蛋白的诊断，毛细管电泳是一个可靠的分析新技术。

烟碱与人血清蛋白相互作用的光谱研究

在0·1mol/L的磷酸氢二钠-柠檬酸体系中,采用荧光光谱、紫外吸收光谱研究了人血清蛋白与烟碱的相互作用。荧光滴定表明这种相互作用使HSA的内源荧光猝灭。通过猝灭常数、结合常数和结合位点数的计算,证明了这种猝灭为静态猝灭机制。尼古丁和HSA形成1∶1稳定复合物;考察不同温度和酸度下的猝灭作用,进一步证实其静态猝灭行为和疏水作用机制。紫外吸收光谱和同步荧光光谱表明,相互作用引起HSA构象变化,而同步荧光光谱提示结合位点更接近于色氨酸。

水溶性阳离子型吡啶基咔咯镓配合物与人血清蛋白的相互作用

利用紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色(CD)光谱和分子对接计算探究了5,10,15-三[4-(N-甲基-吡啶)]咔咯镓配合物(1-Ga)与人血清蛋白(HSA)的相互作用.结果表明,HSA的荧光能被1-Ga静态猝灭,两者的结合常数为2.82×104L/mol,作用距离为3.342 nm.热力学参数显示1-Ga主要通过氢键和疏水作用与HSA结合,位点标记竞争实验表明1-Ga优先结合HSA的布洛芬位点Ⅱ.此外,紫外吸收光谱和CD光谱显示二者的相互作用会导致HSAα-螺旋结构的减少.分子对接计算结果表明1-Ga优先结合在HSA亚结构域ⅢA的位点Ⅱ疏水袋中.

电泳-石墨炉原子吸收光谱法测定人血清蛋白中的铜

本文采用琼脂糖凝胶电泳和石墨炉原子吸收法测定了七个血清样品中的铜。石墨炉法测定铜的特征量为2.0×10^(-11)g。血清中α_2蛋白区带和白蛋白区带的铜含量分别为0.93±0.27μg/ml和0.22±0.06μg/ml(80.2±4.9％和19.8±4.9％)。回收率为93～107％(区带量之和比总量)。分析前,应对试剂进行提纯。分离后的样品用高温炉消化处理。

新荧光试剂5-(4-羧基苯偶氮)-8-水杨醛缩氨基喹啉荧光增敏法测定人血清蛋白质

合成了新荧光试剂 5 (4 羧基苯偶氮 ) 8 水杨醛缩氨基喹啉 (p CPSAQ ) ,探讨了与人血清蛋白反应的最佳实验条件。在 pH =7.0的缓冲体系中 ,蛋白质的存在使 p CPSAQ的荧光大大增强 ,据此建立了测定人血清蛋白质的灵敏方法 ;对人血清白蛋白和γ 球蛋白的线性范围分别为 0 .1～ 4 .5mg/L和 0 .1～ 4 .0mg/L ;检出限分别为0 .0 2 8和 0 .0 2 7mg/L。方法灵敏、快速、选择性好 ,用于人血清样品中总蛋白的测定 ,结果满意。

水溶苯胺蓝吸光光度法测定人血清蛋白

用吸光光度法研究了水溶苯胺蓝(AnB)与牛血清白蛋白(BSA)在Britton-Robinson广泛pH缓冲介质中的结合反应,在最佳试验条件下,以试剂空白为参比,AnB-BSA复合物在600nm波长处的吸光度,与BSA的浓度呈良好的线性关系,BSA的线性范围为1.6×10-8～2.4×107mol.L-1,摩尔吸光系数ε=1.34×106L·mol-1·cm-1,Sandell灵敏度为0.051μg·cm-2,BSA的检出限为1.0×10-8mol·L-1,方法具有灵敏度较高、选择性好等特点,用于人血清样品中蛋白质的测定,与溴甲酚绿方法结果一致。

人血清蛋白的共振散射光谱法测定

在pH7．0的缓冲介质中，吖啶黄（AO）与人血清蛋白（HSA）通过静电引力生成离子缔合物。与单独吖啶黄在相同溶液条件下相比，其共振散射光谱的强度有显著增强。在362nm波长下所测得共振散射光谱峰的强度值与HSA的浓度值在0～1.3mg·L^-1范围内呈线性关系，并求得其检出限为32μg·L^-1。上述反应条件已用于试样中HSA的测定。

丁基罗丹明B-表面活性剂体系荧光光谱法测定人血清蛋白

研究了阳离子染料丁基罗丹明 B在阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠存在时的吸收光谱和荧光性能 ,发现随蛋白质浓度增大荧光强度逐渐增强 ,在一定范围内增强程度与蛋白质浓度成正比 ,据此建立了一种测定人血清蛋白的新方法 ,线性范围 0— 6 .0 mg·L-1 ,检出限为 4 .4 μg/ L。用于合成样品测定 ,结果令人满意。

172例人血清蛋白临床应用合理性调查与分析

目的：评价人血清蛋白的临床应用情况，并为临床合理用药提供实证。方法利用美康合理用药临床药学工作站，从该院2010年应用人血清蛋白的住院患者中，随机抽取172例，对所选病例进行回顾性分析，获取有关临床应用信息，包括患者的年龄、性别、科室、诊断、疗程、用药原因、用药前白蛋白浓度等指标，将以上数据进行整理统计。结果肝胆外科应用最多（26．1％）；用量较大的主要是危重患者；在个人用量分布方面，以使用10～20 g的患者最多；用药原因以低蛋白血症所占比例最大（38．9％）；使用人血清蛋白前患者血清清蛋白浓度分布主要集中在20～30 g/L范围内。结论该院人血清蛋白的使用还存在一些问题，应遵循安全、有效、经济的用药原则，严格执行人血清蛋白的适应证，以获得最佳的效果。

柚皮苷与人血清蛋白作用机理探索

利用荧光光谱及同步荧光光谱法研究了柚皮苷与人血清蛋白相互作用.结果表明,相互作用使得人血清蛋白荧光猝灭且引起蛋白构象改变;猝灭常数大小证明人血清蛋白荧光猝灭机制为静态猝灭;根据能量转移原理求得结合距离为3.7 nm,存在发生能量转移的可能性.

人血清蛋白临床应用现状及其对策

该文列举人血清蛋白临床不合理应用的现状,通过循证医学方法分析人血清蛋白临床应用的适应证。认为目前我国临床人血清蛋白不合理应用现象较普遍,合理应用的指征有待进一步通过循证医学规范。规范人血清蛋白的临床应用十分紧迫。

表儿茶素在模拟生理条件下对人血清蛋白糖基化反应的影响

为了揭示生理条件下表儿茶素对蛋白质糖基化反应的影响,本文采用人血清蛋白与核糖构建美拉德反应模型,通过测定抑制率、分子量、热聚集度、pH、表面疏水性、自由氨基,分析不同浓度表儿茶素对蛋白质糖基化反应的抑制及其产物性质的影响。结果表明,表儿茶素对人血清蛋白的糖基化反应具有抑制作用,且随着表儿茶素浓度的增加,糖基化抑制率增加,当表儿茶素添加量达到0.04 mol/L时,抑制率接近80%;对糖基化产物分子量测定结果显示,添加表儿茶素后糖基化产物的分子量变小,且未产生聚合物;对糖基化产物性质分析结果表明,添加抑制剂后糖基化产物的热稳定性变差,pH、自由氨基和表面疏水性随着表儿茶素浓度的增加而增加,说明糖基化反应被抑制,糖基化产物性质发生了改变。因此,表儿茶素可作为一种生理条件下糖基化反应的抑制剂。

纳米基质辅助聚丙烯酰胺凝胶电泳分离人血清蛋白质

血清蛋白分析是一项重要临床检验，某些蛋白质可以作为疾病诊断的标志物。但由于血清蛋白的种类繁多、组成复杂，给血清蛋白的深入研究工作带来难度。目前，对人血清蛋白的分离主要采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。然而，由于普通聚丙烯酰胺凝胶电泳利用蛋白质的电荷／质量比以及分子大小的差异，实现对血清中蛋白质的分离，对于电荷／质量比以及分子大小都相近的蛋白质就无法分开。

人血清蛋白治疗肾病综合征水肿1例

该文作者结合相关文献及指南,参与1例肾病综合征水肿患者的临床治疗与药学监护。呋塞米联合人血清蛋白治疗后,患者尿量增加,水肿消退。认为在严格把握适应证的情况下,人血清蛋白联合呋塞米利尿可为患者带来益处。

微流体芯片电泳技术对人血清蛋白的快速分离

通过微流体芯片电泳技术分离人血清蛋白,探讨了常见十字形微流体芯片上样品的电动进样与分离过程,分析了在十字芯片上的进样时间和电压设置对后续样品检测和定量的影响。采用的缓冲体系为:100mmol/L H3BO3,50mmol/L NaCl,5%Dextran(以NaOH调至pH 8.3),该缓冲液能够有效分离人血清蛋白中的白蛋白(Albumin)和4种球蛋白(α1-,α2-,β-,和γ-globulin),并且给出了它们在该缓冲体系中的淌度估算范围为5.15×10-5～47.2×10-5 cm2/(V.s)。在芯片上2min之内可以完成进样和分离,相比于常用的毛细管区带电泳,提高了分析速度。

对溴苯甲醛-4-苯基-2-噻唑脲与人血清蛋白相互作用的研究

采用荧光法研究了对溴苯甲醛-4-苯基-2-噻唑脲(BHP)与人血清蛋白(HSA)之间的相互作用。根据溴苯甲醛-4-苯基-2-噻唑脲与HSA相互作用的荧光敏华作用,利用Stern-Volmer方程及非辐射能量转移理论处理试验数据,采用同步荧光光谱探讨了BHP对HSA构象的影响。结果表明,BHP可以使HSA的荧光增强,表明两者之间发生了能量转移,能量转移的机理是BHP与HSA结合形成了复合物。荧光增强(敏化)效应主要源于给体-受体间的偶极-偶极作用的能量转移。能量转移的结果为内原发色基团(给体donor)的荧光被猝灭和外源发色基团(受体acceptor)荧光被敏化,计算得到其敏化常数为-2.494 5×104。同步荧光光谱表明,相互作用引起HSA构象变化,提示结合位点更接近于色氨酸。

微透析法研究金属离子镉与人血清蛋白的相互作用

本文建立了一种新的方法──微透析法用于研究金属离子铺与人血清蛋白（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｕｍｉｎ，简称ＨＳＡ）的相互作用．测定了金属离子Ｃｄ２＋与ＨＳＡ之间的结合位点数为１．８１和结合常数３．５５×１０５Ｍ－１微透析回收率Ｃｄ２＋为５８．３６％（Ｒ．Ｓ．Ｄ２．１％，ｎ＝６）．通过各种离子之间的竞争结合建立了通用的判定金属离子的共同结合位点及相对结合强度的方法．证明在ＨＳＡ上Ｃｄ２＋和Ｚｎ２＋有共同的第一结合位点，它们在ＨＳＡ上有一多元素的共同结合位点．应用本实验方法可以节约蛋白３／４以上，并具有精确、快速、方便等特点．