活血化瘀方药——川芎嗪、复方丹参、血塞通注射液对人血管平滑肌细胞增殖干预作用的比较研究

目的 :探讨临床常用 3种静脉注射活血化瘀中成药防治血管成形术后再狭窄的可能性。方法 :采用3H -TdR、细胞计数两种方法 ,观察其对培养人内乳动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。结果 :血塞通抑制培养血管平滑肌增殖作用最强 ,复方丹参注射液次之 ,川芎嗪作用最弱 ,两种方法基本一致。结论 :提示活血化瘀方药防治血管再狭窄的可行性及血塞通有望成为防治再狭窄的有效药物。

SOCS1对氧化型低密度脂蛋白促进人血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-1(suppressor of cytokine signaling-1,SOCS1)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)促进人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用的影响。方法用脂质体转染法将靶向人SOCS1基因的siRNA(SOCS1-siRNA)和阴性对照siRNA(NC-siRNA)转染VSMC,然后给予100μg/mL的oxLDL孵育48 h。实验分为6组:空白对照组、NC-siRNA组、SOCS1-siRNA组、oxLDL组、oxLDL+NC-siRNA组、oxLDL+SOCS1-siRNA组。用RT-PCR和Western blot法检测SOCS1、Bcl-2、Bax和野生型p53(wt-p53)表达量的变化,用MTT法观察细胞存活力,用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果 RT-PCR和Western blot检测发现,SOCS1-siRNA的转染使细胞SOCS1表达降低(P<0.05,P<0.01),同时使Bcl-2表达降低,Bax和wt-p53表达增高(P<0.05,P<0.01),并能抑制oxLDL促进VSMC的Bcl-2表达增高,Bax和wt-p53表达降低的作用(P<0.05,P<0.01)。MTT结果显示,SOCS1表达下调抑制了细胞存活力(P<0.05),并能抑制oxLDL促进VSMC增殖的作用(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,SOCS1表达下调引起了细胞G0/G1期增加(P<0.05)、S期减少(P<0.05)、凋亡率增加(P<0.01),并能抑制oxLDL促进VSMC G0/G1期减少、S期增加、凋亡率降低的作用(P<0.01)。结论 SOCS1表达下调能抑制VSMC增殖并促进其凋亡,并能抑制oxLDL促进VSMC增殖和降低其凋亡的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的作用靶点。

血小板衍生生长因子诱导人血管平滑肌细胞增殖时钙调素的变化

目的?观察血小板衍生生长因子(PDGF)对培养的人血管平滑肌细胞增殖及钙调素含量变化的作用。方法:应用3H- TdR掺入法和磷酸二酯酶法,观察不同浓度(1、10、20、30、40ng/ml)PDGF-BB对培养的人血管平滑肌细胞DNA合成和钙调素 含量变化的影响及其时间效应。结果:不同浓度PDGF-BB作用后,处于静止状态的人血管平滑肌细胞DNA的合成增加,并呈 现明显的浓度依赖关系,在40ng/ml浓度时DNA的合成达到高峰(P<0.01)。平滑肌细胞在进入细胞增殖周期后,细胞内钙调 素含量逐渐增加,在9h时出现一个短暂的高峰,随后逐渐下降;不同浓度PDGF-BB作用后,钙调素含量增加,并呈现出明显的 浓度依赖关系,30ng/ml浓度时作用最为显著(P<0.01)。结论:PDGF可促进培养的人血管平滑肌细胞增殖,该作用可能与增 加钙调素含量有关。

人着色性干皮病D组基因对白细胞介素-6促进人血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：探讨人着色性干皮病D组基因（XPD）对白细胞介素-6（IL-6）促进人血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖作用的影响。方法：用脂质体转染法将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空质粒pEGFP-N2稳定转染VSMCs,然后给予1×10~5U/L IL-6孵育48h。实验分为6组：（1）空白对照组;（2）pEGFP-N2组;（3）pEGFP-N2/XPD组;（4）IL-6组;（5）IL-6＋pEGFP-N2组;（6）IL-6＋pEGFP-N2/XPD组。用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白报告基因表达情况;用MTT法观察细胞增殖活力;用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;用RT-PCR和Western blotting检测XPD、Bcl-2、Bax和野生型P53（wt-P53）表达量的变化。结果：在荧光显微镜下,可在转染了重组质粒pEGFP-N2/XPD或空质粒pEGFP-N2的细胞中观察到绿色荧光,即转染成功;MTT结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染抑制了细胞增殖活力（P〈0.05）,并能抑制IL-6促进VSMCs增殖的作用（P〈0.05）;流式细胞仪结果显示,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染引起了细胞G_0/G_1期增加（P〈0.05）、S期减少（P〈0.05）、凋亡率增加（P〈0.01）,并能抑制IL-6促进VSMCs G_0/G_1期减少、S期增加、凋亡率降低的作用（P〈0.01）;RT-PCR和Western blotting检测发现,重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染使得XPD表达增高（P〈0.05或P〈0.01）,同时Bcl-2表达降低,Bax和wt-P53表达增高（P〈0.05或P〈0.01）,并能抑制IL-6促进VSMCs的Bcl-2表达增高、Bax和wt-P53表达降低的作用（P〈0.05或P〈0.01）。结论：XPD能抑制VSMCs增殖并促进其凋亡,并能抑制IL-6促进VSMCs增殖和降低其凋亡的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的靶点。

胰岛素对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察胰岛素对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖及ＤＮＡ合成影响，探讨可能的机制。方法：无菌分离动脉血管，采用复合胶原酶分离和培养人ＶＳＭＣ，加胰岛素干预，观测ＶＳＭＣ增殖的影响，用ＭＴＴ（四甲基偶氮唑盐）微酶测量法检测细胞增殖能力和ＶＳＭＣ细胞周期分类的影响。结果：与对照组比较，胰岛素刺激组细胞生成明显增加，并与浓度梯度有明显关系；流式细胞光度仪对细胞周期分类显示：胰岛素、佛波酯（ＰＭＡ）干预组ＶＳＭＣ处ＤＮＡ合成期和分裂期细胞数及百分比均较对照组高（Ｐ＜０．０５），而佛波酯组较胰岛素组高。结论：胰岛素有明显促ＶＳＭＣ增殖作用，并与浓度梯度有明显依赖关系。

大黄素对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察大黄素对人血管平滑肌细胞周期时相和cyclin D1表达的影响,探讨大黄素抑制平滑肌细胞增殖的作用机制。方法 取对数增长期的平滑肌细胞同步于G0期,药物组:加入含37.5mg·L-1大黄素10％胎牛血清的培养液,对照组:仅加入10％胎牛血清的培养液;作用12、24、36、48 h后分别用流式细胞仪和Westemblot法进行细胞周期时相和cyclin D1表达的测定。结果 与对照组比较,药物组在各相同时间点C0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,且随着时间的延长差值增大,cyclin D1表达高峰延迟,表达量下调,细胞周期受阻于G0/G1期。结论 大黄素在抑制平滑肌细胞增殖的过程中通过下调,cyclin D1表达,从而阻滞细胞周期进程。

槲皮素及异鼠李素对去甲肾上腺素促人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响.方法利用培养的人主动脉平滑肌细胞,采用细胞计数和3H-胸腺嘧啶掺入法,观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响,以及槲皮素、异鼠李素和酚妥拉明对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的影响.结果槲皮素有明显抑制血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用,而异鼠李素作用较弱.在所观察1～200 μmol/L的浓度范围内,槲皮素和异鼠李素均在200 μmol/L浓度发挥了最大的抑制作用,其抑制作用有剂量依赖关系.去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞增殖、DNA合成的作用, 而这些促进作用能被酚妥拉明所阻滞.槲皮素和异鼠李素均呈剂量依赖性抑制去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞增殖和DNA合成的作用, 且槲皮素和异鼠李素有明显的协同作用.槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制明显强于酚妥拉明. 槲皮素和异鼠李素对血管平滑肌细胞无细胞毒性作用.结论槲皮素和异鼠李素是细胞毒性低的天然黄酮类物质,对血管平滑肌细胞增殖、DNA合成尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞增殖、DNA合成有较强的抑制作用.

转录因子c-Jun对人血管平滑肌细胞增殖的调控作用及其机制的实验研究

目的:通过下调和上调c-Jun在人血管平滑肌细胞(hVSMCs)中的表达,研究c-Jun对hVSMCs增殖的调控作用及其机制。方法:①l-Jun基因低表达实验:体外培养hVSMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)和siRNA干扰组(转染靶向c-Jun的siRNA)三组,用构建好的siRNA转染各组细胞并培养24 h。②c-Jun基因过表达实验:体外培养hVSMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(转染阴性对照病毒载体)和慢病毒组(转染过表达c-Jun的慢病毒载体)三组,用构建好的慢病毒转染各组细胞并培养48 h。完成上述的细胞转染后,光镜观察各组细胞的生长情况,加入CCK-8试剂检测各组细胞的0D值。Western Blot检测c-Jun基因、线粒体融合基因2(Mfn2)的表达以及RAS-RAF-MEK-ERK1/2信号通路蛋白的表达。结果:siRNA干扰c-Jun表达后,与阴性对照组(1.301±0.027)或空白对照组(1.223±0.016)相比,siRNA干扰组(1.759±0,023)的0D值显著增加(P<0.05),Mfn2的表达下调,RAS、RAF、MEK以及ERK1/2蛋白的表达显著增加(P<0.05)。相反,慢病毒过表达c-Jun后,与阴性对照组(1.660±0,009)或空白对照组(1.862±0,123)相比,慢病毒组(1.101±0,101)的0D值显著减少(P<0.05),Mfn2的表达上调,RAS、RAF、MEK以及ERK1/2蛋白的表达显著减少(P<0.05)。结论:c-Jun可能通过调控Mfn2-RAS-RAF-MEK-ERK1/2信号通路调节hVSMCs的增殖。

腺病毒介导p21基因转染抑制人血管平滑肌细胞增殖的研究

目的 研究抗增殖性p21基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞(HVSMC)的增殖抑制作用及其作用机制。方法 通过腺病毒介导将外源性p21基因转入HVSMC,通过免疫印迹法(Western blot)检测p21基因的表达,原位末端标记法(TUNEL)、DNA片段梯度分析及流式细胞分析(FCM)观察靶细胞的细胞周期变化及凋亡,利用酶联免疫光度仪分析靶细胞的增殖抑制情况。结果 Western blot结果显示p21基因转染后的HVSMC可高水平表达p21蛋白,而另两组无表达。感染后5 d,Adp21组的细胞数为0.275 5±0.01(525 nm波长下吸光度A值),AdlacZ组为0.340 9±0.02,空白组为0.347 5±0.02,Adp21组较另两组的差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL、DNA片段梯度分析及FCM检测均提示靶细胞发生了凋亡。FCM检测还发现明显的细胞周期阻滞现象,Adp21组G0-G1期细胞比例为66.23％,S期细胞比例为10.18％,而另两组G0-G1期和S期细胞比例分别为:47.73％、30.56％和45.31％、32.34％。结论 复制缺陷性腺病毒在体外可有效介导外源性p21基因转染HVSMC,转染后的细胞除发生细胞周期阻滞外还出现明显的凋亡,其生长增殖受到抑制。

高糖及高胰岛素对人血管平滑肌细胞增殖、迁移及miR-145水平的影响

目的探讨高血糖和高胰岛素对人miR-145水平的影响。方法将人血管平滑肌细胞(VSMC)分为正常组、高糖组(25 mmol/L)、高胰岛素组(300 m U/L)和高糖高胰岛素组,各组细胞培养72 h后,用real-time PCR测定各组VSMC中miR-145的水平;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及细胞划痕法分别测定VSMC的增殖及迁移。miR-145病毒转染VSMC 48 h后,再分为上述4组,用上述方法测定病毒转染后VSMC的增殖与迁移。结果与正常组相比,其他3组miR-145水平均不同程度下降(P<0.05),尤以高糖高胰岛素组下降最明显(P<0.01);高糖及高胰岛素促进VSMC的增殖和迁移。miR-145病毒转染后,各组VSMC的增殖和迁移均较转染前明显降低(P<0.05)。结论高血糖及高胰岛素降低VSMC中miR-145的表达,miR-145的过表达可抑制VSMC的增殖和迁移。

分泌型hCREG蛋白抑制人血管平滑肌细胞增殖的量效关系研究

目的:探讨hCREG表达与人血管平滑肌细胞增殖的量效关系。方法:构建强力霉素(Dox)调控表达的pRevTRE-hCREG重组载体;分别经G418及潮霉素筛选表达pRevTet-On、pRevTRE-hCREG的人血管平滑肌细胞株-HITASY细胞克隆;RT-PCR鉴定转染细胞克隆中抗性基因和插入基因的表达;Western blotting和免疫共沉淀检测不同浓度的强力霉素诱导后,HITASY细胞内及培养上清中hCREG的表达;流式细胞仪检测不同浓度的强力霉素诱导后,hCREG表达与细胞增殖的关系。结果:成功构建了强力霉素可调控表达的pRevTRE-hCREG重组载体;筛选出稳定表达双抗性基因的HITASY-hCREG细胞克隆;RT-PCR检测证实细胞克隆中G418及插入基因表达均为阳性;Western blotting及免疫共沉淀检测发现随强力霉素诱导剂量的增加(0、0.01、0.1、1mg/L),HITASY-hCREG细胞及培养上清中hCREG表达均呈剂量依赖性增加;流式细胞周期分析提示,hCREG表达增加后,HITASY-hCREG细胞的G1期细胞明显增加。结论:hCREG蛋白通过剂量依赖方式抑制人血管平滑肌细胞的增殖。

CREG调控IGF2R/IGFII内吞抑制人血管平滑肌细胞增殖

目的:探讨E1A激活基因阻遏子(CREG)抑制人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的机制。方法:应用逆转录病毒载体pLNCX2-CREG和pSM2-siCREG分别转染VSMCs,G418和puromycin筛选得到稳定转染细胞VSMCs-CREG和VSMCs-siCREG;Western blotting检测转染前后细胞CREG的表达;BrdU和流式细胞术检测CREG表达及对VSMCs增殖的影响。Western blotting和免疫荧光染色检测细胞胰岛素样生长因子Ⅱ受体(IGF2R)的表达;ELISA和RT-PCR检测胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)的表达;Alexa 488标记重组IGFII内吞实验观察CREG表达对IGFII内吞的影响;重组IGF2R和anti-IGF2R中和抗体阻断实验观察IGF2R-IGFII内吞作用对细胞增殖的影响;Western blotting检测细胞增殖信号分子PI3K/Akt和ERK表达,抑制剂阻断研究分析上述信号分子表达变化在细胞增殖中的作用。结果:实验分别得到VSMCs-CREG和VSMCs-siCREG的细胞克隆,VSMCs-CREG中CREG表达增加,而VSMCs-siCREG中CREG表达减少。VSMCs-CREG细胞增殖较正常对照组明显受抑,VSMCs-siCREG细胞增殖显著增加。VSMCs-CREG细胞中IGF2R蛋白在细胞膜上的表达及分布均显著增加,而VSMCs-siCREG细胞中IGF2R在膜上分布明显下降。CREG过表达促进IGF2R对IGFII的内吞作用,抑制了IGFII的分泌。IGFII分泌增加启动了CREG沉默后VSMCs的增殖,PI3K/Akt和MAPK/ERK信号协同参与了IGFII对VSMCs增殖的调控作用。结论:CREG通过调控IGF2R在细胞膜的分布,加速IGFII内吞作用,抑制了体外培养VSMCs的增殖。

丹参酮ⅡA对培养人血管平滑肌细胞增殖的影响

为探讨丹参酮ⅡＡ对人血管平滑肌细胞增殖的影响与机制，用四甲基偶氮唑兰比色法测定细胞线粒体脱氢酶活性，以评价该药的细胞毒性；在碱性纤维母细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖模型上，用氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法观察该药对ＤＮＡ合成的影响；用细胞计数法测定该药对平滑肌细胞增殖的影响。结果发现，在无细胞毒性的浓度范围内，丹参酮ⅡＡ剂量依赖性地抑制碱性纤维母细胞生长因子诱导的人血管平滑肌细胞ＤＮＡ的合成，ＩＣ５０为２．８μｍｏｌ／Ｌ；丹参酮ⅡＡ１５μｍｏｌ／Ｌ孵育６天，显著抑制细胞增殖（Ｐ＜０．０５）。提示丹参酮ⅡＡ对生长因子为始因引起的血管成形术后再狭窄、慢性高血压。

LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响

目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。

半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察半胱氨酸(Cys)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,用不同浓度的Cys培养液孵育细胞24h,用MTT法检测VSMCs增殖,流式细胞术检测VSMCs凋亡,RT-PCR法检测bax mRNA的表达。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为100、200、500和1000μmol/LCys的培养液中孵育24h后的吸光度(A)值均高于对照组(P<0.05),表明Cys可诱导人VSMCs增殖;但同时,VSMCs凋亡细胞数明显高于对照组(P<0.05),bax的表达增强,表明Cys亦诱导了人VSMCs凋亡。结论浓度较高时半胱氨酸可同时诱导VSMCs增殖和凋亡。

3种他汀药物调控纤溶活性抑制人血管平滑肌细胞增殖与迁移

目的 探讨3种常用他汀药物(普伐他汀、辛伐他汀和氟伐他汀)介导纤溶酶原激活物及其抑制剂对体外培养人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法 采用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,刮伤实验和改良Transwell chamber装置测定细胞迁移能力;用RT-PCR分析细胞tPA,uPA和PAI-1 mRNA表达;采用发光底物法测定细胞分泌tPA和PAI-1蛋白含量。结果 辛伐他汀和氟伐他汀可通过下调细胞PAI-1 mRNA表达和上调tPA mRNA表达,抑制10％胎牛血清诱导VSMC增殖和迁移,不同他汀药物对纤溶活性的调控时相不尽相同。普伐他汀在指定时间对基因转录活性无影响,随培养时间延长对tPA和PAI-1蛋白分泌伴有轻度增加和抑制。结论 他汀类药物抑制VSMC增殖和迁移可能与非调脂性抗动脉粥样硬化作用机制有关,辛伐他汀和氟伐他汀通过上调tPA mRNA和下调PAI-1 mRNA基因转录活性,而普伐他汀可能与tPA和PAI-1通过翻译后修饰或与辅助因子相互作用而调控纤溶酶及其抑制物活性,进而促进纤溶,抑制细胞增殖和移行。

Ⅰ型内皮素受体反义寡核苷酸抑制人血管平滑肌细胞增殖

目的 研究Ⅰ型内皮素 (ET -1)受体 (ETA)反义寡核苷酸 (ODN)对血管平滑肌细胞 (VSMCs)增殖的影响。方法 培养人桡动脉 (humanradialartery ,HRA)的VSMCs ,通过四唑盐 (MTT)比色实验测定细胞的增殖 ,进而分别采用放射受体结合分析法和放射免疫法检测ETA蛋白表达和ET -1自分泌的情况。结果 ETA -ODN显著抑制VSMCs增殖 ,而且具有浓度和时间依赖性。ETA -ODN( 15 μmol L)具有时间依赖抑制ETA表达。ETA -ODN( 15 μmol L)作用 2 4、48h ,VSMCs的上清液ET -1水平以及VSMCs平均ET -1分泌水平 ,较对照组均显著降低 (P <0 .0 5 )。作用 72h ,ET -1分泌上清液水平继续降低 (P <0 .0 5 ) ,但是VSMCs平均ET -1分泌水平不但没有降低 ,反而高于对照组水平 (P <0 .0 5 )。结论 ETA -ODN通过减弱ETA表达和调节ET -1的自分泌抑制HRA的VSMCs增殖 ,提示对临床上血管移植术后的再狭窄有防治作用。

不同还原性巯基氨基酸对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察三种还原性巯基氨基酸对人血管平滑肌细胞增殖的影响。方法:采用组织贴块法体外培养人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),在培养液中分别加入三种不同浓度的还原性巯基氨基酸(Hcy,Cys,GSH)对VSMCs进行刺激,24h后同MTT比色法测定细胞的活力,3H-TdR测定细胞的增殖率。结果:随浓度增加,Hcy和Cys明显促进VSMCs增殖,Hcy的作用略强于Cys;GSH只有在极高浓度时(1 000μmol/L)才显著促进VSMCs增殖。结论:极高浓度的Hcy、Cys、GSH均可促进VSMCs增殖。

多沙唑嗪抑制人血管平滑肌细胞增殖的实验研究

目的探讨多沙唑嗪对人血管平滑肌细胞(VSMCS)增殖的抑制作用。方法将0.1、1、10、25μmol/L的多沙唑嗪(Doxazosin,Dox)作用于体外培养的VSMCS,采用氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入的方法检测细胞的增殖。结果在1、10、25μmol/L的Dox作用下,VSMCS的3H-TdR的掺入量分别为(983±58.7)cpm、(730±54.9)cpm、(500±64.1)cpm,显著低于对照组的(1270±96.5)cpm(P<0.01),并表现为剂量依赖性(P<0.01)。结论多沙唑嗪能够抑制人VSMCS的增殖,对经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄可能有防治作用。

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖与细胞凋亡的影响

目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,将不同浓度Hcy与VSMCs孵育不同时间,应用MTT法检测VSMCs细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测VSMCs细胞凋亡。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为500μmol/L Hcy的培养液中孵育0h、6h、12h、24h、48h后的A值分别为0．504±0．053、0．586±0．043、0．625±0．031、0．683±0．087、0．812±0．147,细胞凋亡率分别为2．39％±0．47％、2．45％±0．96％、7．58％±2．02％、13．37％±4．71％、17．69％±3．13％,表明Hcy呈时间依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡；在终浓度分别为0、100、200、500、1000μmol/L Hcy的培养液中孵育24h后的A值分别为0．549±0．067、0．616±0．121、0．644±0．095、0．685±0．139、0．846±0．142,细胞凋亡率分别为2．68％±0．23％、2．79％±0．89％、8．45％±2．41％、13．41％±4．98％、17．75％±5．56％,表明Hcy呈浓度依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡。结论Hcy可以诱导VSMCs增殖和细胞凋亡。