甲状腺乳头状癌患者组织中表皮生长因子受体、维生素D受体、溴结构域蛋白4表达水平及其临床意义

目的:探究甲状腺乳头状癌(PTC)患者组织中表皮生长因子受体(EGFR)、维生素D受体(VDR)、溴结构域蛋白4(BRD4)的表达水平和其临床意义。方法:选取2022年2月—2024年3月广州医科大学附属妇女儿童医疗中心增城院区收治的PTC患者54例作为研究对象,取患者的癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组织化学技术检测组织中EGFR、VDR和BRD4蛋白表达水平,并分析EGFR、VDR、BRD4阳性表达与临床病理特征的关系。结果:PTC患者癌组织中EGFR、VDR及BRD4蛋白表达阳性率均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.001)。不同临床病理特征的EGFR阳性表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);瘤体>1 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者VDR阳性率高于瘤体≤1 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者,差异有统计学意义(P<0.05);瘤体>1 cm、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者BRD4阳性率高于瘤体≤1 cm、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFR蛋白表达与VDR、BRD4蛋白表达呈正相关(r=0.462、0.513,P<0.001);VDR蛋白与BRD4蛋白表达呈正相关(r=0.407,P<0.001)。结论:EGFR、VDR和BRD4在PTC患者组织中呈显著高表达,与PTC的形成及临床病理特征有一定相关性,可作为治疗PTC的监测指标。

子痫前期孕妇外周血、胎盘组织中信号肽⁃CUB⁃表皮生长因子样结构域蛋白2的表达及意义

目的探讨信号肽⁃CUB⁃表皮生长因子样结构域蛋白2(Signal peptide⁃CUB⁃EGF⁃like domain⁃containing protein,SCUBE2)在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达及临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月住院分娩的子痫前期患者58例,其中早发型子痫前期30例(发病妊娠周数<34周),晚发型子痫前期组28例(发病妊娠周数≥34周);另选取30例足月正常分娩孕妇作为对照组。收集入院治疗前孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎盘组织标本。ELISA检测三组孕妇血清SCUBE2、VEGFR2表达水平,免疫组化检测三组胎盘组织中SCUBE2的定位及表达,Western blot实验及实时荧光定量PCR(RT⁃qPCR)实验检测三组胎盘组织中SCUBE2、VEGFR2的表达水平。结果免疫组化法检测显示,SCUBE2主要表达于胎盘合体滋养细胞及胎盘血管内皮细胞中,子痫前期组表达水平低于对照组,早发型子痫前期组表达低于晚发型子痫前期组;Western blot及RT⁃qPCR实验检测结果显示,三组孕妇胎盘中SCUBE2和VEGFR2蛋白及mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期组表达量低于对照组,其中早发型子痫前期组表达量低于晚发型子痫前期组(P<0.05);ELISA法检测显示,三组孕妇血清中SCUBE2及VEGFR2表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期组低于对照组,其中早发型子痫前期组表达量低于晚发型子痫前期组(P<0.05),子痫前期组孕妇血清SCUBE2与VEGFR2表达量呈正相关(r=0.6022,P<0.0001)。结论SCUBE2在孕妇血清中及胎盘组织表达量降低可能参与子痫前期的发生发展。

神经表皮生长因子样蛋白1相关的节段性膜性肾病1例

膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是肾病综合征主要的病因之一,好发于中老年人。近年来的流行病学研究发现其在中国的发病频率平均以每年13%的速度提高[1];另一项研究发现,MN在原发性肾小球疾病患者中,从2010年至2015年的占比16.18%上升至2016年至2020年的21.26%[2]。同时,其发病存在一定的地域差异性,目前认为环境、种族等可能是导致这些差异的主要因素[1,3-4]。

肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域及神经表皮生长因子样蛋白-1 检测在M型磷脂酶A2受体阴性膜性肾病中的临床意义

目的探讨肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域(THSD7A)及神经表皮生长因子样蛋白-1(NELL1)检测在M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阴性膜性肾病中的诊断及治疗指导意义。方法选取浙江中医药大学附属杭州市中医院2014至2021年肾穿刺活检确诊为PLA2R阴性膜性肾病共116例,通过免疫组织化学方法检测肾组织THSD7A及NELL1的阳性表达情况,比较各组间临床病理特征及治疗与预后。结果116例PLA2R阴性膜性肾病中THSD7A阳性23例,NELL1阳性9例,其中两者双阳性1例。THSD7A阳性较阴性者IgG4阳性率更高(P=0.010);膜性肾病Ⅰ期占比更少,Ⅱ期占比更多(P=0.002);基底膜增厚更明显(P=0.034)。NELL1阳性较阴性者C1q及IgG2的阳性率更低(P=0.029,P=0.001);炎细胞浸润更多(P=0.033);多部位沉积物更少(P=0.001);基底膜增厚更不明显(P<0.001);不典型膜性肾病比例更低(P=0.010)。继发因素分析显示THSD7A阳性者有1例确诊为乙状结肠癌,NELL1阳性者均未发现恶性肿瘤。生存分析提示THSD7A阳性组肾病复合缓解率(完全缓解或部分缓解)显著低于阴性组(P=0.016),而NELL1阳性组肾病复合缓解率显著优于阴性组(P=0.015),两指标单一阳性组间比较显示NELL1单一阳性组肾病复合缓解率显著优于THSD7A单一阳性组(P<0.001)。结论THSD7A及NELL1阳性膜性肾病更倾向于原发性膜性肾病,且无恶性肿瘤提示价值,但对膜性肾病患者的预后具有一定的预测价值。

CD326分子胞外区表皮生长因子样结构域融合蛋白的表达与纯化

目的:构建含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like1+2结构域的真核表达载体,在COS7细胞中表达相应蛋白并纯化。方法:用PCR扩增编码EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的cDNA,插入真核表达载体pSecTag2B,脂质体法转染COS-7细胞,利用重组蛋白C端的组氨酸标签(6×His-tag)进行金属螯合亲和层析纯化,最后用SDS-PAGE和Western blot法检测纯化的包含EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域融合蛋白的纯度。结果:序列测定的结果显示含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域序列的载体构建正确。经Ni2+-NTA树脂柱亲和层析纯化得到3种融合蛋白,相对分子质量(Mr)分别约为3 600,7 700和12 000。纯度均约为95%。Western blot检测结果显示3种融合蛋白都具有下游的c-myc表位。结论:成功构建了含有CD326分子胞外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达。为制备抗CD326分子不同结构域的单克隆抗体提供了免疫原。

细胞角蛋白18片段M65和表皮生长因子样结构域蛋白7在结直肠癌患者中的表达及临床价值

目的探讨细胞角蛋白18片段M65和表皮生长因子样结构域蛋白7(EGFL7)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达情况及意义,并分析其与患者病理参数的相关性。方法收集初诊确诊的CRC患者46例、非肠道肿瘤对照患者43例,并收集其基本病理资料包括性别、年龄、瘤体大小、TNM分期以及是否淋巴结转移等。ELISA测定血清中M65、EGFL7的浓度;用Mann-Whitney U检验分析M65、EGFL7在不同患者之间的表达差异以及在不同病理参数的患者间的表达情况差异,受试者工作特征(ROC)曲线用于评价M65、EGFL7以及二者联合检测对CRC的诊断效能。免疫组化法检测CRC肿瘤细胞Ki67表达情况,并将血清M65、EGFL7水平与肿瘤细胞增殖能力进行Pearson相关性分析。结果CRC患者血清M65与EGFL7水平较对照组均显著升高,差异有统计学意义(U=290.5,P<0.0001;U=599,P=0.0012);ROC曲线分析显示M65与EGFL7联合检测筛查CRC的敏感性和特异性分别为86.96%和81.84%,曲线下面积(AUC)为0.9090(95%CI:0.8456~0.9724);不同瘤体大小的CRC患者M65表达水平差异有统计学意义(U=150,P=0.0380),而不同瘤体大小、不同TNM分期以及有无淋巴结转移的CRC患者间EGFL7差异均有统计学意义(U=128,P=0.0091;U=129,P=0.0050以及U=156,P=0.0208);M65、EGFL7表达水平与CRC患者肿瘤细胞增殖能力均未见相关性。结论M65、EGFL7水平在CRC中表达升高,二者联合可有效诊断CRC。EGFL7与患者的临床病理特征的相关性更强,且与患者淋巴结转移与否具有显著的相关性,是CRC疾病预后判断及转移评估的优良标志物。

表皮生长因子样结构域-7在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探究表皮生长因子样结构域-7(EGFL7)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年2月至2016年3月于大连市第五人民医院妇科住院治疗的宫颈癌患者(n=40)及非宫颈癌患者(n=20)作为研究对象。采集宫颈癌患者宫颈癌组织及非宫颈癌患者正常宫颈组织,采用免疫组化法检测EGFL7在宫颈癌组织及正常宫颈组织中的表达水平,并分析EGFL7表达水平与宫颈癌患者临床病理特征和预后的关系。结果宫颈癌组织中EGFL7阳性表达率为70.00%,高于正常宫颈组织的10.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFL7表达水平与宫颈癌患者脉管浸润相关(P<0.05);与患者年龄、分化程度、组织类型、浸润深度、国际妇产科联盟(FIGO)分期及淋巴结转移无关。EGFL7阳性表达患者中位生存期为15.97个月,短于EGFL7阴性表达患者的26.70个月,差异有统计学意义(P<0.05)。经COX比例风险回归模型分析,脉管浸润及EGFL7高表达均为影响宫颈癌患者预后的独立风险因素(P<0.05)。结论EGFL7高表达于宫颈癌组织,其表达水平与宫颈癌患者FIGO分期及脉管浸润相关,且脉管浸润及EGFL7表达水平均为影响宫颈癌患者预后的独立风险因素,EGFL7有望成为肿瘤治疗的新靶点,可为探究宫颈癌预后分子标志物提供新的参考。

心脏超声造影联合CD137和胰岛素样生长因子结合蛋白6与冠心病患者终点事件分析

目的探讨心脏超声造影联合血清CD137、胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)水平对老年稳定性冠心病患者PCI术后发生心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法选取2020年3月至2022年3月在长沙市第一医院心内科就诊的老年稳定性冠心病患者108例为冠心病组,根据PCI术后是否发生MACE分为非MACE组81例和MACE组27例,选取同期健康体检者100例为对照组。检测各组血清CD137、IGFBP-6水平,计算造影剂充填速度(β)值、最大微泡数量(A)值,收集冠心病患者一般临床资料。采用ROC曲线分析和多因素logistic回归分析。结果冠心病组血清CD137、IGFBP-6水平显著高于对照组,β值、A值显著低于对照组(P<0.01)。MACE组血清CD137、IGFBP-6水平显著高于非MACE组,β值、A值显著低于非MACE组(P<0.01)。心脏超声参数β值、A值、血清CD137、IGFBP-6联合预测冠心病患者PCI术后发生MACE的ROC曲线下面积为0.930,显著高于单独预测(P<0.01)。β值、A值、CD137、IGFBP-6水平均是冠心病患者PCI术后发生MACE的危险因素(P<0.01)。结论心脏超声造影、血清CD137、IGFBP-6水平对老年冠心病患者PCI术后发生MACE具有一定的预测价值,且联合检测具有更高预测价值。

普萘洛尔治疗增殖期血管瘤患者血管内皮生长因子-A及表皮生长因子样结构域7的表达分析

目的对普萘洛尔治疗增殖期婴幼儿血管瘤的临床疗效和治疗过程中血清及尿液血管内皮生长因子-A（VEGF-A）和表皮生长因子样结构域7（EGFL7）表达水平进行检测分析。方法选择30例婴幼儿增殖期血管瘤患者为研究对象,口服普萘洛尔治疗4-8个月,口服剂量为每天0.5-2 mg·kg^-1。采用B超测量治疗前后瘤体的半径,采用Achauer疗效评定法进行临床疗效评估。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测治疗前、治疗后4周、治疗后12周血清及尿液中VEGF-A和EGFL7水平。结果治疗效果评价：2例优,11例好,14例中等,3例差。治疗前血清VEGF-A水平最高（335.692 pg·mL^-1±136.146 pg·mL^-1）,治疗后4周（264.853 pg·mL^-1±122.120 pg·mL^-1）和治疗后12周（211.345 pg·mL^-1±104.035 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周血清VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。治疗前尿液VEGF-A水平最高（76.234 pg·mL^-1±24.169 pg·mL^-1）,治疗后4周（56.454 pg·mL^-1±16.111 pg·mL^-1）和治疗后12周（34.728 pg·mL^-1±12.656 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周尿液VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。血清和尿液中EGFL7的表达趋势与VEGF-A一致。结论普萘洛尔能够安全有效地治疗增殖期婴幼儿血管瘤。普萘洛尔能降低增殖期婴幼儿血管瘤患者外周血清和尿液中VEGF-A和EGFL7水平。

人胰岛素样生长因子1受体β结构域蛋白的原核表达及活性检测

目的构建人胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)β亚基胞外结构域(ED)和胞内激酶(PKD)结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD融合蛋白,并检测其活性。方法用PCR方法从乳腺cDNA文库中扩增IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体。重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,最后用GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知蛋白表皮生长因子受体2驱动的细胞运动调节蛋白(MEMO)的相互作用。结果构建得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,测序后与目的序列一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期位置相符的目的蛋白,并经过Western blot检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD两个融合蛋白,GST pull-down证明蛋白GST-IGF1Rβ-PKD可以和MEMO相互作用。结论成功克隆GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因,并获得活性良好的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD蛋白。

胰岛素样生长因子Ⅱ及胰岛素样生长因子结合蛋白-6血清水平与类风湿关节炎疾病活动度的关系研究

目的:探究胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factorⅡ,IGF-Ⅱ)及胰岛素样生长因子结合蛋白-6(insulin-like growth factor binding protein-6,IGFBP-6)血清水平与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)疾病活动度的关系。方法:选取2019年2月至2020年12月收治的RA患者为研究对象,从病历系统中提取性别、年龄、体质量指数、病程、IGF-Ⅱ血清水平、IGFBP-6血清水平、28个关节疾病活动性评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)。IGF-Ⅱ血清水平、IGFBP-6血清水平、DAS28均选择入院后24 h测定的结果。根据DAS28将患者分为高度活动组(DAS28>5.1分)、中度活动组(3.2分<DAS28≤5.1分)和轻度活动组(DAS28≤3.2分)。比较3组患者的IGF-Ⅱ血清水平和IGFBP-6血清水平;采用Spearman相关分析评价RA疾病活动度与IGF-Ⅱ血清水平、IGFBP-6血清水平的相关性;以IGF-Ⅱ血清水平和IGFBP-6血清水平为自变量,以是否为高度活动为因变量(否=0,是=1)进行Logistic多因素回归分析。结果:共纳入158例RA患者,轻度活动组38例、中度活动组59例、高度活动组61例。轻度活动组、中度活动组、高度活动组的IGF-Ⅱ血清水平分别为(341.05±44.19)ng·mL^(-1)、(392.11±40.19)ng·mL^(-1)、(472.39±39.76)ng·mL^(-1),3组患者的IGFBP-6血清水平分别为(502.67±39.86)ng·mL^(-1)、(461.23±41.05)ng·mL^(-1)、(386.51±43.17)ng·mL^(-1)。轻度活动组和中度活动组的IGF-Ⅱ血清水平均低于高度活动组(P=0.003,P=0.000)、IGFBP-6血清水平均高于高度活动组(P=0.042,P=0.000);轻度活动组的IGF-Ⅱ血清水平低于中度活动组(P=0.003),IGFBP-6血清水平高于中度活动组(P=0.042)。Spearman相关分析结果显示,IGF-Ⅱ血清水平与RA疾病活动度呈正相关(r_(s)=0.720,P=0.000),IGFBP-6血清水平与RA疾病活动度呈负相关(r_(s)=-0.671,P=0.001)。Logistic多因素回归分析结果显示,IGF-Ⅱ血清水平是RA疾病高度活动的危险因素[B=0.006,P=0.000,OR=1.007,95%CI(1.003,1.010)],IGFBP-6血清水平是RA疾病高度活动的保护因素[B=-0.008,P=0.000,OR=0.992,95%CI(0.989,0.995)]。结论:IGF-Ⅱ血清水平与RA疾病活动度呈正相关,IGFBP-6血清水平与RA疾病活动度呈负相关,二者可在一定程度上反映RA疾病活动度。

血清胰岛素样生长因子-1-2胰岛素样生长因子结合蛋白-3白细胞介素-6在急性淋巴细胞性白血病患者中的表达水平及意义

目的研究急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者血清相关指标的表达水平,探讨其对ALL诊断治疗的意义。方法将122例ALL患者作为观察组,另选40名健康体检者作为对照组,检测2组血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)以及白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果观察组患者血清的IGF-1和IGFBP-3水平显著低于对照组(P<0.05),IGF-2和IL-6水平显著高于对照组;随着病情的恶化,观察组血清的IGF-1和IGFBP-3水平显著降低(P<0.05),IGF-2和IL-6水平显著升高(P<0.05);ALL的病情与IGF-2(r=0.51,P<0.05)和IL-6呈正相关(r=0.60,P<0.05),与IGF-1(r=-0.20,P<0.05)和IGFBP-3(r=-0.50,P<0.05)呈负相关。结论与健康人相比,ALL患者血清的IGF-1和IGFBP-3的表达水平较低、IGF-2和IL-6水平较高,通过检测上述指标可以有效的反映ALL及其发病程度。

乳脂球表皮生长因子8与阿尔茨海默病的关联

目的探讨乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)与阿尔茨海默病(AD)的关联。方法使用阿尔茨海默病神经影像计划数据库,多元线性回归用来研究MFG-E8与AD病理标志物以及脑结构的关联并进行亚组分析。使用混合效应模型研究MFG-E8与AD病理标志物和脑结构的纵向变化。中介分析用来研究MFG-E8与AD病理和脑结构之间的潜在关联。结果一共377例纳入研究,MFG-E8水平与脑脊液中β淀粉样蛋白42(Aβ_(42)),tau蛋白以及磷酸化tau蛋白(P-tau)浓度呈正相关,亚组分析结果显示,在男性、老年人以及携带APOE4基因的人群中,MFGE8水平与AD病理标志物的浓度及侧脑室体积的大小关联与总体人群一致。纵向结果表明,在随访时间内,MFGE8水平的升高与侧脑室体积扩大显著相关。此外,MFG-E8可通过影响Aβ_(42)水平改变侧脑室体积。结论MFG-E8与AD存在关联,可能通过AD病理标志物影响侧脑室体积变化。

肠内营养对老年慢性心衰患者营养状态及胰岛素样生长因子1、C反应蛋白及白介素6的影响

目的探讨肠内营养对老年慢性心衰(CHF)患者营养状态及IGF-1、C反应蛋白及白介素6的影响。方法将老年CHF患者134例,随机单盲取法分为研究组与对照组,每组67例,研究组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予肠内营养支持治疗,对照组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予自愿饮食,观察两组治疗前后营养状态、炎性指标、血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、心功能指标、治疗期间不良事件及并发症发生情况。结果研究组治疗后营养状况评分低于同组治疗前及对照组同期(P <0.05),治疗后体质量指数(BMI)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、三头肌皮褶厚度(TSF)、上臀肌围(AMC)均高于同组治疗前及对照组同期(P <0.05);总IGF-1、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)均低于同组治疗前及对照组同期(P <0.05),研究组治疗后心室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)及6 min步行距离均高于对照组同期(P <0.05),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)均低于对照组同期(P <0.05)。治疗期间两组均未见不良事件发生,研究组并发症发生率低于对照组(P <0.05)。结论肠内营养支持可改善老年慢性心衰患者营养状态,提高心功能,降低IGF-1、CRP、IL-6水平,达到提高治疗效果目的。

肠内营养对老年慢性心力衰竭患者营养状态及胰岛素样生长因子-1、C反应蛋白、白细胞介素-6的影响

目的探讨肠内营养对老年慢性心力衰竭(CHF)患者营养状态及胰岛素样生长因子(IGF)-1、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6的影响。方法老年CHF患者134例随机分为研究组与对照组,每组67例,研究组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予肠内营养支持治疗,对照组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予自愿饮食,观察两组治疗前后营养状态、炎症指标、血清中IGF-1、心功能指标、治疗期间不良事件及并发症发生情况。结果研究组治疗后营养状况评分显著低于治疗前及对照组同期(P<0.05),体重指数(BMI)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、三头肌皮褶厚度(TSF)、上臀肌围(AMC)显著高于治疗前及对照组同期(P<0.05),总IGF-1、IL-6、CRP显著低于治疗前及对照组同期(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)及6min步行距离显著高于对照组(P<0.05),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)显著低于对照组(P<0.05)。治疗期间两组均无不良事件发生,研究组并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论肠内营养支持可改善老年CHF患者营养状态,提高心功能,降低IGF-1、CRP、IL-6水平,达到提高治疗效果的目的。

胰岛素样生长因子结合蛋白-6对RPE细胞增殖和迁移的影响

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-6(insulin-like growth factor binding protein-6,IGFBP-6)对视网膜色素上皮(retinal pigmented epithelium,RPE)细胞增殖和迁移的影响。方法用IGF-Ⅱ(50mg·L-1)、PDGF(20mg·L-1)、VEGF(40mg·L-1)和TGF-β(4mg·L-1)干预ARPE-19细胞6h,以诱导细胞增殖,再加入不同浓度IGFBP-6(1mg·L-1、10mg·L-1、100mg·L-1、500mg·L-1、1000mg·L-1)作用24h、48h后,通过MTS实验观察OD值的变化,研究IGFBP-6对细胞增殖的影响。细胞划痕实验分为IGF-Ⅱ组(50mg·L-1)、IGF-Ⅱ+IGFBP-6组(含IGF-Ⅱ50mg·L-1和IGFBP-6500mg·L-1)、无血清培养液组的实验,细胞划痕24h、48h后,计算各组细胞移行愈合率的变化,从而研究IGFBP-6对细胞迁移的影响。结果 MTS比色法显示一定浓度的IGFBP-6(100mg·L-1、500mg·L-1、1000mg·L-1)可以抑制IGF-Ⅱ诱导的ARPE-19细胞增殖(P<0.05),各浓度IGFBP-6对PDGF、VEGF、TGF-β诱导的细胞增殖均无明显影响(均为P>0.05);细胞划痕实验显示,IGF-Ⅱ组、IGF-Ⅱ+IGFBP-6组、无血清培养液组的细胞移行愈合率[分别为(24h:43.91%±3.85%、29.76%±2.49%、26.12%±2.33%;48h:66.09%±1.67%、59.88%±3.43%、57.05%±2.49%)]差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 IGFBP-6能够抑制IGF-Ⅱ诱导的RPE细胞增殖和迁移。

胰岛素样生长因子结合蛋白6在乳腺癌组织中的表达及意义

目的观察胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)-6在乳腺癌组织中的表达及意义。方法对60例乳腺癌、60例乳腺纤维腺瘤、60例乳腺增生症的标本采用免疫组化法检测IGFBP-6蛋白的表达情况,并用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及乳腺增生症中IGFBP-6的基因表达情况。结果乳腺癌组织中IGFBP-6蛋白的表达量明显低于乳腺纤维腺瘤及乳腺增生症中蛋白的表达情况(P<0.05),且乳腺纤维腺瘤中IGFBP-6蛋白的表达量低于乳腺增生症(P<0.05);而在IGFBP-6 mRNA表达方面,乳腺癌高于乳腺纤维腺瘤及乳腺增生症(P<0.01),乳腺纤维腺瘤高于乳腺增生症(P<0.01)。结论 IGFBP-6的表达水平可作为乳腺癌患者的预后及淋巴结转移情况的相关因素,且可作为乳腺癌发生、发展及预后的重要因素。

血清基质金属蛋白酶组织抑制剂-1、胰岛素样生长因子-1和表皮生长因子水平检测在子宫肌瘤诊断中的价值

目的探讨血清中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及表皮生长因子(EGF)水平检测在子宫肌瘤诊断中的价值。方法选取2014年2月至2015年11月在湖北省妇幼保健院接受手术治疗的65例子宫肌瘤患者为子宫肌瘤组,其中黏膜下肌瘤27例(黏膜下肌瘤组),非黏膜下肌瘤38例(非黏膜下肌瘤组);并选取同期体检健康女性57例为对照组。采用酶联免疫吸附试验测定受试者血清中TIMP-1、IGF-1和EGF水平;对各组受试者血清中TIMP-1、IGF-1及EGF水平进行比较,并分析血清中TIMP-1、IGF-1及EGF水平检测对子宫肌瘤诊断的价值。结果子宫肌瘤组患者血清中TIMP-1、IGF-1和EGF水平显著高于对照组(P<0.01)。黏膜下肌瘤组患者血清中TIMP-1、IGF-1和EGF水平显著高于非黏膜下肌瘤组(P<0.01)。当TIMP-1取117.03μg·L^(-1)时对子宫肌瘤诊断的灵敏度为76.81%,特异度为90.23%;当IGF-1取582.04μg·L^(-1)时对子宫肌瘤诊断的灵敏度为46.36%,特异度为80.74%;当EGF取357.15 ng·L^(-1)时对子宫肌瘤诊断的灵敏度为83.27%,特异度为51.26%;TIMP-1、EGF对子宫肌瘤诊断的灵敏度显著高于IGF-1(P<0.01),TIMP-1和EGF对子宫肌瘤诊断的灵敏度比较差异无统计学意义(P>0.05)。TIMP-1、IGF-1对子宫肌瘤诊断的特异度显著高于EGF(P<0.01),TIMP-1和IGF-1对子宫肌瘤诊断的特异度比较差异无统计学意义(P>0.05)。3项指标联合检测对子宫肌瘤诊断的灵敏度为93.47%,特异度为94.59%,3项指标联合检测对子宫肌瘤诊断的灵敏度显著高于TIMP-1和IGF-1(P<0.05),但与EGF对子宫肌瘤诊断的灵敏度比较差异无统计学意义(P>0.05);3项指标联合检测对子宫肌瘤诊断的特异度显著高于IGF-1、EGF(P<0.05),但与TIMP-1对子宫肌瘤诊断的特异度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TIMP-1、IGF-1和EGF可作为诊断子宫肌瘤的血清学指标,3项指标联合检测对子宫肌瘤的诊断具有重要参考价值。

上调胰岛素样生长因子结合蛋白6基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响

目的:探究上调胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响。方法:体外培养人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,转染IGFBP-6过表达质粒,实时荧光定量PCR法验证转染效率;流式细胞术检测转染IGFBP-6后的细胞周期的改变及凋亡的情况;免疫印迹检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果:IGFBP-6转染MDA-MB-231细胞后,IGFBP-6的mRNA水平明显上调;PCNA、细胞周期蛋白D1的表达水平明显降低;细胞G1/S期阻滞;凋亡细胞增多。结论:IGFBP-6可以显著抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。

异粘蛋白、血管内皮生长因子和CD44V6在粘液表皮样癌组织中的表达及与淋巴结转移关系的临床病理研究

目的探讨异粘蛋白(MTDH)、血管内皮生长因子(VEGF)、CD44V6在粘液表皮样癌组织中的表达水平及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测70例粘液表皮样癌组织和26例癌旁组织中MTDH、VEGF、CD44V6的表达水平。结果MTDH、VEGF、CD44V6在粘液表皮样癌组织中的阳性表达率分别为88.6%、68.6%、72.9%,在对照组中的阳性表达率为15.4%、7.7%、19.2%,存在显著性差异(P<0.01)。MTDH阳性表达与组织分化程度、浸润深度、临床分期及是否淋巴结转移无相关性(P>0.05),CD44V6、VEGF阳性表达与组织分化程度、是否淋巴结转移有相关性(均P<0.05)。随着临床病理分期的升高,MTDH阳性检出率逐渐上升(IV期除外);VEGF、CD44V6阳性表达率随着分化程度降低而升高。MTDH、VEGF、CD44V6在组织分化良好组与分化不良组中的阳性表达率分别为87.1%、51.6%、51.6%和89.7%、82.1%、89.7%。淋巴结未转移组MTDH、VEGF、CD44V6阳性表达率分别为82.5%、57.5%、60.0%;淋巴结转移组MTDH、VEGF、CD44V6阳性表达率分别为96.7%、83.3%、90.0%。结论 MTDH、VEGF、CD44V6参与了粘液表皮样癌的发生发展过程,检测其表达水平有助于判断肿瘤是否转移及预后。